学术投稿

人胰岛素原基因的包装及增殖

袁凤山;刘兆喆;吴志香;杜宁

关键词:人胰岛素原基因, 逆转录病毒载体, 包装细胞, 病毒滴度
摘要:目的:用PA317包装细胞包装突变人胰岛素基因原质粒,并检测其增殖情况.方法:用脂质体转染法将PLXSN-MPINS质粒转染至PA317包装细胞,用G418筛选出阳性PA317包装细胞克隆并测定胰岛素原基因浓度,用TRIZOL法提取未转染和转染后PA317细胞的基因组DNA,PCR检测突变人胰岛素基因的整合情况.结果:(1)用脂质体转染法获得G418阳性PA317包装细胞克隆;(2)该细胞克隆获高滴度的胰岛素原基因浓度;(3)PCR方法在转染后PA317基因组中检测到突变人胰岛素原基因.结论:脂质体转染法是一种操作简便且行之有效的转染方法.PA317包装细胞系可成功包装突变人胰岛素原基因质粒并可获得高滴度表达,为1型糖尿病基因治疗的进一步实验研究奠定了基础.
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 序贯疗法治疗急性早幼粒细胞白血病的临床观察

    目的:探讨序贯疗法治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的长期疗效.方法:对39例初诊和3例复诊病人给予三氧化二砷(As2O3)诱导治疗,完全缓解(CR)后给予联合化疗和维甲酸交替治疗.结果:39例初诊病人中完成诱导分化治疗35例,均获得CR,有效率90%.3例复诊者经As2O3治疗后获CR,总有效率91%.4例复发者经As2O3治疗再获CR.总CR率达91%.经序贯疗法治疗后,全部病例均无病生存.结论:As2O3诱导治疗APL缓解率高,序贯疗法治疗APL患者CR期长,副作用轻.

    作者:刘卓刚;杨威;王欢;廖爱军;卢香兰;杨秀娟;矫德馨;韩乃英;杨卓 刊期: 2004年第02期

  • 上颌恒磨牙先天性缺失病例分析

    复查378名正畸患者全颌曲面断层X线片,统计上颌恒磨牙先天性缺失.发现5例上颌恒磨牙先天性缺失患者,身体健康,无严重牙齿先天性缺失或相关外胚叶发育异常的综合征.

    作者:赵震锦;侯志明;邓燕 刊期: 2004年第02期

  • 动脉导管未闭1013例外科治疗

    目的:探讨动脉导管未闭的外科治疗经验.方法:回顾性分析1 013例动脉导管未闭患者的临床特征,手术过程与转归.结果:单纯动脉导管未闭组无死亡;动脉导管未闭合并其他心内畸形组易早期产生重度肺动脉高压和心功能不全,手术死亡3例.结论:经左腋下小切口治疗动脉导管未闭优点多,可为动脉导管未闭手术治疗的常规方法.动脉导管未闭合并其他心内畸形者,可根据病情分期或一期手术.

    作者:王文生;王占明;龙明生;陈晓慨 刊期: 2004年第02期

  • 蜈蚣等复方中药对震颤大鼠癫痫小发作的作用

    目的:观察由蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星组成的复方中药对震颤大鼠癫痫小发作的作用.方法:震颤大鼠脑海马和皮质慢性安插电极,连续记录灌胃给药前及给药不同时间后的脑电图.结果:复方中药明显抑制了震颤大鼠平均每次癫痫小发作的持续时间(P<0.01),在给药6 d、停药1,2,3,4 d后分别降到给药前水平的(71±9)%,(47±9)%,(52±11)%,(59±15)%及(68±18)%,且在停药1 d后的作用显著强于丙戊酸钠(P<0.01).结论:由蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星组成的复方中药具有明显的对抗震颤大鼠癫痫小发作的作用.

    作者:何苗;蔡际群;杜娃 刊期: 2004年第02期

  • 大鼠海马CA3区神经元突触的老龄性改变

    目的:观察老龄大鼠海马CA3区神经元突触超微结构的改变,探讨老龄动物海马学习记忆功能减退的形态学基础.方法:应用透射电镜技术,观察青年组(3~5月龄)和老龄组(24~26月龄)Wistar大鼠海马神经元的超微结构.结果:老龄组海马CA3区神经元的主要变化:突触连接缩短或间断、突触前后膜融合;突触小胞大量集聚、小胞大小不等;树突棘内棘器远离突触后膜,其扁平小囊增多并扩张.结论:老龄大鼠海马CA3区神经元突触发生了明显的变性改变,这可能是导致学习记忆障碍的形态学基础.

