目的：建立毛细管电泳法检测瑞格列奈片中左旋异构体杂质。方法：采用未涂层熔融石英毛细管柱（50μm ×50 cm，有效长度41 cm）为分离通道，运行缓冲液为pH 3．5，30 mmol/L的磷酸二氢钠缓冲溶液，含5 mg/ml CM-β-CD。结果：左旋瑞格列奈在浓度为2．00～80．00μg/ml 范围内线性关系良好（ r ＝0．9993），方法回收率为92．5％～105．0％。结论：本实验建立的方法简单、准确、灵敏，可用于瑞格列奈片中左旋异构体杂质的检测。
作者：袁晓薇；孙嘉仪；王诗卓；郭兴杰 刊期： 2014年第02期
近日，浙江大学医神经医学研究所段树民院士团队在《自然：科学实验报告》（ Nature Protocols ）上发表了题为“Analysis of microglial migration by a micropipette assay”的论文（ http：／／www．nature．com／nprot／journal／v9／n2／full／nprot．2014．015．html），阐述了离体培养小胶质细胞的迁移方法。小胶质细胞是中枢神经系统中固有的免疫细胞，在维持大脑微环境的稳定中发挥重要作用。当大脑出现病变或损伤时，病灶周围的小胶质细胞会迅速活化，并快速向病损区迁移，及时吞噬清除坏死组织或病原体。小胶质细胞的趋向性迁移是它们产生免疫反应及行使功能的重要基础和前提。为了建立一套简便可行、适用于体外小胶质细胞迁移的方法，课题组成员借鉴了神经元轴突转向实验的方法，应用特制玻璃电极向体外培养的小胶质细胞脉冲式注射趋化因子，模拟大脑病损时的释放状态，在短时间内形成一定浓度梯度，进而诱导周围小胶质细胞向趋化因子释放中心迁移。结合显微实时成像，该法不仅可直接记录细胞迁移的动态过程，而且还可用于观察细胞迁移过程中亚细胞器、胞内钙离子等的同步变化。该法无需复杂仪器系统和昂贵耗材，且适用于研究其他细胞类型如肿瘤细胞、淋巴细胞等的迁移活动。
作者： 刊期： 2014年第02期
目的：开发一个结合互联网技术的呼吸系统常见住院疾病诊断专家系统。方法：采用SaaS架构体系，使用Microsoft Visual Studio 2005工具包中的ASP． NET和C＃开发基于浏览器访问方式的网络医学专家诊断系统。其数据库通过Microsoft SQL Server 2005构建，并且采用正向推理的推理机设计。结果：该专家系统拥有高效的数据访问及智能数据分析功能，是一个覆盖多个疾病的医学诊断专家系统。同时用户能够通过网络方式进行疾病诊断。结论：该系统可以诊断多种常见呼吸系统疾病。该系统结合了网络技术，可以进行远程医疗服务。
作者：徐卫华；陈友凌；严峥 刊期： 2014年第02期
目的：建立毛细管电泳法检查盐酸左西替利嗪片中右旋异构体杂质。方法：用磺酸化-β-环糊精（ S-β-CD）作为手性选择剂，考察了S-β-CD浓度、pH值和缓冲盐浓度对分离的影响。结果：在30 mmol/L磷酸盐运行缓冲液（含20 g/L S-β-CD，pH 7．0）中，西替利嗪对映体在分离电压为15 kV的条件下得到良好分离，并满足对盐酸左西替利嗪片检查右旋异构体杂质所需要的条件。结论：本实验建立的方法灵敏、可靠，可用于左旋西替利嗪中右旋异构体杂质的检查。
作者：王诗卓；赵允凤；孙嘉仪；郭兴杰 刊期： 2014年第02期
近日，《自噬》（ Autophagy）在线发表了浙江大学医学院基础医学系刘伟团队和浙江大学医学院附属第二医院陈志华团队的合作论文“Dissection of autophagy in human platelets”，阐明细胞自噬在人类血小板功能维持中的重要作用。全文见https：／／www．landesbioscience ．com／journals／autophagy／article／27832／？ nocache＝1484135998。细胞自噬是各种组织细胞通过持续降解胞内成分以维持内环境稳定的重要途径。尽管细胞自噬在包括衰老、免疫和肿瘤发生及神经变性性疾病等多种生理病理过程中的作用被逐渐认识，但细胞自噬在血小板中的功能尚不明确。