余琴;陈琼;黄焕军;宋宇虎;常莹;田德安;林菊生
作者: 刊期: 2009年第02期
目的 比较血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在子宫腺肌病异位内膜、在位内膜与子宫肌瘤正常内膜中表达的差异,探讨其在发病机制中的意义.方法 用免疫组化链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法(SABC法)检测31例子宫腺肌病患者的在位、异位内膜以及3l例子宫肌瘤患者正常内膜中2种因子的表达水平.分析同一内膜不同因子表达的相关性.结果 VEGF-C在在位内膜表达的平均吸光度值为(0.26±0.14),在异位内膜的表达值为(0.23±0.10),在正常内膜的表达值为(0.14±0.07),在位和异位内膜的表达均高于正常内膜(P<0.05),ICAM-1在在位内膜表达的平均吸光度值为(0.12±0.04),在异位内膜的表达值为(0.10±0.02),在正常内膜的表达值为(0.37±0.13),在位和异位内膜的表达均低于正常内膜(P<0.05).2种因子在在位内膜的表达均失去正常内膜所具有的相关性.结论 子宫腺肌病在位和异位内膜VEGF-C的过度表达和ICAM-1的低表达均可能与发病机制有关,在位内膜的改变在发病中起着重要作用.
作者:胡亚敏;郑红兵 刊期: 2009年第02期
目的 采用碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)构建组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valve,TEHV),并对其生物力学性能进行研究.方法 分离培养大鼠MSCs,进行细胞鉴定后种植于去细胞瓣叶支架上.将瓣叶置于含5 ng/ml bFGF的培养液中,分别培养7 d和14 d作为实验组A和实验组B.实验组C除培养液中不添加bFGF外,其余同实验组B.对照组为大鼠肌成纤维细胞构建的TEHV.对各组TEHV进行形态学观察,生化检测和生物力学测试.结果 MSCs表达CD29(94.82%)和CD44(93.59%).各组TEHV具有相似的形态结构,DNA和羟脯氨酸含量、大负荷、大应力、大应变和弹性模量的差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用MSCs和肌成纤维细胞构建的TEHV具有相同的生物力学性能,而采用bFGF联合MSCs体外构建TEHV能在更短的时间内获得相同的生物力学性能.
作者:洪昊;苏伟;董念国;史嘉玮 刊期: 2009年第02期
目的 研究糖基化磷脂酰肌醇特异性磷酯酶D(GPI-PLD)基因转染并过度表达对肺癌细胞株A549生物学特征的影响.方法 用脂质体转染法将GPI-PLD真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转入A549细胞,以未转染的A549细胞及转染空载体pcDNA3.1(+)的细胞为对照,筛选出阳性细胞克隆.以胎盘碱性磷酸酶(PLAP)为底物,定量检测GPI-PLD活性,RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平,细胞计数绘制生长曲线,锥虫蓝排斥法观察补体介导的细胞毒(CDC)杀伤率,分光光度法测定PLAP活性,ELISA检测癌胚抗原(CEA)的表达情况.结果 阳性细胞克隆GPI-PLD酶活性水平比对照组升高约3倍,GPI-PLD mRNA表达水平显著增加,GPI-PLD基因过度表达可促进GPI锚定的蛋白质如CEA和PLAP等被大量水解释放入培养液,导致细胞增殖能力减弱,对补体杀伤的敏感性增强.结论 成功将GPI-PLD基因转染入A549细胞,并在细胞中稳定表达.GPI-PLD过表达能抑制肿瘤细胞增殖,增强肿瘤细胞对补体杀伤的敏感性.
作者:石新云;黄明清;黄洁 刊期: 2009年第02期
目的 通过测定少弱精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide syn-thase traffic inducer,NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的表达,探讨其与少弱精子症发病的相关性.方法 采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例严重少弱精子症患者(病例组)和7例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN mRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物NO2-/NO3-水平.结果 病例组患者睾丸组织中NOSTRIN mRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.73±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增强(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为(48.56±8.49)μmol/L,较正常组(25.37±9.61)μmol/L显著升高(P<0.01)f病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01).结论 少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO2-/NO3-水平升高,可能与少弱精子症的发生有着相关性.
