学术投稿

肝脏特异性F抗原的提纯与鉴定

张琦;李焕斌;王玲;徐云弟;谢克俭

关键词:肝脏/F抗原, 柱层析, 提纯, 鉴定
摘要:目的:建立一种新的分离纯化人肝脏特异性F抗原(肝脏F蛋白)的方法,为临床检测肝脏特异性F抗原提供物质基础.方法:在0.25 mol/L蔗糖中,人肝组织匀浆以105000 g离心后,上清液用Sepharose 6-B和DEAE-ED52两步柱层析分离,后经等电聚焦,得到纯化的F抗原.用纯化的F抗原免疫兔子获相应的多克隆抗体.结果:纯化的肝脏F抗原经SDS-PAGE电泳鉴定呈单一区带,分子量约44000 Da,PI在6.5-6.7之间,密度为1.26,是一种蛋白质抗原,不含有可探测到的碳水化合物和脂类.结论:经两步柱层析及等电聚焦可获得纯化的F抗原,并保留了免疫特性,可供进一步研究其临床价值.
温州医科大学学报杂志相关文献
  • 幼兔丁卡因脊髓神经毒性损伤后凋亡相关基因的表达

    目的:观察丁卡因注入幼兔蛛网膜下腔造成幼兔脊髓神经损伤后神经细胞凋亡相关基因bax和bcl-2的表达及其意义.方法:日本大耳白兔48只,雌雄不拘,45日龄左右,体重1.0~1.5 kg.随机分为0.9%生理盐水对照组(S组)和2%丁卡因组(T组)两个大组,每组24只.两组又分别随机分为3 h组、6 h组,7 d组三小组,共六个小组,每组8只.于L6,7穿刺后,20 s内注入生理盐水或2%丁卡因0.2 ml.于注药后3 h、6 h、7 d三个时相点各处死3 h组,6 h组,7 d组的8只幼兔,取L5,6段脊髓,应用透射电镜、HE染色观察神经细胞的形态学变化.采用免疫组化法检测两组各个时相点脊髓神经细胞凋亡相关基因的表达情况.结果:T组所有幼兔的双后肢运动功能均出现不同程度的受损.HE染色显示T组脊髓损伤主要表现为多发性小出血灶,7 d后为胶质细胞增生.电镜观察可见到典型的凋亡细胞.S组和T组在3 h、6 h、7 d不同时相点均有神经细胞凋亡相关基因bax和bcl-2的表达,与S组比较,T组的阳性细胞光密度值较高(P<0.05).结论:丁卡因致幼兔脊髓神经系统毒性损伤后存在细胞凋亡现象.凋亡相关基因bax和bcl-2共同参与了脊髓神经毒性损伤的发生和发展.

    作者:狄美琴;上官王宁;倪育飞;连庆泉 刊期: 2006年第06期

  • 卒中后抑郁实验动物模型的研究

    目的:探讨脑卒中后抑郁(PSD)大鼠模型建立的可行性、有效性和简便性.方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,并结合孤养、束缚应激制成PSD大鼠模型,观察大鼠糖水消耗试验,自发性行为改变,下丘脑单胺类神经递质的变化.结果:模型组大鼠蔗糖水饮用量与正常组相比明显减少(P<0.01);旷野试验中模型组大鼠水平及垂直得分均小于正常组(P<0.01);模型组大鼠下丘脑NE、5-HT、DA含量均明显小于正常组(P<0.01或0.05).结论:在局灶性脑缺血大鼠模型基础上结合孤养、束缚应激制成的PSD大鼠模型,可为卒中后抑郁的研究提供较为理想的动物模型.

    作者:倪贵华;邵蓓;范虹 刊期: 2006年第06期

  • 恶性孤立性肺结节螺旋CT诊断

    目的:探讨恶性孤立性肺结节(SPN)的螺旋CT表现.方法:回顾性分析100例经手术病理或随访证实为肺癌且影像资料齐全的孤立性肺结节.CT资料着重观察:病灶的形态、边缘征象、内部征象、邻近结构改变及强化特性,并比较各病理类型的特征表现及随访变化.结果:100例恶性SPN中病灶呈类圆形占96%;边缘清楚占95%;分叶或脐凹征显示率达74%;毛刺占76%(长毛刺:19%,短毛刺:65%;二者同时存在8%);棘状突起占26%;含气支气管征占20%;空泡征达13%;空洞占13%(均为不规则厚壁、偏心空洞);血管纠集征占23%;胸膜凹陷征占43%;局限胸膜黏连、增厚占16%.细支气管肺泡癌(Bronchioloalveolar carcinoma,BAC)空泡征、含气支气管征、晕征显示率高于非细支气管肺癌(NBAC)(P<0.05).鳞癌空洞显示率高于其他恶性结节(P<0.05).鳞癌增强后,不均匀强化率比非鳞癌结节不均匀强化率高(P<0.05).结论:在螺旋CT扫描中,恶性孤立性肺结节可出现多种征象,其中分叶征和毛刺征的诊断价值较高.根据结节的各种征象和强化方式,结合各种CT检查技术有助于病变的定性诊断.

