学术投稿

糖尿病大鼠来源骨髓间充质干细胞体外培养观察及其生物学特性

金培峰;张浩;郑亮承;蒋成榜;孙成超

关键词:糖尿病, 间充质干细胞, VEGF, 细胞凋亡, 增殖, 大鼠
摘要:目的:研究糖尿病是否会导致在体外培养条件下自体骨髓间充质干细胞的增殖、分泌和抗凋亡能力的改变.方法:利用链脲佐菌素(STZ)诱导制作成年大鼠糖尿病模型(n=6),正常大鼠作为对照组(n=6),分别于体外利用全骨髓贴壁法来扩增和纯化骨髓间充质干细胞后,取生长良好的第2代细胞作为本实验的研究对象.采用Cell Count kit-8(CCK-8)分别绘制两组细胞的生长曲线来评价增殖能力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子(VEGF)和胰岛素样生长因子 -1(IGF-1)的分泌量;应用Hoechst33342染色和膜联蛋白V/PI双染流式细胞术观察细胞在低氧无血清条件下的抗凋亡能力.结果:来源于糖尿病大鼠的骨髓间充质干细胞的增殖较正常的大鼠显著性减慢( P<0.01),在形态学上则表现为较正常的细胞更扁平.VEGF和IGF-1的分泌量较正常大鼠来源的明显降低,其中VEGF的分泌量为(80.7±13.1) pg/mL和(67.9±12.3)pg/mL(P<0.05),IGF-1的分泌量分别为(374.8±41.2)pg/mL和(281.8±26.8) pg/mL(P<0.01).在低氧无血清条件下,糖尿病来源的干细胞抗凋亡能力显著性降低,两组早期细胞凋亡指数分别为28.7±3.4和37.1±2.42(P<0.01).结论:糖尿病大鼠来源的骨髓间充质干细胞可以成功地在体外进行增殖培养,但是其在增殖能力、分泌、抗凋亡能力等一系列生物学性状上有不同程度的损害.
温州医科大学学报杂志相关文献
  • 苦参碱诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡作用及其可能机制

    目的:探讨苦参碱(MT)诱导人肺鳞癌细胞株SK -MES-1凋亡作用及其抗肿瘤机制.方法:培养人肺鳞癌细胞株SK -MES-1,用不同浓度的MT处理SK-MES-1细胞,用MTT法检测MT对SK -MES-1细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;流式细胞术检测细胞相关凋亡蛋白 Bcl-2、bax、caspase-3表达.结果:MT抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK -MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性.与对照组相比,苦参碱处理后的SK -MES-1细胞G0/G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降.Bax 和capase-3表达增强,Bcl-2表达下调.结论:MT在体外能抑制人肺鳞癌细胞株SK -MES-1增殖,诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系,可能与抑制 Bcl-2活性、激活bax和capase-3有关.

    作者:金晨慈;蒋龙翔 刊期: 2010年第01期

  • LC-ESI-MS法测定混合二元酸三种主要组分含量

    目的:建立LC-ESI-MS测定混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸含量的方法.方法:色谱条件:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇:0.1%甲酸=10:90(V/V),柱温25 ℃,流速0.4 mL/min.质谱条件:ESI(电喷雾离子源),负离子模式检测,选择离子监测(selected ion monitoring,SIM)方式定量,监测离子峰分别是丁二酸m/z 117,戊二酸m/z 131,己二酸m/z 145.结果:丁二酸、戊二酸和己二酸在0.2~20μg/mL范围内线性关系良好( r=0.99204、0.99257、0.99327),三种二元酸的低检测极限都是0.05 μg/mL,加样回收率在97.15%~99.23%范围内,精密度RSD ≤2%(n=5).测得混合二元酸样品中丁二酸、戊二酸和己二酸的含量分别为37.28%、33.40%和14.15%,三者合计84.83%.结论:该方法准确,灵敏度高,稳定快速,且重现性好,适合于混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸含量的测定.