作者:相文佩;水丽君;温子娜;胡廉;熊承良 刊期: 2009年第02期
目的 观察胰岛素样生长因子-T(IGF-1)基因转染对胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白(myoglobulin)、肌动蛋白(actin)及心肌特异性肌钙蛋白-T(Troponin-T)表达的影响.方法 将含有IGF-1基因的真核质粒转染人大鼠胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中,采用免疫组织化学方法对心肌细胞内上述4种蛋白的表达进行检测.利用HPIAS-2000图像分析系统测定4种蛋白在各组中表达的平均吸光度值和平均阳性面积率.结果 IGF-1基因转染后的心肌细胞内上述4种蛋白的表达明显高于未转染的对照组(P<0.05).结论 IGF-1基因转染的心肌细胞较未转染的心肌细胞合成IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的能力增强,为IGF-1基因治疗心肌梗死提供了实验依据.
作者:杨虹;邓成国 刊期: 2009年第02期
目的 探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)中嵌顿性胆囊结石的处理方法.方法 回顾性分析腹腔镜手术治疗胆囊颈和壶腹部结石嵌顿患者456例的临床效果及并发症发生情况.结果 450例顺利完成腹腔镜胆囊切除术,6例中转开腹,患者均痊愈出院.结论 胆囊颈和壶腹部结石嵌顿行腹腔镜胆囊切除术是安全可行的.术前详细评估、明确诊断、熟练的腹腔镜操作技术、选择恰当的处理策略是关键.
作者:俞亚红;张先林;陈忠;丁志强;秦仁义;卢兴培 刊期: 2009年第02期
目的 分析<华中科技大学学报(医学版)>引文的数量特征及其蕴含的情报价值,揭示学报作者对文献信息的掌握及利用规律,为进一步提高<华中科技大学学报(医学版)>论文的学术质量提供量化依据和合理建议.方法 采用文献计量学方法,对2004~2006年18期<华中科技大学学报(医学版)>引文量、引文类型、引文语种进行定量分析,并计算其自引率及普赖斯指数.结果 3年引文率为100%,篇均引文8.32条.主要的引文类型分别为期刊(95.35%)、图书(4.27%)和特种文献(0.39%);引文语种主要是英语和汉语,各占79.96%和19.98%;自引率1.01%;普赖斯指数52.62%.结论 该刊的平均引文量已接近我国自然科学核心期刊论文的平均引文量;作者群具有较强的情报控制能力;自引率在稳步增加;普赖斯指数接近甚至超过平均值;英文期刊仍是主要的情报源.
作者:邹立君 刊期: 2009年第02期
目的 探讨藤黄酸对人B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)细胞系Raji细胞周期的影响及可能的信号通路.方法 采用碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞周期.免疫印迹检测Cyclin D3、Cyclin E和NF-кB蛋白表达.结果 藤黄酸能明显抑制Raji细胞增殖,呈剂量依赖性阻滞Raji细胞周期于G0/G1.期,下调Cyclin D3、Cyclin E和NF-кB蛋白表达.结论 藤黄酸通过抑制调节Cyclin D3和Cyclin E的表达,阻滞细胞周期进程,该过程可能与NF-кB传导通路有关.
