陈建文;邓菁;吕斌;田峰;张梦;伍雅婷;刘飞
目的 评价音乐对父母陪伴下小儿麻醉诱导的影响.方法 以父母和小儿术前焦虑程度为首要研究目标,父母满意程度为次要研究目标.将100例ASA Ⅰ或Ⅱ级的择期手术患儿,年龄2~10岁,随机分成2组:音乐辅助组(音乐辅助父母陪伴)和对照组(单纯父母陪伴).通过术前焦虑评分(mYPAS评分)测定两组小儿术前焦虑程度;通过状态-特质焦虑问卷(STAI)测定父母术前焦虑程度;通过视觉模拟评分(VAS)评价父母满意程度.结果 音乐辅助组父母术前焦虑评分降低(P<0.05),满意评分略升高,但差异无统计学意义(P>0.05);音乐辅助组小儿焦虑评分较低,但是两组之间的差异无统计学意义.结论 音乐辅助可以减轻父母在陪伴小儿麻醉诱导期间的焦虑心理,但对小儿的焦虑心理作用有限.
作者:李冶秋;许强;周婷;王磊 刊期: 2011年第06期
目的 探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达.将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor 转染MIA PaCa-2 细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化.结果 与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织.同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍).结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中 miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关.
作者:林凡;王欣;俞亚红;王敏;洪晓泉 刊期: 2011年第06期
目的 探索一种用显微外科技术制备小鼠肺缺血再灌注损伤模型的方法,并对其效果进行评估.方法 将30只C57BL/6J小鼠随机分成2组(缺血再灌注组和假手术组),每组15只.缺血再灌注组采用无创血管夹夹闭左肺门60 min,再灌注120 min,建立肺缺血再灌注模型.获取标本,检测肺湿干重比值,用光镜和电镜观察肺组织结构变化.结果 肺缺血再灌注组湿干重比值明显高于假手术组(P<0.01),光镜、电镜下均可观察到严重的肺损伤改变.结论 成功建立了小鼠肺缺血再灌注损伤模型,且方法简单,易于操作,成功率高,为肺缺血再灌注损伤机制研究提供了一种可行的模型.
作者:郑志坤;李劲松;王建军;江科;张俊;乔新伟 刊期: 2011年第06期
目的 研究水通道蛋白4(AQP4)在肺腺癌中的表达及其对肺腺癌细胞增殖与迁移的影响.方法 收集20例经病理切片确诊的肺腺癌组织和4例癌周正常肺组织(距癌缘4~6 cm,病理证实无肿瘤细胞),通过LSAB免疫组化法检测其中AQP4的表达.以APQ4-shRNA转染培养的肺腺癌细胞,通过Western blot法检测细胞中AQP4及E-cadherin的表达;通过MTT法和Transwell小室法分别检测AQP4表达对肺腺癌细胞增殖与迁移的影响.结果 AQP4在肺腺癌组织中表达阳性率为 55%(11/20),正常肺组织均为阴性.在肺腺癌细胞株中,AQP4均呈阳性表达且与E-cadherin蛋白的表达呈负相关;AQP4的表达对肺腺癌细胞增殖无明显影响(P>0.05).细胞迁移实验48 h后,与对照组比较,AQP4-shRNA转染组细胞迁移显著减少(8.9 % vs 14.8%,P<0.05).结论 AQP4与肺腺癌的发生和迁移均相关;AQP4可能通过调节E-cadherin蛋白的表达而促进肺腺癌细胞的迁移.
作者:谢艳萍;温晓红;姜志强;辅桓钦;戴利成;韩慧 刊期: 2011年第06期
目的 探讨miR-192对人肝癌细胞株HepG2中RB1基因表达的调节作用.方法 运用生物信息学方法对miR-192进行靶基因预测并分析其潜在靶基因RB1;将含有miR-192结合位点的RB1 mRNA 3′端非编码区(3′UTR)片段和在miR-192结合位点进行突变的RB1 3′UTR突变片段克隆至报告基因载体pMIR-Report luciferase vector,重组质粒分别命名为pMIR-RB1和pMIR-RB1-mut;将重组质粒、Beta-gal内参质粒和microRNA共转染HepG2细胞,双荧光素酶报告基因系统检测各实验组中细胞荧光素酶的表达;SYBR Green荧光定量PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测miR-192对内源性RB1表达的调节作用.结果 生物信息学分析筛选出89个miR-192的潜在靶基因,RB1基因是其中之一;测序验证重组质粒pMIR-RB1和pMIR-RB1-mut构建成功;过表达miR-192时,共转染pMIR-RB1质粒的细胞相对荧光素酶活性(4.80±0.36)较相应过表达miR-NC组(7.90±0.91)明显降低(P<0.05),而共转染pMIR-Luc或pMIR-RB1-mut质粒的细胞相对荧光素酶活性[pMIR-Luc:(7.68±1.04);pMIR-RB1-mut:(7.56±0.99)]较相应过表达miR-NC组[pMIR-Luc:(7.86±0.73);pMIR-RB1-mut:(7.82±1.05)]无显著差异;上调miR-192水平显著降低HepG2细胞中内源性RB1 mRNA[(0.56±0.10)vs (1.05±0.13)]和蛋白(47% vs 100%)的表达.结论 RB1基因是miR-192的一个靶基因,在HepG2细胞中,miR-192通过直接结合RB1 mRNA 3′UTR而负性调控RB1基因表达.
