学术投稿

DNA指纹图技术分析微生物肥料菌种组成稳定性

王凌华;赵勇;李武;赵立平

关键词:微生物肥料, ERIC-PCR, PCR-TGGE, DNA指纹图, 质量控制
摘要:目的分析2种市售微生物肥料在不同生产批次中微生物菌种组成的稳定性.方法利用ERIC-PCR基因组DNA指纹图技术和16S rDNA V3扩增一温度梯度凝胶电泳(PCR-TGGE)指纹图技术.结果这2种微生物肥料在同一个生产批次不同包装之间的2种DNA指纹图谱相似性较高,分别在78%~95%和96%~100%,表明同一个批次内的菌种组成比较一致.但其在不同的生产批次之间菌种组成差异存在显著性,反映在2种DNA指纹图谱上,不同生产批次样品间ERIC-PCR指纹图相似性低只有10%,PCR-TGGE指纹图相似性低为46%.结论通过ERIC-PCR和PCR-TGGE DNA指纹图技术可以对微生物肥料中菌种组成的稳定性进行快速、准确的分析,如何保持菌种组成在批次之间的稳定一致,是复合菌种微生物肥料质量控制中面临的难题.
中国微生态学杂志相关文献
  • STD门诊生殖器溃疡性疾病的病原学研究

    目的了解生殖器溃疡性疾病(GUD)的发病率、病因及其与HIV感染的关系.方法用暗视野显微镜检查(D-F)、梅毒血清学试验(STS)、酶免疫法(EIA)检测HSV抗原和HD培养等方法检测322例生殖器溃疡标本中TP、HSV和HD,并进行血清HIV抗体检测.结果在8 999例STD门诊患者中,GUD患者322例(3.58%,322/8 999);在322例GUD患者中,梅毒85例(26.4%,85/322),生殖器疱疹74例(26.09%,84/322),软下疳0例(0,0/322),病因不明的GUD为153例(47.52%,153/322);其中GUD患者的HIV感染率为1.86%(6/322),梅毒患者的HIV感染率为4.70%(4/85),生殖器疱疹患者的HIV感染率为1.19%(1/84),其他GUD的HIV感染率为0.65%(1/153).比较三者的HIV感染率发现,梅毒的HIV感染率高于生殖器疱疹和其他GUD患者(4.70%vs1.19%,χ2=0.24,P>0.05,OR=3.04,95%CI=0.31-29.93;4.70% vs 0.65%,χ2=1.29,P>0.05,OR=5.63,95%CI=0.58-55.06),但两者差异无显著性;GH患者的HIV感染率与其他GUD患者的HIV感染率相比,差异无显著性(1.19% vs 0.65%,χ2=0.00,P>0.05,OR=1.85,95% CI=0.11-30.00)结论在性病门诊中,GUD的主要病因为梅毒和生殖器疱疹,且存在混合性感染;梅毒与HIV的感染有一定关系.

    作者:朱慧兰;苏向阳;赖维;叶兴东;张锡宝 刊期: 2005年第05期

  • 定君生治疗老年性阴道炎的疗效观察

    目的观察定君生治疗老年性阴道炎的临床疗效.方法对224例老年性阴道炎患者随机分组,分别予以定君生和甲硝唑局部用药,进行疗效比较.结果第1疗程结束,定君生组痊愈率为59.35%,总有效率为90.24%;甲硝唑组痊愈率为59.41%,总有效率为87.13%.第2、3疗程结束,定君生组痊愈率为78.00%、90.91%,总有效率为94.00%、90.91%;甲硝唑组痊愈率为46.34%、36.36%,总有效率为70.73%、45.45%.2组疗效差异有显著性(P<0.05).结论定君生对老年性阴道炎疗效显著,长期应用优于甲硝唑.