作者:王勇;陈燕;吴小建;陈子;柯文娟;舒文秀;吴秋玲 刊期: 2009年第02期
目的 观察七叶内酯(esculetin)对大鼠血管平滑肌细胞(rVSMCs)增殖的影响并探讨其主要机制.方法 体外培养rVSMCs,观察不同浓度七叶内酯作用不同时间对rVSMCs增殖的影响.细胞计数及MTT检测rVSMCs的增殖;Western blot检测细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、蛋白激酶B(Akt)和Caspase-9的表达.结果 细胞计数和MTT结果均表明,随着药物浓度的增加(5、25、100μmol/L)和作用时间的延长(24、48、72 h),七叶内酯抑制rVSMCs增殖的作用逐渐增强,与空白对照组相比差异均有统计学意义;各浓度组七叶内酯均能显著抑制Akt、ERK1/2的磷酸化,促进Caspase-9的活化,并呈现出剂量依赖性.结论 在一定范围内,七叶内酯可呈剂量和时间依赖性抑制rVSMCs的增殖,其主要机制可能是抑制了Ras-Raf-MEK-ERK/MAPK和Ras-P13K-Akt信号转导通路.
作者:戴榕;郑琼莉;徐全胜;祝炜 刊期: 2009年第02期
目的 研究压力对体外培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)中神经微丝的影响,探讨高眼压性青光眼中细胞骨架蛋白的表达变化.方法 建立体外加压培养纯化的Sprague-Dawley(SD)乳鼠视网膜神经节细胞模型,采用抗大鼠Thy1.1单克隆抗体免疫荧光细胞化学染色法鉴定RGCs的纯度.将纯化培养的SD乳鼠RGCs分别在0、20、40、60及80 mmHg的压力下培养.免疫组织化学方法检测神经微丝蛋白-H(NF-H)的表达,并用图像分析系统对各组NF-H表达进行分析测定.结果 ①纯化后的视网膜神经节细胞纯度为96%.②压力为20 mmHg时,实验组RGCs中NF-H表达与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),且NF-H在视网膜神经节细胞中的分布相对均一;压力为40、60及80 mmHg时,实验组RGCs中NF-H表达与对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.01),且NF-H在视网膜神经节细胞中分布紊乱.结论 纯化的RGCs可以在体外存活并生长,一定的压力(≥40 mmHg)可影响RGCs中细胞骨架蛋白的表达.
作者:钟杰;张虹 刊期: 2009年第02期
目的 构建Livin靶向siRNA重组表达载体,研究其对人结肠癌细胞生长的抑制作用.方法 构建Livin靶向siRNA重组表达载体并转染结肠癌细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测Livin的表达.结果 经酶切鉴定和测序结果证实Livin靶向siRNA重组表达载体构建成功,它对结肠癌细胞Livin mRNA和蛋白的表达抑制率分别为30.18%和28.88%.结论 Livin靶向siRNA重组表达载体构建成功并能显著抑制Livin基因的表达.
作者:蔡明;王国斌;陶凯雄;蔡昌学 刊期: 2009年第02期
目的 探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断羊水间期细胞非整倍体的临床应用价值.方法 收集547例孕妇中唐氏综合征筛查阳性者28例及3例具有其他产前诊断指征的孕妇,共计31例患者的羊水,应用13/21号染色体特异性双色探针对羊水间期细胞进行FISH检测,以羊水培养细胞常规G显带核型分析作为FISH检测结果对照.结果 31例标本中1例发生母血严重污染,其余30份标本均杂交成功(包括1例混浊羊水).FISH检测结果发现典型21三体1例,未发现13三体.FISH诊断结果与核型分析结果一致.结论 FISH产前诊断羊水间期细胞非整倍体准确率与核型分析一致,与核型分析相比,FISH具有快速、所需样本量少且结果直观易辨的优势,有较高的临床应用价值.