作者:谢琼慧;王梦漪;谢卫国;何星星;常莹;蒋翔;阮琼芳;林菊生 刊期: 2011年第06期
目的 对宫颈癌淋巴结转移进行分层分析,为评估患者预后和指导个体化的治疗提供依据.方法 对286例ⅠA~ⅡB期宫颈癌住院手术患者的临床病理资料进行回顾性分析,对其淋巴结转移的高危因素采用卡方检验和多元logistic回归分析.结果 286例宫颈癌患者盆腔淋巴结转移率为24.1%.影响淋巴结转移的显著的独立危险因素是肿瘤直径(P=0.001),间质浸润(P=0.006);影响淋巴结转移宫颈癌患者预后的独立影响因素是病理类型(P=0.027),宫旁浸润(P=0.067);无宫旁浸润的宫颈鳞癌患者预后好.结论 在ⅠA~ⅡB期宫颈癌中,其前哨淋巴结转移中闭孔淋巴结是易受累的区域,其次是髂内淋巴结.结合临床病理因素,研究影响宫颈癌患者淋巴结转移的相关高危因素并进行预后评估,可以为其个体化治疗提供依据.
作者:潘秀玉;艾文霞;熊慧华;龚娥娥;吴茜子;朱涛;王常玉;奚玲 刊期: 2011年第06期
目的 探讨经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达.方法 随机将BALB/c小鼠分成对照组和哮喘组.应用5%鸡卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化激化的方法制备小鼠慢性哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA.后一次激发24 h 后处死小鼠,取肺组织进行RT-PCR和免疫组织化学检测,观察哮喘小鼠肺组织TRPC mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 RT-PCR结果显示,正常小鼠肺组织分别表达TRPC1、TRPC2、TRPC3、TRPC6 mRNA;与对照组相比,哮喘小鼠肺组织TRPC1、TRPC6 mRNA表达显著增高(P<0.05);免疫组织化学检测发现TRPC1、6蛋白在哮喘小鼠肺组织的支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞及浸润的炎症细胞表达明显增强.结论 TRPC1、TRPC6 可能与哮喘发病机制密切相关.
作者:李建华;周丽芬;陈志勇;刘筱蔼;黄建荣;彭妙茹;赵珅婷 刊期: 2011年第06期
目的 探讨在川崎病(Kawasaki disease,KD)初始治疗前,Kobayashi评分体系预测中国KD患儿并发冠状动脉损伤(CAL)的能效.方法 回顾性分析113例KD患儿临床资料,将其分为冠状动脉损伤组(CAL组)与非冠状动脉损伤组(NCAL组);应用Kobayashi评分体系对所有患儿评分,用χ2检验分析各评分参数及依危险程度分组后的CAL发生率有无统计学差异,并分析该评分体系的能效.结果 CAL组43例,NCAL组70例,根据该评分体系分为低危组80例、高危组33例,单因素分析结果显示谷草转氨酶(AST)≥100 U/L、外周血中性粒细胞百分比≥80%、C反应蛋白(CRP)≥100 mg/L、年龄≤1岁是KD患儿并发CAL的危险因素,Kobayashi评分高危组的CAL发生率明显高于低危组(均P<0.05);该评分体系的灵敏度为0.56、特异度为0.87、符合率Kappa值为0.50.结论 Kobayashi评分体系的7个参数中AST≥100 U/L、外周血中性粒细胞%≥80%、CRP≥100 mg/L、年龄≤1岁被证明是中国KD患儿并发CAL的危险因素;该评分体系虽然可以预测中国KD患儿是否并发CAL,但能效不高.
