刘海霞；周雄武
目的探讨P38蛋白激酶和核因子κB(NF-κB)在脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达过程中的调控作用. 方法分离培养大鼠肺泡巨噬细胞,设正常对照组,LPS刺激组,P38蛋白激酶抑制剂SB203580干预组(SB203580+LPS组).分别采用免疫组织化学、RT-PCR、Western blot及Griess方法检测NF-κB、iNOS mRNA、核蛋白P38的表达以及培养上清NO含量.结果 LPS刺激组核蛋白P38、胞核NF-κB染色阳性细胞百分比、iNOS mRNA的表达以及培养上清NO含量均较正常对照组显著升高(P<0.01);加入SB203580干预后上述指标均显著降低,与LPS刺激组相比差异均具有极显著性意义(P<0.01).核蛋白P38的表达与胞核NF-κB染色阳性细胞百分比、iNOS mRNA以及培养上清NO含量均呈显著正相关(r=0.862,0.569,0.715,均 P<0.01),胞核NF-κB染色阳性细胞百分比与iNOS mRNA的表达以及NO的产生亦呈显著正相关(r=0.653,0.597,均P<0.01).结论 LPS刺激肺泡巨噬细胞P38活化可上调胞核NF-κB、iNOS mRNA和NO的表达;NF-κB可能是P38信号途径下游的重要位点之一.
作者：黄翠萍；张珍祥；徐永健 刊期： 2005年第02期
目的探讨膀胱移行细胞癌组织中核因子κB(NF-κB)和尿激酶纤溶酶原激活剂(uPA)的表达及相互关系.方法采用免疫组化二步法对38例膀胱移行细胞癌和10例非癌膀胱粘膜标本中NF-κB p65和uPA蛋白的表达进行测定,分析其与肿瘤临床病理学特征的关系及内在联系.结果 NF-κB p65和uPA蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达显著高于非癌膀胱粘膜(均P<0.01);NF-κB p65和uPA蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达具有相关关系(r=0.89,P<0.01);NF-κB蛋白的组成性活化与膀胱癌淋巴结转移(P<0.01)和病理分级(P<0.05)有关;uPA蛋白的表达与膀胱癌浸润深度(P<0.05)、病理分级(P<0.05)和淋巴结转移(P<0.01)有关.结论 NF-κB的组成性活化和uPA的高表达与膀胱癌的临床病理学特征有关,NF-κB可能通过调控uPA的合成促进肿瘤的进展,可能是未来膀胱癌治疗中的一个重要靶点.
作者：文博；杨为民；周四维；鲁雄兵；张世林；陈春莲 刊期： 2005年第02期
目的观察小檗碱(berberine, Ber)对离体兔阴茎海绵体平滑肌条的舒张效应,探索其作用机制.方法采用离体平滑肌张力变化记录技术观察Ber对离体兔海绵体肌条的作用.结果在离体兔阴茎海绵体平滑肌标本上①Ber、西地那非(sildenafil,Sild)、罂粟碱(papaverine, Pap)及氨力农(amrinone, Amr)均可浓度依赖性地引起舒张效应,其作用强度依次为Sild>Ber>Pap＞Amr,EC50分别为0.84,6.20,15.00和27.69 μmol/L.②当NO合酶抑制剂L-NAME (0.1 mmol/L)存在时,Ber的大舒张效应由100.0 %降低到(84.0 ± 3.4)%.当同时加入L-Arginine(1 mmol/L)时,可部分对抗L-NAME的作用,Ber对海绵体的大舒张效应可恢复到(96.0 ± 4.5)%.③Ber (1,10 μmol/L) 浓度依赖性地增强乙酰胆碱(ACh)引起的舒张效应,ACh的大效应分别由(72.0 ± 3.6)% 升高到(81.0 ± 5.4)% 或(93.0 ± 6.3)%.④Ber(1,10 μmol/L)对KCl 去极化引起的收缩反应的作用微弱(P＞0.05).结论 Ber对兔阴茎海绵体具有浓度依赖性舒张作用,其机制与影响NO-cGMP信号通路有关.
