学术投稿

原核细胞中人神经生长因子基因的克隆

尹元琴;马萍;隋承光;任常山

关键词:神经生长因子, 克隆, 载体
摘要:目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备.方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌.结果:βNGF cDNA经BamHI 和PstI双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆.结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA.
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 严重肝损伤的外科处理

    对15例严重肝损伤患者进行了手术,并对其致伤原因,损伤程度,合并伤,手术方式等进行总结,强调了术中各种处理方法的正确应用.

    作者:王镇;夏振龙;戴显伟;戴朝六;石文君 刊期: 2003年第02期

  • PTEN和Caspase-3表达与胃原发恶性淋巴瘤病理生物学行为的关系

    目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN和细胞凋亡关键酶Caspase-3与胃原发恶性淋巴瘤病理生物学行为的关系及其分子机制.方法:采用SABC免疫组织化学方法检测56例胃原发恶性淋巴瘤组织中PTEN基因编码产物和Caspase-3表达情况,并与胃淋巴瘤病理生物学特征进行比较分析.结果:56例胃原发恶性淋巴瘤中28例见PTEN表达,阳性率50.0%,显著低于非瘤胃粘膜阳性表达率(96.4%)(P<0.001).肿瘤浸润深度达浆膜或穿透浆膜者PTEN表达(37.9%)显著低于未穿透肌层者(63.0%)( P<0.05);伴淋巴结转移之肿瘤PTEN表达(28.1%),显著低于不伴转移者(79.2%)(P<0.05).Caspase-3在胃原发恶性淋巴瘤组织中阳性率76.8%,显著低于非瘤胃粘膜表层上皮阳性率96.4%(P<0.05),但高于胃固有腺体中的阳性表达率(35.7%),P<0.05.PTEN基因编码产物蛋白表达与Caspase-3的表达呈正相关 (P<0.005).结论:抑癌基因PTEN编码蛋白和Caspase-3表达在胃原发恶性淋巴瘤组织中表达下调,PTEN基因编码产物可能通过调节Caspase-3表达而影响胃淋巴瘤细胞的凋亡水平和肿瘤的病理生物学行为.PTEN和Caspase-3在胃原发恶性淋巴瘤发展过程中的作用及具体机制尚需深入探讨.

    作者:郑华川;孙宏伟;吴东瑛;张素敏;况立革;辛彦 刊期: 2003年第02期

  • 喉部分切除术后误咽患者的饮食护理

    喉部分切除术后误咽是喉部分切除较为常见的并发症,可引起肺部感染和吸入性肺炎.本文总结98例喉部分切除术后误咽患者的饮食护理.

    作者:郑东侠;张丽文 刊期: 2003年第02期

  • 人工鼻和气体流量设置对气道内吸入气温度和湿度的影响

    目的: 观察麻醉机呼吸环路气体低、中、高流量设置和呼吸环路加入人工鼻对气道内吸入气温度和湿度的影响.方法:选择60名ASA Ⅰ~Ⅱ级病人,随机分为6组,3组呼吸环路内加入人工鼻,流量设置分别是0.5,1.5,4.5 L/min ; 另3组不使用人工鼻,流量设置同上.应用温度湿度仪连续监测吸入气温度和相对湿度,公式计算绝对湿度.机械通气3min后的测量值设为基础值,然后纪录15,30,45和60 min的值.结果:随机械通气时间延长,人工鼻组的不同流量设置均显著增加气道内吸入气温度和湿度,当流量设置为0.5 L/min高,其次是1.5 L/min,再其次为4.5 L/min ;不用人工鼻组,低、中、高流量设置显著影响气道内吸入气温度和湿度,随通气时间延长,流量为0.5 L/min时温度和湿度逐渐升高,1.5 L/min略有下降,4.5 L/min则明显降低.结论:人工鼻能补偿气体中、高流量时气道内温度和湿度的降低,低流量增加气道内的温度和湿度.临床采用低流量麻醉技术和人工鼻对保护病人气道粘膜有利.

