徐逸;朱舟;吴轲;曾宁;田学俾;陈忠华
目的 探讨乙酰胆碱(ACh)对人心房肌的脱敏作用及其机制.方法 取30例心脏手术患者的右心耳,部分用酶解法分离成单细胞,分别应用标准微电极技术、肌力换能器和全细胞膜片钳技术记录组织动作电位、心肌收缩力和单细胞乙酰胆碱敏感钾电流(IK,ACh),并观察乙酰胆碱的作用.结果 10 μmol/L乙酰胆碱可降低心房肌收缩力,缩短动作电位时程,随着时间推移效应逐步减小,即出现脱敏现象.乙酰胆碱敏感钾电流(IK,ACh)出现类似的脱敏现象.结论 ACh降低心房肌组织收缩力的作用有脱敏现象,脱敏的发生可能与心房肌细胞动作电位时程(APD)的脱敏及IK,ACh的脱敏有关.
作者:张昌伟;水志刚;孙宗全;刘金平;夏家红;师智勇 刊期: 2008年第06期
目的 探讨肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中存在血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的肿瘤组织E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)与无VM生成的肿瘤组织E-cad的表达情况,初步探讨恶性肿瘤VM的生成特点,存在VM结构的肿瘤易于复发和转移及与VM可能相关的原因.方法 收集手术切除的肝细胞肝癌标本40例,制作石蜡切片,进行Hepatocyte、CD31免疫组化染色,筛选出存在VM的肿瘤病例,并对40例病例标本进行E-cad免疫组化染色及进行吸光度分析.对存在VM结构的肿瘤标本进行连续切片,E-cad免疫组化染色,对管道状VM及血管不同层面行吸光度分析,观察VM表达E-cad的连续性特征.结果 17.50%(7/40)的HCC存在VM,VM阳性组较VM阴性组HCC的E-cad表达明显下降,其差异存在统计学意义(P<0.01).VM结构较内皮性血管周围HCC的E-cad表达亦明显下降,其差异亦存在统计学意义(P<0.05).结论 HCC E-cad表达的下降,使恶性肿瘤细胞更易经拟态血管发生血道转移,同时使肿瘤细胞间附着结构松散.细胞间更易发生解离及自身细胞变性,提示内皮性肿瘤血管与VM分属不同的形成机制.
作者:安丹;柴新群;冯贤松 刊期: 2008年第06期
目的 研究大鼠体神经-内脏神经吻合以及体神经-体神经吻合术后生长相关蛋白(GAP-43)与微管相关蛋白(TAU)在脊髓前角运动神经元中的表达变化规律与差异,进一步探讨影响异类神经元再生的相关因子.方法 建立大鼠人工体神经-内脏神经吻合动物模型(模型组)和体神经-体神经吻合动物模型(模型对照组),用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别观察正常组和模型对照组、模型组术后3、7、14、28、60和90 d时脊髓腰4(L4)运动神经元的GAP-43与TAU的mRNA表达水平变化.结果 模型组和模型对照组大鼠L4运动神经元中GAP-43和TAU mRNA表达水平术后第3天时开始均较正常动物增高.7 d时模型组GAP-43 mRNA达高峰,持续高表达状态至28 d后逐渐降低,至90 d降至正常水平,而模型对照组在14 d时达高峰.持续高表达,90 d降至正常水平.TAU在正常动物Lt运动神经元中表达较少,在模型组14 d时表达达高峰,模型对照组在28 d达高峰,90 d时降至正常水平.结论 大鼠人工体神经-内脏神经反射弧建立后脊髓L4前角运动神经元GAP-43及TAU持续高表达状态,提示异类神经元再生和突触重建过程的进行,其表达变化过程与异类神经元成功再生的过程极为吻合.而大鼠人工体神经-内脏神经及体神经-体神经吻合后GAP-43和TAU表达趋势上的差异可能与神经再生过程中的微环境差异和支配靶器官的改变有关.
