学术投稿

TUNEL技术方法的探讨

陈春莲;蓝儒竹;叶章群;吴翠环;周晟

关键词:TUNEL技术, 凋亡, 去势, 末端脱氧核苷酸转移酶, 凋亡指数
摘要:探讨末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)的染色方法,以期提高特异性与敏感性。采用以去势(经手术切除睾丸)后天数不同的大白鼠前列腺,用TUNEL法染色,观察不同时期的细胞凋亡水平,对经典的TUNEL法进行改良,将染色结果与TUNEL经典法和HE染色法进行对比。结果表明:采用改良法后,阳性细胞明显增加,而且着色深,凋亡指数明显增高(P<0.01) 。
华中科技大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 放疗并用胞必佳治疗肺癌29例疗效观察

    29例肺癌行放疗联合红色诺卡氏菌细胞壁骨架(胞必佳)治疗,另外29例行单纯放疗。胞必佳组获完全缓解(CR)7例、部分缓解(PR)17例,有效率82.7%;对照组获CR 3例、PR 14例,有效率58.6%。两组有效率统计学比较有差异(P<0.05)。胞必佳组发热发生率34.5%,皮肤反应发生率55.1%,二者均以Ⅰ度为主。认为胞必佳可提高肺癌单纯放疗的近期疗效,毒副反应轻。

    作者:袁响林;胡长耀;胡国清;殷铁军 刊期: 2001年第03期

  • 急性心梗后即刻给予心得安对左室重塑影响的实验研究

    在兔急性心梗(AMI)模型上观察AMI后即刻应用心得安对兔左室重塑的影响。结果显示:与心梗-安慰剂组比较,心梗-心得安组未缩小梗塞范围,也未降低膨胀指数;与假手术-心得安组比较,心梗-心得安组的心室重量、左室容积指数和室壁应力显著升高(2.65±0.11) g/kg vs (2.32±0.11) g/kg,P<0.05;(2.22±0.23) ml/kg vs (1.70±0.12) ml/kg,P<0.001;(0.84±0.07) vs (0.75±0.052),P<0.05;而与心梗-安慰剂组间无显著差异。心梗-心得安组与心梗-安慰剂组比较,心率显著降低[(153±6.36)min-1 vs (225±4.08) min-1,P<0.001)],但左室舒张末压、+dp/dtmax和心脏指数两组间无显著差异。上述结果表明:兔AMI后即刻应用心得安治疗对左室重塑无防治作用。

    作者:郑鹏;胡昭明 刊期: 2001年第03期

  • 灯盏花素对大鼠低氧性肺动脉高压治疗作用及血清一氧化氮和内皮素-1的影响

    为探讨灯盏花素对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的治疗作用及机制,应用灯盏花素腹腔注射,观察其对大鼠不同低氧时间肺动脉平均压(mPAP)、血清一氧化氮(Nitric oxide,NO)及内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)含量的影响,并与单纯低氧组对照。结果显示:单纯低氧组大鼠mPAP和血清内皮素-1含量在低氧5、14和28 d均明显增高(P<0.01),血清一氧化氮明显降低(P<0.01);灯盏花素治疗组肺动脉平均压和血清内皮素-1含量在低氧5、14和28 d均较单纯低氧组明显降低(P<0.01),血清一氧化氮含量明显升高(P<0.01)。灯盏花素明显降低大鼠慢性低氧性肺动脉高压,可能是通过增加血清NO、降低ET-1含量发挥其作用的,可用于慢性肺动脉高压的治疗。