    作者:印春铭;赵芸慧;王俊科 刊期: 2003年第02期

  • 劈裂牙牙龈切除术与牙冠延长术后修复效果的比较

    目的:比较牙龈切除术与牙冠延长术应用于牙体劈裂达龈下较深部位病例的修复效果.方法:选择牙体劈裂达龈下较深部位的患牙23颗,分别采用牙龈切除术与牙冠延长术完全暴露断面,再行常规桩冠修复,通过术前、术后及6个月复查时的龈袋深度,比较两组的临床疗效.结果:牙龈切除术组术前、术后及6个月复查时龈袋深度均数分别为4.3, 2.4,2.3 mm; 牙冠延长术组术前、术后及6个月复查时龈袋深度均数分别为4.4, 1.8, 1.4 mm .两组术后及6个月复查时龈袋深度均比术前明显减少;而术后及6个月复查时,牙冠延长术组的龈袋深度均明显低于牙龈切除术组.结论:牙龈切除术与牙冠延长术应用于牙体劈裂达龈下较深部位患牙均能明显改善龈袋深度,而后者的临床疗效优于前者.

    作者:郝玉全;潘春玲;魏亚琴;韩雪松;代昕 刊期: 2003年第02期

  • 心肌梗死患者生活质量的调查与分析

    通过对64例心肌梗死患者进行问卷调查,了解心肌梗死患者的生活质量水平,为采取有效的护理干预提高心肌梗死患者的生活质量提供参考.

    作者:高丽红;刘丽杰 刊期: 2003年第02期

  • 留置气囊导尿管并发症的原因分析及防治措施

    本文从护理学角度分析留置气囊导尿管并发症的发生原因及其防治措施.

    作者:赵丽萍;钱红 刊期: 2003年第02期

  • 急诊肺动脉栓塞的诊断与治疗

    目的:探讨急诊肺动脉栓塞病人的诊断与治疗.方法:对65例确诊为肺栓塞的患者,分析其临床表现、心电图、胸部X线、血气及胸部计算机断层扫描结果,并总结治疗经验.结果:65例患者中以胸痛为主诉就诊者51例,以咯血为主诉者7例.血气分析PaO2<80 mmHg者65例;PaO2<60 mmHg者49例.CT见血管栓塞者11例 (91.7%).心电图典型SI QIII TIII改变者13例(20%).肺动脉压增高者45例(69.2%).治疗上强调早期发现、早期溶栓,溶栓治疗效果不好或患者本身有禁忌症时,可选用介入治疗.结论:肺栓塞临床症状不典型,易误诊为冠心病、心绞痛及肺炎等多种疾病,诊断时应借助各种诊断手段,减少误诊率,及时治疗,减少并发症的发生.

    作者:汪洋;田家乐;李永国 刊期: 2003年第02期

  • 斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质的初步研究

    目的:探讨斑须按蚊体内疟原虫雄配子体出丝的发生机制.方法:应用体外雄配子体出丝分析方法,检测斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质对柏氏疟原虫雄配子体出丝的诱导活性并比较其在按蚊吸血前后的变化.结果: 斑须按蚊唾液腺抽提物可在中性pH条件下诱导柏氏疟原虫雄配子体出丝;吸血后蚊唾液腺抽提物的雄配子体出丝诱导活性明显减弱.结论:雌性斑须按蚊唾液腺中含有疟原虫雄配子体出丝诱导物质,并在吸血过程中消耗该物质.

    作者:王继春;罗恩杰;刘英杰;安春丽 刊期: 2003年第02期

  • 腹部多脏器损伤病人的急诊护理

    本文探讨急诊腹部多脏器损伤病人的护理体会.

    作者:钱红;赵丽萍 刊期: 2003年第02期

  • 猪耳软骨脱细胞基质氨基酸成分的分析

    为比较软骨脱细胞基质与新鲜软骨之间组成成分的差别, 使用氨基酸分析仪对新鲜猪耳及其脱细胞基质的成分进行分析.结果脱细胞软骨基质的氨基酸含量高于新鲜软骨,但换算成为氨基酸的个数时,二者相同.表明脱细胞软骨的主要组成成分为II型胶原.

