学术投稿

改建型STAT1-CC基因慢病毒载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达

陈俊杰;胡建军;陈成水;张洁;王梦怡;蒋磊

关键词:STAT1, 慢病毒载体, A549细胞, 肺肿瘤, 基因
摘要:目的:构建携带STAT1基因和突变型STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,转染肺癌A549细胞并检测STAT1和STAT1-CC基因在肺癌A549细胞内的表达.方法:采用PCR技术从质粒模板中扩增得到目的基因STAT1和STAT1-CC,将其接入含有CMV启动子和绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体中,构建慢病毒载体表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,双酶切和测序鉴定.分别将重组子Lenti-STAT1、LentiSTAT1-CC和包装质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染非小细胞肺癌细胞株A549.荧光显微镜观察A549细胞EGFP表达,Western Blotting验证STAT1在A549细胞株中的表达.结果:酶切及测序结果显示成功构建重组慢病毒表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,将慢病毒颗粒感染A549细胞48 h后,观察到宿主细胞内EGFP表达,Western Blotting证实STAT1蛋白在A549细胞中过表达.结论:本实验成功构建了携带STAT1基因和STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,并在A549细胞中过表达STAT1基因.
温州医科大学学报杂志相关文献
  • 手术室专科护士临床培训体会

    专科护士是指具有某一专科领域的工作经历,并经过系统化的该领域理论实践的职业培训,具有相应资格证书,能熟练运用专科护理知识和技术为服务对象提供专业化服务的注册护士[1].为促进我省专科护理的发展,我院手术室自2010年8月至2011年7月间共承担两期学员的临床实践培训工作.

    作者:徐小群;陈丽莉;曹茜 刊期: 2012年第03期

  • 瘦素在女性青春期发育中的价值

    目的:探讨血清瘦素在女性青春期发育中的作用.方法:通过对213名10~14岁女生体重、身高、血清瘦素、促黄体生成素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E2)水平测定,并分组统计,评价相互关系.结果:随着青春期的临近,血清瘦素水平逐步上升,瘦素水平与体重指数(r=0.816,P<0.01)、LH (r=0.620,P<0.01)、FSH(r=0.489,P<0.01)呈正相关,与E2呈负相关(r=-0.493,P<0.01).结论:瘦素可作用于下丘脑-垂体-性腺轴,是女性青春期发育的启动因子.

    作者:胡少龙;郑昭璟;吴俊琪;王苏华;邵丽佳;徐瑞龙 刊期: 2012年第03期

  • 超声引导神经联合阻滞在老年腹股沟疝修补术中的应用

    目的:探讨超声引导下髂腹股沟、髂腹下神经联合阻滞在老年腹股沟疝修补术中的应用效果.方法:我院收治的需行腹股沟疝手术的患者60例,ASA Ⅱ~Ⅲ级,随机分成两组:U组和T组,每组30例,均行髂腹股沟、髂腹下神经阻滞麻醉,U组为超声引导法,T组为传统方法.局麻药为0.5%罗派卡因,剂量为0.4 mL/kg.记录麻醉起效时间、麻醉维持时间,评定手术全程的麻醉效果(优、良、差),记录相关并发症.结果:U组麻醉起效时间短于T组(P<0.05),U组麻醉优良率高于T组,T组3例阻滞不完善,需改全麻完成手术.两组均无严重并发症发生.结论:腹股沟疝手术患者超声引导髂腹股沟、髂腹下神经联合阻滞较传统方法下的阻滞效果更好,起效时间更短,在临床上具有推广应用价值.

    作者:吴林飞;李剑;朱张茜;吴艳琴 刊期: 2012年第03期

  • 植入型心律转复除颤器除颤电极导线故障观察

    目的:探讨植入型心律转复除颤器(ICD)或心脏再同步化心律转复除颤器(CRT-D)除颤电极导线障碍的可能原因和提示指标.方法:对我院2000年至2011年125例植入ICD或CRT-D的病人进行随访.观察指标:导线阻抗、感知、阈值、VV间期以及非持续性室性心动过速(NSVT).统计除颤电极导线功能故障发生率,分析其可能原因.结果:125例病人中出现除颤电极导线功能故障7例,发生率为5.6%.其中电极导线绝缘层破裂1例,ICD导线微接触障碍1例,导线微损坏3例,导管头端跨心内外膜1例,导线老化1例.导线阻抗、感知、阈值、VV间期是除颤电极导线功能故障的敏感的提示指标.结论:植入ICD或CRT-D的病人,通过密切随访导线阻抗、感知、阈值和W间期能尽早发现除颤电极导线功能障碍,减少不恰当放电.