    作者:余苔痕;吴恩福;郑祥武;姜亿一;叶彩儿 刊期: 2006年第06期

  • 妊娠合并子宫肌瘤184例分析

    子宫肌瘤是女性生殖器官中常见的良性肿瘤,妊娠合并子宫肌瘤属高危妊娠,处理不当会影响母儿健康甚至危及生命.1998年1月1日~2002年12月31日我院共住院分娩18090例,其中合并子宫肌瘤184例,现报告如下.

    作者:吴朝阳;刘艳波 刊期: 2006年第06期

  • 小鼠慢性自身免疫性心肌炎模型的建立

    目的:建立Balb/c小鼠实验性慢性自身免疫性心肌炎模型.方法:用遗传易感的5周龄雄性Balb/c小鼠,于第0天、第7天、第21天、第42天重复皮下注射纯化的猪心肌肌球蛋白,分别于免疫后14、21、42、70 d处死小鼠,观察组织病理变化情况,测定血清肌球蛋白抗体滴度和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)浓度.结果:实验组86%(31/36)小鼠出现不同程度的心肌炎病理改变.14 d、21 d出现急性心肌炎表现,主要为心外膜下、心肌间质单个核细胞浸润和肌浆溶解.42 d、70 d符合慢性心肌炎病理表现,主要表现为肌纤维排列紊乱、纤维化,而心肌间质和心外膜下仍可见少量单个核细胞浸润.血清抗心肌肌球蛋白自身抗体滴度、cTnⅠ浓度在急慢性期不同时间段均有不同程度增高.结论:猪心肌肌球蛋白重复免疫可以诱导Balb/c小鼠出现典型的炎症持续存在的慢性自身免疫性心肌炎.

    作者:姜剑斌;张静;仇慧仙;陈其 刊期: 2006年第06期

  • 重组人生长激素治疗青春发育后期矮小女孩胰岛素水平和糖耐量试验的观察

    目的:探讨国产重组人生长激素(rhGH)的治疗对青春发育后期女性矮小儿童的空腹胰岛素(FINS)水平及糖耐量试验(OGTT)的影响.方法:测定rhGH治疗组、非rhGH治疗组各12例矮小女孩治疗前后FINS水平及OGTT.结果:两组女孩治疗一年后FINS水平及OGTT结果无显著性差异.结论:rhGH治疗一年的青春发育后期女性儿童血清空腹胰岛素水平及糖耐量试验无明显异常.

    作者:张宇;杨立础;李温慈 刊期: 2006年第06期

  • 胰周血管16层CT成像研究

    目的:探讨16层CT血管成像技术显示胰周血管的价值.方法:对40例无腹部疾病的病人行16层CT双期扫描.使用轴位CT图像、薄层大密度投影(TSMIP)和容积重建(VR)图像评价胰腺周围动脉和静脉.结果:轴位CT图像、TSMIP和VR对胰腺间接供血动脉和门静脉、肠系膜上静脉、脾静脉、胃网膜右静脉的显示率均为100%,对胃结肠干均为80%.轴位CT、TSMIP和VR对胰十二指肠上后动脉的显示率分别为97.5%、92.5%、67.5%;对胰十二指肠上前动脉,为95%、95%、75%;对胰十二指肠下动脉,为97.5%、92.5%、57.5%;对右结肠上静脉,为100%、87.5%、80%;对胰十二指肠上后静脉,为92.5%、65%、40%;对胰十二指肠上前静脉,为92.5%、62.5%、45%.结论:结合适当的扫描技术和显示方法,使用16层CT可获得良好的胰周血管的显示.

    作者:刘再毅;吴恩福;郑祥武;严志汉;叶彩儿 刊期: 2006年第06期

  • 纤支镜直视下经皮气管切开术27例

    我院ICU于2005年1月至2005年12月在纤支镜直视下行经皮气管切开术(percutaneous dilational tracheostomy PDT)27例,取得较好效果,现介绍如下.