作者:陈晶晶;刘亚黎 刊期: 2011年第06期
目的 研究异丙肾上腺素和高频率刺激对心衰心肌细胞晚发后除极(DADs)产生的影响以及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)途径在DADs产生中的作用.方法 制备家兔慢性心衰模型,酶解法分离心室肌细胞,将细胞分为正常对照组(Ctl组)、正常对照+异丙肾上腺素干预组(Ctl+ISO组)、慢性心衰组(CHF组)、慢性心衰+异丙肾上腺素干预组(CHF+ISO组)、慢性心衰+异丙肾上腺素干预+KN93干预组(KN93组).应用全细胞膜片钳技术记录动作电位(AP),采用含1 μmol/L 异丙肾上腺素的正钙蒂罗德液灌流心室肌细胞,在1~2 Hz电刺激下,诱发心肌细胞产生DADs.在此基础上用KN93(1 μmol/L)灌流心衰心肌细胞,观察CaMKⅡ的特异抑制剂KN93对DADs发生率、DADs的幅值、联律间期和发生个数的影响.结果 灌流正钙蒂罗德液,并在1 Hz电刺激下,Ctl组、Ctl+ISO组、CHF组、CHF+ISO组的DADs发生率分别为15.0%(3/20)、45.0%(9/20)、26.7%(12/45)、92.3%(36/39).以含1 μmol/L异丙肾上腺素和1 μmol/L KN93的蒂罗德液灌流心衰心肌细胞,在1 Hz电刺激下,KN93组的DADs诱发率为50%(7/14);再给予2 Hz的刺激,记录到DADs的幅值为(1.82±0.78)mV、联律间期为(524.62±390.91)ms、个数为(2.42±0.90).结论 异丙肾上腺素和高频率刺激均可诱发心衰心肌细胞DADs的产生;模型应激状态下,KN93可以抑制慢性心衰心肌细胞DADs,CaMKⅡ信号转导途径可能是慢性心衰触发性心律失常产生的重要途径.
作者:方雁;张存泰;刘念;蔡少艾;周仑;张敏 刊期: 2011年第06期
目的 研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制Aurora B基因表达对卵巢癌细胞A2780细胞紫杉醇化疗敏感性的影响.方法 采用RNAi方法,将不同浓度AURKB siRNA转入A2780细胞(实验组),同时设阴性对照组和空白对照组,并以不同浓度紫杉醇作用各组细胞.采用MTT检测细胞存活率;AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞内Caspase-3蛋白水平;Hoechst染色观察细胞凋亡.结果 A2780细胞转染不同浓度siRNA后,随着siRNA浓度增加,细胞存活率逐渐下降,至50 pmol/L时,实验组与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度紫杉醇处理各组细胞,随着紫杉醇浓度增加,细胞存活率明显下降,当紫杉醇浓度至10 μmol/L时,实验组与空白对照和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);50 pmol/L siRNA 转染A2780细胞48 h,再以10 μmol/L 浓度紫杉醇处理细胞,实验组细胞凋亡率明显增加,与空白对照组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);50 pmol/L浓度siRNA转染A2780 细胞48 h,再以10 μmol/L 浓度紫杉醇处理细胞,实验组细胞内Caspase-3蛋白表达明显上调,细胞凋亡明显增加.结论 Aurora B的抑制可增强A2780细胞对紫杉醇的化疗敏感性,并使细胞凋亡增加.
作者:任利容;梁铭霖;肖兰;王泽华 刊期: 2011年第06期
目的 研究宁夏地区回族人群原发性高血压(essential hypertension,EH)与血管紧张素Ⅱ1型受体(angiogenesis Ⅱ type 1,AT1R)基因A1166C多态性的关系.方法 采用病例-对照研究方法,选取宁夏地区回族146例原发性高血压患者和112例正常血压者分别作为病例组(EH 组)和对照组,应用多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)结合限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)方法对以上人群的外周血白细胞DNA进行AT1R(A1166C)的基因多态性检测,分析该位点不同基因型及等位基因频率在EH组和对照组中的分布.结果 EH组AA和AC基因型分布频率为88.36% 和11.64%,对照组中分别为93.75%和6.25%,两组相比差异无统计学意义(P>0.05),未发现CC基因型;A1166 与1166C 等位基因频率在EH 组中分别为94.18%、5.82%,在对照组中分别为96.87% 和3.13%,两组相比差异也无统计学意义(P>0.05).EH组和对照组不同性别间上述基因型的分布及等位基因频率差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 AT1R 基因A1166C多态位点分子变异与宁夏回族原发性高血压患者易感无明显相关性.
