刘卫红；姚琦；陈望燕；王瑛
自的 我更新能力强,随着培养时间的延长可产生大量的CD133-细胞.裸鼠移植成瘤实验表明CD133+细胞成瘤率是10/10,成瘤平均时间是（58±6）d；而CD133-成瘤率是4/10,平均成瘤时间是（145±8）d,CD133+细胞成瘤能力明显强于CD133-细胞.MTT检测结果 表明CD133+细胞的IC50值为CD133-细胞的2.5倍左右,提示对顺铂药物不敏感.对使用顺铂的细胞进行吖啶橙染色后发现,大量CD133-细胞呈现细胞凋亡状态,而CD133+细胞形态基本正常.进一步的Annexin Ⅴ-FITC和PI双染结果 表明,药物处理后的CD133+ 细胞比CD133-细胞具有更强的抗凋亡能力.结论免疫磁珠分选得到的CD133+细胞具有自我更新、增殖和分化为CD133-细胞等肿瘤干细胞的特征.CD133+ 细胞比CD133-细胞具有较强的成瘤能力、耐药性及抗凋亡能力.
作者：李青；唐良萏；汪艳；张曦；朱慧芬 刊期： 2012年第01期
1临床资料患者,男,59岁,因进行性吞咽困难3个月于2010年2月23日入院,入院时可进半流质饮食.体格检查:轻度贫血貌,颈部淋巴结无肿大.电子胃镜检查:食管距门齿约26 cm处左侧壁见一半球形黏膜下隆起致管腔狭窄,黏膜表面光滑完整,色泽如常,胃镜通过无困难;食管距门齿30 cm处见息肉状新生物向腔内突出,表面血管丰富(图1),于此处活检送病理学检查,光学显微镜下见鳞状上皮黏膜组织,少部分区域上皮细胞轻度增生改变.上消化道钡餐检查:位于主动脉弓下的食管段可见一大小3 cm×2 cm充盈缺损,钡剂通过尚可,管壁柔软,边缘光滑,考虑为良性肿瘤;位于心脏后方的食管段可见一长3.5 cm狭窄,管壁毛糙,稍僵硬,黏膜面粗糙,考虑为食管癌(图2).
作者：江文洋；付向宁；付圣灵；廖永德 刊期： 2012年第01期
目的 构建细胞因子融合蛋白IP10-EGFRvⅢScFv,建立并检测稳定表达融合蛋白的细胞株NIH3T3.方法 通过RT-PCR法扩增小鼠IP10基因,全基因人工合成EGFRvⅢScFv,两段 基因依次克隆于表达载体pcDNA3.1(-)PCMV启动子下游,二者以编码(Gly4Ser)3的柔性接头序列(linker)相连.将构建好的pcDNA3.1(-)IP10-EGFRvⅢScFv转染NIH3T3细胞,并用G418筛选出阳性克隆,采用实时定量PCR和Western blot法检测克隆细胞 基因和蛋白的表达量,并观察转染后的NIH3T3细胞体外生长状况.结果 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)IP10-EGFRvⅢScFv,经过浓度为200 mg/L的G418工作液筛选出了稳定高表达IP10-EGFRvⅢScFv的细胞系NIH3T3,且其生长状态并未受转染基因的影响.通过荧光检测、实时定量PCR、Western blot法检测到转染72 h后 基因和蛋白表达量高,和稳定克隆株相比,表达量并无明显差异(P＞0.05).结论构建的新型细胞因子融合蛋白可以在NIH3T3细胞内获得稳定表达,为后期融合蛋白的提取及功能研究打下基础.
作者：王旋；赵洪洋；罗赤星；周毅；张方成；姜晓兵 刊期： 2012年第01期
目的 研究在体外染毒条件下硒对镉转化人支气管上皮细胞系16HBE凋亡和癌基因表达的影响.方法 用0.625、1.25、2.5和5.0 μmol/L 亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞24 h,用流式细胞术检测凋亡,用RT-PCR检测p53,bcl-2 和 bax 表达.结果 0.625、1.25、2.5和5.0 μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞后,随硒剂量升高细胞凋亡率增高,相关系数r=0.987 9(P＜0.01),并且在1.25、2.5和5.0 μmol/L亚硒酸钠剂量组的凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).亚硒酸钠可以抑制镉转化16HBE细胞p53和bcl-2的表达(P＜0.05或P＜0.01),bax表达虽有所增强但P＞0.05.进行相关性分析,细胞凋亡与p53和bcl-2表达呈负相关,相关系数r分别为-0.923 6(P＜0.01)和-0.862 1(P＜0.05),而细胞凋亡与bax表达呈正相关,相关系数r=0.781 8(P＜0.05).p53表达和bcl-2表达呈正相关,相关系数r=0.894 1(P＜0.05).p53、bcl-2表达和bax表达之间呈显著负相关,相关系数分别为-0.822 2(P＜0.05)和-0.961 3(P＜0.01).结论亚硒酸钠处理镉转化16HBE细胞,通过使p53和bcl-2表达下调、bax表达上调,诱导细胞凋亡从而起到抑制细胞恶性转化的作用.