    作者:陈新国;徐建国;赵洁;潘娅静;张雪良;徐子琴;徐赛男;徐敏 刊期: 2006年第06期

  • 口服布洛芬治疗早产儿动脉导管未闭疗效观察

    动脉导管未闭(PDA)是常见的早产儿先天性心脏病,早产儿动脉导管常不能关闭,或功能性关闭后又重新开放.PDA开放可加重呼吸窘迫,促发充血性心力衰竭.口服布洛芬混悬液治疗早产儿PDA在国内外均有报道.为观察不同时间口服布洛芬混悬液对早产儿PDA的疗效和安全性,我们对48例早产儿进行了对照研究,报告如下.

    作者:张淑娟;高原 刊期: 2006年第06期

  • 骨桥素对高磷诱导的牛血管平滑肌细胞钙化的作用

    目的:研究骨桥素(OPN)对高磷诱导的牛血管平滑肌细胞钙化是否具有抑制作用.方法:用含不同磷(iP)浓度(1.4~2.0 mmol/L)的培养基体外培养牛血管平滑肌细胞,观察细胞钙沉积及OPN的表达;在高磷(2.0 mmol/L)培养基中加入不同浓度外源性OPN测定细胞钙化值的变化.用甲?酚肽络合酮法测定钙化量,用二喹啉甲酸检测法(BCA法)测蛋白含量,并以细胞蛋白含量标化钙化量.以实时荧光定量PCR法检测OPN mRNA的表达,以Western Blotting法测定OPN蛋白表达.结果:①培养基磷浓度1.4 mmol/L组细胞仅有少量钙沉积,随着培养基磷浓度增高及培养时间的延长,细胞钙沉积增加,第9天时,iP 2.0 mmol/L组与iP 1.4 mmol/L组钙沉积[(138.00±12.53) μg/mg protein比(22.67±2.52) μg/mg protein]差异具有显著性.②随着培养液磷浓度增高OPN mRNA表达逐渐增高,iP 2.0 mmol/L组与iP 1.4 mmol/L OPNmRNA表达[(2.51±0.18)×107 拷贝/106 GAPDH与(1.27±0.04)×107 拷贝/106 GAPDH]差异具有显著性.③随着培养基磷浓度增高OPN蛋白表达量亦相应增加.④随着培养基中OPN浓度的增高细胞钙化有减少趋势,OPN浓度0.5 μg/ml和5 μg/ml组钙化分别为(67±6.68) μg/mg protein、48.32±6.55 μg/mg protein,与单纯高磷组比较其差别具显著性(P<0.05).结论:高磷培养基能诱导血管平滑肌发生钙化和OPN表达,且与磷浓度和作用时间有关,外源性OPN能抑制高磷诱导的细胞钙化的产生,而且这种抑制作用具剂量依赖性.

    作者:李占园;刘毅;徐玉兰;毛朝鸣 刊期: 2006年第06期

  • 慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠右心室骨桥蛋白及其整合素β3受体mRNA表达的变化

    目的:观察慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体基因表达变化与右心室重塑的关系.方法:48只雄性SD大鼠随机分为四组:对照组(C组)、低O2高CO21 w、低O2高CO22 w和4 w组(1HH、2HH和4HH).除对照组吸入空气外,其他三组大鼠置于含9.O%~11.0%O2,5.5%~6.5%CO2的低O2高CO2氧舱内,每天8 h,每周6 d.测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数;采用RT-PCR法测定不同低O2高CO2组大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体mRNA的表达水平.结果:①低O2高CO2各组大鼠mPAP和RV/LV+S均明显高于C组(P<0.01),并且随着低O2高CO2时间的延长而增高.②C组大鼠右心室心肌OPN和整合素β3 mRNA表达水平均很低,低O2高CO2各组大鼠心肌OPN和整合素β3 mRNA表达水平增高,与C组比较差异均有显著性(P<0.01和P<0.05).相关性分析显示,骨桥蛋白mRNA表达水平与大鼠右心室肥大程度呈显著正相关性(P<0.01).结论:慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压及右室肥大形成过程中,右心室心肌OPN及其受体整合素β 3基因表达增高,可能在右心室心肌重塑中起重要的作用.

