赵勇；张远强；张金山；刘新平；许若军
目的对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾淋巴细胞进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据.方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD20+B细胞的分布进行观察,并进行图像分析.结果SARS患者脾内的脾小体及动脉周围淋巴鞘(白髓)均遭到严重损害.动脉周围淋巴鞘的数量减少90.39%;脾小体减少80%左右,有的甚至完全消失;脾红髓广泛出血坏死.红髓内的CD3+T细胞平均数较正常减少71.76%,有的甚至完全消失,CD4+T细胞和CD8+T细胞分别平均减少86%和84%.CD20+B细胞减少80%以上. 结论定量分析显示,SARS死亡患者脾中T细胞和B细胞普遍严重减少,提示SARS患者免疫系统遭到严重破坏,并可能是疾病的原发性损伤.
作者：战军；唐军民；唐岩；梅芳；王国涛；顾江 刊期： 2005年第04期
目的了解控制性超排卵(COH)对小鼠卵母细胞上表达水通道蛋白(AQP3)的影响.方法模拟人类超排卵周期,对小鼠进行超促排卵,按随机表顺序分为COH组和对照组,每组各10只ICR小鼠,用半定量实时荧光PCR方法检测小鼠MⅡ卵母细胞上AQP3 mRNA的表达.结果卵母细胞膨胀实验显示,ICR小鼠卵母细胞上有AQP3的表达,用半定量实时荧光PCR方法检测时以β-肌动蛋白(β-actin)作为内参照,COH组和对照组ACT值分别是0.65±0.23和2.49±0.05,△△CT值是1.84±0.18,两组比较P＜0.001,具有统计学意义.结论控制性超排卵(COH)明显降低了ICR小鼠卵母细胞上AQP3 mRNA的表达,这也可能是导致卵母细胞低冻融复苏率低的原因之一.
作者：孟庆霞；徐晨明；蔡婕；黄荷凤 刊期： 2005年第04期
目的探讨实验性蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛时,内皮素受体-A(ETA)基因在大鼠脑基底动脉的表达变化及在诱发脑血管痉挛中的作用.方法56只Wistar大鼠随机分为正常组、蛛网膜下腔出血组(2、3、7、14 d)、生理盐水组和假手术组,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以β-actin为内参照基因,分别检测各组实验动物脑基底动脉ETA mRNA的表达变化.结果蛛网膜下腔出血后2、3 d组脑基底动脉ETA mRNA表达较正常组明显增高,7 d组仍增高,14 d组趋于正常.结论ETA在蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛的病理生理过程中可能起重要作用.
作者：林雪群；黄海鹰；祝高春；石嘉庆；戴育成；熊建忠 刊期： 2005年第04期
目的构建人全长D2R基因真核表达载体,研究D2R在帕金森病(PD)中的作用和机制.方法将D,R cDNA片段克隆于pLNCX2逆转录病毒载体,转染成纤维包装细胞系PT67,G418筛选单克隆后进行传代培养,通过原位杂交、免疫组织化学和Western blot检测其表达效果.病毒上清再感染骨髓基质细胞(MSCs),免疫荧光检测D2R基因表达率.结果成功构建了逆转录病毒表达载体pLNCX2-D2R,原位杂交证实D2R基因在PT-67表达的阳性率为80%以上,免疫组织化学检测可见其蛋白分布在胞浆和胞膜,细胞裂解后Western blot蛋白电泳可检测到约48.84kD的蛋白.经转染D2R基因的PT67细胞能分泌病毒并感染MSCs.结论逆转录病毒介导的D2R基因经PT67细胞包装后,能够产生病毒颗粒,收集含病毒颗粒的上清可进一步感染MSCs,这种经逆转录病毒介导的D2R基因可用来作针对帕金森病进行基因治疗的研究.
作者：赵焕英；赵春礼；鲁玲玲；鲁强；刘延英；杨慧 刊期： 2005年第04期
目的探讨海锦窦的解剖学概念及其相关显微解剖,为临床应用提供解剖学基础.方法用10%甲醛固定的成人头颅湿标本22例,分别在动脉系统与静脉系统中灌注红、蓝乳胶铸型,在手术显微镜下观察海绵窦及其相邻结构.结果海绵窦蓝染乳胶形成粗细不等,反复分支的网状结构,与颈内动脉成毗邻关系并可分离.结论本研究所见支持海绵窦是静脉丛的概念.