    作者:崔丽丽;黄伟剑;吴高俊;李海鹰;林捷 刊期: 2012年第03期

  • 苯扎氯铵溶液膀胱冲洗对长期留置导尿患者下尿路感染的影响

    目的:观察苯扎氯铵溶液膀胱冲洗治疗下尿路感染的临床疗效.方法:将我院收治的120例因颅脑外伤而需要留置导尿患者,随机分为苯扎氯铵组60例,对照组60例,分别采用0.0025%苯扎氯铵溶液、0.9%氯化钠溶液进行膀胱冲洗,比较两种不同方法对患者尿路感染发生率的影响,并在第3、7、14天留取中段尿进行尿常规及细菌培养检测.结果:膀胱冲洗后第7,14天苯扎氯铵组尿白细胞计数明显低于对照组,对照组尿液细菌培养的阳性率明显高于苯扎氯铵组(P<0.01),两组均未出现明显的不良反应.结论:用苯扎氯铵溶液进行膀胱冲洗能够有效预防和治疗与留置尿管相关的下尿路感染,未发现明显不良反应,具有一定的临床应用价值.

    作者:严笑金 刊期: 2012年第03期

  • 慢性阻塞性肺疾病与小细胞肺癌危险性关系探讨

    目的:分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)与小细胞肺癌(SCLC)的危险性关系.方法:采用病例对照的方法,回顾性地分析SCLC发病的危险因素.结果:吸烟是COPD和SCLC的共同致病因素(均P< 0.05);具有COPD、肺气肿、支气管炎病史者发生SCLC的危险性明显增高(P<0.05);控制吸烟因素的影响,有COPD病史者发生SCLC的危险性仍明显增高(P<0.05).结论:COPD是SCLC的独立危险因素.

    作者:许瑞玉;戴元荣;颜孙舜;徐慧 刊期: 2012年第03期

  • 笑气/氧气吸入镇静在儿童牙科畏惧症患者中的应用

    目的:探讨笑气镇静麻醉在儿童牙科畏惧症(DF)患者中的应用效果.方法:选择DF患儿231例,随机分为实验组(116例)和对照组(115例).实验组在使用笑气/氧气吸入镇静技术下进行治疗,对照组按常规程序进行治疗.比较治疗前后DF发生率、CFSS-DS评分变化等.结果:术后实验组DF发生率为31.03%,对照组DF发生率为85.21%,两组差异有统计学意义(x2=69.601,P=0.000);实验组治疗后CFSS-DS评分明显下降(P<0.05).结论:使用笑气/氧气吸入镇静技术,可缓解患儿的紧张、恐惧心理,降低DF发生率,对儿童心理的健康成长有良好的保护作用.

    作者:朱莉;王彦亮;吴连俊;戴智;李洪远;范伟伟 刊期: 2012年第03期

  • 卵巢储备功能下降不孕症的护理

    卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)即卵巢产生卵子的能力减弱,卵母细胞质量下降,表现为月经初潮后到40岁前出现月经稀发、经量减少渐至闭经以及生育能力减退.DOR的病因迄今不甚明了,可能与遗传、年龄、卵细胞储备过少或耗竭过多等因素有关.

    作者:阮利云 刊期: 2012年第03期

  • 多媒体教学软件结合仿真模拟人在急救护理教学中的实践

    急救护理学是一门综合性和技术性很强的应用学科.在院前抢救、医院急诊科、重症监护三个急救环节中,护士是急救的基础力量和主力军[1].作为一名急救护士,在面对急危重症病人时,必须要从容应对,快速地做出反应,这需要不断地进行训练.