    作者:赖红;马萍;高杰;王铁民;包峰;吕永利 刊期: 2004年第02期

  • 幽门螺杆菌感染以及根治后对肝硬化患者血氨浓度的影响

    目的:探讨幽门螺杆菌感染及根治后对肝硬化患者血氨浓度的影响.方法:用13C-呼气实验方法,选择50例肝硬化门脉高压患者作为实验组,对其中36例幽门螺杆菌阳性者,检测根治幽门螺杆菌前后血氨浓度的变化,27例胃病患者为对照组.结果:肝硬化门脉高压合并幽门螺杆菌感染组,血氨明显升高(P<0.01),根治后血氨降低(P<0.01).结论:幽门螺杆菌感染可导致肝硬化门脉高压患者血氨升高,根治后能降低血氨浓度.

    作者:姜敏;张义侠;郑有贵;傅宝玉 刊期: 2004年第02期

  • Cyclin E,CDK2,Ki-67在白血病中的表达及其临床意义

    目的:探讨白血病细胞周期素E(cyclin E)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞增殖相关抗原(Ki-67)在白血病中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学S-P法检测50例白血病病人骨髓(急性40例,慢性10例)cyclin E、CDK2和Ki-67的表达情况.结果:cyclin E阳性表达率38.0%,CDK2阳性表达率64.0%,均明显高于正常对照组(P<0.05);Ki-67阳性表达率16.0%,与正常对照组比较无显著差异(P>0.05).cyclin E表达与CDK2表达呈密切正相关(P<0.05);CDK2表达与Ki-67表达密切正相关(P<0.05).cyclin E和CDK2共同阳性表达者复发率明显增高.结论:cyciin E和CDK2的异常表达在白血病发生发展和复发过程中起重要作用,其表达水平对判断疾病的预后和疗效有一定价值.

    作者:郝杰;侯科佐;刘云鹏;于萍 刊期: 2004年第02期

  • 蟾蜍毒素粗提物诱导卵巢癌OVCAR-3细胞M期阻滞

    目的:探讨蟾蜍毒素粗提物对卵巢癌细胞的抑制作用及对细胞周期的影响.方法:采用台盼蓝拒染色法,集落形成实验测定细胞增殖能力,采用流式细胞仪解析细胞周期.结果:蟾蜍毒素粗提物作用细胞24,48,72h,半数抑制浓度分别为0.62,0.24,0.09μg/ml.细胞经0.5,5μg/ml蟾蜍毒素粗提物处理1,6 h,细胞生存率均>95%,集落抑制率分别为(43.1±6.4)%,(78.2±4.9)%,(89.8±2.2)%,(95.0±2.6)%,与对照组相比有显著差异(P<0.05).经蟾蜍毒素粗提物作用后,细胞阻滞于M期.结论:蟾蜍毒素粗提物能够抑制OVCAR-3细胞增殖,同时诱导M期阻滞.

    作者:李艳荣;卢香兰;刘云鹏;岳瑶;王萍萍;朱志图;李迎春;金波 刊期: 2004年第02期

  • 原发性青光眼患者屈光状态的研究

    目的:探讨原发性青光眼患者的屈光状态对其发病机制的影响.方法:对原发性青光眼患者50例(100眼),分别进行裸眼视力、矫正视力、主觉和他觉验光检查,以及眼轴的测量.结果:原发性青光眼患者50例(100眼)中,屈光不正患病率为71.00%.原发性开角型青光眼患者的近视率为76.09%,平均屈光度为-3.61D;原发性闭角型青光眼患者的远视率为50.00%,平均屈光度为+0.57D(P<0.01).原发性开角型和闭角型青光眼平均眼轴长度为24.81 mm和22.30 mm(P<0.01).结论:原发性青光眼的发病与患者的屈光状态存在一定内在联系,原发性开角型青光眼以近视性屈光不正为主,原发性闭角型青光眼以远视性屈光不正为主.

    作者:亢晓丽;李冰;马鹤 刊期: 2004年第02期

  • 环氧合酶2与胃癌分化程度关系的研究

    目的:观察环氧合酶2(COX-2)在胃癌组织中的表达与其临床病理特征的关系.方法:将82例胃癌组织切片分别进行HE和免疫组化染色,用X2检验方法分析.结果:COX-2主要存在于胃癌细胞的胞浆中,胃癌组织中表达率87.80%,过表达率65.28%.结论:胃癌组织中COX-2的过表达率与胃癌细胞的分化程度明显相关.

    作者:谷兰;刘桂琴;洪声明;王梅先;吴烨秋 刊期: 2004年第02期

  • 腹主动脉骑跨栓塞15例的临床救治分析

    目的:总结腹主动脉骑跨栓塞的救治经验和教训.方法:回顾性分析了我院采用双股动脉Fogarty导管取栓治疗腹主动脉骑跨栓塞15例.结果:血流再通后早发死亡3例,主要原因为高血钾引起的心搏骤停;迟发死亡4例,主要原因为急性肾功能衰竭(ARF)为首发的多器官功能不全综合征(MODS).存活8例,有5例截去单侧或双侧下肢.远期随访5例,存活肢体血运良好.结论:早期诊断,早期取栓治疗是降低腹主动脉骑跨栓塞病死率和截肢率的关键.术中预防高钾血症引起的心搏骤停、术后及早防治ARF阻断其病理连锁反应,预防MODS发生是降低死亡率的重要环节.