作者:李迪;肖传国;李兵;陈朝辉;韩晓敏 刊期: 2008年第06期
目的 探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)小干扰RNA对缺氧/复氧诱发的大鼠心肌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 分离的大鼠心肌细胞在PTP-1B小干扰RNA转染后培养24 h.然后缺氧处理4 h,再复氧6 h(4H/6R).心肌细胞的凋亡用TUNEL染色法测定;Western blot检测心肌细胞PTP-1B和磷酸化Akt的表达水平;比色法衡量凋亡酶Caspase 3和Caspase 8的活性;共免疫沉降法检测与Fas受体结合的PTP-1B的数量.结果 缺氧/复氧的处理不仅严重损伤了培养的大鼠心肌细胞,同时也上调了心肌细胞PT-lB蛋白的表达水平;PTP-1B小干扰RNA显著地减少了缺氧/复氧诱发的心肌细胞凋亡,PTP-1B小干扰RNA组与阴性对照组的凋亡指数分别为:(12.1±1.4)%和(23.2±1.6)%,P<0.05;与阴性对照组比较,PTP-1B小干扰RNA显著增加了Akt的磷酸化水平.抑制了Caspase 3和Caspase 8的酶活性,同时降低了PTP-1B与Fas受体的结合.结论 PTP-1B是一个缺氧/复氧(4H/6R)诱发的心肌细胞凋亡的关键调节因子,针对PTP-1B的小干扰RNA可有效地抑制心肌细胞的损伤.其机制可能与增加的Akt磷酸化水平,凋亡酶Caspase 3和Caspase 8的酶活性被抑制,以及PTP-1B与Fas受体结合的减少相关联.
作者:宋慧文 刊期: 2008年第06期
近年来先天性心脏病的介入治疗发展迅速,特别是继发孔型房间隔缺损(ASD)介入封堵术已经成为行之有效的治疗方法[1].我院自2004年8月至2008年3月共施行继发孔型ASD介入治疗35例,现总结如下.
作者:马可忠;严晓娟;刘娟;朱锐;沈青山 刊期: 2008年第06期
毛细支气管炎是婴幼儿常见的下呼吸道感染,病情多较严重,其心肌钾水平的相关研究报道较少.
作者:黄小力;文红霞;陆小霞 刊期: 2008年第06期
目的 通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率.方法 取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法 ,小量提取制备质粒DNA,以凝胶电泳、紫外分光光度计及酶切验证提取效果.结果 在NaOH浓度为0.10 mol/L下,不可逆变性条带基本得到消除,超螺旋DNA的提取纯度和得率均得到明显提高.结论 改变溶液Ⅱ的碱性条件,可以制备高质量的质粒DNA.
作者:黄南;程熠;连欢;张述;李卓娅 刊期: 2008年第06期
目的 观察顺铂作用下A549细胞的细胞周期变化规律和Chk1、Chk2(Chk1/2)反义寡核苷酸(AsODN)对顺铂(DDP)诱导的A549细胞生物学行为的影响.方法 流式细胞术SubG1法检测DDP作用下A549细胞周期和凋亡的动力学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测转染Chk1/2AsODN后Chk1/2蛋白的表达;流式细胞仪Amexin V-FITC法和SubG1法检测转染Chk1/2 AsODN后DDP作用下的细胞周期和凋亡变化.结果 10ümol/L DDP作用12 h后A549细胞出现明显的S期阻滞,Chk1/2 AsODN对A549细胞中Chk1/2蛋白表达有明显抑制作用.转染Chk1/2 AsODN可显著增加DDP诱导下A549细胞的凋亡率约200%~300%,而联合转染Chk1/2 AsODN与单转染相比,凋亡无明显增加(P>0.05).转染Chk1/2 AsODN引起化疗增敏的机制是通过解除S期阻滞这种肿瘤细胞的自我保护机制实现的.结论 Chk1/2可作为肺癌化疗药物增敏治疗的有效靶点,灭活Chk1/2基因可以显著增强肿瘤细胞化疗的敏感性.
作者:叶飞;高庆蕾;黄晓园;谢大兴;卢运萍;周剑锋 刊期: 2008年第06期
目的 探讨脂氧素A4[5(S),6(R)-Lipoxin A4,LXA4,]对同种异体心脏移植物存活的影响.方法 通过Heron法建立小鼠颈部同种异体心脏移植模型.移植鼠30只随机分为两组:生理盐水对照组(对照组)和LXA4用药组(LXA4组),检测术后第5天移植心肌细胞凋亡指数和血清中IL-12含量,观察移植心存活时间和病理变化.结果 与对照组相比,LXA4组显著降低了移植心急性排斥期心肌细胞凋亡和IL-12的含量.延长了移植物的存活时间,减轻了移植物炎症细胞的浸润.结论 LXA4可以减轻移植心心肌细胞凋亡,延长移植心的存活时间.