    作者:祝雪花;廖毅;蔡福满;符丽燕;陈军;高歌心 刊期: 2012年第03期

  • 分阶段治疗内侧创口的开放性跟骨骨折疗效观察

    目的:评估分阶段治疗内侧创口的开放性移位性跟骨骨折的临床疗效.方法:自2005年3月至2011年1月我院共收治开放性跟骨骨折16例,其中,伤口位于内侧的13例,均予以分阶段治疗,获得完整随访资料的10例,按Gustilo分型、1型2例,Ⅱ型7例,ⅢA型1例;按Sanders跟骨骨折分型,Ⅱ型3例,Ⅲ型6例,Ⅳ型1例.软组织治疗阶段予急诊彻底清创,一期闭合创口或者使用负压封闭引流(VSD)技术封闭创面后二期闭合创口,骨折先予以手法整复,临时固定,软组织条件允许后进入骨折终治疗阶段,9例通过外侧L形切口行切开复位钢板内固定术.结果:10例术后影像学复查均满意,均获随访,随访时间12 - 28月,平均(18.2±5.0)个月,AOFAS评分58 ~91分,平均(78.9±11.8)分.1例发生浅表感染,1例发生小面积皮肤坏死,无严重并发症发生.结论:创口位于内侧的开放性跟骨骨折相对于创口位于外侧、跖侧的开放性跟骨骨折属低能量损伤,通过分阶段的治疗,有效预防了并发症,降低了手术风险,临床效果满意.

    作者:赖宪良;王增西;沈新升;刘东旭;张骏 刊期: 2012年第03期

  • 临床带教中护生护理风险教育实践

    护理风险是指医院内患者在接受护理过程中有可能发生的一切不安全事件[1],它始终贯穿于护理工作的各个环节.缺乏风险意识和风险防范能力的实习护生是护理风险发生的高危人群[2].

    作者:王爱霞;包雪青 刊期: 2012年第03期

  • 90Sr敷贴治疗颜面外伤术后瘢痕的护理

    瘢痕是指局部病损皮胶原纤维增生性病理改变,成条索状或瘤样,多见于青年,好发于手术后感染、烧伤、烫烧及机械创作后,多发生在皮肤紧张度较高的部位.轻者仅有不同程度的痛痒,重者有一定的功能障碍,甚至有损美观.

    作者:王爱梅;王咏梅 刊期: 2012年第03期

  • 改建型STAT1-CC基因慢病毒载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达

    目的:构建携带STAT1基因和突变型STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,转染肺癌A549细胞并检测STAT1和STAT1-CC基因在肺癌A549细胞内的表达.方法:采用PCR技术从质粒模板中扩增得到目的基因STAT1和STAT1-CC,将其接入含有CMV启动子和绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体中,构建慢病毒载体表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,双酶切和测序鉴定.分别将重组子Lenti-STAT1、LentiSTAT1-CC和包装质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染非小细胞肺癌细胞株A549.荧光显微镜观察A549细胞EGFP表达,Western Blotting验证STAT1在A549细胞株中的表达.结果:酶切及测序结果显示成功构建重组慢病毒表达载体Lenti-STAT1和Lenti-STAT1-CC,将慢病毒颗粒感染A549细胞48 h后,观察到宿主细胞内EGFP表达,Western Blotting证实STAT1蛋白在A549细胞中过表达.结论:本实验成功构建了携带STAT1基因和STAT1-CC基因的慢病毒表达载体,并在A549细胞中过表达STAT1基因.

    作者:陈俊杰;胡建军;陈成水;张洁;王梦怡;蒋磊 刊期: 2012年第03期

  • MicroRNA-29c在单侧输尿管梗阻大鼠中的表达及意义

    目的:观察microRNA-29c(miR-29c)在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织中的表达变化,探讨其是否参与肾间质纤维化及其可能机制.方法:高通量测序技术和实时荧光定量PCR检测miR-29c在UUO大鼠术后1d和3d肾脏组织中的表达情况.使用生物信息学预测miR-29c靶mRNA,对其靶mRNA进行Gene Ontology和pathway分析.结果:UUO大鼠术后1 d和术后3d手术侧肾组织miR-29c表达下调,Co1 I mRNA和FN mRNA的表达升高.预测靶mRNA经分析后获得miR-29c有统计学意义的10个靶mRNA,其中6个编码细胞外基质蛋白.结论:miR-29c在大鼠UUO模型早期的肾组织中表达下调,可能通过促进细胞外基质堆积参与肾间质纤维化的发生发展.