    作者:全芸;叶静婉 刊期: 2005年第05期

  • 羧甲基壳聚糖对5株口腔颌面部感染细菌的抑菌性能的评价

    目的研究羧甲基壳聚糖对5株口腔颌面部感染细菌的抑菌性能,为在临床应用提供相关资料.方法采用液体梯度稀释法分别测定羧甲基壳聚糖对牙龈卟啉菌、中间普氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的低抑菌浓度(MIC).结果羧甲基壳聚糖对5株菌的MIC分别为:20、5、2.5、5、10 g/L.结论羧甲基壳聚糖对口腔颌面部感染重要相关细菌具有抑菌作用.

    作者:张永军;高继红;薛毅;苏金波 刊期: 2005年第05期

  • 葡萄球菌临床分离株对抗生素的药物敏感性

    目的了解天津8家三级甲等医院葡萄球菌临床分离株对常用抗生素的耐药情况和趋势.方法收集天津市8所医院葡萄球菌临床株,用纸片扩散法进行药物敏感性测定.结果2001~2002年分离的葡萄球菌临床株490株.金黄色葡萄球菌319株,MRSA占51.7%;凝固酶阴性葡萄球菌171株,MRCNS占65.6%.其中一医院2002~2003年分离的葡萄球菌临床株共103株.金黄色葡萄球菌81株,MRSA占%;凝固酶阴性葡萄球菌22株,MRCNS占72.84%;未发现万古霉素耐药株.结论葡萄球菌的标本来源主要是痰培养和尿培养.MRSA的分离率与我国其他地区的数据相似.万古霉素在该地区仍然是有效的治疗葡萄球菌感染的抗菌药物.

    作者:吕星;宋诗铎;魏殿军;郭文学 刊期: 2005年第05期

  • 联合用药治疗细菌性阴道病

    根据细菌性阴道病的特点,可以选择用微生物类药品联合硝基咪唑类药品治疗细菌性阴道病(BV),主要是为了寻找一种疗效好且不易复发的方法.药敏试验发现,定君生(乳杆菌活菌胶囊,一种微生物类药)对甲硝唑(硝基咪唑类药)极不敏感,两者可以联合用药.近一年来,通过对门诊50例细菌性阴道病患者的联合用药治疗,取得了满意的效果,可以达到这一要求.

    作者:祝慧娟 刊期: 2005年第05期

  • 正常大鼠肠道菌群及细菌易位的变化

    用SD大鼠检测正常肠道肠球菌、肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌和类杆菌的细菌易位的变化,采用多指标测试的实验方法以进行分析.通过上述指标检测,为大鼠有关肠道菌群和细菌易位提供一些参考数据.

    作者:王冬梅;于德钦;田余祥;陈海龙 刊期: 2005年第05期

  • 双歧杆菌治疗恢复期急性重症胰腺炎临床观察

    目的观察双歧杆菌治疗恢复期急性重症胰腺炎(SAP)临床疗效及肠道菌群变化.方法将恢复期SAP病例随机分为对照组和治疗组,对照组给予常规治疗;而治疗组在给予常规治疗基础上加服回春生胶囊,疗程4周.均在治疗前后记录临床疗效,包括生化指标及肠道菌群变化.结果治疗组与对照组治疗后各项指标时间比较差异均有显著性(P<0.05,P<0.01);2组肠道菌群变化情况为对照组治疗前后肠道菌群未发生明显变化(P>0.05),而治疗组治疗后大肠埃希菌明显下降,双歧杆菌显著上升(P<0.01).结论双歧杆菌治疗恢复期SAP疗效明显,值得临床应用.

    作者:郭公新;杨光耀;彭伟;李镇杰;韩磊;卓越;颜玉 刊期: 2005年第05期

  • 无偿献血者ALT异常与戊型肝炎病毒感染的关系

    目的了解无偿献血者ALT异常(按血站标准,以大于25赖氏单位为异常)与戊型肝炎病毒感染的关系.方法对萧山地区2004年8~11月无偿献血者中,ALT异常的102例血清标本,进行抗-HEV IgM抗体检测;同时对照检测450份ALT正常的无偿献血者血清标本.结果在102例ALT异常血清中,抗-HEV IgM抗体阳性为6例,阳性率为5.88%,在450份ALT正常血清中,抗-HEV IgM抗体阳性为5例,阳性率为1.11%.结论在无偿献血者ALT异常血清中,抗-HEV IgM抗体检出比例较高.