    作者:于晓敏;王贤亲;何文斐;胡淑萍;楚生辉;贾娟;王秀勇;叶发青 刊期: 2010年第01期

  • 血液净化方式对维持性透析患者晚期氧化蛋白产物的影响

    目的:观察血液透析方式对维持性透析(MHD)患者的晚期氧化蛋白产物(AOPP)分子水平清除的效果.方法:选择MHD患者单次血液灌流串联血液透析组(HP+HD组)60例,以及第7天行单纯血液透析组(HD组),单次血液透析滤过(HDF)60例,尿毒症未行血液透析(NHD)患者60例,健康对照组(CG )20例;检测血清中AOPP浓度.结果:①NHD、HD、HD+HP、HDF四组患者未治疗前血AOPP水平均高于CG( P<0.01);②HP+HD、HDF治疗后患者血AOPP水平较治疗前明显降低( P<0.01),HD组治疗后血AOPP水平均较治疗前明显升高( P<0.05);③单次HDF组治疗后血AOPP降低的水平较HP+HD组更有效,差异有显著性( P<0.01).结论:HP+HD、HDF比单纯HD能更有效地降低MHD患者AOPP水平,单纯HD随着时间延长AOPP水平逐渐升高.HDF对大分子AOPP清除效率比HP更有效.

    作者:金领微;陈辉乐;王红;武敏;刘俊;张莹;徐佳;何晓静;杨瞒球 刊期: 2010年第01期

  • 甲状腺淋巴管造影在鉴别甲状旁腺中的意义

    甲状腺全切或次全切除术中如何保留甲状旁腺从而避免术后出现甲状旁腺功能低下至关重要.如何找到一种保留甲状旁腺的有效方法是甲状腺外科研究的重点.近年来,我们在行甲状腺癌前哨淋巴结检测过程中发现甲状腺淋巴网与甲状旁腺的淋巴网互不相通,采用甲状腺淋巴管造影可很好地鉴别出甲状旁腺,现报告如下.

    作者:张筱骅;郝儒田;尤捷;赵李昊;黄督平;李权 刊期: 2010年第01期

  • 门静脉高压症大动物模型的研制进展

    用于制造门脉高压症动物模型常用的动物为鼠与兔,但如欲对门静脉高压症的手术方式进行研究,则小动物模型难以达到预期的效果且操作不方便,因此选择一种理想的大动物门静脉高压症模型,对于评价外科治疗效果非常重要.多年来,国内外学者探讨了多种制备门静脉高压症大动物模型的方法,每种方法都有其优点,但也有其局限性,现综述如下.

    作者:邓礼明;张启瑜 刊期: 2010年第01期

  • 全主动脉弓替换加支架植入手术治疗Stanford A型主动脉夹层

    目的:总结升主动脉及主动脉弓替换加降主动脉支架植入术治疗Stanford A型主动脉夹层的临床经验.方法:2006年2月至2008年12月,我科对15例Stanford A型主动脉夹层患者行升主动脉及主动脉弓替换加降主动脉支架植入术,手术均在全身麻醉、深低温停循环和选择性脑灌注下进行.单纯行升主动脉及主动脉弓替换加降主动脉支架植入术12例,同期行带瓣管道主动脉根部替换术(Bentall术) 2例,行Bentall术加冠状动脉旁路移植术1例.结果:全组无手术死亡病例,住院期间死亡1例,原因为术后第4天脑出血.全组无术后再次开胸止血和截瘫病例.目前14例患者定期门诊随访,无死亡和需要再次手术病例.结论:升主动脉及主动脉弓替换加降主动脉支架植入术是治疗血管内膜破口位于主动脉弓和降主动脉的Stanford A型主动脉夹层的安全方法,深低温停循环加腋动脉插管选择性脑灌注能有效地预防神经系统的并发症.

    作者:林晓铭;孙成超;郑亮承;程德志;何志锋;池闯 刊期: 2010年第01期

  • 甲状腺机能亢进症患者治疗后骨密度的评估

    目的:研究甲状腺机能亢进症(简称甲亢)患者经抗甲状腺药物治疗后骨密度的改善情况.方法:用单能X线骨吸收仪(SXA)测量48例绝经前妇女和50岁以前男性甲亢患者及19例健康人群的骨密度,同时测定甲亢患者的血清甲状腺功能,自甲亢诊断和治疗开始分为3组,即A组:≤3个月,B组: 3~12个月,C组:>12个月,对治疗后不同阶段的骨密度进行评估,并与健康人群进行比较.结果:B组骨密度(-1.41±0.25)较A组(-2.02±0.74)无明显改善( P>0.05),C组骨密度(-0.14±0.74)较A、B两组明显升高(均 P<0.01),且与健康对照组(-0.12±0.68)比较差异无显著性( P>0.05).不同阶段TSH,FT3,FT4与骨密度没有相关性.结论:甲亢患者的骨量减少或者骨质疏松经抗甲状腺药物治疗后具有一定的可逆性.