    作者:林全;王良兴;施孟如;黄晓颖;陈少贤 刊期: 2006年第06期

  • 肝脏特异性F抗原的提纯与鉴定

    目的:建立一种新的分离纯化人肝脏特异性F抗原(肝脏F蛋白)的方法,为临床检测肝脏特异性F抗原提供物质基础.方法:在0.25 mol/L蔗糖中,人肝组织匀浆以105000 g离心后,上清液用Sepharose 6-B和DEAE-ED52两步柱层析分离,后经等电聚焦,得到纯化的F抗原.用纯化的F抗原免疫兔子获相应的多克隆抗体.结果:纯化的肝脏F抗原经SDS-PAGE电泳鉴定呈单一区带,分子量约44000 Da,PI在6.5-6.7之间,密度为1.26,是一种蛋白质抗原,不含有可探测到的碳水化合物和脂类.结论:经两步柱层析及等电聚焦可获得纯化的F抗原,并保留了免疫特性,可供进一步研究其临床价值.

    作者:张琦;李焕斌;王玲;徐云弟;谢克俭 刊期: 2006年第06期

  • 冷冻法治疗皮肤瘢痕性病变的探讨

    目的:探讨冷冻疗法治疗皮肤瘢痕增生性病变的疗效.方法:对我院近年来85例皮肤瘢痕增生性病变的患者应用液氮治疗,观察其疗效,其中80例得到随访.结果:显效43例,有效35例,无效2例.结论:液氮冷冻治疗皮肤瘢痕增生性病变有较好的疗效.

    作者:郑君达;李力群;李建凤 刊期: 2006年第06期

  • 东菱精纯克栓酶治疗急性进展型脑梗死的护理

    急性进展型脑梗死是脑梗死的一种类型,其特点是疾病和局部症状缓慢出现,逐渐加重病情可能进展数天或两周,对患者的危害极大,如何激活血纤溶系统活性,防止栓子继续进展,及早建立侧支循环挽救半暗区的神经细胞成为治疗脑梗死的关键[1].东菱精纯克栓酶是新型强力单成分溶血栓微循环治疗剂,具有增强纤溶系统活性,改善流变学,减少血栓形成基质等作用,可有效降低全血黏度,红细胞压积及血纤维蛋白原含量,抑制血栓形成,从而改善脑部血流供应,使因缺血而功能受损的脑细胞恢复功能[2].但该药易导致出血及其他相关的不良反应,我科2005年4月至2006年1月应用东菱精纯克栓酶(DF-521)治疗急性进展型脑卒中患者125例,经过我们的严密观察及用药护理、饮食指导,肢体功能锻炼,并做好基础护理等,减少了不良反应的发生,取得满意的疗效.现将护理体会报告如下.

    作者:周琦;贺彩芳 刊期: 2006年第06期

  • 子宫内膜间质肉瘤临床病理分析

    子宫内膜间质肉瘤是一类起源于苗勒氏管的较少见恶性肿瘤.它具有向上皮和间叶分化的潜能[1],在病理形态和免疫组化方面可显示多种变异[2],病理诊断有一定难度.现就26例子宫内膜间质肉瘤临床病理特征分析如下.

    作者:郭瑞华;张品南 刊期: 2006年第06期

  • 川崎病并冠状动脉扩张危险因素分析

    目的:探讨川崎病并发冠状动脉扩张的危险因素.方法:确诊为川崎病的患儿126例,根据超声结果分为冠状动脉扩张组和无冠状动脉扩张组,对其性别、年龄、发热天数、急性期C-反应蛋白、血沉、白蛋白、血清钠离子浓度等资料进行比较分析,并作logistic相关分析.结果:126例川崎病患儿并发冠状动脉扩张者66例(占52.38%),无扩张者60例(占47.62%).两组患儿年龄、发热天数、白蛋白、血钠(低钠)差异有显著性(P<0.05);多因素Logistic回归分析提示年龄、发热时间、血钠浓度和冠脉扩张密切相关(P<0.05).结论:川崎病患儿并冠状动脉扩张与患儿年龄小、发热时间长及血钠浓度低密切相关.

    作者:仇慧仙;陈其;张园海;任跃 刊期: 2006年第06期

  • 急性心肌梗死PCI后早期T波改变与冠脉病变的关系

    目的:探讨急性心肌梗死行PCI治疗后,早期T波改变与冠脉病变支数关系.方法:60例急性心肌梗死行立即和(或)择期PCI治疗,根据冠脉造影结果分为单支病变组和多支病变组,24 h内心电图动态变化分T波倒置组和未倒置组.结果:60例急性心肌梗死患者,手术全部成功,犯罪血管再通,TIMI3级58例,2级2例,植入支架1~5枚不等,24 h内T波倒置33例,T波未倒置27例;早期T波倒置是否明显与冠状动脉病变支数有统计学意义.出院后,59例患者门诊随访24~48个月不等,2例原先冠状动脉多支病变,因再次胸痛入院行冠状动脉造影及支架术.结论:急性心肌梗死,心电图早期T波改变与冠脉病变支数有密切关系.