    作者:施建妙;杨国春 刊期: 2005年第05期

  • p53、p16和细菌L型DNA在卵巢肿瘤中的表达及意义

    目的探讨p53、p16抑癌基因和细菌L型DNA在卵巢肿瘤中的表达及临床意义.方法用原位核酸杂交方法检测了101例卵巢肿瘤中的p53、p16抑癌基因以及L型菌DNA的阳性信号.结果恶性肿瘤中p53原位核酸杂交mRNA的阳性信号,恶性肿瘤明显高于良性肿瘤(P<0.01),p16原位核酸杂交mRNA的阳性信号,恶性肿瘤则低于良性肿瘤(P<0.01),2种抑癌基因的指标与肿瘤的病理分级及患者预后有明显相关性(P<0.05).而细菌L型的阳性信号与病理分级、有腹水比无腹水者、腹腔淋巴结有转移比无转移者差异有显著性(P<0.05).结论p53 mRNA在卵巢肿瘤中有不同程度异常表达,p16 mRNA表达与肿瘤细胞分化呈负相关,2种抑癌基因均可作为判断卵巢肿瘤生物学行为及患者预后参考指标.L型感染有可能成为诱发肿瘤因素之一,它们与抑癌基因可能有协同致瘤作用.研究细菌L型感染与肿瘤的关系,具有重要的临床应用价值.

    作者:汪万英;赵芳芳;何杰;俞岚;姚敏 刊期: 2005年第05期

  • 肺脓疡患者血培养中检出脑膜炎奈瑟菌

    脑膜炎奈瑟菌又称脑膜炎球菌(Meningococcus),是流行性脑脊髓膜炎的病原菌.人类是脑膜炎奈瑟菌的唯一宿主.2004年10月从肺脓疡患者血培养中检出脑膜炎奈瑟菌1例,现将结果报道如下.

    作者:张国荣;周午琼 刊期: 2005年第05期

  • 妈咪爱治疗小儿急性腹泻病的疗效观察

    儿童消化系统发育尚未成熟,机体防御功能差,易患各种类型的腹泻病,严重影响了小儿的健康和生长发育.据世界卫生组织估计每年有上千万儿童死与急性腹泻.随着抗生素的广泛应用而造成耐药菌株的逐渐增加,常出现菌群失调现象,同时其副作用也给使用者带来一定的不利影响,因此抗生素的应用受到限制.近年来,笔者采用了微生态调节剂妈咪爱治疗小儿急性腹泻病,疗效显著,现报告如下.

    作者:侍小萍 刊期: 2005年第05期

  • 胸腹水和脓汁感染菌细菌谱及耐药性分析

    目的了解胸腹水和脓汁感染病原菌种类及其对抗菌药物的耐药情况.方法对玉溪市人民医院1 999年1月~2004年9月送检的胸腹水和脓汁标本采用全自动血培养仪进行细菌培养,并对分离菌用微生物分析仪进行鉴定及药敏试验.结果选用需氧和(或)厌氧培养对胸腹水和脓汁的阳性检出率有不同程度的影响,在732份胸腹水和脓汁感染标本中分离到细菌者244份,共计254株,分属于26个菌属71种,阳性检出率为33.33%(胸水7.86%、腹水41.4%和脓汁59.9%),G+菌占52.36%,G-菌占42.13%,真菌占5.51%,主要以葡萄球菌(29.13%)、大肠埃希菌(22.83%)、链球菌(12.99%)、肠球菌(5.51%)和念珠菌(5.51%)为主.耐苯唑西林的葡萄球菌耐药率明显高于对苯唑西林敏感的菌;产ESBLs的大肠埃希菌耐药率明显高于不产酶的细菌,它们对氨苄西林、头孢噻吩、庆大霉素、奈啶酸、培氟沙星、替卡西林和复方新诺敏的耐药率均在53%以上,亚安培南的敏感性为100%.结论胸腹水和脓汁中可分离培养出多种细菌和真菌,选择培养方法对提高阳性率至关重要,注意监测胸腹水和脓汁中菌株的耐药性,临床医生在治疗时应根据细菌检验报告合理选择抗菌药物,避免盲目经验用药,减少或延缓细菌耐药的产生.

