A20基因抑制人平滑肌细胞损伤的实验研究

朱楚洪；应大君；糜建红；董世武；张伟

关键词：基因, 脂蛋白类, LDL, 脱噬作用, 肌, 平滑

摘要：目的:探讨外源性锌指蛋白家族中A20基因对氧化型低密度脂蛋白诱导平滑肌细胞同型半胱氨酸蛋白酶Caspase 3表达和凋亡的影响,为预防和治疗动脉粥样硬化提供依据.方法:DOTAP脂质体转染pEGFPEHA20-N1于原代培养的平滑肌细胞,经G418筛选,A20表达经免疫荧光鉴定.Tunnel原位末端标记法、原位杂交检测转染前后氧化型低密度脂蛋白诱导平滑肌细胞凋亡情况及Caspase 3的表达情况.结果:A20基因在平滑肌细胞得到有效表达,正常对照组及转染A20基因组人平滑肌细胞凋亡为(3±1)%,氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlow-densitylipoprotein,OxLDL)作用后对照组与转染A20基因组凋亡分别为(16±2)%,(5±1)%,两者相差显著(P＜0.05).A20基因能显著抑制OXLDL诱导的平滑肌细胞Caspase 3的表达.结论:A20基因在动脉粥样硬化后期能阻止平滑肌细胞凋亡,对防止粥样癍块破裂的治疗中可能有一定作用.

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中药内服外用缓解腰椎间盘突出症患者腰腿痛

采用中医内服配合中药温痹散场效应仪热敷治疗腰椎间盘突出症 85例,结果治愈 43例,好转 38例,显示本疗法对症状缓解与功能康复有良好作用.

作者：包力；陈志婵；孔令新；徐新玉；刘跃民；卓鹰刊期： 2003年第29期
震刺疗法改善腰椎间盘突出症患者临床症状

近年来采用青龙摆尾针刺法配合牵引治疗腰椎间盘突出症 84例 ,经两个疗程治疗各项功能恢复正常 68例.

作者：张连媚刊期： 2003年第29期
直肠癌术后患者生活质量的初步评价

直肠癌疾病本身及手术引起的生理、病理变化,必然导致患者的躯体功能、生理功能、精神心理状态的改变,从而影响患者的生活质量,通过设计的调查问卷对生活质量进行评估,可以全面客观的评价疾病及治疗对患者造成的身体、心理及社会生活等方面的影响.

作者：赵海；张亘刊期： 2003年第29期
垂体腺瘤患者微血管密度检测与腺瘤侵袭性评价

目的:蛋白在垂体腺瘤中表达,探讨抗白细胞分化抗原(Cluster of differ-entiation)CD34单抗标记的微血管密度(Mi-crovascular Density,MVD)与垂体腺瘤分级的关系及其临床意义,对患者选择更有效和安全有利于患者社会生活的治疗手段提供理论依据.方法:采用免疫组化SP法对1998-05/2001-07 4l例垂体腺瘤组织及5例正常垂体组织中CD34的表达进行检测.结果:41例垂体腺瘤组织中平均MVD为20.9±8.0,5例正常垂体组织的平均MVD为12.2±2.4,二者差异具有显著性意义(t=2.4.P＜0.05).其中平均MVD(个/高倍视野)值在23例侵蚀型垂体腺瘤组(Ⅲ～V级)为27.0±4.8,在18例封闭型垂体组织(Ⅰ～Ⅱ级)为13.2±2.6,侵蚀型垂体腺瘤组的平均MVD与封闭型垂体腺瘤组和正常垂体组织组之间的差异均有显著性(t=10.9,P＜0.01).而封闭型垂体腺瘤组和正常垂体组织组平均MVD的之间差异无显著性意义(P＞0.05).结论:抗CD34单抗标记的肿瘤微血管密度与垂体腺瘤的临床分级密切相关,可反映垂体腺瘤侵袭性行为的使用指标,以指导临床医生选择更为切实、安全及对患者生理、心理、精神和主观感受都有益处的治疗方案.

作者：杨继乐；田刚刊期： 2003年第29期
河图洛书推足面筋手法治疗距小腿关节损伤

据有关学者研究表明运动性损伤部位以踝、足、膝受伤率高,分别为 23.0%, 19.6%, 16%,其次是手腕和肩部.这表明运动创伤主要分布在上、下肢的关节部位,特别是踝部创伤率高.对距小腿关节 (踝关节 )运动损伤采用常规性和传统的中医手法,如冷敷、热敷、针灸、拔罐、推拿按摩等,一般需 2～ 3周方可恢复(但个别仍不能痊愈).采用河图洛书推足面筋手法,经过两年多的临床实践与研究,尤其对体育专业师生距小腿关节运动损伤,进行了跟踪治疗观察,作了详细记录,对收治的 38例距小腿关节扭伤者,均取得良好疗效.