作者:夏革清;张丽萍;谢宝国;吴超英 刊期: 2009年第02期
目的 探讨在感染相关的肺透明膜病发病中是否有维甲酸受体α(retinoic acid receptor-α,RARα)异常的机制参与以及全反式维甲酸(all trans-retinoic acid,ATRA)对脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)引起的A549细胞肺泡活性蛋白-B(surfactant protein B,SP-B)表达下调是否有干预作用.方法 将体外培养的人肺腺癌细胞A549分为①对照组:用无血清DMEM培养液培养;②LPS组:含10μg/ml LPS无血清DMEM培养液培养24 h;③LPS+ATRA治疗组:10μg/ml LPS培养24 h,再加入1 μmol/ml ATRA培养24 h;④ATRA+LPS预防组:1 μmol/ml ATRA培养24 h,再加入10μg/ml LPS培养24 h.应用免疫细胞化学方法(SP法)检测各组A549细胞中SP-B、RARα的表达及分布情况.结果 LPS组A549细胞胞质中SP-B表达较对照组明显减弱(P<0.05);RARα胞核内表达减弱而出现明显胞质内表达(P<0.05).LPS+ATRA治疗组SP-B表达与对照组比较表达强度相近(P>0.05);RARα表达强度及细胞内定位与对照组表达无明显变化(P>0.05).ATRA+LPS预防组A549细胞质中SP-B表达明显减弱;胞核中RARα的表达明显减弱,而胞质内表达增强,与LPS组结果一致(P>0.05).结论 LPS可引起A549细胞SP-B蛋白水平下调.其机制可能与LPS引起RARα表达和细胞内分布异常有关;ATRA可能通过诱导RARα核内表达而干预LPS引起的A549细胞SP-B表达下调;预先给与ATRA不能减轻LPS引起的A549细胞SP-B蛋白水平下调.
作者:张荣辉;吕晶;李娜萍 刊期: 2009年第02期
目的 探讨利用甲基化酶抑制剂(肼屈嗪)和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(丙戊酸)干预胆管癌细胞后,对P16和RASSFIA基因表达的影响.方法 将胆管癌细胞QBC939分为4组,丙戊酸组、肼屈嗪组、两药合用组以及空白组,分别以相应药物(终浓度10 mmol/L)作用48 h.空白组加入等量的含10%血清的RPMI 1640培养液.利用PCR、Westernblot和甲基化特异性PCR检测处理后的P16、RASSF1A基因及蛋白的表达和它们启动子区甲基化状态.结果 空白组P16基因及蛋白微量表达,RASSF1A基因及蛋白无表达;单用丙戊酸不能使两基因mRNA及蛋白表达增加,而单用肼屈嗪可以增加两基因mRNA及蛋白表达,两种药物合用使两基因mRNA及蛋白表达量明显高于单用一种药物组(均P<0.01);单用肼屈嗪、两药合用分别可使P16基因和RASSF1A基因启动子区部分和完全去甲基化,而单用丙戊酸无此效果.结论 两种药物在恢复沉默抑癌基因表达上有协同作用,有望成为胆管癌治疗的新选择.
作者:李宏;陈绍勤;舒艺;陈勇军;邹声泉 刊期: 2009年第02期
目的 研究线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)对哮喘气道平滑肌细胞(ASMCs)表型转化的影响.方法 腹腔注射和雾化吸人制备哮喘大鼠模型.取哮喘及正常大鼠ASMCs,分为以下6组进行干预:正常对照组;正常+mi-toKATP开放剂diazoxide组;正常+mitoKATP阻断剂5-HD组;哮喘对照组;哮喘+diazoxide组;哮喘+5-HD组.激光共聚焦显微镜检测各组ASMCs R-123荧光强度以反映线粒体膜电位(△ψm),Western blot法检测各组细胞α一肌动蛋白(ractin)表达量.结果 ①与正常对照组比较.哮喘对照组R-123荧光强度明显增强,α-actin表达明显下调(均P<0.05).②diazoxide干预ASMCs 24 h后.正常及哮喘ASMCs R-123荧光强度均明显增强(均P<0.05);正常ASMCs α-actin表达量无明显变化(P>0.05).但哮喘ASMCs α-actin表达量明显增加(P<0.05).结论 diazoxide引起mitoKATP开放,并逆转哮喘ASMCs由收缩型向合成型发生的表型转化.