作者：余日安；陈华洁；贺凌飞；陈秉；戴文涛；陈学敏 刊期： 2012年第01期
目的 观察脂肪因子chemerin是否调节巨噬泡沫细胞形成,以及对巨噬泡沫细胞CD36、ATP结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)表达和炎症因子释放的影响.方法 100 nmol/L佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,随机分组,Chemerin不同浓度和作用时间下联合相同浓度(50 μg/mL)氧化型低密度脂蛋白与THP-1源性巨噬细胞共孵育.油红O染色观察细胞内脂滴变化,Western blot和实时PCR检测CD36、ABCA1的mRNA和蛋白水平的表达.ELISA法检测培养液中炎症因子--肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的浓度,酶法检测细胞内胆固醇含量.结果 Chemerin诱导巨噬细胞内脂滴蓄积,下调 CD36和ABCA1 mRNA及蛋白的表达,增加培养液中促炎因子TNF-α的释放而降低抗炎因子IL-10的释放,提高细胞内胆固醇的含量,且有浓度和时间依赖性.结论 Chemerin通过下调CD36和 ABCA1基因的mRNA及蛋白的表达,诱导THP-1巨噬细胞内脂滴蓄积和泡沫细胞形成;ABCA1 表达下调可能与促炎因子TNF-α释放增加和抗炎因子IL-10释放减少有关.
作者：谢霆；刘成珪；陈新忠；董念国；杨文凯；张树华；胡晓青 刊期： 2012年第01期
目的 通过对鼻内镜鼻腔泪囊造孔术前鼻窦CT检查结合泪道造影的相关结果 进行分析,确定鼻内镜手术适应证,制定理想的手术方案,以提高手术治愈率.方法 29例(33眼)慢性泪囊炎患者术前分别进行泪囊造影及鼻窦CT检查,依据检查结果 采用不同手术方式.结果 两种影像学检查可以确定泪囊大小及周围解剖结构,小泪囊(＜5 mm)9例(10眼),其中＜2 mm 1例(1眼);大泪囊(＞5 mm)20例(23眼).26例(30眼)患者通过鼻内镜下泪囊鼻腔造孔术治愈,治愈率90.91%;2例(2眼)好转,好转率6.06%;总有效率96.97%.泪囊小于2 mm的小泪囊患者手术无效.结论鼻窦CT及泪道造影是泪囊鼻腔造孔术前必不可少的影像学检查,对提高手术成功率有重要作用.
作者：刘卫红；姚琦；陈望燕；王瑛 刊期： 2012年第01期
目的 研究缬沙坦对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响,并探讨其新的作用机制.方法 体外培养VSMCs,采用AngⅡ诱导其增殖,用不同浓度的缬沙坦(10-5、10-6、10-7mol/L)进行干预,细胞计数及四氮唑盐试验(MTT)检测VSMCs增殖情况,Western blot检测各组线粒体融合素基因-2(mitofusin-2,Mfn2)、Raf、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signalregulated kinase 1/2,ERK1/2)表达水平的变化.结果 AngⅡ能够明显促进VSMCs的增殖,下调Mfn2的表达、增强Raf和ERK1/2的表达;缬沙坦10-5、10-6mol/L可以拮抗AngⅡ的上述作用,而缬沙坦10-7mol/L无此作用;缬沙坦对无AngⅡ刺激的VSMCs增殖无明显影响.结论缬沙坦能有效抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖,其机制与调节Mfn2的表达、抑制Ras-Raf-ERK/MAPK信号通路有关.