作者:马萍;陈丽娜;覃数;刘海燕;徐清斌 刊期: 2011年第06期
目的 探讨降低海马NO含量对凋亡相关因子的调节作用.方法 体内和体外实验均分为4组:生理盐水对照组(NS组),海人酸致痫组(KA组),氨基胍预处理+海人酸组(AG+KA组)和氨基胍组(AG组).采用免疫细胞化学法显示体外培养的海马神经元在不同处理因素作用24 h和48 h后bcl-2、bax的免疫反应性.采用Western blot法或半定量RT-PCR法检测各组大鼠造模后24 h、48 h时 bcl-2、bax蛋白及Apaf-1 mRNA的表达情况.结果 在体外实验中,KA组bcl-2的免疫反应较NS组减弱而bax的免疫反应增强;AG+KA组bcl-2的免疫反应较KA组增强而bax的免疫反应减弱;AG组与NS组相比无明显差异.体内实验中,Western blot检测显示大鼠海马组织中bcl-2和bax蛋白的表达水平呈负相关,其趋势与体外实验结果一致;半定量RT-PCR检测显示Apaf-1 mRNA的含量在造模后24 h和48 h时间点,KA组明显高于NS组(P<0.05),而AG预处理则明显拮抗KA诱导的Apaf-1 mRNA高表达.结论 降低NO含量可以上调bcl-2蛋白的表达,下调bax和Apaf-1 mRNA的表达.
作者:徐院花;唐振刚;李正莉;尧青 刊期: 2011年第06期
目的 探讨8-羟基二氢小檗碱对NIT-1细胞胰岛素分泌的影响及其机制.方法 采用不同浓度8-羟基二氢小檗碱干预NIT-1细胞后,以放射免疫法、液体闪烁计数法、酶法,分别检测其胰岛素水平、葡萄糖利用、葡萄糖激酶(GK)活性.结果 在低浓度葡萄糖(5.5 mmol/L)刺激下,与空白对照组相比,加入高浓度8-羟基二氢小檗碱(1.0 μmol/L)的NIT-1细胞胰岛素分泌增加、葡萄糖利用活跃,且GK酶活性增强(P<0.05);在高浓度葡萄糖(16.5 mmol/L)刺激下,与空白对照组相比,加入不同浓度8-羟基二氢小檗碱(0.5、1.0 μmol/L)的NIT-1细胞胰岛素分泌增加、葡萄糖利用活跃,且GK酶活性增强(P<0.01或P<0.05).结论 8-羟基二氢小檗碱能促进葡萄糖刺激下NIT-1细胞的胰岛素分泌,其机制可能与增加NIT-1细胞葡萄糖利用、增强GK酶活性有关.
作者:徐丽君;陆付耳;王增四;易屏;魏世超;董慧;邹欣 刊期: 2011年第06期
目的 探讨建立外周左向右分流的新型兔肺动脉高压模型的方法.方法 手术建立颈部、腋部、颈部+腋部分流模型,术后16及24周开胸测肺动脉压力,取心肺标本,行苏木精-伊红和Gomori's 醛复红染色,观察肺小动脉肌化程度及继发性右室肥厚.结果 术后16周颈部+腋部分流组的肺血流动力学指标、肺小血管肌化程度及继发性右室肥厚改变明显,24周时上述指标进一步加重;而24周时,颈部分流仅引起轻度肺动脉高压,腋部分流组未见改变.结论 较单纯颈部或腋部分流模型,颈部+腋部双分流是一种更为成功的分流型肺动脉高压模型.
作者:刘成珪;王永生;孟刘坤;肖亚琼;张凯伦 刊期: 2011年第06期
目的 应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对CD105的小片段RNA(siRNA)抑制CD105在体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中表达的情况,观察CD105沉默后对细胞生长的影响.方法 根据人的CD105 mRNA序列选择3个不同的靶位点,分别合成3条CD105 siRNA,并同时合成阴性对照和阳性对照siRNA.采用脂质体介导的基因法转染至体外培养的HUVECs中,采用RT-PCR检测各组细胞CD105表达水平,Western blot检测干扰前后CD105蛋白表达水平,并用MTT法检测人HUVECs的细胞活力.结果 RT-PCR和Western blot检测表明,3号CD105 siRNA能有效沉默CD105的表达,转染后的HUVECs中CD105 mRNA水平和蛋白表达水平明显下降.MTT结果表明CD105的下调导致了HUVECs活力的下降.结论 特异性的siRNA可以下调HUVECs中CD105 mRNA及蛋白表达水平,减低细胞活力.也提示CD105可能对体外培养HUVECs的生长有促进作用,CD105可以作为治疗新生血管的靶点.