作者：席焕久；张鹏飞；罗俊生 刊期： 2005年第04期
目的研究北草蜥的精子形成过程.方法以2.5%戊二醛和1%锇酸双重固定,常规制作石蜡切片和超薄切片,光镜和透射电镜观察.结果北草蜥精子形成过程主要有核逐渐延长、染色质浓缩、顶体形成、线粒体逐步发达与融合、细胞质消除与鞭毛形成等.可分为4个时期:时期Ⅰ,精子细胞前顶体囊泡移至核膜时,核膜凹陷形成封闭的顶体囊泡,囊泡底部靠近核膜有一电子致密的顶体颗粒,在1个薄层有颗粒的胞质中形成顶体下颗粒,将顶体颗粒和核膜连接起来;时期Ⅱ,精子细胞顶体囊泡扁平,细胞核延长,染色质浓缩成短丝状的染色质纤维;时期Ⅲ,精子细胞核进一步延长,染色质纤维变粗变长,并沿核纵轴方向有序排列,近端中心粒及尾部开始出现;时期Ⅳ,Sertoli细胞质内纵行微管出现,至精子释放前消失,精子细胞顶体发育完全,终环形成,核内染色质纤维浓缩至大限度,呈高电子致密度的均质状态.结论北草蜥精子形成过程中细胞核及细胞器的超微结构变化在有鳞类蜥蜴分类上具有重要意义.
作者：刘永章；张永普；方周溪 刊期： 2005年第04期
目的寻找安全有效的淋巴管生成抑制剂.方法取猪的胸导管内皮细胞进行培养,进行光镜和电镜观察.设立对照组、内抑制素实验组和血小板因子-4(PF-4)实验组.应用刮线法和MTT法来判定这两种抑制因子对细胞有无抑制作用.结果应用刮线法对Endostatin、PF-4对照组与实验各组的细胞数及细胞游走距离进行比较,均P＜0.05.采用MTT法将内抑制素、PF-4对照组与实验各组吸光光度值相比较,均P＜0.05.结论内抑制素和PF-4对淋巴管内皮细胞的增殖和游走有明显的抑制作用,且有剂量依赖性.
作者：谢方民；程园园；邵旭建 刊期： 2005年第04期
目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NFH)的表达以初步观察该基因的作用. 方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic 1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Western blot鉴定.采用RT-PCR,实时PCR,Westem blot和细胞组织化学方法观察tropic1808稳定株中NFH的表达.结果Western blot检测表明,tropic1808基因稳定表达,RT-PCR,实时PCR,Western blot和细胞组织化学方法均观察到NF-H在tropic1808稳定株中的表达高于空载体对照.结论Tropic1808基因可以在PC12稳定表达且NF-H在tropic1808稳定株中表达上升.
作者：刘梅；张琦；刘炎；丁斐 刊期： 2005年第04期
目的研究同型半胱氨酸(HCY)、同型半胱氨酸诱导基因-2抗体(HCY-2Ab)及叶酸对人胚心肌细胞超微结构的影响.方法取培养的人胚心肌细胞,进行HE染色,常规电镜包埋,透射电镜观察.结果当HCY的浓度小于1.0mmol/L时,随着HCY浓度的升高,心肌细胞核内常染色质增多、细胞质内线粒体和粗面内质网均多于空白对照组,而糖原颗粒减少;当浓度超过1.0mmol/L时,心肌细胞逐渐退化,细胞核内常染色质减少,异染色质增多,核膜包裹染色质形成凋亡小体,细胞质内线粒体肿胀、数目减少,粗面内质网减少;加入外源性的HCY-2Ab或叶酸,心肌细胞形态较相同HCY浓度下的好转.结论HCY对培养的人胚心肌细胞超微结构的维持具有正调节和负调节双相作用;外源性的HCY-2Ab和叶酸在一定程度上可以逆转HCY的作用.