作者：史作阳；王俊法刊期： 2003年第29期
性腺切除对家兔骨代谢及骨量的影响

目的:研究切除家兔卵巢、睾丸后骨丢失情况.方法:选择48只家兔,20只切除卵巢,20只切除睾丸,对照组各4只家兔.手术后4,7和10周分别测定血清中钙、磷、碱性磷酸酶、肌苷、骨钙素含量和尿内羟脯氨酸,10周后处死家兔,测定胫骨骨矿含量,骨沉积速度、骨皮质宽度和类骨质宽度.结果:卵巢切除组(OVX)与睾丸切除组(ORX)比较,血清肌苷(μmoL/L)在4周时分别为82±4,66±6;7周时分别为78±4,40±3.差异有显著性意义(P＜0.01).而尿内羟脯氨酸和骨钙素含量OVX比ORX降低.OVX骨沉积速度、类骨质宽度大于ORX,两组之间差异有显著性意义.结论:骨质丢失与雌激素之间有密切关系;睾丸切除后对骨质影响时间较短,7周后对骨质影响逐渐消失.

作者：夏亚一；赵慧；孙正义刊期： 2003年第29期
骨骼肌卫星细胞的体外培养与生物学特性

目的:建立理想的骨骼肌卫星细胞体外培养方法,探讨其生物学特性,以达到应用于组织工程和基因治疗的目的.方法:采用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶二步消化法获取大鼠骨骼肌卫星细胞,进行体外原代和传代培养.观察细胞的形态,通过生长曲线、细胞融合率研究骨骼肌卫星细胞的增殖与分化能力,利用免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定.结果:二步消化法适用于骨骼肌卫星细胞的获取.在生长培养基作用下,细胞增殖旺盛;在分化培养基条件下,细胞分化良好,可融合成肌管.α-sarcometric肌动蛋白和肌球蛋白细胞免疫化学染色,骨骼肌卫星细胞弱阳性,肌管强阳性.结论:体外培养的骨骼肌卫星细胞具有良好的增殖与分化能力,适用于组织工程和基因治疗.

作者：魏宽海；裴国献；金丹刊期： 2003年第29期
伤口液对电离辐射复合创伤大鼠成纤维细胞迁移和增殖作用的影响

目的:观察伤口液刺激成纤维细胞(FB)活性的变化,探讨电离辐射复合创伤的伤口修复启动受抑的机制.方法:大鼠随机数字表法分为单创组、电离辐射复合创伤组,分别于伤后3,6,12,24,48 h取伤口液,观察伤口液刺激培养的FB增殖、诱导FB迁移及促进培养FB划痕伤口闭合的活性变化.结果:伤口液刺激FB增殖和诱导FB迁移的活性在伤后3～48 h逐渐升高,但24 h以前复合伤组伤口液的这些作用强于单创组,伤后48 h明显低于单创组,促进培养融合的FB伤口闭合的作用也显著低于单创组.结论:生长因子过高、过低均不利于激活伤口周围静止的成纤维细胞.电离辐射复合创伤伤口愈合起始阶段就存在着生长因子分泌紊乱,从而对修复的启动和发展不利,终影响伤口修复.

作者：陈晓红；孙仁山；程天民；冉新泽刊期： 2003年第29期
根据骨折患者不同分期实施辨证施护的体会

对骨折患者采取不同分期实施辨证施护、功能指导,不仅可减少并发症,而且提高了患者对护理的满意度.

作者：施金玉刊期： 2003年第29期
预构血管化骨与非血管化骨游离移植的比较实验研究

目的:建立预构血管化骨游离移植的动物模型,探讨血管束植入预构血管化骨的过程及预构血管化骨游离移植后的骨生长及代谢变化.方法:通过将兔腹壁浅动静脉束植入股骨干中,预构血管化骨,然后用单光子发射计算机断层显像(SPECT)检测,酶组织化学技术及组织学观察等技术对预构血管化骨与非血管化骨游离移植术后骨组织生长,代谢及血供等情况,进行了比较实验研究.结果:SPECT检测后,预构血管化骨可以在移植后继续保持移植骨的血供,维持骨的正常代谢.骨细胞的琥珀酸脱氢酶(SDH)研究显示:早期观察骨细胞的SDH的变化可了解移植骨组织的成活与生长情况.而移植骨组织学观察表明:血管化骨移植术后骨组织连续保持正常结构和活性,而非血管化骨组织移植后则出现吸收,坏死等改变.结论:预构血管化骨可以作为血管化骨游离移植,在游离移植后,提供血的血供,保持骨的正常结构和继续生长,可用作骨缺损的功能性修复.