    作者:谢媚媚;章慧娣;黄慧雅;苏震;尤小寒;薛向阳 刊期: 2012年第03期

  • 温州地区绝经女性骨质疏松症与雌激素受体基因多态性及相关因素

    目的:探讨温州地区绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)与雌激素受体(estrogen receptor,ER)α基因多态性及相关因素.方法:将纳入研究的203例绝经女性按标准分为骨量正常组、骨量减少组与PMOP组.分别检测各观察对象的腰椎L1-4骨密度、PvuⅡ、XbaⅠ基因型并调查其膳食行为与运动方式等项目.结果:结果显示年龄越大、文化程度越低、身材矮小及BMI越低、多妊娠次数、多产次者与PMOP的发生率有关.摄入牛奶、豆浆、茶、水产品、豆类、肉类、蛋类、水果、坚果及每月运动次数越多与高骨密度有关.PvuⅡ基因型中PP,PP、Pp的频率分别为26.6%、27.6%及45.8%;XbaⅠ基因型XX、xx、Xx的频率分别为9.9%、57.1%及33%.多因素分析表明年龄因素、咖啡饮用量、XbaⅠ的XX基因型是骨量减少的危险性因素;文化程度越高、BMI较大、经常饮茶或经常摄入水果是PMOP的保护因素.结论:本地区膳食行为、环境因素与PMOP间关系密切,但ERα基因型分布频率不同于其他地区且与骨密度间关系尚不明确,其对骨质疏松发病的预测价值有待深入研究.

    作者:蒋尚群;吴爱琴;陈小剑;李宝青;厉芳红;高聪颖;余清 刊期: 2012年第03期

  • 麻醉手术中输注18-氨基酸对体温和血糖的影响

    目的:研究硬膜外阻滞复合全麻手术中持续输注18-氨基酸对体温和血糖的影响.方法:选取胃癌根治术患者40例,均行硬膜外阻滞复合全麻,随机分为4组,于麻醉诱导开始时输注复方氨基酸注射液(18-氨基酸,11.4%乐凡命)0 mL·kg-1·h-1(组Ⅰ、输注0.9%氯化钠溶液3 mL·kg-1·h-1)、1 mL·kg-1·h-1(组Ⅱ)、2mL·kg-1·h1(组Ⅲ)和3 mL·kg-1·h-1(组Ⅳ)至关腹完成.监测记录诱导前30 min、切皮前、切皮后30 min和2h、关腹后30 min和1 h的鼓膜温度、血糖值.以四分表法评价术后寒战程度.结果:各组各时间点体温呈现先下降后回升的变化.组Ⅰ麻醉诱导后各时间点体温与基础值相比都有显著下降(P<0.05或P<0.01);组Ⅱ和组Ⅲ自切皮前至关腹后30 min均下降(P<0.05或P<0.01);组Ⅳ仅在切皮前、切皮后30 min显著下降(P<0.05或P<0.01);输注氨基酸各组体温均于关腹后1h回升至基础值水平(P> 0.05).各组各时间点血糖随时间呈现上升趋势.组Ⅳ血糖自诱导后切皮前即显著升高(P<0.05),其他三组除切皮前外,其余时间点与基础值的差异也都有统计学意义(P<0.05或P<0.01).四组寒战发生率分别为40%、20%、10%和0%.结论:硬膜外阻滞复合全麻手术中持续输注18-氨基酸具有保温作用,可减少术后寒战的发生,但可能促使血糖提前升高,其效应与氨基酸剂量可能相关.