作者:柯有力;肖诗亮;刘成硅;肖雅琼;杨超;彭岚刚 刊期: 2008年第06期
目的 建立海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系,为评价海洛因成瘾者参加美沙酮维持治疗效果提供技术支持.方法 运用文献分析法和专家咨询法进行指标的筛选,应用层次分析法计算各级指标的权重.结果 构建了海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系并确立了各级指标的权重.结论 在海洛因成瘾者美沙酮维持治疗效果评价指标体系研究中,专家咨询法和层次分析法是科学和可行的方法 .
作者:彭佳林;李翠;徐娟;方鹏骞 刊期: 2008年第06期
目的 分析武汉地区汉族人群D1S518、D4S2639、D15S817 3个短串联重复序列(STR)基因座遗传多态性,探讨其在法医学检验中的应用价值.方法 应用PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及银染显带等技术,对各样品进行3个STR基因座分型,调查武汉地区汉族人群3个STR基因座遗传多态性基因频率分布.结果 D1S518基因座观察到8个等位基因,24个基因型;D4S2639基因座观察到9个等位基因,32个基因型;D15S817基因座观察到7个等位基因,18个基因型,3个STR基因座的杂合度分别为0.754 7、0.816 5、0.760 2;多态性信息含量分别为0.729 0、0.756 8、0.722 2.结论 D1S518、D4S2639、D15S817 3个STR基因座基因频率分布与Hardy-Weinberg平衡吻合良好,在武汉地区汉族人群中呈现较高的遗传多态性,属于高信息度遗传标记.
作者:杨荣芝;梅焜;余纯应;杨庆恩 刊期: 2008年第06期
目的 应用应变率成像技术研究糖尿病及糖尿病前期患者的左室收缩功能.方法 确诊为糖尿病的患者49例;糖尿病前期者43例;正常对照组55例.启用定量组织多普勒及应变率功能,测量心肌各节段收缩期运动速度(Sa)及应变率(SRs),反映心肌收缩功能.结果 3组患者中各节段心肌的Sa与SRs成正相关(P<0.05).糖尿病组及糖尿病前期组心肌收缩功能较正常组降低(均P<0.05).糖尿病患者心肌的受损程度较糖尿病前期组高(P<0.05).糖尿病发展到了晚期,心脏整体收缩功能才会发生改变.结论 应变率成像具有较高的敏感性,可早期预测糖尿病心肌收缩功能的受损.
作者:陆永萍;邓又斌;黄燕玲;张华莉;于飞;吕燕芬;朱昆生 刊期: 2008年第06期
目的 观察维生素A酸(RA)对体外培养小鼠囊胚细胞毒性作用.方法 获取妊娠3.5 d小鼠囊胚,分别在含0、1和10 ttmol/L RA的M199培养液中培养24 h,用荧光染料Propidium(PI)和Bisbenzimide(Hoechst 33258)特异性染色,分别计数囊胚内细胞总数以及内细胞群(ICM)和滋养层(TE)细胞数.结果 RA可导致小鼠囊胚内细胞总数以及ICM和TE细胞数减少.结论 RA对小鼠早期胚胎的发育具有细胞毒性作用,从而影响早期胚胎的生长发育.
作者:熊彦娥;张端莲 刊期: 2008年第06期
目的 比较Pinl抑制剂(Juglone)和环磷酰胺(CTX)对4株宫颈癌细胞生长的影响,以探讨Juglone的抗肿瘤作用.方法 体外培养人宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C33a以及Caski,用细胞生长曲线和MTT试验观察细胞生长状况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot和比色法检测Caspase 3蛋白表达及活性.结果 细胞生长曲线和MTT试验均表明,Juglone对4株宫颈癌细胞生长有明显的抑制作用,且抑制作用随作用浓度和作用时间增加而增强.流式细胞仪检测表明,Juglone(50 μmol/L)培养24 h后,G2/M期细胞比例数较CTX组明显增加.而G0/G1期细胞比例数却较CTX组降低.Western blot和比色法显示Juglone各浓度组中Caspase 3活性明显高于CTX组.结论 Juglone可能通过体外抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡等途径抑制肿瘤的发展.