    作者:周林海;张怀勤;黄伟剑;林捷 刊期: 2006年第06期

  • 罗格列酮对大鼠非酒精性脂肪肝的防治作用

    目的:观察罗格列酮对大鼠非酒精性脂肪肝的防治作用.方法:42只SD大鼠随机分为正常组、对照组、罗格列酮组,对照组、罗格列酮组予高脂饮食,罗格列酮组同时予罗格列酮.12 w后处死大鼠,称量大鼠体重和肝脏湿重,检测血糖、血脂、氨基转移酶,做肝组织病理学检查和肝脏脂肪的测定.结果:①对照组大鼠体重、肝湿重、肝指数(肝湿重/体重× 100%)均升高(P<0.01);罗格列酮组大鼠体重与正常组无差别,肝湿重、肝指数低于对照组(P<0.01).②血糖对照组较正常组增加(P<0.05),而罗格列酮组与正常组无区别;对照组存在脂代谢紊乱(P<0.01),罗格列酮组脂代谢紊乱明显改善(P<0.01).③对照组有程度不同的肝细胞脂肪变性(P<0.01),脂变程度以中、重度为主,罗格列酮组肝细胞脂肪变性以轻度为主,不存在重度病变,与对照组相比明显改善(P<0.05);对照组和罗格列酮组肝脏脂肪含量增高,但罗格列酮组肝脏脂肪含量明显低于对照组(P<0.05).结论:罗格列酮可改善非酒精性脂肪肝大鼠的血脂紊乱和脂肪变性.

    作者:冯文焕;汪大望;郑景晨;高鑫;沈飞霞;吴步猛;何秋香;袁谦 刊期: 2006年第06期

  • 正常大小卵巢癌综合征的临床分析

    目的:探讨正常大小卵巢癌综合征的临床特点、诊断标准、有效的治疗方法及预后.方法:回顾性分析1997-2003年我院治疗及病理复核证实的正常大小卵巢癌综合征12例,其中7例为性腺外苗勒氏管肿瘤,也称卵巢外腹膜浆液性乳头状腺癌(epspc extraovarian peritoneal seous papillary carcinoma,EPSPC),2例为卵巢浆液性腺癌,1例为恶性间皮瘤,2例为原发灶不明的转移性腺癌.无论上述何种类型均宜大限度切除肿瘤,使术后残存肿瘤<2 cm,并辅以有效的多疗程综合化疗.结果:2例EPSPC存活80个月,随访至2005年10月仍健在;1例原发灶不明的转移性腺癌已存活70个月,目前仍健在.9例已死亡,患者平均生存13.2个月.结论:卵巢正常大小,尤其是绝经后妇女,伴有综合征的患者应高度疑似卵巢癌综合征;对此综合征患者必须高度重视鉴别诊断,首选手术治疗,行肿瘤细胞减灭术,术后辅以有效的化疗或放疗,可以获得较长的生存期.

    作者:陈利琼;曹华妹;蔡珠华 刊期: 2006年第06期

  • 胃癌根治术前应用立止血对凝血功能变化的影响

    目的:探讨胃癌根治手术(D2,D3)对患者凝血功能的影响以及术前应用立止血对凝血功能的影响.方法:40例胃癌根治手术患者随机分为立止血及对照二组.术前5 min分组静注立止血2 kU或生理盐水5 ml.分别于给药前、给药后30 min和1 h及术毕抽取静脉血,检测血浆凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT).结果:对照组给药后30 min、1 h及术毕,PT、APTT均延长,与术前相比差异有显著性(P<0.05).立止血组术中PT、APTT延长,但与术前比较差异无显著性(P>0.05);术毕PT、APTT延长,与对照组比较差异无显著性.结论:胃癌根治术前静注立止血2 ku可使术中凝血时间趋于正常,从而减少术中渗血,而对术后凝血时间影响不大.

    作者:黄颖鹏;朱冠保;陈哲京;姚建高;韩少良;程骏 刊期: 2006年第06期

温州医科大学学报杂志

温州医科大学学报杂志

主管:温州医科大学

主办:温州医科大学