    作者:储从家;孔繁林;吴惠玲;向秀华;罗次节;管新龙 刊期: 2005年第05期

  • 胡桃楸提取物对白色念珠菌生长的抑制作用

    目的探讨胡桃楸提取物对白色念珠菌生长的抑制作用.方法以NCCLS方案检测胡桃楸提取物和伊曲康唑(ICZ)、氟康唑(FCZ)、两性霉索B(AMB)和5-氟胞嘧啶(5-FC)对133株白色念珠菌体外生长抑制作用.结果标准菌株JC1A的MIC结果表明胡桃楸提取物对白色念珠菌的抗菌作用相当于FCZ,略低于ICZ、AMB和5-FC;临床分离株对ICZ和FCZ的耐药率很高,对胡桃楸提取物的耐药率较低.结论胡桃楸提取物对白色念珠菌生长有强力抑制作用.

    作者:闻平;陈蕾 刊期: 2005年第05期

  • 金荞麦抗菌活性研究

    目的探讨金荞麦乙醇提取物乙酸乙酯的萃取部分(待测样品)的抑菌作用,并对此部分进行分离纯化以研究其抗菌活性的物质基础.方法与复方板蓝根颗粒做对比,采用平皿稀释法及动物实验对待测样品进行体外及体内实验,测定其对各试验菌的小抑菌浓度(MIC)和对肺炎链球菌感染小鼠的体内保护作用.并采用多种色谱方法对此部分进行分离纯化.结果体外抑菌试验表明,待测样品对乙型溶血性链球菌、肺炎球菌有明显的抑制作用;体内抑菌实验表明此部分对肺炎球菌菌株所致的小鼠感染有保护作用;从该活性部分分离得到8个化合物为:反式对羟基桂皮酸甲酯(trans-p-hydroxy cinnamic methyl ester,Ⅰ),3,4-二羟基苯甲酰胺(3,4-dihydroxy benzamide,Ⅱ),原儿茶酸(protocatechuic acid,Ⅲ),原儿茶酸甲酯(protocatechuic acid methyl ester,Ⅳ),木犀草素(luteolin,V),槲皮素(quercitrin,Ⅵ),芸香苷(rutm,Ⅶ),(一)-表儿茶素[(一)-epicatechin,Ⅷ].结论待测样品在体内及体外均有较强的抑菌活性,而具有抗菌作用的物质基础为酚酸类及黄酮类化合物.

    作者:王立波;邵萌;高慧媛;吴斌;吴立军 刊期: 2005年第05期

  • 熟肉制品微生物污染情况分析

    随着生活节奏逐步加快,人们越来越多的选用即时食品,应运而生的熟食种类也越来越多.在卫生部统筹安排下,为了解辽宁省熟肉制品卫生现状,笔者于2004年对熟肉制品的微生物污染情况进行了调查分析.

    作者:马景宏;王为黎;赵虹 刊期: 2005年第05期

  • DNA指纹图技术分析微生物肥料菌种组成稳定性

    目的分析2种市售微生物肥料在不同生产批次中微生物菌种组成的稳定性.方法利用ERIC-PCR基因组DNA指纹图技术和16S rDNA V3扩增一温度梯度凝胶电泳(PCR-TGGE)指纹图技术.结果这2种微生物肥料在同一个生产批次不同包装之间的2种DNA指纹图谱相似性较高,分别在78%~95%和96%~100%,表明同一个批次内的菌种组成比较一致.但其在不同的生产批次之间菌种组成差异存在显著性,反映在2种DNA指纹图谱上,不同生产批次样品间ERIC-PCR指纹图相似性低只有10%,PCR-TGGE指纹图相似性低为46%.结论通过ERIC-PCR和PCR-TGGE DNA指纹图技术可以对微生物肥料中菌种组成的稳定性进行快速、准确的分析,如何保持菌种组成在批次之间的稳定一致,是复合菌种微生物肥料质量控制中面临的难题.