作者：张文娟；龚俊荣；郭小梅 刊期： 2012年第01期
目的 观察腺苷A1受体基因敲除小鼠在戊四氮致痫后大脑皮层蛋白质的表达变化,探讨腺苷A1受体的抗癫痫和脑保护作用机制.方法 采用PCR技术鉴定腺苷A1受体基因敲除小鼠与野生型小鼠,应用戊四氮(30 mg/kg)腹腔注射制作癫痫模型,利用蛋白组学双向电泳检测癫痫发作后大脑皮层蛋白质表达变化,选取部分差异点进行质谱分析.结果 点燃组癫痫模型点燃成功后24 h、1个月,分别与对照组小鼠相比,大脑皮层多种蛋白质表达差异具有统计学意义.腺苷A1受体基因敲除小鼠与野生型小鼠相比较,对照组两者之间与点燃组两者之间多种蛋白质表达差异具有统计学意义.癫痫模型点燃成功后腺苷A1受体基因敲除小鼠与野生型小鼠相比,大脑皮层内表达下调蛋白为谷氨酰胺合成酶、醛缩酶A及甘氨酸受体;表达上调蛋白为蛋白激酶C及3-磷酸甘油醛脱氢酶.结论腺苷A1受体可能通过改变大脑皮层内多种蛋白质表达发挥其抗癫痫和脑保护作用.
作者：刘志广；康慧聪；王媛；李巷；刘晓燕；刘建林；曾铮；朱遂强 刊期： 2012年第01期
目的 了解我国农村独生子女与非独生子女小学生行为问题的现状与差异,为开展农村小学生行为问题的预防和干预提供依据.方法 采用Achenbach儿童行为家长评定量表(CBCL)对5 074名农村小学生进行行为问题的调查研究.结果 非独生子女除了在社交问题的得分低于独生子女以外,在退缩、躯体主诉、焦虑/抑郁、违纪行为、思维问题、内向性问题和总行为问题的得分均高于独生子女,差异有统计学意义(均P＜0.05).男生在外向性问题和总行为问题得分高于女生,内向性问题得分低于女生,差异有统计学意义(均P＜0.05).独生子女男生与非独生子女男生的行为问题年级发展趋势基本相同,独生子女女生与非独生子女女生则有不一样的发展趋势.结论农村独生子女发生行为问题的风险要低于非独生子女.是否独生子女对农村不同性别小学生行为问题的发生影响不一致,应该重点关注农村非独生子女女生心理和行为的发展.
作者：余晓敏；吴汉荣 刊期： 2012年第01期
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是生物体内普遍存在的一种基因表达调控机制.1998年,Fire等[1]以秀丽隐杆线虫为研究对象,第一次在实验室中揭示了基因沉默现象,并指出诱导这种作用的是一种含有21~25个核苷酸的小干扰RNA(short interfering RNAs,siRNAs).因这一发现,Fire等被授予了2006年诺贝尔生理学或医学奖[2].随后,在果蝇[3]及脊椎动物[4]体内均发现了基因沉默现象.这一重大发现使得siRNAs理论上成为了一种治疗人类疾病的理想药物.人们设想通过RNAi技术,设计特异性的siRNAs靶向致病基因,通过降解致病基因转录出的mRNA来阻止有害基因产物的表达,从而达到治疗疾病的作用.目前,RNAi技术已成为功能性基因组学、药物治疗靶点设计、分子信号转导通路研究和人类疾病治疗的重要手段[3-5].
作者：张萍；王伟 刊期： 2012年第01期
目的 研究瑞芬太尼对大鼠脑缺血再灌注损伤后bcl-2和Caspase-3表达的影响,探讨瑞芬太尼对脑缺血再灌注损伤的作用.方法 以线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的脑缺血再灌注模型,采用免疫组化、Real-time PCR法和神经行为检测相结合的.方法,观察缺血再灌注侧大脑皮质内bcl-2和Caspase-3的表达及神经功能的变化.结果 与缺血再灌注组比较,瑞芬太尼组的bcl-2 mRNA实时表达明显增高(P＜0.05),Caspase-3 mRNA实时表达明显降低(P＜0.05),神经异常行为明显减轻.结论瑞芬太尼可上调大鼠脑缺血再灌注损伤后bcl-2的表达,下调Caspase-3表达,明显改善神经症状,对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用.