作为真核细胞才具有的生理功能，细胞自噬的一个重要特征是在胞内形成有双层膜的自噬泡，这需要细胞内膜系统参与提供膜的来源。利用血小板这一无核但含有胞内膜性结构，且具重要生理功能的特殊细胞，研究团队发现，如同其他有核细胞，人体血小板中表达有全套自噬相关蛋白，并可经mTOR的抑制诱导自噬。进一步研究结果显示，血小板中的自噬需要Ⅲ型PI3K的活性；抑制自噬性降解能引起血小板粘附和聚集功能障碍。利用Bcelin-1敲除小鼠进而证明自噬缺陷会导致小鼠的凝血时间延长。这些结果表明，自噬在维持血小板功能中发挥重要作用。同时也提示，可以快速诱导的细胞适应性自噬，短时间内可能不需要基因转录水平的调控。
作者： 刊期： 2014年第02期
目的：运用聚乙二醇6000沉淀筛检血清催乳素（ PRL）水平升高患者中巨催乳素血症并进行临床样本验证。方法：运用聚乙二醇6000沉淀去除PRL升高患者血清中的巨催乳素分子（MPRL）。采用Sephacryl S-100HR层析柱联合化学发光免疫分析法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳联合蛋白质印迹法检测聚乙二醇6000沉淀血清MPRL的效果。采用聚乙二醇6000沉淀及化学发光免疫分析法检测PRL升高患者血清样本中的MPRL并筛查巨催乳素血症。分析真性高催乳素血症、高催乳素血症＋巨催乳素血症、真性巨催乳素血症患者不同临床表现。结果：聚乙二醇6000沉淀后，血清样本中MPRL峰或MPRL杂交信号明显降低，但对大分子催乳素（ BPRL）和小分子催乳素（ SPRL）无明显影响。1538例血清PRL升高患者中，16．1％（247/1538）为巨催乳素血症，其余83．9％（1291/1538）为真性高催乳素血症。247例巨催乳素血症样本中，93．5％（231/247）为真性巨催乳素血症，6．5％（16/247）为巨催乳素血症＋高催乳素血症。508例真性高催乳素血症患者中86．2％（438/508）有月经不调、停经/闭经、不孕不育或垂体瘤疾病，85．7％（6/7）高催乳素血症＋巨催乳素血症患者有上述临床表现，真性巨催乳素血症患者仅15．5％（11/71）有上述临床表现。结论：血清PRL升高患者中有一定比例的真性巨催乳素血症（假性高催乳素血症），运用聚乙二醇6000沉淀检测能简便有效地区分真性或假性高催乳素血症患者。
作者：陈永健；周永列；徐莉；严杰 刊期： 2014年第02期
据统计，全球约有20亿人口患有贫血，中国人群贫血患病率约为15％，中国农村中老年妇女人群贫血率更是高达40％。缺铁性贫血的发病机制和防治策略是国际研究的热点。近年来，浙江大学公共卫生学院营养与代谢实验室王福俤教授团队围绕铁代谢核心激素hepcidin调控机制以及以此为靶点的铁缺乏防治新策略研究方向发表了多篇论文。机体铁代谢是一个可控而复杂的过程，肝脏分泌的hepcidin 是调节人体铁稳态关键物质，它会“叫停”泵铁蛋白（ferroportin）的工作，以调节人体铁吸收。而人体内hepcidin过度活跃会令血液中含铁量过度下降，进而限制红细胞的合成。2012年《人类分子遗传学》（ Human Molecular Genetics）杂志在线报道了王福俤团队对中国中老年妇女缺铁性贫血风险基因位点的研究成果，成果揭示人类第一个贫血基因TMPRSS6位点变异患者对hepcidin的抑制能力较差，从而加大患贫血风险。全文见http：／／hmg．oxfordjournals ．org／content／21／9／2124。
作者： 刊期： 2014年第02期
目的：探讨慢性阻塞性肺疾病（ COPD）评估测试（ CAT）在评估COPD患者临床预后中的应用价值。方法：将入选舟山市普陀区人民医院门诊COPD稳定期患者100例进行CAT评分和BODE指数评分，对两者结果做Spearman相关分析。记录3年随访患者病情急性加重次数和生存情况，并分析两种指标评估预后的差异。结果：CAT评分1、2、3和4级患者分别为28、30、29和13例，而根据BODE评分1、2、3和4级患者分别为31、29、28和12例。 CAT评分与BODE指数总分、4个变量得分均存在显著的相关性（ r＝-0．237、-0．