作者:钱颖;董卫红;贺晓琪;王泽华 刊期: 2008年第06期
目的 研究标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗,对尘螨过敏变应性鼻炎患者的疗效及安全性.方法 73例尘螨过敏为主的变应性鼻炎患者,随机分为舌下含服免疫治疗(sublingual immunotherapy,SLIT)+药物组及单纯用药组.SLIT+药物组以标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗,辅以对症药物治疗;单纯用药组以糠酸莫米松鼻喷剂及氯雷他定片对症治疗.每月回访1次共随访半年.观察并记录治疗后症状得分、药物评分及不良反应情况.半年后综合评价患者主观症状、用药及治疗满意度情况.结果 SLlT+药物组与单纯用药组相比,其半年后症状得分、药物评分改善情况均明显高于单纯用药组.患者主观评价症状、用药及治疗满意度亦明显高于单纯用药组.同时,SLIT+药物组有部分患者出现了一定程度的不良事件.结论 标准化粉尘螨滴剂舌下含服免疫治疗对尘螨过敏变应性鼻炎患者症状得分及药物评分改善极为显著,但对治疗中的不良反应应给予充分关注.SUT长期疗效及不良反应情况尚需进一步观察.
作者:陈建军;孔维佳;项济生;舒宏;施秋梅;檀慧芳;周月 刊期: 2008年第06期
目的 探讨建立紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型的可行性.方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,各组均在第1、3、5、7天腹腔注射紫杉醇,剂量分别为0、0.5,1.0、2.0 mg/(kg·d).分别于用药前和用药后第3、5、7、12、16、20和25天测定大鼠的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL),用药后第20天采用透射电镜观察坐骨神经超微结构.结果 腹腔注射紫杉醇1.0 mg/kg组大鼠早在用药的第5天出现机械痛敏和热痛敏,机械痛阈在用药的第12天达到小.而热痛阈在用药的第16天达到小.腹腔注射紫杉醇1.0 mg/kg组大鼠的坐骨神经纤维髓鞘板层结构松散、肿胀变形、排列紊乱、厚薄不均.结论 使用SD大鼠重复腹腔注射1.0 mg/kg紫杉醇的方法 可以成功建立紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型.
作者:陈治军;田玉科;罗放;曹菲;王平 刊期: 2008年第06期
目的 探讨低血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平与正常水平的小鼠乳腺癌模型中,应用人参皂甙(GS)Rg3后IGF家族及血管生长因子相关基因的变化.方法 7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导肝脏特异性IGF-I基因敲除(LID)鼠及对照鼠建立原发性乳腺癌模型,应用GSRg3进行干预治疗,利用基因芯片技术检测小鼠乳腺肿瘤及正常组织中相关基因的差异表达.结果 ①LID鼠组小鼠的肿瘤发生时间、生长速度及大小均低于对照组;②IGF家族及血管生长相关基因的变化:LID鼠组肿瘤组织中IGF-I、IGFBP-4、IGFBP-7、FGF-1、FIGF、Ang-1、HGF、TGF-81基因较对照组上调,IGF-11、IGF-ⅡR、IGFBP-2、IGFBP-3、IGFBP-5、FLT-1、Ang-2、FGFR-2、PDGFa、PDGFb、THBS-1、Co118al基因较对照组下调;应用GSRg3组IGF-I R、IGF-ⅡR、IGFBP-2、IGFBP-3、IGFBP-5、VEGFa、Ang-2、EGF、EGFR、PDGFa、FGFR-2、THBS-1、Coll8al基因较对照组上调,而IGF-I、IGFBP-4、IGFBP-7、TEK、TGF-81基因较对照组下调.结论 IGF-I促进小鼠乳腺癌的发生发展,且与血管生长密切相关,GSRg3可能通过IGF-I及其结合蛋白、TEK、TGF-β1、THBS-1及Col18al发挥抗肿瘤作用.