作者:赵建平;叶永军;高敏;胡伟华;周志刚 刊期: 2009年第02期
目的 探讨后腹腔镜治疗肾囊肿时结合使用硬化剂,以减少肾囊肿复发率.方法 不同硬化剂体外处理肾囊肿壁,观察不同时间段囊肿壁硬化效果,选择适当硬化剂.86例单纯性肾囊肿,其中单纯采用后腹腔镜去顶术38例,采用后腹腔镜去顶术并术中结合硬化剂治疗48例.平均随访时间22个月(6~36个月),B超复查囊肿大小.结果 单纯采用后腹腔镜去顶术组平均手术时间(36.6±15.3)min,住院时间(5.3±1.6)d,长期随访复发4例(复发率10.5%);采用后腹腔镜术中结合硬化剂组平均手术时间(38.2±13.8)min,住院时间(5.6±1.4)d,长期随访无复发.结论 肾囊肿后腹腔镜去顶术中结合使用硬化剂,除具有创伤小、出血少和康复快等优点外,能有效降低远期复发率.
作者:李运柱;李文洲;陈琳;余家俊;彭松;胡卫锋;李国灏;冯滔;张伟;郭枫 刊期: 2009年第02期
目的 评价实时超声造影对脂肪肝背景下肝脏局灶性病变(FLL)的诊断价值.方法 采用低机械指数实时谐波超声造影技术,对常规超声不能确诊的脂肪肝背景下的69个局灶性病变进行了超声造影检查,将超声造影结果同增强CT、增强MRI及病理诊断进行对比,分析超声造影检查的诊断价值.结果 超声造影检查后,1例肝紫癜被误诊,1例肝血管瘤被误诊.超声造影对恶性FLL的敏感性、特异性、诊断符合率分别为100%(9/9)、96.7 %(58/60)、97.1%(67/69).结论 超声造影可作为脂肪肝背景下FLL鉴别诊断的重要方法.
作者:邓远;李开艳;罗鸿昌;陈云超 刊期: 2009年第02期
目的 改良氯化金髓鞘染色方法并且证明该方法可用于髓鞘染色的定性、定量分析.方法 采用7、14、21日龄的新生正常SD大鼠,各5只;APP/PS1小鼠(阿尔茨海默病动物模型)5只和PS1小鼠(无淀粉样蛋白沉积的阴性对照正常小鼠模型)6只.断头取脑处理后冰冻切片机切片,用改良的氯化金染色方法对脑组织切片染色.直接在光学显微镜下观察髓鞘染色效果,测定目标区域平均吸光度值,进行髓鞘化定量分析比较.结果 新生7 d大鼠髓鞘化染色阴性,21 d大鼠的髓鞘化程度比14 d大鼠的髓鞘化程度明显增高.APP/PS1组小鼠可观察到病理性髓鞘染色,定量分析显示其目标区域平均吸光度值低于PS1组,APP/PS1组存在明显的脱髓鞘改变.结论 改良的氯化金髓鞘染色快速、简单、敏感、稳定,可进行髓鞘化定性、定量分析.
作者:陈寒;唐荣华;唐洲平;郭守刚;占传家 刊期: 2009年第02期
目的 研究解偶联蛋白-2(uncoupling protein-2,UCP-2)基因在肝细胞急性损伤过程中的作用.方法 构建小鼠UCP-2基因过表达慢病毒载体;二步胶原酶灌注法分离培养小鼠原代肝细胞;慢病毒感染肝细胞,使肝细胞中UCP-2基因表达上调;荧光显微镜镜检确定感染效率.Real time PCR检测UCP-2表达;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于病毒感染肝细胞24 h后.检测细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;碘化丙啶(PI)染色流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡因子Caspase 3的活化.结果 Real time PCR检测证实目的 细胞中UCP-2表达上调;TNF-α作用后病毒感染的实验组上清液中ALT和LDH水平、细胞凋亡率、凋亡因子Caspase 3活化程度均高于对照组(均P<0.05).结论 UCP-2基因过度表达可加重肝细胞急性损伤.
作者:万赤丹;程锐;王春友;王宏博;王帅;刘涛 刊期: 2009年第02期