    作者:杨丽娟;沈飞霞;郑景晨;章海凌;倪连松 刊期: 2010年第01期

  • 补偿性护理在脑卒中患者中的应用

    脑卒中是多发病,我国每年新发病例超过200万 [1],是世界上脑卒中发病率、致残率高的国家之一.存活者 中50%~70%的患者遗留偏瘫、失语等严重残疾,给社会和家庭带来严重的负担[2].为发挥患者在治疗过程中的主观能动性,克服疾病的影响,减少并发症的发生,使患者早日回归社会,我们对2007年3月至2009年3月收住我科的脑卒中患者运用美国护理专家奥伦提出的补偿性护理,效果满意,现报告如下.

    作者:范小清;杨彩华;林薇 刊期: 2010年第01期

  • 肿瘤化疗病人PICC导管非计划性拔管原因与护理对策

    随着医学发展,癌症病人配合手术、化疗、放疗及内分泌等综合治疗,治愈率越来越高.在化疗过程中,化学药物对静脉的损伤,是一个严重并发症.经外周静脉置入中心静脉导管(peripherally inserted central catheters,PICC)深入应用,可使化疗病人患静脉炎和渗漏性损伤的几率降到低,化疗得以顺利进行.若发生PICC导管非计划性拔管,不但增加病人心理负担,而且造成经济损失.本科PICC置管325例,发生非计划性拔管 17例,发生率为5.1%.积极寻找原因,制定护理对策,可使发生率明显下降.现将护理体会总结如下.

    作者:郑小冬;柳琼;于轶群 刊期: 2010年第01期

  • 普米克令舒雾化吸入治疗小儿急性喉炎的疗效观察

    小儿急性喉炎是指喉部黏膜急性弥漫性炎症,常见于1~3岁幼儿,其起病急,病情进展迅速,严重时可出现发绀、烦躁不安、面色苍白、伴有不同程度的呼吸困难.一般白天症状轻,夜间入睡后加重,出现喉梗阻如不及时抢救,可窒息死亡 [1].普米克令舒为液体吸入剂,对糖皮质激素受体的亲和力强,其抗炎及抑制变态反应强度是地塞米松的20~30倍[2].我科从2007年7月至2008年10 月对小儿急性喉炎应用普米克令舒雾化吸入治疗与地塞米松雾化吸入治疗进行对照观察,现总结如下.

    作者:蔡振荡;吴超雄;王清清 刊期: 2010年第01期

  • 温州医学院附属义乌医院正式挂牌成立

    作者: 刊期: 2010年第01期

  • 慢性心血管疾病生活方式的影响因素调查

    心血管疾病是全球性的重大公共卫生问题,全球每年约有1700万人死于心血管疾病,其中有3/4以上可归于吸烟、高血压和高胆固醇血症[1].心血管疾病死亡率高,但在美国、加拿大等发达国家,自上世纪60年代末期心血管疾病死亡率却呈下降趋势,表明利用现有知识和技术开展心血管疾病防治工作可以降低心血管疾病发病和死亡.近20年来我国的心血管疾病发病和死亡率却呈上升趋势.笔者选取了2007年7月至2008年12月在本社区卫生服务中心管理的133例心血管疾病(包括脑血管病)患者的生活方式做调查分析,为家庭康复护理提供有效服务依据,以减少疾病复发率.现将结果报告如下.

    作者:包爱娥 刊期: 2010年第01期

  • 2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析

    目的:了解女性下生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染的型别分布及特点.方法:采用核酸分子快速杂交分型技术对2008年1-12月间在温州医学院温州市第三临床学院妇产科就诊的2735例女性进行生殖道21种HPV检测并分型.结果:HPV总感染率为38.7%(1059/2735),21种HPV亚型(除HPV43型外)均有检出,其中单一型感染率为22.8%(623/2735),混合型感染率为15.9%(436/2735 );HPV高危型感染率为31.3%(857/2735),HPV低危型感染率为8.9%(244/2735).在1059例HPV DNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16型(占17.7%),HPV52型(占12.2%),HPV58型(占13.5%);低危型有HPV6型(占8.8%),HPV11型(占9.4%).2735例HPV感染高峰年龄在30~40岁(占11.7%),50~60岁年龄段下降至4%,各年龄段HPV感染检出率差异有显著性(P <0.01).结论:在温州地区,30~40岁为HPV感染的高峰年龄,高危人群HPV感染率达38.7%,HPV感染的常见型别为HPV16,HPV52,HPV58,HPV6和HPV11.