    作者:丁毅鹏;徐永健;张珍祥 刊期: 2001年第03期

  • 电视胸腔镜手术治疗胸部疾病36例

    1999年6月至2000年5月用电视胸腔镜手术(VATS)治疗胸部疾病36例,其中包括自发性气胸、肺大疱切除术20例;凝固性血胸清除、纤维膜剥脱术4例;纵隔肿瘤切除术3例;肺叶切除术2例;肺楔形切除术3例;胸膜间皮瘤切除术1例;广泛性恶性胸膜间皮瘤活检术1例;肺癌胸腔镜探查后中转开胸术2例。治疗效果满意,无手术死亡和并发症发生。纤维支气管镜指导下的双腔气管插管技术和肺功能差者单肺通气时采用CPAP法预防、纠正低氧血症是VATS手术成功的前提和条件。VATS具有创伤小、痛苦轻、恢复快和对美容影响小的优点。自发性气胸、肺大疱切除可列为首选治疗术式。VATS辅助胸壁小切口是较理想的微创手术方式。目前VATS临床应用有局限性,不能代替常规开胸手术,对手术操作难度大的病变或较大的肿瘤仍选择常规开胸手术为宜。

    作者:王家顺;李劲松;冯伦高;杨林;翟伟;丁静民 刊期: 2001年第03期

  • 多发性肌炎/皮肌炎患者心脏损害的分析和评价

    探讨多发性肌炎(PM)/皮肌炎(DM)患者心脏损害的表现及其意义。以临床资料、血清肌酶谱、胸片、心电图、超声心动图等指标为依据,对我院1992~1998年住院治疗的45例PM/DM患者进行分析和评价。23例伴发心脏损害(51.1%),病变累及心包、心肌、心内膜和冠状动脉,临床表现多种多样,心脏损害者中3例因心力衰竭死亡。表明心脏损害为PM/DM常见的合并症,也是本病常见的死亡原因之一,应引起临床医师的足够重视。

    作者:胡绍先;何培根 刊期: 2001年第03期

  • 雷公藤甲素亚慢性中毒对昆明种小鼠肾脏及睾丸的影响

    为了观察雷公藤甲素肾脏及睾丸的毒性影响,80只昆明小鼠随机分成3个实验组和1个对照组。60 d内3个实验组的小鼠每48h腹腔注射雷公藤甲素一次(A组: 0.025 mg/kg,B组: 0.05 mg/kg,C组: 0.1 mg/kg)。结果显示:肾脏病变除肾小管上皮细胞变性、坏死外,肾小管管腔内出现蛋白管型,后处死的所有实验组动物的90 %以上肾小球囊壁壁层上皮不同程度地增生,BUN检测结果表明,B组和C组均显著性升高(P<0.05),提示有发展成肾功能衰竭的趋势。说明甲素对小鼠的肾损害可能是亚慢性中毒者的主要死亡原因之一。睾丸病变明显,表现为睾丸萎缩,脏器系数降低,各级生精细胞变性、坏死,数量减少,其中以精子、精子细胞和次级精母细胞敏感,实验结果还表明甲素对睾丸具有蓄积毒性。提示雷公藤在抗生育作用中,甲素起着非常重要的作用。

    作者:刘良;王战勇;黄光照;刘艳 刊期: 2001年第03期

  • 8种人恶性淋巴瘤细胞系P16基因突变的研究

    为确定P16基因与恶性淋巴瘤发生发展的关系,对8种人恶性淋巴瘤细胞系中P16基因突变情况进行研究。用银染PCR-SSCP方法对P16基因第二外显子突变情况进行研究,并对检出突变者用自动测序仪进行测序分析。检出1例纯合缺失,2例P16基因第二外显子突变。测序分析发现SU-DHL-1 P16基因第二外显子有3处点突变,即密码子72的GAC突变为AAC,密码子77的GCT突变为ACT,密码子82与83之间插入了一个C。认为 P16基因在B细胞恶性淋巴瘤细胞系中的突变率较高,提示其改变可能参与恶性淋巴瘤的发生发展。

    作者:杨年兰;陈燕;李崇渔 刊期: 2001年第03期

  • 磷脂酶A2抑制剂对肝脏缺血再灌注的保护作用

    为研究一氧化氮/内皮素(NO/ET)失衡与肝缺血再灌注(I/R)损伤的关系以及磷脂酶A2抑制剂消炎痛(INDO)对NO/ET的调节作用,采用肝I/R模型,比较I/R组和INDO组NO/ET的变化情况及其与肝I/R损伤的关系。再灌注急性期血NO代谢产物(NO2-/NO3-)降低、ET升高致NO/ET比值降低,血TNF-α、肝丙二醛(MDA)及酶的漏出增加,肝ATP含量降低,肝损伤加重;INDO可阻止再灌注后NO2-/NO3-下降、改善NO/ET平衡、减轻肝损伤。认为肝I/R损伤与NO/ET失衡有关,INDO对肝I/R急性期的保护作用与其对NO/ET的调节作用有关。