作者：谭艳；汤强；胡本容；向继洲 刊期： 2005年第02期
目的研究IL-18抗柯萨奇B3病毒(Coxsackie B3 virus,CVB3)的作用.方法将心肌细胞分为4组.感染组:用CVB3感染心肌细胞;干预组:心肌细胞感染病毒后加入IL-18(4～30 ng/ml);IL-18组:正常心肌细胞加入IL-18(8 ng/ml);对照组:正常心肌细胞.观察培养心肌细胞病变(CPE)及心肌酶谱乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)的变化.并进行IL-18大无毒剂量实验.结果感染组感染病毒后第2、5天心肌细胞病变程度较其余3组明显,LDH和CK浓度明显升高,与其余3组比较差异有极显著性意义(P<0.01).IL-18浓度≥40 ng/ml对正常心肌细胞有毒性作用;在4～20 ng/ml范围内对感染心肌细胞具有保护作用.结论 IL-18可以抑制CVB3对心肌细胞的损伤,对CVB3感染的心肌细胞有保护作用.
作者：李玲；刘亚黎；彭华；林雯；陈立敏；蒙冰 刊期： 2005年第02期
目的观察2%医用几丁糖在兔角膜碱烧伤早期对角膜上皮愈合,抗过氧化损伤和炎症反应的影响.方法用15只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型,设立几丁糖组(右眼)和磷酸盐缓冲液对照组(左眼).裂隙灯观察角膜烧伤后角膜炎症反应及上皮修复过程.于烧伤后第7,14,28天各随机处死5只兔,取角膜和房水检测超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,并观察角膜组织病理学变化.结果医用几丁糖组较对照组同期角膜上皮修复快,SOD活性高,MDA生成量少,角膜炎症反应轻.结论几丁糖在角膜碱烧伤急性期治疗中具有较强的促进上皮修复,抗过氧化损伤及抑制炎症的作用.
作者：杨红；向艳；顾其胜；王蓉；张晓农 刊期： 2005年第02期
目的通过对高眼压鼠视网膜Fos蛋白表达的定位研究,了解眼内压升高会对视网膜上哪些细胞造成影响.方法前房加压灌注法制作大鼠急性高眼压模型.免疫组织化学方法观察Fos蛋白在视网膜上的表达.结果灌注术后30 min,在节细胞层、内颗粒层及色素上皮层出现Fos蛋白阳性染色.结论急性眼内压升高可能主要对节细胞、内颗粒层(müller细胞)及色素上皮层细胞造成影响,而感光细胞可能不受影响.
作者：刘海霞；周雄武 刊期： 2005年第02期
目的研究多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用.方法对60例梗阻性黄疸患者于手术前采集静脉血2 ml进行多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测.经手术及病理学证实,其中胆管癌32例、胆管良性病变28例.结果 60例患者中,糖类抗原19-9(CA19-9)和糖类抗原242(CA242)同时阳性者31例,其中胆管癌患者26例,其CA19-9大于500 U/ml者23例;胆管良性病变者5例,其中1例CA19-9大于500 U/ml.当CA19-9和CA242同时阳性时,诊断胆管癌敏感性为81.3%,特异性为82.1%.结论应用多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测胆管癌,当CA19-9和CA242同时阳性时,敏感性和特异性均较好,可作为临床诊断胆管癌的筛查指标.