作者：赵丽君；董静霞；毕振伍；吕丹瑜；李英 刊期： 2005年第04期
目的研究促甲状腺激素释放激素受体-2(TRH-R2)在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达,探讨其在生殖发育调节中的作用.方法应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测8 d、15 d、20 d、35 d、60 d和90 d大鼠睾丸中TRH-R2的表达和定位,并结合图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析,观察其在发育过程中的变化.结果免疫印迹杂交发现TRH-R2蛋白表达于出生后15 d以后各阶段的大鼠睾丸;而免疫组织化学在第8 d以后的各个发育阶段均检测到TRH-R2的表达,TRH-R2定位于大鼠睾丸的间质细胞,TRH-R2免疫反应阳性物位于细胞膜和细胞质内,细胞核为阴性;图像分析结果显示随着大鼠睾丸的发育,TRH-R2表达量逐渐增多,35 d达到大值,此后维持稳定水平,表达量在35 d同其他阶段之间具有统计学差异(P＜0.01).结论TRH-R2在大鼠睾丸发育过程中均有表达,定位于睾丸的间质细胞,其表达量随着增龄变化而变化,即同发育过程相关.
作者：赵勇；张远强；张金山；刘新平；许若军 刊期： 2005年第04期
目的探讨大鼠脑损伤后诱导性一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂--氨基胍(AG)的神经保护作用.方法采用大鼠额叶锐器损伤模型,将SD大鼠随机分成氨基胍(AG)治疗组和生理盐水(NS)对照组.用生物化学方法检测NO含量;RT-PCR法及免疫组织化学染色方法观察iNOSmRNA和iNOS阳性细胞表达变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.将两组结果进行比较.结果AG治疗组创伤区及周边NO含量、iNOSmRNA和iNOS阳性细胞表达量较NS组明显降低,凋亡细胞数量也相应明显减少.结论AG能选择性地抑制iNOS表达,减少NO过量产生,从而减少细胞凋亡,发挥神经保护作用.
作者：倪衡建；何志贤；张志军；杨学峰；胡燕 刊期： 2005年第04期
为寻找新的神经干细胞来源用于治疗急性脊髓损伤的实验研究,本实验采用绿色荧光大鼠(GFP转基因鼠)有毛皮肤在体外经剪碎,胰酶消化,过滤细胞,无血清培养液培养分离细胞,用表皮生长因子和成纤维细胞生长因子促进细胞增殖,去除生长因子后用含血清培养液培养细胞等过程,采用神经上皮于细胞蛋白(nestin)、微管相关蛋白(MAP2)、神经丝蛋白(NF-200)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫细胞化学染色法对培养细胞的分化状况进行鉴定.
作者：张伟；曾园山；陈雅云；吴武田；陈穗君 刊期： 2005年第04期
目的探讨造血系统多种肿瘤细胞系中CD34+干细胞是否存在,并对其性质进行研究.方法利用流式细胞检测技术,检测了急性单核细胞白血病细胞THP-1、红白血病细胞MEL、慢性粒细胞白血病细胞K562,急性淋巴细胞白血病细胞MOLT-4,恶性淋巴瘤细胞RAJI,多发性骨髓瘤细胞RPMI8226、SP2/0和树突状细胞肉瘤DCS肿瘤细胞中CD34+的肿瘤细胞所占的比例.选取了MOLT-4和K562细胞系,分选出CD34+细胞,继续培养,观察CD34+细胞比例变化;比较CD34+与CD34-肿瘤细胞在功能状态、细胞周期、分化状态、耐药性的差异. 结果8种不同类型造血系统肿瘤细胞中CD34阳性率依次为2.5%、5.2%、3.1%、2.1%、1.4%、O、0和6.2%.从K562细胞中分选出CD34+细胞,继续培养后恢复为原来比例.MOLT-4和K562细胞系中分离出的CD34+细胞RNA含量低、细胞处于G0/G1期的比率较高(81.5%和77.9%)、分化抑制蛋白Id-1表达强阳性/阳性(分化程度低)、多耐药蛋白p-gp高表达(耐药性强).结论血液系统肿瘤细胞系中有一小部分肿瘤细胞带正常造血干细胞的标记,并且带有这种标记的细胞表现出更为原始的细胞特性,其中包括血液肿瘤细胞干细胞.