    作者:童郁;邵展;许锴;张德亭 刊期: 2010年第01期

  • 髋臼前柱拉力螺钉内固定的解剖学研究

    目的:探讨髋臼前柱拉力螺钉内固定的解剖学基础.方法:取12个骨盆标本,其中男7个,女5个.于双侧髋臼中部垂直于前后柱表面截骨,以逆行法沿前柱中心打入一克氏针,其从髂骨后外侧穿出点为P点,作一参考线AB,其中A为坐骨大切迹顶点,B为髂前上、下棘切迹,由 P点向AB作垂线,与AB相交于D点,与髋臼上缘相交于E点.然后测量以下数值:①AB ,AD,PD,PE的距离;②骨盆俯卧位时前柱克氏针与水平面的夹角α,与矢状面的夹角β;③测量髋臼前柱截面的半径;④测量髋臼前柱克氏针在骨皮质内的长度.结果:PD是AB的中垂线.PD的距离男性为(1.59±0.25)cm,女性为(1.49±0.20)cm; PE的距离男性为(3.67±0.40)cm,女性为(3.28±0.12)cm;夹角α男性为(25.0±2.6)°,女性为(23.9±3.5)°;夹角β男性为(37.5±2.5)°,女性为(37.4±2.2)°;前柱截面的半径男性为(6.45±0.27)mm,女性为(6.34±0.34)mm;前柱克氏针的长度男性为(11.5±0.4)cm,女性为(11.2±0.5)cm.结论:髋臼前柱拉力螺钉内固定在解剖学上是可行的.

    作者:石成弟;郭晓山;黄俊武;水小龙;周海波 刊期: 2010年第01期

  • 雌激素受体α基因多态性与良性前列腺增生相关研究

    目的:探讨雌激素受体α基因 PvuII和XbaI位点的单核苷酸多态性与良性前列腺增生(BPH)发病风险的关系.方法:收集112例BPH患者和111例健康对照人群的外周血标本,应用PCR -RFLP技术分析雌激素受体α基因PvuII和XbaI 的单核苷酸变异,采用非条件logistic回归分析和计算其基因型和等位基因频率.结果:PvuII和XbaI位点基因型符合Hardy -Weinberg平衡检验;PvuII位点以杂合子基因型Pp占多数(占44.84%),基因型PP少(占14.35%); XbaI位点以纯合子基因型xx为主,为64.13%;XX少,为4.48%;比较 PvuII和XbaI位点的基因型和等位基因在BPH患者和健康对照中的分布频率,差异均无显著性(P>0.05);雌激素受体α基因Pvu II与XbaI位点间具有较强的连锁不平衡效应(D'=0.958, r2=0.398).单体型分析显示pX在BPH患者中的分布显著高于健康对照人群( P=0.032108,OR=6.394,95%CI:0.919~44.517),提示单体型pX是BPH发生的易感因素.结论:雌激素受体α基因的单核苷酸多态性与前列腺增生发病存在一定的相关性.

    作者:季敬璋;白永恒;俞雅萍;莫亚林;吕建新 刊期: 2010年第01期

  • 微小病变肾病综合征并发急性肾衰竭的临床病理特点

    目的:探讨微小病变肾病综合征(minimal change nephrotic syndrome,MCNS)并发特发性急性肾衰竭(idiopathic acute renal failure,IARF)的临床病理特点.方法:回顾性分析15例成人 MCNS并发IARF(肾衰组)临床病理表现及转归情况,随机抽取成人MCNS无并发急性肾衰竭15例(非肾衰组)作对照.结果:肾衰组血肌酐为(307.7±168.6)μmol/L,少尿型占73.3%(11例),急性肾衰竭好转率为86.7%(13例).与非肾衰组相比,肾衰组水肿程度较重,收缩压水平较高( P<0.01);肾衰组肾小管上皮细胞浊肿和肾小管上皮细胞扁平化发生率较高( P<0.01),肾小管腔内蛋白管型的发生率较高(P <0.05);肾病综合征的缓解时间和平均住院时间较长( P<0.01).结论:成人原发性MCNS并发IARF患者临床上水肿程度较重和收缩压水平较高,病理表现主要为急性肾小管损伤,肾功能损伤多呈可逆性质,预后好.