作者：谭学新；宫相芹；徐中飞；邓春富；王绪凯；王玉新刊期： 2003年第29期
碱性成纤维细胞生长因子对脊髓损伤后bcl-2及bax基因表达的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脊髓损伤后bcl-2和bax基因表达的影响.方法:利用Allen WD法以25 gcf致伤SD大鼠脊髓制作损伤模型,经蛛网膜下腔导管于术后即刻,0.5,1,2,3,4,6,12,24,48 h导管注入bFGF20uL(含bFGF 200 U);对照组相同时间点注入等量生理盐水作对照.术后2,6,12,24,48 h取损伤脊髓组织,采用免疫组化和原位杂交方法分别检测Bcl-2、Bax蛋白和bcl-2 mRNA基因的表达.结果:脊髓损伤后应用bFGF显著促进bcl-2基因的表达,2,6,12,24,48 hBcl-2平均光密度值分别为0.165±0.020,0.254±0.081,0.312±0.017,0.415±0.021,0.304±0.031,(P＜0.01,t=2.729～9.279),Bax平均光密度值分别为0.034±0.021,0.184±0.014,0.204±0.014,0 216±0.027,0.180±0.013(P＜0.01,t=4.601～6.376),提高Bcl-2蛋白的含量,降低了Bax蛋白的水平,每组数据差异具有统计学意义.结论:bFGF通过促进bcl-2基因的表达、抑制Bax蛋白的表达抑制脊髓损伤后神经细胞的凋亡,从而保护脊髓组织,这可能是bFGF对脊髓损伤具有保护作用的机制之一.

作者：刘文革；王锋；林佳俊刊期： 2003年第29期
复合人工皮肤修复猪全层皮肤缺损

目的:探讨复合人工皮肤在修复中国小型猪全层皮肤缺损中的作用.方法:16头中国实验用小型猪于背部正中分别切除全层皮肤至深筋膜的3个创面,3个创面以数字表法分成复合皮移植组(实验组),刃厚皮移植组(对照组1)及全厚皮移植组(对照组2),术后定期留取创面组织进行组织学检测.结果:人工复合皮肤具有表皮,真皮双层结构,在愈合过程中表皮细胞逐步增殖、分化、发育形成基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层.结论:表皮细胞悬液与脱细胞真皮基质重组的复合皮由于含有真皮与表皮双层结构,其组织学形态与超微结构与天然皮肤极为相似;通过表皮细胞培养可扩大皮源,为大面积深度烧伤患者提供了皮源.利用组织工程技术构建人工复合皮肤,可用于皮肤缺损者的治疗,解决了自体供皮不足.

作者：徐刚；王永满；孙拥新；冯玉柱；高潮；李春梅；姜海刊期： 2003年第29期
中药正骨通痹丹治疗骨质疏松症的疗效观察

正骨通痹丹为作者家传验方,经临床实践证可明治疗骨坏死,骨质疏松等病症.以口服正骨通痹丹对骨质疏松症( PMOP)患者进行 1～ 3个疗程的治疗,并进行药效对比观察.

作者：周成刚；乔溪梅刊期： 2003年第29期
两种生物材料修补大鼠腹壁缺损的组织学反应

目的:观察聚丙烯(Polypfopylene,PP)和复合材料(Polypropylene+ex-panded Polytetrafluoroethylene,PP+ePTFE)修补大鼠腹壁缺损的组织学反应,客观地评价两种材料的特点,以便为临床选用材料提供一定的理论依据.方法:Wistar大鼠分为PP全层修补(PP-T)组、PP保留腹膜(PP-PR)组和PP+ePTFE全层修补(PP+ePTFE-T)组.切除1.5 cm(2.0 cm的前腹壁,分别以相同面积的两种补片修补缺损,于术后14,30,60和120 d进行腹腔内粘连评分及组织学检查.结果:PP+ePTFE组动物术后各期腹腔粘连明显轻于PP+T组(分别P＜0 05).PP+PR组动物腹腔无粘连.术后14 d,两种材料周围均以炎性反应为主,但PP+ePTFE组腹腔面反应很轻.30 d后,在PP和PP+ePTFE非腹腔面周围成纤维细胞和胶原逐渐增加.PP+ePTFE材料的腹腔面逐渐形成一间皮层.结论:PP材料与组织掺和好,但与腹腔粘连重.PP+ePTFE材料既有组织掺和好,又具有抗腹腔粘连作用.腹膜是防止PP材料与腹腔脏器粘连的好屏障.