    作者:王凌华;赵勇;李武;赵立平 刊期: 2005年第05期

  • 小剂量克拉霉素三联疗法短疗程治疗儿童消化性溃疡幽门螺杆菌感染的临床研究

    目的研究小剂量克拉霉素三联短程疗法对儿童消化性溃疡幽门螺杆菌(Hp)感染的临床疗效、根除率及不良反应.方法经胃镜检查确诊为消化性溃疡及幽门螺杆菌脲酶快速诊断试验(HPUT)为Hp感染的患儿75例,男57例、女18例.分3组进行对比性研究.A组为大剂量短疗程组、B组为小剂量短疗程组、C组为小剂量长疗程组.小剂量克拉霉素为15 mg/(kg·d),大剂量为30mg/(kg·d),分2次口服.短疗程为1周,长疗程为2周.结果临床疗效A组有效率为96.6%,B组有效率为90.9%,C组有效率为91.6%,3组间差异无显著性(x2=0.75,P>0.05).Hp根除率A组为93.1%、B组为90.9%、C组为95.8%,3组间差异无显著性(χ2=0.75,P>0.05).不良反应发生率A组为27.6%、B组为4.6%、C组为29.2%.B组与A组之间(x2=4.57,P<0.05)、B组与C组之间(χ2=4.84,P<0.05)差异均有显著性.结论小剂量克拉霉素、奥美拉唑和阿莫西林三联1周疗法是根除儿童消化性溃疡Hp感染的理想方案,其根除率高、副作用少、耐受性好、疗程短、顺应性好.

    作者:付惠玲;万冬;苗运洲 刊期: 2005年第05期

  • 槐花与伪品茉莉花的鉴别及对正常菌群影响

    槐花来源于豆科植物槐树sophora japomcal(L)的干燥花.槐花中主要有芸香甙、槲皮素、槐花米甲素(黄酮类)和缩合鞣质等药效成分.缩合鞣质,一般由儿茶素组成,结构复杂,不能水解.缩合鞣质和黄酮是茶多酚的主要成分对普通变形杆菌、金葡葡球菌、表皮葡萄球菌、变形链球菌、肉毒杆菌、霍乱弧菌、黄色弧菌、副溶血弧菌、嗜水气单胞嗜水亚种、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、铜绿假单胞菌、福氏痢疾杆菌、宋氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、黄色溶血性葡萄球菌、金黄色链球菌及真菌具有很强的抑制作用.

    作者:夏稷子 刊期: 2005年第05期

  • 生态制剂对蛋鸡产蛋性能的影响

    将两歧双歧杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分别制成每克含活菌1亿的微囊,等量混合而成生态制剂,按0.125%添加在蛋鸡基础饲料中,饲喂蛋鸡,同时设对照组,观察蛋鸡产蛋性能的变化.经过1个月的实验,结果表明:该生态制剂对产蛋高峰期,可提高产蛋率10.08%、降低死亡率46.26%、提高饲料利用率32.16%;而对产蛋后期,提高产蛋率仅3.46%、降低死亡率58.50%、饲料利用率差异无显著性(P>0.01).

    作者:赖国旗;张德纯;韦克 刊期: 2005年第05期

  • 金双歧治疗肠易激综合征患者疗效观察

    目的探讨金双歧活菌制剂治疗肠易激综合征(IBS)患者的临床疗效和对菌群失调的调整作用.方法64例患者随机分成2组.治疗组35例,口服金双歧活菌制剂(每粒含活菌0.5亿),4片/次,2次/d,连服1个月;对照组29例,口服安慰剂胶囊,疗程同治疗组.评价标准系采用积分法.结果治疗组治疗效果与对照组相比差异有显著性(P<0.05).患者治疗后肠道中双歧杆菌、类杆菌和肠杆菌数量明显上升.结论金双歧活菌制剂能纠正肠道菌群失调,对IBS患者有良好的治疗作用.

    作者:李民;李玉明 刊期: 2005年第05期

中国微生态学杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 大连医科大学