作者：任乐荣；刘玉琴；刘险峰；苏广彦；顾蓓；董继红 刊期： 2005年第04期
目的探讨应用Fluoro-Jade B(FJB)染色法检测基底神经核神经元变性死亡的方法.方法制备纹状体定位注射红藻氨酸(KA)损伤大鼠模型、腹腔注射MPTP损伤小鼠模型、以及培养纹状体神经元KA损伤细胞模型,用FJB荧光染色显示和分析变性死亡的神经元.结果FJB染色可清晰地显示KA和MPTP致大、小鼠损伤引起的变性神经元胞体和部分突起.在脑组织切片上,KA模型纹状体内、MPTP模型黑质致密部内分布许多FJB染色阳性的变性神经元,而对照组动物未见变性神经元.在培养纹状体神经元体系内,FJB也能清楚地显示KA损伤后变性的神经元.单位面积内计数FJB阳性神经元占培养纹状体神经元总数的比率(均值±标准差),KA损伤组为(8.42±1.09)%,较对照组(3.42±0.45)%明显增多(P＜0.01).结论FJB方法快速、简便、经济、可靠.可以用于脑组织切片和培养细胞显示变性神经元,能成功检测出KA和MPTP损伤后基底神经核的变性神经元.
作者：曹荣；扈慧静；王艳芹；张金萍；陈良为 刊期： 2005年第04期
目的心肌纤维化是心肌梗死后左室重构的主要组成部分,本实验主要观察骨髓基质干细胞移植对缺血性心肌左室重构细胞外基质的基因表达以及对心脏左室功能的影响.方法将骨髓基质干细胞经体外培养、5-氮杂胞苷(5-azacytidine)诱导、扩增及标记后,植入急性心肌梗死大鼠动物模型心肌中,于28d测定大鼠心脏功能后取出心脏并称量,对缺血性心肌的纤维化程度及注入的骨髓基质干细胞进行观察,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及原位杂交技术,检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)等细胞外基质基因表达情况,并观察了转化生长因子(TGF)-β1基因表达情况.结果在心肌中骨髓基质干细胞存活;梗死大鼠心脏功能明显改善;心肌梗死面积明显减小(10%);Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TIM-1以及TGF-β1基因表达水平与未注入骨髓基质干细胞对照组相比显著降低,且心肌细胞纤维化被有效抑制.结论骨髓基质干细胞移植可以抑制心肌纤维化,降低细胞外基质基因表达,改善心脏功能,有望成为心肌梗死治疗的一条新途径.
作者：徐小华；许增禄；徐园园；仇文颖；钱晓菁；陈咏梅 刊期： 2005年第04期
目的观察α-横纹肌肌节肌动蛋白(α-SCA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和中间丝结蛋白在小鼠心脏发育过程中的时空表达特征,以探讨这些蛋白质表达与胚胎及生后小鼠心脏成熟的关系.方法用抗α-SCA、抗α-SMA及抗结蛋白单克隆抗体对胚胎及生后小鼠心脏连续切片进行染色.结果胎龄9 d,心室和流出道α-SCA、α-SMA表达较强,而结蛋白表达较弱.在心房,α-SCA、α-SMA的表达限于背侧壁和腹侧壁,静脉窦仅见少许α-SCA弱阳性细胞.心房和静脉窦则无结蛋白表达.α-SCA、α-SMA和结蛋白的表达于胎龄12 d达高峰.较高水平的α-SCA表达将持续到生后.心脏各部α-SMA和结蛋白表达于胎龄12 d后逐渐下降,但在右心室表达持续时间较长.出生后,结蛋白表达主要集中于明带Z线和闰盘.结论α-SMA和结蛋白在小鼠胚胎心脏表达的时空差异性表明小鼠胚胎心脏不同部位发育成熟的时间有差异,右心室成熟较慢.α-SMA表达可能与早期胚胎心脏的缓慢蠕动收缩有关.肌节的发育成熟需要较高的结蛋白表达.
作者：李海荣；景雅；徐秀文；王彤；杨艳萍；乔从进 刊期： 2005年第04期
目的在活细胞内建立并优化三通道FRET检测方法,使之更好地适用于膜蛋白复合物亚单位的相互作用.方法利用在HEK293细胞中转染pCFP-YFP作为阳性对照,共转pCFP和pYFP作为阴性对照,用不同的公式如FRETN、NFRET、FR及Net FRET/Df等进行FRET定量计算,并通过改变供体与受体比例来观察所测得的FRET值与FRET转移效率的关系.在HEK293细胞内转染CFP或YFP标记的不同亲离子型谷氨酸受体(iGluR)亚单位,分析它们之间的相互作用.结果FRETN、NFRET、FR及Net FRET/Df等公式均可以适用于本研究所建的三通道FRET检测系统;对于不同的公式,供体与受体蛋白分子表达比例的变化会对测量结果产生不同的影响.用所建FRET技术,发现CFP-GluRl与YFP-GluRl之间,以及CFP-NRl与YFP-NR1具有确定FRET信号,而CFP-GluRl与YFPNRl则没有FRET发生.结论在对不同iGluR亚单位之间相互作用的研究中证明同一受体亚型中的亚单位之间可以形成同聚体,而不同受体亚型的亚单位之间则不会形成复合物.