作者：李基业；邓群；黎沾良刊期： 2003年第29期
软骨终板细胞生物学特性及体外退行性变的机制研究

目的:通过建立猪腰椎间盘软骨终板细胞的培养模型,观察其演变,探讨软骨终板细胞的生物学行为及其影响因素.方法:取长枫杂交猪腰椎间盘软骨终板细胞,于200 mL/L胎牛血清的杜尔伯克改良基础培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium,DMEM)中培养,建立体外软骨终板细胞培养模型.以光镜及苏木精-伊红染色观察其生物学表现;以甲苯胺蓝、番红O、Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色对软骨终板细胞进行鉴定;观察冻存后软骨终板细胞的生物学特性.结果:原代细胞生物学性状接近体内细胞,多次传代后细胞呈现衰老现象.经染色证实此细胞具有Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达.冻存细胞复苏后,细胞形态及其分化、增殖能力与冻存前基本相同.结论:猪腰椎软骨终板细胞的体外培养模型的建立,可为体外研究软骨终板的退行性变机制提供实验基础.

作者：刘斌；瞿东滨；金大地；王岩松刊期： 2003年第29期
中药内服外用治疗下肢静脉曲张

近几年来,采用物理疗法与中医康复结合治疗下肢静脉曲张256例,效果显著.

作者：王新红；赵洪夫刊期： 2003年第29期
推拿及运动疗法治疗慢性腰肌劳损129例

针对慢性腰肌劳损具有迁延不愈,容易复发或急性发作,难以彻底治愈等特点,采用传统推拿及运动疗法治疗129例慢性腰肌劳损患者.推拿手法和运动疗法同时进行,有效解除了患者的症状和体征,缓解痉挛、松解粘连.

作者：宁俊忠；廖军锋；范秀华；陈耀平刊期： 2003年第29期
腰神经根损伤后神经细胞粘附分子(N-CAM)在神经肌肉接头部的表达

目的:研究大鼠腰神经根损伤后,神经细胞黏附分子(N-CAM)在神经肌肉接头部的表达.方法:采用免疫组织化学方法和激光共聚焦显微扫描(confocal iaserscaring microscopy)技术,观察了大鼠胚胎期,出生后14 d,成年期以及L5神经根受压后10,20,和30 d,大鼠比且鱼肌神经肌肉接头部N-CAM的分布变化.结果:大鼠胚胎期,肌管的表面和神经肌肉接头部N-CAM呈强烈着染,在发育过程中其浓度逐渐减退,至成年肌肉时几乎消失.而当肌肉失神经支配后可导致N-CAM重新再现.结论:N-CAM在肌肉中的表达是通过神经支配状况调节的.

作者：周重建；侯宝兴；王拥军；刘梅；施杞刊期： 2003年第29期
胎儿骨髓间质干细胞的获得和诱导成软骨培养

目的:研究胎儿骨髓间质干细胞(MSCs)体外分离、培养、扩增并向软骨细胞表型转化,探究新的组织工程化软骨种子细胞的来源.方法:从引产胎儿(家属自愿捐献)髂骨获得骨髓,体外培养从骨髓中获得的MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面抗原.将传代后的MSCs在诱导培养液中培养,检测软骨细胞的特异性标志物.结果:从胎儿骨髓得到的细胞表达MSCs的表面标志物,并可在体外培养、扩增,诱导后细胞变为多伪足的多边形细胞,扫描电镜见细胞表面有丰富的交联,透射电镜观察见大量粗面内质网、高尔基体、线粒体.甲苯胺蓝染色见细胞内有异染性基质(免疫组化和RT-PCR检测COLⅡ表达阳性.结论:胎儿MSCs可作为软骨组织工程的较理想的种子细胞.

作者：庞永刚；崔鹏程；陈文弦刊期： 2003年第29期
截肢患者的康复评定与治疗

目的 :对 1例截肢患者进行病例讨论,以明确康复评定、康复计划及康复目标. 方法 :康复干预前后进行康复团队讨论. 结果 :患者为经股骨( transfemoral, TF)下位截肢,处于假肢前期,存在髋关节挛缩、肌肉萎缩和幻肢痛.经 2周治疗后,患者的运动功能和实用功能均改善.已佩带长腿假肢.讨论内容涵盖了一般评定、截肢特征、康复计划、具体方法和目标等. 结论 :通过团队合作,可以完善截肢的康复任务.

作者：李放刊期： 2003年第29期