    作者:杨德华;胡新华;张强;王淳;段志泉 刊期: 2004年第02期

  • 安氏Ⅱ1错(牙合)软组织侧貌分析及软硬组织的相关性研究

    为探讨反映安氏Ⅱ1错(牙合)畸形软组织侧貌的特征性指标,根据侧位X线头颅定位片做安氏Ⅱ1错(牙合)患者的软硬组织头影测量分析,并进行软组织间及软硬组织间相关性研究.结果表明安氏Ⅱ1错(牙合)畸形的患者软组织侧貌畸形主要集中在面下1/3,唇部突出明显,上唇凸度及位置可以反映骨性上颌前突程度,而下唇明显增厚,对安氏Ⅱ1错(牙合)侧貌有一定代偿作用.面凸角、Z角、上唇基角及上唇-审美平面距可综合应用,以评价安氏Ⅱ1错(牙合)畸形软组织侧貌.

    作者:张扬;任雅秋;冯翠娟 刊期: 2004年第02期

  • 大鼠脑缺血再灌注后水孔蛋白4表达的研究

    目的:探讨水孔蛋白4(AQP-4)在脑缺血再灌注后的表达及意义.方法:采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,分别于缺血再灌注后12,24,48,72,120,168 h的6个时相点用免疫组化方法观察大鼠模型缺血区AQP-4的表达,并与假手术组和正常组比较.结果:正常组和假手术组不同时相点均无AQP-4的表达;缺血再灌注组12 h在缺血周边区神经胶质细胞上有较弱表达,24h表达增强,48~120 h达到高峰,168 h后AQP-4持续表达.结论:脑缺血再灌注时缺血区域有AQP-4表达,AQP-4表达可能是脑缺血再灌注损伤的机制之一.

    作者:兰希发;姚文秀;郭阳 刊期: 2004年第02期

  • PTEN蛋白在卵巢癌发生发展过程中的表达及临床病理意义

    目的:检测抑癌基因PTEN蛋白表达在卵巢癌发生发展中的作用及相关病理机制.方法:采用免疫组化法检测95例卵巢癌组织、19例卵巢交界性肿瘤、10例正常卵巢、10例卵巢囊肿组织中PTEN蛋白表达,比较其表达与卵巢癌临床病理特征的关系.结果:卵巢交界性肿瘤和卵巢癌组织中PTEN蛋白表达显著低于正常卵巢和卵巢囊肿(P<0.05);PTEN蛋白表达与卵巢癌组织分化程度呈正相关(P<0.01),与临床病理分期负相关(P<0.05);卵巢癌中PTEN蛋白表达降低或失活与卵巢癌淋巴结转移相关(P<0.01);上皮性卵巢癌中子宫内膜样癌PTEN蛋白表达低(P<0.01).结论:在卵巢癌发生过程中PTEN蛋白表达降低起到重要作用,表达异常的PTEN蛋白与卵巢癌的组织分化程度、临床病理分期和转移能力相关,与上皮性卵巢癌中子宫内膜样癌PTEN蛋白表达关系更为密切.PTEN蛋白表达可作为判定卵巢癌发生及淋巴转移能力的一项有效客观指标.

    作者:陈颖;李建军;杨雪飞;郑华川;吴东瑛;张素敏;张艳英;辛彦 刊期: 2004年第02期

  • 成鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究

    目的:探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外培养和向神经元样细胞分化的能力.方法:利用Percoll分离液(1.073×103g/L)梯度分离成年大鼠MSCs,采用3种不同的方法对其诱导分化,免疫细胞化学方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、星形胶质细胞特异性标志(GFAP)和神经前体细胞(Nestin)的表达.结果:成功进行了成年大鼠MSCs的原代和传代培养,3种诱导方法均能使MSCs分化为神经元样细胞,都能表达NSE、NF和Nestin,而不表达GFAP.结论:MSCs能在体外分离、扩增、传代,并能向非间充类细胞分化.