    作者:陈舒羽;施珂珂;周浩栋;卢泱;葛圣金 刊期: 2012年第03期

  • 少突胶质细胞瘤影像学表现与临床病理分析

    目的:分析颅内少突胶质细胞瘤的影像学表现及临床、病理的特点,以提高对本病的认识.方法:对20例经手术病理证实的颅内少突胶质细胞瘤的CT、MR表现及病理改变进行回顾性分析.所有患者术前行MR平扫加增强扫描,9例行CT平扫.结果:20例均为单发病灶,年龄27 - 58岁,病变均位于幕上脑实质内.其中Ⅱ级少突胶质细胞瘤13例,Ⅲ级7例.其CT、MR上表现为:①额叶发病率高,占65.0%;②Ⅲ级肿瘤往往大于Ⅱ级肿瘤,大径的均值分别是55.6 mm和42.7 mm;③肿瘤形态呈团块状、类圆形或不规则分叶状,密度呈等或稍高密度,4例见索条状或团片状钙化,T1WI常呈低信号或等低信号,T2WI及液体衰减反转恢复序列(FLAIR)呈高信号,信号多不均匀;④肿瘤易出现囊变,57.1%(4/7)的Ⅲ级肿瘤和46.2%(6/13)的Ⅱ级肿瘤出现囊变;⑤肿瘤灶周水肿较常见,45.0% (9/20)呈轻中度水肿,25.0% (5/20)重度水肿,30.0% (6/20)无水肿;⑥增强扫描有60.0% (12/20)的肿瘤可见强化,均为不均匀强化,35.0%(7/20)肿瘤为轻中度强化,25.0% (5/20)为明显强化.结论:少突胶质细胞瘤的CT、MRI表现具有一定特点,充分认识该肿瘤影像学表现,可以提高定性诊断及分级的正确性.

    作者:陈杨宗;谢福荣;李鹏;杨登法 刊期: 2012年第03期

  • 温经通络方联合硫酸镁预防奥沙利铂所致周围神经毒性的疗效观察

    目的:观察温经通络方熏洗联合硫酸镁静滴预防奥沙利铂引起的周围神经毒性的疗效.方法:入选病例均需用包括奥沙利铂的治疗方案,随机分为A、B两组,各50例.A组用奥沙利铂前予25%硫酸镁20 mL加入5%葡萄糖液500 mL中静脉滴注,每天1次,连用3d;B组硫酸镁用法同A组,且使用奥沙利铂后予温经通络方熏洗,每天1次,每次30 min,部位为四肢肢端,连续3d.两组患者于第8周期完成后进行疗效评价.结果:A组发生Ⅰ级感觉神经毒性9例,Ⅱ级13例,Ⅲ级1例,Ⅳ级0例,总发生率为46.0%.B组发生Ⅰ级感觉神经毒性6例,Ⅱ级2例,Ⅲ级1例,Ⅳ级0例,总发生率为18.0%,两组差异有统计学意义(P<0.01).结论:温经通络方熏洗联合硫酸镁静滴较单用硫酸镁静滴更能降低奥沙利铂神经毒性的发生率,值得临床推广使用.

    作者:陈美谦;王春妹;林新新 刊期: 2012年第03期

  • 锥形束CT三维头影测量在颅面部生长发育中的法学研究

    目的:探讨锥形束CT (cone beam computer tomography,CBCT)三维测量在颅面部生长发育中的应用和优点.方法:14例研究对象分别拍摄普通X线头影片(包括头颅侧位片、正位片)和CBCT两种图像.CBCT图像用Simplant Pro 13.0软件多平面重建方法(multi-planer reconstruction,MPR法,即轴向、矢状向、冠状向联合定点)定点和三维头影测量,普通X线片(头颅侧位片、正位片)采用winceph7.0软件进行头影测量,测量两种图像中同一名称的线性和角度指标,共31项,测量在CBCT能测量而在二维图像中无法测量的项目13项.所有对象均测量两次,测量时间间隔1周,用配对t检验分析普通X线头影片(头颅侧位片、正位片)测量和CBCT三维测量之间的差异.结果:CBCT三维图像和普通二维X线片同一名称31个项目的测量值比较差异均有统计学意义,得出了13个只能在三维图像测量项目的平均值.结论:CBCT三维头影测量与普通X线头影测量结果有差异,CBCT图像是三维立体影像,能真实地反映颅面部的解剖结构,而二维图像由于放大、重叠等原因不能完全准确地反映颅颌面结构.故CBCT是研究颅面部生长发育一种较好的工具.

    作者:阳福;秦化祥;胡荣党 刊期: 2012年第03期

  • 断层融合技术在泌尿系结石诊断中的应用价值

    数字断层融合技术(digital tomosynthesis,DT)是在数字平板X线设备上一次扫描后通过计算机重建得出扫描容积内全部层面的图像.2011年6月至2011年10月我科对20例泌尿系结石患者在静脉肾盂造影(intravenous pyelography,IVP)中采用DT检查,现将患者资料进行回顾性总结,探讨DT在泌尿系结石诊断中的应用价值.

    作者:张志田;闻建民;陈瑶;黄朕;唐栋 刊期: 2012年第03期

温州医科大学学报杂志

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