    作者:尤小寒;周莹;黄朝兴 刊期: 2010年第01期

  • 胸中下段食管癌258例临床分析

    目的:了解影响食管癌分期的高危因素,为监床放化疗结合的综合治疗提供依据.方法:回顾性分析2001年1月一2006年12月收治的258例胸中下段食管癌的临床病理资料,所有患者均未经术前放化疗而直接行食管癌根治性手术,分期依据uICC97 TNM分期标准.结果:胸中段癌159例,胸下段癌99例.钡荆造影平均长度为(4.87±2.33)cm,手术平均长度为(5.28±2.35)cm,单因素分析显示食管癌病灶长度、病理分型、位置与临床分期有关(P<0.05),多因素分析显示病灶长度在5 cm以上和位于下段食管是食管癌处于临床晚期的危险因素(P<0.05).结论:食管癌实际长度比造影片上长,食管癌病灶长度和位置与临床分期有关.

    作者:孙文辉;骆明远;张丽珍;盛李明 刊期: 2010年第01期

  • 血小板白细胞聚集体及其临床意义

    近年来,心脑血管疾病的发生率有着明显的增高,其中许多病理生理方面的因素需要去探讨.血小板白细胞聚集体(platelet-1eukocyte aggregates,PLA)作为一种影响血栓形成的因素,近几年逐渐引起国内外心脑血管病专家的重视.研究PLA的发生机制有利于加深对疾病本身的认识,指导疾病的诊断和治疗,有利于对疾病本身的监测,形成更深层次的疾病预警.

    作者:周强;易兴阳;池丽芬 刊期: 2010年第01期

  • 异基因造血干细胞移植治疗再生障碍性贫血

    目的:评价异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗再生障碍性贫血的临床疗效.方法:3例再障患者,其中重型再障2例,再障-PNH综合征1例,均为HLA全相合亲缘供者.预处理方案:重型再障患者为CTX+ATG方案,再障-PNH综合征患者加用白消安、氟达拉宾,急性移植物抗宿主病(aGVHD)预防方案为环孢菌素A(CsA)加氨甲喋呤(MTX)联合方案,以前列素E1预防肝静脉闭塞病(VOD),以巨细胞病毒(CMV)抗原血症监测和更昔洛韦预防CMV病.结果:3例患者经DNA短串联重复序列多态性分析证明为供髓植入,中性粒细胞大于0.5×109/L的平均天数为16 d(12~20 d),血小板大于20×109/L的平均天数为20 d(15~23 d).发生Ⅱ度aGVHD 1例,未发生cGVHD,未发生移植排斥.中位随访时间248 d(138~465 d),全部患者均无病生存.结论:allo-HSCT是治疗再生障碍性贫血的有效方法.

    作者:梁彬;俞康;陈怡;沈志坚;江松福;胡旭东;钱红兰;孙岚;周淑娟 刊期: 2010年第01期

  • 苦瓜蛋白诱导K562/A02细胞凋亡

    目的:观察苦瓜蛋白对K562/A02细胞凋亡受抑逆转作用及其分子机制.方法:CCK-8法测定苦瓜蛋白对耐药细胞K562/A02的IC50值,细胞形态学和AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞法测定P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达及caspase-3和 caspase-8活性.结果:苦瓜蛋白显著抑制K562/A02耐药细胞的增殖;经苦瓜蛋白处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,AnnexinV/PI双染法显示凋亡细胞明显增加;P-gp蛋白表达下降,caspase-3和caspase -8活性显著增强.结论:苦瓜蛋白能诱导K562/A02耐药细胞凋亡,逆转耐药白血病细胞P -gp高表达所介导的细胞凋亡抑制.

    作者:尹丽慧;熊术道;叶爱芳;韩义香;章圣辉;吴建波 刊期: 2010年第01期

温州医科大学学报杂志

温州医科大学学报杂志

主管:温州医科大学

主办:温州医科大学