作者：尚丹；熊俊；郑启昌；胡俊华；郭兴军 刊期： 2005年第02期
目的研究吉西他滨诱导人乳腺癌细胞系MCF-7细胞产生凋亡.方法应用MTT法、DNA电泳技术及流式细胞术观察吉西他滨诱导人MCF-7细胞凋亡.结果吉西他滨作用后,MTT结果显示细胞生长抑制率随药物浓度的增加而逐渐增大;DNA断裂电泳可见典型的梯形DNA条带,大小约180～200 bp的整倍数递增,随吉西他滨作用时间延长和浓度的增加而逐渐增强;流式细胞术分析,吉西他滨1.0 μg/ml和10.0 μg/ml作用24 h后,凋亡细胞比例分别为8%和14%;作用48 h后分别增加到15%和29%.结论吉西他滨可以诱导乳腺癌细胞产生凋亡,呈时间和剂量依赖性.
作者：邵军；黄韬；樊海宁 刊期： 2005年第02期
目的研究高糖环境中人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, HMC)中血清和糖皮质激素诱导的激酶(serum and glucocorticoid-inducible kinase,SGK)3种亚型SGK1、SGK2和SGK3的表达及意义.方法将培养的HMC分为正常组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L D-葡萄糖)和甘露醇对照组(19.5 mmol/L甘露醇和5.5 mmol/L D-葡萄糖).采用RT-PCR方法检测SGK1、SGK2和SGK3 mRNA的表达,Western blot方法检测SGK1蛋白的表达.结果在高糖及甘露醇刺激下,HMC中SGK1、SGK2和SGK3 mRNA及SGK1蛋白的表达明显上调(P<0.05);其中高糖上调SGK的表达明显高于甘露醇(P<0.05).结论高糖能促进HMC的SGK1、SGK2和SGK3 mRNA及SGK1蛋白的表达,SGK1可能是高糖作用于HMC的细胞内信号通路中靶分子之一,由它介导的高糖信号转导途径在糖尿病肾病的发生中可能起了重要作用.
作者：王全胜；张晓丽；张阿丽；王玉梅；邓安国；朱忠华；冯玉锡 刊期： 2005年第02期
目的研究Survivin在肾上腺皮质的表达,并探讨它与cyclin D1、 Ki-67在鉴别肾上腺皮质良、恶性肿瘤中的临床意义.方法用免疫组化方法分析Survivin, cyclin D1, Ki-67蛋白在8例肾上腺皮质增生、64例皮质腺瘤和24例皮质癌中的表达.结果 Survivin表达于全部标本,但在肾上腺皮质增生、皮质腺瘤、皮质癌的表达强度有显著性差异,表达强度≥+ +之标本,在三者中分别占0%, 22%, 63%.Survivin同时表达于部分胞核,胞核的表达可以帮助鉴别良、恶性肿瘤.cyclin D1在肾上腺皮质增生、皮质腺瘤、皮质癌中的阳性表达分别为25%,30%和54%, Ki-67阳性表达分别为100%, 19%, 71%.结论 Survivin,cyclin D1 和 Ki-67的表达对肾上腺皮质腺瘤与皮质癌有一定的诊断意义.Survivin与Ki-67两者联合表达阳性可能成为区分皮质癌与皮质腺瘤的有效方法.
作者：黄皓；张旭；马鑫；陈忠；郑涛；李宏召；朱庆国；徐晓峰；李功成；阮黎 刊期： 2005年第02期
目的研究基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2、MMP-9)及其抑制因子-1,2(TIMP-1、TIMP-2)在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达,探讨其在老年性白内障发病中的作用.方法对40例老年性白内障患者(排除代谢性和继发性白内障)和8例晶状体脱位(晶状体透明)患者晶状体前囊膜,用免疫组化方法(SP法)和免疫荧光技术检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达.结果 MMP-2、MMP-9、 TIMP-1、TIMP-2在老年性白内障晶状体上皮细胞表达均为阳性,而在透明晶状体上皮细胞仅1例表达阳性,其余为阴性.MMP-2在老年性白内障组和透明晶状体组平均吸光度(A值)分别为(0.447 9±0.093 7)、(0.145 8±0.053 6);TIMP-2为(0.573 4±0.109 4)、(0.135 7±0.023 1);MMP-9为(0.177 9±0.065 5)、(0.039 2±0.009 3);TIMP-1为(0.279 0±0.062 6)、(0.092 2±0.028 2).结论基质金属蛋白酶及其抑制因子在老年性白内障发病机制中可能发挥重要作用.