772、0．789、-0．767、0．888，均P＜0．05）。多元回归分析结果显示CAT与BODE中的气流阻塞程度、呼吸困难程度、运动能力3个变量相关。随着CAT分级级别增加，COPD患者急性加重发作次数和病死率也相应增加两种指标在评估各级COPD患者急性加重发作次数之间差异无统计学意义（P＞0．05）；病死人数两者之间差异亦无统计学意义（1级：χ2＝0．919，2级：χ2＝0．001，3级：χ2＝0．177，4级：χ2＝0．322，均P＞0．05）。结论：CAT评分与BODE指数相关性较好，CAT适用于评价COPD患者生活质量，便于医师和患者简易快捷地了解病情，指导和监督治疗。
作者：顾靖华；邱宜军；陆亿华；徐旭东；徐志豪 刊期： 2014年第02期
目的：建立适用于体外细胞模型的OATP1 B1手性底物非索非那定柱前手性衍生化分析方法，为测定细胞中非索非那定对映体提供分析手段。方法：选择R-（＋）-苯乙基异氰酸酯作为手性衍生化试剂，与非索非那定生成氨基甲酸酯衍生物，应用液相色谱-串联质谱法确定对映体衍生物色谱峰，通过反相高效液相色谱法实现对映体的分离分析。结果：在建立的手性分离条件下，成功实现非索非那定对映体分离分析，非索非那定两个对映体衍生物在25～100 ng/ml浓度范围内线性关系良好（R2＝0．9992，0．9989），日内、日间精密度均小于10％。结论：本实验建立的非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效液相色谱分析方法灵敏、准确，可用于体外细胞模型中盐酸非索非那定立体选择性分析。
作者：姚青青；屈伯宣；周权；曾苏 刊期： 2014年第02期
随着互联网的普及和自媒体的崛起，我们面临的不仅仅是信息过量问题，更重要是信息可信度问题。为了向大众传播正确的营养知识，纠正错谬的健康理念，浙江大学公共卫生系主任王福俤教授带领公共卫生系营养与代谢研究组创办了非营利性的科普宣教平台--西湖营养（http：／／www．wnutrition．org；微信：wnutrition）。西湖营养主要发布营养和公共卫生领域的新发现、新知识、新理论；西湖营养的每一篇文章都是基于专业科研论文或已论证的权威膳食指导，而每一篇文章在发布前都经过了营养与代谢研究组专家的审核。
作者： 刊期： 2014年第02期
自从2002年被Pubmed收录以来，读者在Pubmed （ http：／／www．ncbi．nlm．nih．gov／pubmed）上输入《浙江大学学报（医学版）》刊名汉语拼音“Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban”或英文刊名“Journal of Zhejiang University Medical Sciences”或ISSN号“1008-9292”可以检索到收录以来的的文献题录和摘要。从2014年4月14日开始，读者可以通过上述途径在摘要页面点击右上角全文链接图标免费下载全文PDF进行阅读。
作者： 刊期： 2014年第02期
目的：了解国内生产的马来酸噻吗洛尔及其滴眼液中对映体杂质含量，为我国药典制订手性药物杂质限量提供参考数据。方法：应用手性高效液相色谱法，色谱条件为：Chiralcel OD 手性柱（4．6 mm ×150 mm，5μm）；检测器波长297 nm；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺（480∶20∶1）；柱温25℃；流速1．0 ml/min，进样量5μl。结果：两个对映体的色谱分离度为4．3。不同厂家的两批马来酸噻吗洛尔原料药中的对映体杂质平均含量小于0．67％，3批马来酸噻吗洛尔滴眼液中的对映体杂质平均含量小于0．31％。结论：各批马来酸噻吗洛尔产品中对映体杂质含量均符合欧洲药典标准，我国药典可以参照此数据。
作者：朱倩颖；余露山；郑国刚；谢升谷；陶巧凤 刊期： 2014年第02期