    作者:袁维;路磊;刘宏志;芮刚;孔令强 刊期: 2004年第02期

  • 瘦素促胎儿生长作用及其与胰岛素和胰岛素样生长因子1关系的探讨

    目的:探讨瘦素促胎儿生长作用及其与胰岛素和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的关系.方法:采用放射免疫法检测100例足月新生儿脐血血清瘦素、胰岛素和IGF-1水平,根据新生儿出生体重分为大于胎龄儿(LGA)组19例,适于胎龄儿(AGA)组65例,小于胎龄儿(SGA)组16例.结果:(1)脐血瘦素水平与新生儿出生体重呈正相关关系(r=0.57,P<0.01),其中LGA组脐血瘦素水平为(13.38±6.75)μg/L,显著高于AGA组(7.40±4.45)μg/L;SGA组(2.79±1.54)μg/L低于AGA组,差异有显著性(P<0.01);(2)脐血胰岛素和IGF-1水平分别与新生儿出生体重呈显著正相关关系,相关系数(r)分别为0.30和0.35;(3)脐血瘦素和胰岛素水平呈正相关关系(r=0.32,P<0.01),脐血瘦素与IGF-1水平之间元相关关系(r=018,P>0.05).结论:脐血瘦素水平与胎儿生长发育状态密切相关,瘦素和胰岛素对胎儿体重有双向调节作用,IGF-1和瘦素具有各自独立的调控胎儿生长发育体系.

    作者:刘彤;银铎;夏亚军;尚涛 刊期: 2004年第02期

  • aFGF对染铅大鼠海马神经元细胞浆ERK活性的保护作用

    目的:探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对染铅的原代培养大鼠脑神经元细胞外调节蛋白激酶(ERK)活性的影响.方法:神经元培养4~8 d后,用0.6μg/L aFGF及不同浓度铅处理细胞,用改良Takai法测定ERK活性.结果:神经元染铅30 min,在0.1~2.0μmol/L铅浓度范围内,ERK比活性明显升高,呈浓度依赖性,尤其1.0~2.0μmol/L时高.用aFGF预处理后再染铅时,在1.0~5.0μmol/L时ERK比活性与对照组比较无明显差异.结论:ERK比活性随着染铅浓度不同而发生改变.aFGF可保护神经元避免铅对ERK活性的影响.

    作者:彭博;孙黎光;刘素媛;邢伟 刊期: 2004年第02期

  • 大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的实验研究

    目的:研究细胞凋亡在急性脊髓损伤中的作用.方法:以大鼠脊髓压迫性损伤的动物模型,应用透射电镜,HE染色,原位缺口末端标记(TUNFEL)观察急性脊髓损伤后神经细胞的死亡形式.结果:急性脊髓损伤后2 h电镜清晰观察到神经细胞凋亡的形态变化,HE染色和TUNEL显示急性脊髓损伤后6 h和8 h凋亡阳性细胞达高峰.结论:细胞凋亡为急性脊髓损伤后神经细胞的主要死亡形式,也是加重脊髓损伤的一个因素.

    作者:白伦浩;周凤华;王欢;李雷;高红;王海义;陈淑珍 刊期: 2004年第02期

  • Er,Cr:YSGG激光根管内照射对根管壁作用的形态学研究

    目的:探讨Er,Cr:YSGG激光根管内照射对根管壁的作用,为此激光在根管治疗领域的临床应用提供实验依据.方法:选用24颗新拔除的单根离体牙,去除牙冠,常规根管预备后,随机分成6组.分别使用1,2,3,4,6 W Er Cr:YSGG激光于有水条件下进行根管内照射;另选一组不做任何处理,作为阳性对照.扫描电镜下观察根管内壁的形态学改变.结果:与对照组相比,激光照射组可有效去除根管内壁的玷污层及碎屑;牙本质小管口清晰可见;未见熔融及炭化等热损伤改变,其中使用3W激光处理为理想.与1~3W相比,4W,6W时根管表面更为粗糙不平,且偶见裂纹.结论:应用3W Er,Cr:YSGG激光进行根管内照射可起到较为理想的根管清洁作用,有望在临床上应用提高根管治疗效果.

    作者:于静涛;贾兴亚;包穆蓉 刊期: 2004年第02期

  • 沈阳地区160例健康中、老年人血脂、血糖水平的观察

    目的:探讨沈阳地区健康中、老年人血脂、血糖水平随增龄的变化.方法:选择160例无心、肺、脑等系统疾病的健康中老年人,测定其甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和空腹血糖(FBG)血清水平.结果:男性TC、FBG、女性TG、TC、LDL-G、FBG随增龄变化明显;45~59岁组TC和LDL-C女性与男性比较差异有显著意义(P<0.05,P<0.01);年龄对男性血脂指标无作用,BMI对LDL-C的作用大,对HDL-C的作用次之;年龄对女性TG作用大,对TC的作用次之,BMI对TG作用大,对HDL-C的作用次之.结论:随着性别的不同和增龄血脂水平有很大的变化;FBG随增龄而增加.

    作者:杨莹;白小涓;武晓云;张汝新;陈燕;陈香美 刊期: 2004年第02期

中国医科大学学报杂志

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主管:辽宁省教育厅

主办:中国医科大学