作者：谢二娟；张虹；胡维琨；李贵刚；彭洁 刊期： 2005年第02期
目的研究间α胰蛋白酶抑制物(IαI)在实验性肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达及意义.方法采用乙二醇和氯化铵诱导形成大鼠肾草酸钙结石模型,检测各组大鼠肾功能、肾组织Ca2+含量和草酸钙晶体沉积、尿生化,并用免疫组化和计算机图像分析技术观察IαI在肾组织的表达情况.结果模型组大鼠的血清Cr、BUN、肾Ca2+含量、24 h尿Ca2+和草酸分泌量均明显高于正常组(P<0.05).正常肾组织IαI分布仅在近曲小管,而在结石组肾组织的近曲小管、上皮细胞、皮髓质交界处等的表达显著增加.结论高草酸尿和草酸钙结晶的沉积能使肾脏通过合成更多的IαI来抑制草酸钙晶体的形成.
作者：曹正国；刘继红；周四维；叶章群；米其武 刊期： 2005年第02期
目的探讨内质网Ca2+-ATP酶抑制剂thapsigargin对白血病多药耐药细胞株K562/A02化疗敏感性的影响.方法用MTT比色法检测K562/A02细胞耐药性、thapsigargin的增殖抑制活性及其对K562/A02细胞化疗敏感性的影响;丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)染色荧光显微镜观察thapsigargin处理后K562/A02细胞形态改变;流式细胞仪(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)表达;荧光显微镜检测P-gp功能.结果①thapsigargin对K562和K562/A02细胞的增殖抑制活性呈剂量和时间依赖性,K562/A02细胞较K562细胞对thapsigargin更敏感,thapsigargin诱导K562/A02细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变.②K562/A02细胞对阿霉素(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MXT)均出现不同程度的耐药性;thapsigargin抑制K562/A02细胞P-gp功能而对其表达无影响,thapsigargin能增加K562/A02细胞对ADM、DNR、VCR、VP-16、HHT和MXT的化疗敏感性.结论 Thapsigargin能诱导白血病多药耐药细胞株K562/A02细胞凋亡并能部分逆转K562/A02的多药耐药性;thapsigargin的多药耐药逆转功能可能与其凋亡诱导作用和抑制P-gp功能有关.
作者：冯献启；刘芳；邹萍 刊期： 2005年第02期
目的观察坐骨神经慢性收缩损伤(CCI)后小剂量吗啡连续腹腔注射对大鼠痛敏的影响,以及脊髓背角c-fos基因及TrkA受体表达,探讨吗啡耐受的可能机制.方法选择雌性SD大鼠40只,随机分为4组,A组:假手术组,B组:CCI组,C组:CCI+生理盐水组,D组:CCI+吗啡组[5 mg/(kg·d)],分别于术前2 d,术后7、14 d进行热痛阈测试,免疫组织化学方法检测术后7、14 d c-fos基因及TrkA受体的表达.结果 A组术后术侧热痛阈轻度下降,与术前相比差异无显著性意义.B、C、D组术后术侧呈现不同程度热痛阈下降,以术后14 d为著,B、C组与A组相比,差异均有极显著性意义(均P<0.01),D组与A组相比,差异有显著性意义(P<0.05).CCI术后14 d脊髓c-fos基因、TrkA受体的表达较术后7 d明显增加,c-fos基因的表达主要集中于脊髓背角表层Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ层的中间内侧部,TrkA受体分布于Ⅱ～Ⅴ层.c-fos基因、TrkA受体的表达在B、C、D 3组与A组相比,差异具有显著性意义(P<0.05);D组与B组相比,差异无显著性意义(P>0.05).结论小剂量吗啡连续腹腔注射不能有效抑制坐骨神经损伤后热痛觉过敏及脊髓背角c-fos基因、TrkA受体的表达,可能与长时间使用吗啡导致脊髓背角神经元兴奋性进一步升高,发生中枢可塑性改变,以及脊髓背角神经元μ-阿片受体脱敏感有关.