作者：舒榕；刘冬玲；王强 刊期： 2012年第01期
目的 观察鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)对感染人轮状病毒(human rotavirus,HRV)乳鼠空肠黏膜上皮细胞的保护作用.方法 将60只昆明种乳鼠均分为4组:灌服HRV作为感染组;灌服HRV前和后灌服LGG作为预处理组和治疗组;正常对照组灌服细胞培养液.从第4天开始,连续5 d观察各组乳鼠的临床症状,每天2次检测乳鼠大便HRV抗原.在实验的第9天随机处死每组中的8只乳鼠,取出空肠段苏木精-伊红染色,利用Image-Pro Plus 5.1图像软件分析各组乳鼠空肠黏膜厚度、绒毛高度和隐窝深度.利用光学显微镜和透射电子显微镜观察乳鼠空肠黏膜上皮细胞的病理变化.结果 至第9天,对照组乳鼠无腹泻、无死亡.HRV感染组、预处理组、治疗组乳鼠腹泻率和死亡率分别为100.00%、46.67%,13.33%、0%,26.66%、6.67%.对照组、HRV感染组、预处理组、治疗组乳鼠空肠黏膜隐窝深度分别为(35.2±2.4)、(45.9±3.6)、(35.8±5.6)和(38.9±2.9)μm,HRV感染组明显高于其它3组(均P＜0.01).病理检测发现HRV感染组乳鼠空肠黏膜上皮细胞出现广泛的空泡样变性,而预处理组和治疗组乳鼠空肠黏膜上皮细胞空泡样变性的情况均有减少.预处理组与治疗组相比,前者对乳鼠空肠黏膜上皮细胞的保护效果更好.结论 LGG对感染HRV的乳鼠空肠黏膜上皮细胞有一定的保护作用,感染前灌服LGG的保护效果好于感染后灌服.
作者：张振；王晓梅；汤建桥；高源；王宝香；郑义 刊期： 2012年第01期
目的 分析颈动脉内膜剥脱术治疗颈动脉狭窄患者的疗效及安全性.方法 回顾性分析武汉同济医院神经外科2005年1月至2010年8月12例经颈动脉内膜剥脱术治疗颈动脉狭窄的患者资料.结果 术后患者影像学检查结果 提示颈动脉通畅.所有患者脑缺血症状较术前均有改善.12例中1例出现术后切口血肿导致呼吸困难,其余未见手术并发症.随访6个月到45个月,随访期内无一例发生缺血性脑卒中.结论颈动脉内膜剥脱术能安全有效地治疗脑缺血的发生和有效预防缺血性脑卒中.
作者：陈劲草；周平；李正伟；王胜；欧一博 刊期： 2012年第01期
目的 研究5/6肾切除大鼠肾时钟基因per2、bmal1及时钟输出基因dbp 的表达节律.方法 SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为模型组和假手术组.造模次日置于12 h∶12 h明暗交替的环境饲养.第12周分别在7AM(ZT0),11AM(ZT4),3PM(ZT8),7PM(ZT12),11PM(ZT16),3AM(ZT20)各时间点两组各处死5只大鼠.Real-time PCR法检测肾bmal1、per2、dbp mRNA表达.结果 假手术对照组与模型组per2在ZT8时为谷值点(T),在ZT16~ZT20达到峰值(P),模型组per2的峰值提前4 h,两组P/T分别为2.49、2.47;模型组与假手术组肾bmal1 mRNA 表达的近日节律相似:于ZT4时为峰值点、ZT20为谷值点,但假手术组则自峰值点迅速下降,于ZT12~ZT20在谷值波动.模型组与假手术组dbp mRNA表达趋势相反:假手术组在ZT4及ZT20为谷值点,其余各时间点表达水平均较高,模型组dbp mRNA表达峰值点在ZT16,其余各时间点均在较低水平波动.结论肾组织中时钟基因per2、bmal1及时钟输出基因dbp mRNA的表达呈近日节律,慢性肾衰时该节律发生变化.