作者：王敏珍；邱爽；滑玉林；杨帆；沈逸；罗建红 刊期： 2005年第04期
目的探讨颈椎关节突关节疼痛综合征并发上臂痛的神经解剖学机制.方法以抗降钙素基因相关肽(CGRP)抗体对SD大鼠C4～T1关节突关节囊作免疫组织化学染色.将荧光标记物快蓝(FB)和核黄(NY)分别注射到SD大鼠右侧桡神经和C1～T1颈椎关节突关节囊.显微镜下观察颈脊神经背根节(DRG)内被逆行荧光标记的神经元,再用抗CGRP抗体行免疫组织化学染色,观察DRG内的CGRP免疫阳性神经元.后比较荧光照片和免疫组织化学照片上的神经元.结果C4～T1关节突关节囊上分布着丰富的CGRP免疫阳性神经纤维,它们或独立走行或交织成网.在C5～T1各节段的DRG中均可观测到被FB单标(76%)、NY单标(16%)和FB/NY双标(8%)的神经元.约40%的荧光逆行标记神经元在免疫组织化学染色的切片上呈CGRP免疫反应阳性.结论大鼠颈部DRG内一部分含GRP的感觉神经元的周围突分两支,一支支配颈椎关节突关节囊,另一支随桡神经分布到前(上)肢.提示,颈椎关节突关节疼痛综合征并发上臂牵涉痛的神经形态学基础之一可能发生在DRG水平.
作者：吴丽如；李瑞锡；王劼；李震；刘才栋；顾红玉；彭裕文 刊期： 2005年第04期
目的研究升主动脉缩窄术后升主动脉瘤形态学和形成原因.方法将40只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组.制备升主动脉缩窄模型,于术后3～5个月取升主动脉,采用光镜、特殊染色及基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-3)免疫组织化学的方法对升主动脉瘤进行观察.结果幼年Wistar大鼠升主动脉缩窄术后3～5个月后产生升主动脉瘤,此模型成瘤率为63.3%,其中夹层动脉瘤成瘤率为36.7%,MMP-2、MMP-3在升主动脉瘤中表达强阳性.结论大鼠升主动脉缩窄术产生升主动脉瘤的机率较高,并呈现MMP-2、MMP-3表达强阳性.
作者：范军；柏树令；曹德寿；朱小兵；汪薇 刊期： 2005年第04期
目的研究雌激素受体(ER)α和β在新生、成年和卵巢切除大鼠心脏的表达.方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法,分析新生和成年大鼠心脏各部的ERα和β mRNA及ER蛋白质的表达,探讨不同剂量的17β-雌二醇对卵巢切除大鼠心脏ERα和β mRNA、ER蛋白质的表达调控及对心房、心室重量和它们与体重比变化的影响.结果ERα mRNA在新生大鼠心脏各部表达较低,而成年大鼠心脏各部ERαmRNA的转录水平提高3～20倍,这种差别体现在ERα蛋白质的表达水平不同.反之新生大鼠心脏ERβ mRNA表达水平较高,而成年大鼠心脏ERβmRNA的表达降低2～7倍.卵巢切除减少成年大鼠心房ERα mRNA和蛋白质的表达,减轻心房重量及心房/体重比;17β-雌二醇替代却能反转这些改变,同时随着血浆17β-雌二醇水平的增高,这种影响在一定程度上呈剂量依赖关系.卵巢切除和17β-雌二醇替代并不改变心脏和心室/体重比,也不影响ERβmRNA的表达.结论雌激素受体α和β在新生和成年大鼠心脏的表达存在差别,ERβ可能在大鼠心脏的发育过程中起重要作用,ERα是雌激素对成年大鼠心脏调控的优势受体;雌激素的主要靶器官是心房,且通过其受体的介导促进心房肌细胞的增生.
作者：田宗文；宋健；王乔；杨晓宁；陈锡昌；程邦昌 刊期： 2005年第04期
解剖学报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国解剖学会