作者:任玉萍;叶子荣;唐泓波;张军;高峰;吴毅平 刊期: 2008年第06期
目的 研究丹参酮对拟人类阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VD)2种模型大鼠学习、记忆功能障碍的改善作用.方法 ①实验动物随机分成5组:痴呆(AD/VD)模型组、丹参酮治疗组、假造模对照组和正常对照组,VD模型组:应用改良的大脑中动脉线栓塞(MCAO)法建模;AD模型组:应用D-半乳糖腹腔注射和海马内注射β-淀粉样肽蛋白片段1-40(Aβ1-40)复合造模方法 建模.丹参酮治疗组:VD大鼠造模完成后或AD大鼠造模24 h后给予丹参酮[50 mg/(kg·d)3,溶于5 ml玉米油中灌胃14 d.假造模对照组:与VD大鼠同法.但不做插线、结扎;与AD大鼠同法注射等量溶媒.正常对照组:大鼠不做任何处理.②采用水迷宫行为学实验,以单位时间逃避潜伏期及其频率为指标,测定大鼠空间学习、记忆功能.结果 ①AD/VD大鼠逃避潜伏期明显延长,逃生错误频率高,与两个对照组比较差异均有显著性意义.②丹参酮治疗组大鼠较痴呆模型组逃避潜伏期明显缩短,逃生错误频率减低,差异有统计学意义.结论 ①2种痴呆大鼠模型具有较好仿真人类AD/VD的特点.②丹参酮对AD/VD具有一定的治疗作用.
作者:李林;夏保芦;茹立强 刊期: 2008年第06期
目的 初步探讨辐射效应诱导下乏氧人宫颈癌细胞系HeLa细胞乏氧诱导因子-lα(HIF-lα)和DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)表达相关性及其调控机制.方法 免疫印迹法检测乏氧状态下HeLa细胞接受射线照射后HIF-lα和DNA-PK(包括DNA-PKcs及Ku80)表达情况;运用靶向抑制HIF-lα或DNA-PKcs的小发卡样干扰RNA(shRNA)表达质粒分别转染乏氧HeLa细胞,经辐射诱导后检测不同时间点各自DNA-PKcs或HIF-lα表达的变化.结果 乏氧HeLa细胞经辐射诱导后0、12、24、48 h时间点检测到HIF-lα、DNA-PKcs和Ku80表达随时间增加逐渐增高,其中HIF-lα和DNA-PKcs的相对表达量呈正相关(r=0.816,P=0.041);运用HIF-lα-shRNA表达质粒明显抑制乏氧HeLa细胞内HIF-lα表达,检测到细胞经照射后12、24、48 h时间点DNA-PKcs的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);而pDNA-PKcs-shRNA表达质粒抑制DNA-PKes表达后检测各时间点HIF-lα的表达与转染空白质粒的阴性对照组相比均明显减少(P<0.05).结论 辐射诱导乏氧HeLa细胞内HIF-lα表达与DNA-PKcs的表达水平相关;通过抑制DNA-PKcs的表达能显著降低乏氧HeLa细胞HIF-lα表达水平,对HIF-lα的调控机制提出新的思路.
作者:熊华;于世英;袁响林;邹燕梅;庄亮 刊期: 2008年第06期
目的 研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXCR4轴在骨髓间充质细胞迁徙到梗死心肌中的作用.方法 全骨髓贴壁法培养骨髓间充质细胞,结扎SD大鼠左前降支制作急性心肌梗死模型并制备正常和梗死心肌组织提取液,利用Boyden小室体外迁移体系观察不同浓度SDF-1和心肌组织提取液对骨髓间充质细胞的趋化作用,及AMD 3100处理骨髓间充质细胞对心肌组织提取液趋化骨髓间充质细胞的影响.结果 成功培养了骨髓间充质细胞并建立了大鼠急性心肌梗死模型.SDF-1对骨髓间充质细胞有剂量依赖性的趋化作用,梗死1周的心肌组织提取液对骨髓间充质细胞有明显的趋化作用.而这种作用可部分被SDF-1受体CXCR4的阻断剂AMD 3100抑制.结论 梗死心肌组织提取液对骨髓间充质细胞有明显的趋化作用,SDF-1/CXCR4可能是梗死心肌组织提取液中趋化骨髓间充质细胞的主要趋化因子/受体对.
作者:陈军;张凯伦;杜心灵;李师亮 刊期: 2008年第06期