    作者:吕平;陈道达;田源;张景辉;吴毅华 刊期: 2001年第03期

  • 白介素10在心脏移植排斥反应中表达的实验研究

    研究白介素10(IL-10)在大白鼠心脏移植排斥反应中心脏局部的表达变化情况,并探讨其参与排斥反应的可能机制。分五组:A组(对照组)、B组(供体特异性全血输注组)、C组(Anti-IL-2Mab组)、D组(Anti-IL-4Mab组)、E组(Anti-IL-2Mab+CsA组)处理受体,将大鼠移植心移植到受体的颈部,观察移植心存活时间、动态病理变化。并于移植术后第1 d、第3 d、第5 d、第7 d、第9 d、第11 d、第14 d分别取移植心置于液氮中待测。应用半定量的RT-PCR法动态检测移植心IL-10的表达情况。结果表明:各组移植心存活时间分别为(8.3±1.7) d、(29.2±7.1) d、(26.4±5.7) d、(10.2±1.9) d、(55.0±10.6) d。其中B组、C组对A组差异有显著意义,E组对A组及C组分别有极显著意义和显著意义。IL-10在B组、C组及E组均有较强的表达,在A组及D组表达微弱,并与移植物的存活时间密切相关。结果提示:IL-10参与调节移植排斥反应,其表达水平与移植物存活时间正相关,机制可能为Th类细胞因子的免疫偏离。应用TH1类细胞因子单克隆抗体并联用免疫抑制剂可以有效的抑制移植排斥反应,从而延长移植物的存活期。

    作者:夏家红;黄毅;刘成硅;肖诗亮;杨辰垣 刊期: 2001年第03期

  • SRPK2的测序及分析

    用SRPK1有关的克隆,制备探针,并与人胎脑cDNA文库进行筛查。测得SRPK2 3.744 kb的核苷酸序列,并与SRPK1比较。显示SRPK2与SRPK1的序列有77%的相近,而在SRPK1激酶区域有90%相似。从SRPK2的氨基酸序列上看,其NH2端存在一段富含脯氨酸序列区。推测SRPK2是SRPK家族的新成员,SRPK2的NH2端的富含脯氨酸结构可使其具有独特的调节功能,并可作为特异激酶的靶体。

    作者:林雯;胡文胜;王焕友;傅向东 刊期: 2001年第03期

  • 结节性脂膜炎28例回顾性分析

    回顾性分析了28例经皮肤组织病理检查确诊的结节性脂膜炎住院患者。其多发于中青年人,临床症状以发热、皮下结节或斑块、关节疼痛为主,皮肤凹陷性萎缩斑、色素沉着斑相对少见,但对诊断更具提示意义。该病误诊率高达64.3%,同时对误诊原因进行了分析。据此建议对原因不明的反复发热伴发结节或斑块的患者应尽早做皮肤组织病理学检查以利确诊。

    作者:邓云华;徐祖森;陈兴平;周礼义;陈映玲 刊期: 2001年第03期

  • 鼠脑神经递质受体在卵母细胞上的表达

    把提取的鼠脑mRNA注射到卵母细胞内,在卵母细胞上以双电极电压钳技术研究某些递质的诱导电流。实验发现除卵母细胞本身所具有的muscarine受体外,还有多种受体明显地在卵母细胞上表达。卵母细胞膜上的表达受体的反应可分平滑型、振荡型、复合型三类。其反应类型与所开启的通道及通透离子有关。平滑型反应的受体与离子通道为一复合体,激动剂开启其自身离子通道。而振荡型反应是递质通过第二信使的介导,引起胞内Ca2+库中的Ca2+释放,开启卵母细胞膜本身的Cl-通道,产生Ca2+依赖的Cl-电流,构成振荡型电流反应的主要成分。复合型二者兼有。