作者：黄小妹；陈文莉 刊期： 2012年第01期
目的 检测大鼠心肌在体缺血再灌注损伤(IR)组织间液钙离子浓度,比较IR前后心肌胞膜钠钙交换体(NCX)mRNA表达水平,探讨其对钙超载的意义.方法 12只SD大鼠随机分为IR组和对照组,以微透析技术连续收集心肌组织间液标本,原子吸收光谱法检测钙离子浓度.IR组通过结扎(20 min)后松解(60 min)冠状动脉前降支造成心肌缺血再灌注,结束时收取左心室缺血区和右心室心肌行NCX mRNA定量PCR检测,实验前后采血检测血钙和肌钙蛋白T(cTnT).对照组免除结扎、松解前降支,其余操作与IR组一致.结果 IR组血浆cTnT浓度显著升高[对照组 vs IR组,ng/mL:(1.62±0.60) vs.(4.29±2.22),P=0.031].IR组心肌组织间液钙离子浓度在缺血期无明显变化,再灌注20 min显著下降,心肌析出液钙离子浓度与对照组存在显著性差异[对照组vs.IR组,ng/mL:(224±31) vs.(136±39),P=0.002].血浆Ca2+浓度实验前后无显著差异.心肌细胞膜NCX mRNA表达水平在组间和组内均无显著差异.结论大鼠在体心肌缺血20 min再灌注60 min,组织间液钙离子浓度在缺血期无明显变化,再灌注期迅速下降,这种变化趋势与胞膜NCX表达无关.
作者：黄邵洪；荣健；王淑云；吴钟凯 刊期： 2012年第01期
目的 探讨麻醉期间目标导向液体治疗(GDT)对胶质瘤开颅切除术患者预后的影响,为神经外科患者的液体管理提供理论依据.方法 将40例胶质瘤患者随机分为对照组(C组)和目标导向组(G组).C组:根据患者术中平均动脉压(MBP)、心率(HR)、中心静脉压(CVP)等行常规液体治疗;G组:在Vigileo监护仪指导下,根据每搏量变异度(SVV)行目标导向液体治疗.分别于术前30 min(T1)、手术开始后1 h(T2)、术毕(T3)、术后6 h(T4)、术后24 h(T5)、术后48 h(T6)采集颈内静脉血,T1～T3采集动脉血行血气分析[血氧分压(PO2)、血氧饱和度(SO2)、血细胞比容(Hct)、血红蛋白(Hb)、乳酸、渗透压],于T1～T6采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中S100-β浓度,监测T1～T3血液动力学指标并计算氧供指数(DO2I),同时记录两组患者术后发生感染、脑水肿的人数以及术后住院时间.结果 与C组比较,G组术后住院时间缩短,术毕MBP、CVP、心指数(CI)、中心静脉氧饱和度(ScvO2)及DO2I增加,术毕以及术后6 h血乳酸浓度降低,术后6 h血S100-β浓度降低(均P＜0.05),两组患者术后均无感染以及脑水肿发生.结论 GDT有利于改善胶质瘤开颅切除术患者的预后.
作者：张杰；施庆余；罗爱林 刊期： 2012年第01期
目的 探讨人气道上皮细胞三磷酸腺苷(ATP)释放量的改变在机械通气所致气道黏液高分泌中的作用.方法 人气道黏膜上皮细胞(HBE16)体外培养,通过节律性倾斜细胞培养板,利用液体的表面张力、大气压及液体重力所产生的牵张力(剪应力)及压力(压应力)给予压力牵张刺激,并利用向密闭盒中注入医用氧气增加压力以模拟机械通气,各组培养细胞依施加条件不同而分为对照组、单纯倾斜组、倾斜+钙离子螯合剂BAPTA-AM、倾斜+BAPTA-AM+钙离子螯合剂EGTA、加压+倾斜、加压+倾斜+嘌呤P2Y受体阻断剂reactive blue-2(RB-2)、加压+倾斜+ BAPTA-AM、加压+倾斜+ BAPTA-AM +EGTA,共8组,分别采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞活性、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组黏蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平、ELISA法检测细胞培养上清液中MUC5AC含量、高效液相色谱法(HPLC)检测培养液中ATP释放量.结果 加压+倾斜组细胞MUC5AC mRNA相对含量、培养上清液中ATP释放量和MUC5AC蛋白分泌量分别为:(11.80±0.01)、(7.41±0.45)μmol/g、(0.77±0.26),显著高于单纯倾斜组的(6.60±0.01)、(2.76±0.47)μmol/g、(0.25±0.01)及对照组的(3.40±0.01)、(0.00±0.01)μmol/g、(0.02±0.01)(均P＜0.05).RB-2、EGTA + BAPTA-AM处理后的加压+倾斜组细胞的MUC5AC mRNA相对含量分别为:(10.5±0.03)、(11.9±0.11),与加压+倾斜组相比抑制作用不显著(P＞0.05);培养上清液中ATP释放量分别为:(0.05±0.02)μmol/g、(0.08±0.02)μmol/g,较加压+倾斜组显著降低(均P＜0.05).结论机械通气可以显著提高气道黏膜上皮MUC5AC的分泌,其机制与气道上皮细胞依赖Ca2+的ATP的过量释放密切相关.