急性早幼粒细胞白血病（ APL）是急性髓系白血病中的一种特殊类型，被法国-美国-英国（ FAB）协作组定义为急性髓系白血病M3型。 APL患者骨髓里大量积聚不成熟的早幼粒细胞，妨碍骨髓正常造血功能。更为凶险的是，这类白血病细胞富含的颗粒还能导致患者凝血功能异常，出现严重出血症状，病情非常凶险。上世纪80年代，我国血液病学专家、中国工程院院士、国家高科学技术奖获得者王振义教授针对APL独有的PML-RARα融合基因，提出利用全反式维甲酸诱导白血病细胞分化，极大地提高了患者的救治成功率和长期生存时间。然而，维甲酸治疗只能使大约80％患者获得完全缓解，因此，针对APL治疗的研究并没有放慢脚步。近，来自巴黎第七大学的科学家们发现PML转化相关蛋白53（PML-transformation-related protein 53，Trp53）的激活是治愈APL的主要机制。 Trp53能够清除APL小鼠模型身上的肿瘤细胞。科学家们进一步指出，全反式维甲酸和砷剂导致细胞PML-RARα融合基因发生降解，进一步诱导Trp53发挥作用，使得白血病细胞发生一种类似于衰老的变化，终得以清除。细胞衰老是一种程序性反应，由端粒缩短导致稳定的细胞周期捕获和各种促炎性细胞因子分泌，后者能招募效应免疫细胞，终清除衰老细胞。研究人员发现，维甲酸治疗后抑制E2 F通路、诱导p53和衰老相关分泌表型，这种三基因标签是维甲酸致PML过表达、诱导衰老细胞的特征。维甲酸治疗后，p53蛋白成为了细胞生死的仲裁者，它能够通过PML核体触发细胞衰老。 PML核体是正常细胞中的球形结构，但白血病中的PML／RARα融合蛋白扰乱了它的结构。研究显示，维甲酸和砷剂的治疗可以令PML核体恢复，激活p53并引起细胞衰老。此外，Trp53仅仅在PMLL-RARα融合基因诱导的APL中发挥调定点作用；在一种特殊类型的、由早幼粒细胞白血病锌指（ PLZF ）-RARα融合基因诱导的白血病中， Trp53则不发挥此作用。相关研究（Ablain J，Rice K，Soilihi H，et al．Activation of a promyelocytic leukemia-tumor protein53 axi sunderlies acute promyelocytic leukemiacure ．）发表在2014年第2期《自然：医学》（ Nature Medicine）。这项研究拓展了我们对APL治疗机制的认识，为进一步的治疗方法设计（特别是针对少数难治性病例的治疗）提供了一个新的思路。全文见http：／／www．nature．com／nm／journal／v20／n2／full／nm．3441．html，doi：10．1038／nm．3441。
作者： 刊期： 2014年第02期
《浙江大学学报（医学版）》是由中华人民共和国教育部主管、浙江大学主办、浙江大学出版社出版的综合性医药学学术刊物，登载医学、药学、卫生学、生物医学及相关学科论文，主要读者对象为从事医学、药学、生物学等方面的教学、科研、临床工作人员。目前为双月刊。本刊创办于1958年，是新中国早期创办的期刊之一。本刊将秉承立足医学前沿、弘扬求是学风的宗旨，敏锐捕捉、科学甄别、及时传播医学创新和转化成果，悉心育人、谨慎著文，致力于中国医药学基础研究领域的知识创新和临床诊疗水平的提高。
作者： 刊期： 2014年第02期
嗜铬细胞瘤是肾上腺素能系统的嗜铬组织分泌过多儿茶酚胺的肿瘤。嗜铬细胞瘤可发生在任何年龄，以40～60岁人群多见，在女性中的发病率稍高于男性。近年研究显示VHL基因、1型神经纤维瘤病基因、琥珀酸脱氢酶基因、跨膜蛋白127基因、髓细胞增生原癌基因伙伴蛋白X基因突变与嗜铬细胞瘤发病相关，免疫组织化学法分析发现端粒酶、血管内皮生长因子、环氧化酶-2、肾上腺髓质素、血浆嗜铬蛋白A、信号转导和转录活化因子-3等分子标志物对判断嗜铬细胞瘤良恶性及鉴别其来源和分化也具有重要作用。本文针对近年来嗜铬细胞瘤分子生物学方面的研究进展作一综述。
作者：宫士坤；刘忠 刊期： 2014年第02期
作者： 刊期： 2014年第02期