    作者:王钦文;常岚;王凤;杨季清;李之望 刊期: 2001年第03期

  • 不同年龄大鼠神经系统tau蛋白的表达特性

    通过研究不同年龄组大鼠脑组织中微管相关蛋白tau的表达特性和磷酸化位点的差异,为阿尔茨海默病(AD)脑组织中tau蛋白的研究提供资料。将大鼠分为胎鼠、新生鼠、成年鼠和老年鼠4组,取各组大鼠的脑组织制成匀浆,用免疫印迹法检测各组tau蛋白的分子量范围及磷酸化状态。结果发现非磷酸化依赖性抗tau抗体R134d的免疫显色结果显示:胎鼠和新生鼠主要含低分子量(14.2~28.8 ku)tau蛋白;成年鼠除在脊索中显示高分子量tau(67.5~96.6 ku)外,大脑灰质和白质中的tau蛋白主要集中在中分子量(28.8~42.7 ku)范围;老年鼠的灰质、白质和脊索中均含高分子量tau蛋白,且在灰质和白质组分中中分子量tau的含量比成年组显著增高。Tau-1的显色性质与R134 d相似。PHF-1和M4只在胎鼠和新生鼠显带。认为大鼠神经系统tau蛋白的表达性质及其磷酸化状态随年龄增长而显著不同。

    作者:卢峡;李娜;江宇;张苏琳;魏泽兰;王建枝 刊期: 2001年第03期

  • 鼻腔、鼻窦部砂粒性骨化纤维瘤6例临床分析

    为探讨临床上比较罕见的砂粒性骨化纤维瘤(psammomatoid ossifying fibroma,POF)的临床特征、诊断与治疗方法,分析了6例POF的临床资料并综合文献,提出 POF是一种以青少年为主、具有局部侵袭性的良性肿瘤,有明确的组织形态特征,临床症状特别是CT扫描是临床诊断的基础,治疗原则是在彻底清除病灶的基础上,兼顾面容与功能的保护。

    作者:熊新高;朱立新;汪广平;孔维佳;章威 刊期: 2001年第03期

  • 体外循环时心肌细胞上ICAM-1的变化及抑肽酶对其表达的影响

    为观察心脏瓣膜置换术病人在CPB前后心肌上ICAM-1的表达,并探讨抑肽酶对其表达的影响,选择择期心脏瓣膜替换术病人20例,随机分为抑肽酶组和对照组,各10例。分别于手术开始及结束时取右心房心肌标本,采用免疫组化法检测心肌细胞及心肌血管内皮细胞上ICAM-1的表达,以测得ICAM-1积分光密度值(IOD值)进行分析。结果:心脏瓣膜替换术病人CPB后心肌细胞上ICAM-1的表达较术前有明显增加(P<0.05),而在抑肽酶组则无明显变化。组间比较,差异具有显著意义,P<0.05。在对照组,心肌血管EC上ICAM-1在CPB后表达明显增加(P<0.05),而抑肽酶组,差异无显著性。组间比较,P<0.05。认为CPB时心肌细胞及心肌血管EC 上ICAM-1的表达增高,ICAM-1可能参与CPB时心肌的炎症损伤,抑肽酶可以通过抑制ICAM-1的表达而减轻CPB所致的炎症反应。

    作者:范慧敏;李伦明;张凯伦;孙宗全 刊期: 2001年第03期

  • TUNEL技术方法的探讨

    探讨末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)的染色方法,以期提高特异性与敏感性。采用以去势(经手术切除睾丸)后天数不同的大白鼠前列腺,用TUNEL法染色,观察不同时期的细胞凋亡水平,对经典的TUNEL法进行改良,将染色结果与TUNEL经典法和HE染色法进行对比。结果表明:采用改良法后,阳性细胞明显增加,而且着色深,凋亡指数明显增高(P<0.01) 。