作者:丁怡;张明昌 刊期: 2011年第06期
心脏骤停(caridiac arrest,CA)是心脏病危重并发症之一,其80%以上是由心室颤动(ventricular fibrillation,VF)所致[1].冠心病及其它心脏病、精神和躯体遭受巨大冲击都可导致心脏骤停.本实验旨在通过药物和介入方法建立大动物室颤模型,为临床心脏骤停后的心肺复苏研究提供可靠的室颤动物模型.
作者:林敬阳;屈百鸣;金钦阳;洪银维 刊期: 2011年第06期
目的 综合评价DYX1C1基因1249G>T多态性与阅读障碍易感性之间的关系.方法 全面检索相关文献,收集2011年8月前有关DYX1C1基因1249G>T多态性与阅读障碍易感性关系的病例对照研究及以家系为基础的传递/不平衡检验(TDT),采用Catmap软件包进行Meta分析.结果 该研究共纳入文献7篇.合并病例对照研究和TDT研究的Meta分析结果显示,合并后OR值为0.68(95%CI=0.28~1.65,P=0.394).亚组分析结果显示,病例对照研究合并后OR值为1.15(95%CI=0.74~1.79,P=0.522);TDT研究合并后OR值为0.31(95%CI=0.07~1.41,P=0.130).敏感性分析进一步表明该结果稳定性较好.结论 该研究提示DYX1C1基因1249G>T多态性与阅读障碍易感性不存在明显关联.
作者:杨俊;莫胜男;邹丽;宋然然;徐勇 刊期: 2011年第06期
目的 探讨口服避孕药(OC)预处理在有自发排卵的不孕患者体外受精/单精子卵胞浆内显微注射(IVF/ICSI)长方案中的价值.方法 回顾性分析1 668个新鲜周期,并根据降调前是否用OC预处理分为2组:A组为在长方案降调之前使用OC预处理组,B组为降调前未使用OC组.比较两组之间各参数及结局.结果 两组促性腺激素(Gn)用量及刺激天数、获卵数、受精率、卵裂率、妊娠率、流产率、反应不良取消周期率、功能性囊肿发生率均无统计学差异.但A组降调后血清雌激素(E2)值及HCG注射日内膜值低于B组,HCG日E2值以及因有卵巢过度刺激综合征(OHSS)风险取消新鲜周期移植的概率高于B组;35岁以上患者降调后激素水平及HCG日内膜值均低于B组,Gn用量大于B组.结论 使用OC预处理并不能降低功能性囊肿的发生率或者提高妊娠率,而且可能导致垂体抑制过度,在年龄偏大的患者中表现尤其明显.
作者:杨学舟;章汉旺 刊期: 2011年第06期
目的 构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染细胞蛋白27(ICP27)基因与pcDNA3.1(+)真核表达质粒的重组质粒pcDNA3.1(+)/ ICP27.方法 通过RT-PCR方法从HSV-2培养物中提取RNA制备ICP27的编码基因UL54 DNA,将其与载体pcDNA3.1(+)连接.通过双酶切和测序鉴定重组质粒是否构建成功,Western blot法鉴定重组质粒在真核细胞COS-7中表达.结果 重组质粒pcDNA3.1(+)/ ICP27构建成功,可在COS-7中表达.结论 成功构建了可在真核细胞内表达的pcDNA3.1(+)/ ICP27重组质粒,为下一步研究该重组质粒作为DNA疫苗的免疫学效应奠定了基础.
作者:李慎秋;梁宁;赵红磊;邹婕;谢春丽;蒋思 刊期: 2011年第06期
目的 研究玻璃化复苏囊胚移植后的妊娠结局与冷冻前囊胚质量、发育速度的相关性,探讨单囊胚移植的可能性.方法 回顾分析105例复苏周期单囊胚移植患者的临床资料,观察发育速度、囊胚质量、内细胞团(ICM)/滋养外胚层(TE)评分对妊娠结局的影响.结果 第5、6天囊胚间复苏后存活率、移植后妊娠率的差异均无统计学意义(98.0%,54.5% vs 97.0%,52.5%).优质囊胚移植后妊娠率(44/70,62.9%)显著高于非优质囊胚(12/35,34.3%).ICM评分为A、B级的囊胚移植后妊娠率差异无统计学意义(70.6% vs 58.0%),但均显著高于C级胚胎(21.1%).TE评分越低,妊娠率有下降趋势但差异无统计学意义.结论 复苏周期单囊胚移植妊娠率与囊胚质量有关,与囊胚发育速度无关.ICM评分而非TE评分与妊娠结果显著相关.复苏周期单个优质囊胚移植后妊娠率高,提示单囊胚移植可行.
作者:任新玲;章汉旺;刘群;陈雯;李豫峰;朱桂金 刊期: 2011年第06期