目的：研究人结核分枝杆菌侵入抗原提呈细胞后诱导树突细胞（ DC ）成熟的机制。方法：选择小鼠DC2．4细胞株为抗原提呈细胞的效应细胞，建立人结核分枝杆菌H37 Rv株的细胞混合培养模型。在不同混合培养时段，采用实时荧光定量PCR检测DC2．4细胞Toll样受体2（TLR2）、TLR4 mRNA的表达量；蛋白质印迹法检测DC的核因子κB （ NF-κB ） p65蛋白的表达；免疫酶联吸附试验定量检测DC产生α肿瘤坏死因子（ TNF-α）的水平；采用间接免疫荧光法和流式细胞术检测DC2．4表面CD80和CD86的表达情况。结果：H37 Rv与DC2．4共培养2 h后开始有细菌侵入；共培养6、8、10、12 h后，细菌侵入率分别为（37．9±5．6）％、（51.2±7．6）％、（57．2±8．9）％、（63.9±12．4）％；TLR2、TLR4 mRNA也开始增量，共培养10 h时达高峰，之后开始下降；共培养6 h时，NF-κB p65的表达量明显增高；TNF-α的表达量在共培养6 h开始上调，8 h时达高峰，随后逐渐下降；共培养6 h时，DC2．4表面CD80、CD86表达量明显增高。结论：人结核分枝杆菌侵入DC2．4时，通过激活TLR2/4-NF-κB 信号通路，诱导 DC 成熟，提高其抗原提呈能力。
作者：徐倩；金梦媚；郑文文；朱丽；徐水凌 刊期： 2014年第02期
成果规划（ OM）是一种参与者导向的用于项目规划、监测和评估的新方法。它以不断学习为基础，以个人、团体和组织机构在行为、关系、活动等方面的改变为指标。 OM实践可以明晰政府、管理者、卫生工作者以及其他相关人员的角色分配，使得有限的社会资源得到充分利用，提高卫生服务效率和质量。本文通过对OM原理与方法的阐述以及OM在卫生资源整合应用中的模拟介绍，展示OM在卫生决策中的应用。
作者：陈冰冰；陈坤 刊期： 2014年第02期
烟酰胺磷酸核糖转移酶（ Nampt ）又称内脏脂肪素（ Visfatin ）和前B细胞克隆增强因子。研究发现，Nampt是催化烟酰胺腺嘌呤二核苷（ NAD ）合成的限速酶，也是一种脂肪因子、细胞因子，参与免疫、代谢和应激等相关生理病理过程；值得关注的是，Nampt参与了一系列与炎症相关的疾病，包括急性肺损伤、动脉粥样硬化、心肌梗死、肥胖、2型糖尿病、关节炎等，因而Nampt 被认为是炎症相关疾病的治疗药物开发新靶点。本文就Nampt在炎症中的作用研究进展作一综述。
作者：黄静；魏尔清；卢韵碧 刊期： 2014年第02期
目的：了解2013年杭州市手足口病（ HFMD）流行特征、不同HFMD病原体与疾病严重程度关系以及人肠道病毒71型（ HEV71）阳性重症HFMD患儿接触人群HEV71携带率。方法：采集2013年杭州市儿童医院收治的HFMD疑似患儿咽拭子或粪便标本，采用实时荧光定量PCR检测HFMD病原体，了解轻症和重症HFMD患儿中HFMD病原体的分布。选取54例HEV71阳性重症HFMD患儿家属中密切接触和一般接触者各1名，检测其粪便标本中的HEV71并随访1个月。分析杭州市儿童医院2011～2013年检出的HFMD病原体构成比差异和优势病原体转变。结果：849例HFMD疑似患儿中确诊641例，男女患儿比例1．4∶1，1～3岁患儿占80．3％。 HFMD患儿标本中24．3％（156/641）检出HEV71，4．7％（30/641）检出A组16型柯萨奇病毒（CVA16），71．0％（455/641）检出其他肠道病毒。75．6％（118/156）HEV71感染病例为重症HFMD，但CVA16和其他HFMD病毒感染病例中仅分别有13．3％（4/30）和6．2％（28/455）为重症HFMD，三者间差异有统计学意义（χ2＝43．28， P ＜0．05）。2011、2012年 HFMD 优势病原体为HEV71，2013年为其他肠道病毒。54例密切接触者和54例一般接触者中分别有9例和10例检出HEV71（ P＞0．05），且均无HFMD临床表现。结论：2013年杭州市HFMD流行季节、好发年龄与性别无明显变化，HEV71感染易引发重症HFMD，但其他肠道病毒已替代HEV71成为HFMD优势病原体。
作者：周俊；吴亦栋；陈晓玲；宋超；严杰 刊期： 2014年第02期
浙江大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：浙江大学