    作者:陈春莲;蓝儒竹;叶章群;吴翠环;周晟 刊期: 2001年第03期

  • 孔源性视网膜脱离的临床特点

    对109眼孔源性视网膜脱离的发病年龄及不同年龄组视网膜脱离与屈光状态,不同年龄组裂孔的形态等关系进行了分析。结果表明:40岁以下网脱近视多见,40岁以后网脱近视逐渐减少。圆孔多见于40岁以下年龄组,马蹄形裂孔多见于40岁以上年龄组。

    作者:孙京华;杨红;薛蔚 刊期: 2001年第03期

  • 不同抗炎药物对缺氧所致大鼠离体肺血管环张力变化的影响

    为研究离体大鼠肺血管在缺氧时张力的变化,以及甾体、非甾体类抗炎药物对此变化影响的异同性,采用等长收缩技术,测定加入消炎痛或地塞米松前后张力改变的特点及两药作用的差异。结果发现:Wistar大鼠与Sprague-Dawley大鼠肺血管环对缺氧的反应不同,后者仅出现收缩反应,而Wistar大鼠在收缩前出现一内皮依赖的舒张;COX非特异性抑制剂消炎痛对缺氧所致的舒张和收缩均有增强作用;COX-2特异性抑制剂地塞米松则在明显抑制舒张的同时轻度增强收缩反应。结果表明:不同种属大鼠的肺血管缺氧反应可能存在差异;缩管性PGs和扩管性PGs分别调节急性肺血管缺氧的舒张和收缩反应,这一过程呈一定的内皮依赖性;非选择性和选择性的COX抑制剂对肺血管缺氧反应的作用不尽相同。

    作者:吴萍;李钢;叶笃筠;熊宗斌;廖晓梅;余上斌;孙炜 刊期: 2001年第03期

  • MDM2、p53在增生、癌变子宫内膜的表达及其意义

    应用原位杂交方法,以地高辛标记的cDNA探针检测6例正常子宫内膜、14例增生性子宫内膜和30例子宫内膜腺癌组织石蜡包埋标本中MDM2基因mRNA的表达,运用免疫组化SABC法检测MDM2和p53基因的蛋白表达。结果表明:p53基因在正常、增生性及癌变子宫内膜组织中表达率依次增高,在子宫内膜腺癌组织中其表达水平与临床分期和病理分级相关(P<0.05)。MDM2基因在增生性内膜中较癌变内膜表达率高,但无统计学意义(P>0.05)。MDM2基因的mRNA与蛋白表达具很好的相关性(P<0.01)。认为p53与子宫内膜癌的形成相关。MDM2可能与子宫内膜组织异常增殖有关。在子宫内膜增生及癌变组织中可能存在p53对MDM2在转录水平的调控。

    作者:濮德敏;邢琦;刘丽江;漆秀梅 刊期: 2001年第03期

  • 95例前列腺炎真菌培养阳性结果分析

    为研究慢性前列腺炎患者真菌感染情况,探讨改良沙堡氏液体培养基在真菌培养中的应用价值,取慢性前列腺炎患者前列腺液进行病原体检查,采用改良沙堡氏液体培养基与沙堡氏琼脂培养基对照做真菌培养,对真菌培养阳性者进一步做菌种鉴定。结果从1138例前列腺液中真菌培养阳性者,改良沙堡氏液基为95例,占8.35%,沙堡氏琼脂基为30例,占2.64%。95例中白色念珠菌63株,占66.3%,热带念珠菌15株,占15.8%,其他念珠菌17株,占17.9%。认为①慢性前列腺炎与真菌感染之间的密切关系是一个不可忽视的问题,对那些使用抗生素治疗时间长,治疗效果差的慢性前列腺炎患者要考虑真菌感染的可能。②念珠菌性前列腺炎仍以白色念珠菌感染为主。③采用改良沙堡氏液基可提高念珠菌的检出率。

    作者:万沐芬;陈映玲 刊期: 2001年第03期

华中科技大学学报(医学版)杂志

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