作者：万丽；罗爱林；田玉科 刊期： 2005年第02期
目的观察体外培养的星形胶质细胞(astrocyte, AS)对物理损伤的反应,探讨细胞周期调控对AS活化及增殖的影响.方法建立体外培养大鼠纯化的AS机械损伤模型,利用免疫细胞化学方法观察损伤区的细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、5-溴脱氧尿苷(BrdU)的动态变化;以及周期素依赖的蛋白激酶(CDK)选择性抑制剂olomoucine干预后PCNA、BrdU表达的变化.结果物理损伤后24 h,损伤边缘区AS明显活化,细胞数目增加、胞体肥大,且交织成网状; PCNA表达增强, BrdU阳性细胞比率增加,大量AS进入增殖期.特异性细胞周期抑制剂olomoucine干预后,AS的 PCNA表达增强被抑制,胞体肥大程度减轻,BrdU阳性细胞比率减少.结论损伤刺激可促使胶质细胞细胞周期(cell cycle)启动、反应性增殖活化; olomoucine可以通过抑制CDK调控反应性AS的肥大、增殖.
作者：朱舟；王伟；谢敏杰；余勇飞；陈晨；杜鹏 刊期： 2005年第02期
目的研究不同剂量的延迟电压门控性钾通道(Kv)阻断剂四氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)对大鼠气道反应性的影响.方法用大鼠离体气管张力实验观察不同剂量4-AP对不同浓度组胺所致气管张力变化的影响.结果单纯不同剂量4-AP诱导大鼠离体气管产生浓度依赖性收缩反应;0.05 mmol/L 4-AP与不同浓度组胺收缩气管呈相加作用;0.15 mmol/L 4-AP与组胺之间呈协同作用,即随着组胺浓度的增加,支气管收缩反应增加的幅度超过两者的相加作用;而0.45 mmol/L 4-AP反而使支气管对组胺发生舒张反应.结论不同剂量4-AP 对气管反应性的影响极不相同.
作者：张少华；凌智群；胡茂琼；曹福元；王迪浔 刊期： 2005年第02期
目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)与癫痫发病及其与胶质细胞的关系.方法将SD大鼠随机分为2组:1.生理盐水对照组,腹腔注射与致痫剂等容量的生理盐水;2.戊四氮(PTZ)组,PTZ 60 mg/kg腹腔注射后2、4、8、12 h取脑,每个时间点、每项检测各8只.①采用行为学观察方法观察大鼠的行为表现;②用免疫组织化学方法(SABC法)显示大鼠大脑皮质和海马星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)含量的变化;③用Western blot方法测定大鼠大脑皮质和海马匀浆后细胞周期素D1(cyclin D1)表达的变化;④采用放射免疫分析方法测定大鼠大脑皮质和海马组织匀浆及脑脊液中IL-1β、TNF-α含量的变化.结果 PTZ组大鼠在注射PTZ 1～2 min后出现癫痫发作,而对照组无癫痫发作;注射PTZ 4 h后GFAP含量升高,与对照组比较GFAP表达明显增强(P＜0.05);注射PTZ 2 h后cyclin D1表达增加,与对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05);IL-1β、TNF-α在大鼠大脑皮质和海马组织匀浆及脑脊液中的含量在注射PTZ后均有不同程度的升高,与对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论大鼠癫痫发作时星形胶质细胞被激活,胶质细胞增殖并合成和分泌IL-1β、TNF-α等细胞因子,从而促进癫痫的发生和发展.