作者：苏晖晖；尤列·皮尔曼；维克多·科罗索夫；周向东 刊期： 2012年第01期
目的 探讨雌激素受体(ER)表达不同的乳腺癌细胞间相互作用.方法 PCR法检测MDA-MB-231 及MCF-7细胞中ER的基因表达.CCK-8法检测17β-雌二醇对MCF-7和MDA-MB-231细胞生长增殖的影响.将MDA-MB-231(雌激素受体阴性细胞)用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)法标记荧光信号,将其分别与MCF-7细胞(雌激素受体阳性细胞)和未标记荧光的MDA-MB-231细胞(雌激素受体阴性细胞)用Transwell侵袭小室分层共培养,加入或不加入雌二醇,检测MDA-MB-231细胞的增殖差异.结果 MCF-7细胞表达雌激素受体α(ESR1,Erα)和雌激素受体β(ESR2,Erβ),而MDA-MB-231细胞均不表达.17β-雌二醇浓度为10-11 mol/L时促MCF-7增殖作用大,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),对MDA-MB-231细胞则无明显作用(P＞0.05).在加入雌二醇培养的MCF-7细胞与MDA-MB-231细胞小室分层共培养组,经流式细胞仪检测发现MDA-MB-231平均荧光强度较对照组显著降低.结论雌激素受体阳性细胞在雌激素作用下,可促进雌激素受体阴性细胞的增殖.
作者：沈娜；宋海平；赵月；郭辉；赵向旺；姜冉；何文山；黄韬 刊期： 2012年第01期
目的 研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMP-1)对肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)CTGF和TIMP-1基因表达以及对Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌的影响.方法 根据已筛选出的对CTGF和TIMP-1基因有效的RNA干扰靶位,将化学合成siRNA CTGF和siRNA TIMP-1以脂质体LipofectamineTM2000介导,瞬时转染HSC-T6细胞,分别设siRNA CTGF组、siRNA TIMP-1组、siRNA CTGF和siRNA TIMP-1联合组、脂质体组及非特异性(negative control,NC)siRNA组,抽提转染24、48 h细胞mRNA和蛋白,并收集细胞上清液.应用RT-PCR鉴定CTGF和TIMP-1 mRNA的表达;Western blot检测其蛋白表达;ELISA法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌.结果 各干预组转染24、48 h后分别与脂质体组和NC siRNA组比较,HSC-T6细胞CTGF及TIMP-1 mRNA和蛋白表达均明显下调(均P＜0.05),且干预组HSC-T6培养上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少(均P＜0.05).siRNA联合组分别与siRNA CTGF组和siRNA TIMP-1组比较,于转染48 h siRNA联合组较siRNA TIMP-1组抑制率高,细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原量比siRNA TIMP-1组少,且差异具有统计学意义(均P＜0.05);而与siRNA CTGF组比较,其CTGF mRNA和蛋白抑制率增高,细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原量较siRNA联合组减少,但差异无统计学意义(均P＞0.05).结论针对HSC-T6 CTGF mRNA基因全长943位点和TIMP-1 mRNA 304位点化学合成的siRNA,对靶基因mRNA和蛋白表达有较好的抑制效果,CTGF和TIMP-1 沉默可显著减少细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;CTGF和TIMP-1两种基因同时沉默,有增强抗肝纤维化效果的可能.
作者：黄加权；焦云桃；李兰；徐蕾；陶然；范翔雪；马科；郭威；宁琴 刊期： 2012年第01期
原发性纵隔脂肪肉瘤(primary mediastium liposarcoma,PML)是少见的纵隔恶性肿瘤,早期无特异性症状,缺乏可靠、特异的诊断方法,术前很难明确诊断,往往误诊为其他类型的纵隔肿瘤.武汉同济医院心胸外科自2009年1月至2010年1月共收治PML患者2例,总结分析如下.
作者：王星宇；潘铁成；魏翔；刘立刚 刊期： 2012年第01期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