作者：王珍；刘庆莹；朱长庚；王伟 刊期： 2005年第02期
目的探讨CuZn超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的代谢变化与胃癌组织发生及发展之间的相互关系.方法 52例胃癌患者手术切除的新鲜胃标本,检测胃壁组织中CuZnSOD的活性;应用免疫组化的方法检测CuZnSOD在胃壁组织中的分布,并采用病理图像分析的方法进行灰度检测.结果胃非粘液性腺癌Ⅰ～Ⅳ级癌灶组织中CuZnSOD活性分别为:(62.85±8.47)、(60.94±6.51)、(36.76±3.73)、(39.04±3.85)NU/mgPr;其癌细胞中CuZnSOD灰度分别为:(128.91±14.11)、(120.07±5.34)、(97.73±5.87)、(83.83±7.28).胃粘液性腺癌组织中CuZnSOD活性为(17.73±1.74)NU/mgPr;其癌细胞多不表达CuZnSOD.CuZnSOD在正常对照组胃泌酸腺细胞中呈阳性表达,在胃粘液性腺细胞中呈阴性表达.结论胃非粘液性腺癌的发生可能来源于分布在胃体和胃底的胃泌酸腺细胞,CuZnSOD具有促进其癌细胞分裂和增生的作用.胃粘液性腺癌的发生可能来源于胃粘液性腺细胞,CuZnSOD与其癌细胞的发生、分裂和增生无关.
作者：王少洪；彭杰青；沈金辉；方可君；王奕中；章克毅；周厚强 刊期： 2005年第02期
目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对模拟中枢缺血再灌注原代培养神经细胞的保护作用.方法分离SD乳鼠的小脑颗粒细胞进行原代培养,建立以缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)模拟的体外缺血再灌注模型(简称OGD).通过MTT比色和锥虫蓝染色,吖啶橙染色(AO)和DNA琼脂糖凝胶电泳的检测方法,观察OGD再灌注对小脑颗粒细胞的损伤,以及OGD中用不同浓度的MT孵育不同时间,MT对神经元损伤的抑制作用.结果在OGD的细胞模型中,与OGD组比较1 nmol/L和10 nmol/L的MT孵育48 h后的细胞存活率明显提高(P<0.05);100 nmol/L MT孵育24 h后细胞的存活率明显提高(P<0.05);药理剂量的MT(1、10、100 μmol/L)孵育12 h后细胞的存活率就明显提高(P<0.05);各剂量组细胞的存活率都随着孵育时间的延长而增强.而且,当MT浓度介于1 nmol/L和10μmol/L之间时,细胞的存活率随着剂量的增大而提高.经OGD处理的细胞,吖啶橙染色(AO)和DNA琼脂糖凝胶电泳显示细胞损伤呈现凋亡和坏死两种方式,MT能够抑制OGD所诱导的细胞凋亡.结论 MT可防治脑中枢缺血再灌注引发的继发性损伤.
作者：鲁志强；王西明；段秋红；卢涛；何善述 刊期： 2005年第02期
目的在染色体水平对决定果蝇吸入麻醉药敏感性的基因进行定位,选择合适的果蝇品系.方法用单瓶连续法测定7 d龄野生黑腹果蝇(HYM3, H)和黑体果蝇(black body,b)七氟醚麻醉ED50值,将两种品系果蝇七氟醚麻醉ED50值进行比较. 结果黑腹果蝇和黑体果蝇七氟醚麻醉ED50值分别为(0.790±0.023)%和(0.557±0.029)%,经t检验,两种品系果蝇七氟醚半数麻醉有效剂量差异有极显著性意义(P<0.01).结论黑体果蝇可用于决定黑腹果蝇对七氟醚麻醉敏感性基因的定位研究.
作者：金传刚；田玉科；毕好生；刘进 刊期： 2005年第02期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