    作者:杨琨;宋敏;张晨 刊期: 2003年第02期

  • HCV抗体3种检测方法的比较

    应用化学发光酶免分析法(CLEIA)、粒子凝集法(PA)和快速金标法分别检测50例血清标本的HCV抗体,对3种方法进行比较分析.化学发光法的阳性率高(78%),敏感性高,特异性好;粒子凝集法和金标法阳性率(76%和60%)均低于化学发光法,虽然阳性率较低,但以化学发光法为基准无假阳性.化学发光法可作为判定HCV抗体是否阳性的标准. 粒子凝集法和金标法操作简便,并且粒子凝集法可测定抗体效价.金标法不需要仪器和配制试剂,15 min即可判定结果,可用于急诊检查.

    作者:徐兰;张丽霞 刊期: 2003年第02期

  • 新生儿期血浆中神经节苷脂测定

    目的: 观察新生儿血浆中神经节苷脂动态变化,评价其对新生儿生长发育的影响.方法:应用改良间苯二酚盐酸微量法测定血浆中总神经节苷脂结合的唾液酸含量.结果:血浆总神经节苷脂结合的唾液酸含量在出生时低,为(7.80±0.79)nmol/ml,14 d达高峰,为(16.25±1.44)nmol/ml,与出生时相比,显著增高,P<0.01.1岁时为(12.22±1.19)nmol/ml,与日龄14 d相比,显著减低,P<0.01; 与出生时相比,明显增高,P<0.01.日龄14 d后随日龄增加,血浆总神经节苷脂结合的唾液酸含量逐渐减低(Y=15.36-0.007X+eps, r=-0.53, P<0.01).结论:新生儿血浆中神经节苷脂水平至少在新生儿期可以反映中枢神经系统的发育与成熟.

    作者:潘晓丽;陈琪玮;华天懿;孟淑英 刊期: 2003年第02期

  • 眼球前段重建术治疗全角膜感染的护理

    我科对24例全角膜感染患者治疗,通过眼球前段重建术及良好的护理,23例取得了满意效果.本文总结了护理经验.

    作者:周铁虹;李洪阳 刊期: 2003年第02期

  • 甲磺酸甲酯对CAOV3细胞端粒酶活性的影响

    目的:探讨卵巢癌细胞CAOV3经烷化剂甲磺酸甲酯(MMS)作用后端粒酶活性变化与生长状态之间的关系.方法:台盼蓝拒染法计数活细胞,噻唑蓝(MTT)法测定药物作用浓度,流式细胞术观察细胞凋亡,端粒重复扩增法(TRAP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测端粒酶活性.结果:用药组与未用药组活细胞百分率无显著差异.MMS主要使CAOV3细胞受阻于S期,未见凋亡峰.用药组与对照组相比较端粒酶活性增强.结论:MMS对CAOV3细胞端粒酶活性有上调作用.CAOV3细胞对MMS的抗凋亡效应可能与端粒酶活性上调有关.

    作者:刘永萍;赵恂;杨平;时亮;姚阳;于成国 刊期: 2003年第02期

  • 硫酸镁治疗妊高征前后钙、镁及一氧化氮的相关性研究

    目的:研究妊高征患者静滴硫酸镁治疗前、后血浆中钙、镁、一氧化氮及红细胞内钙、镁浓度之间相关性,探讨妊高征离子紊乱的原因.方法:以正常晚期妊娠及妊高征患者各30例为观察对象,测定钙、镁采用原子吸收法,一氧化氮采用镉柱还原Griess试剂显色法.结果:治疗前妊高征组血浆中钙离子水平降低,一氧化氮合成减少,镁离子水平正常,红细胞内镁降低;治疗后血浆中钙﹑镁离子显著升高,一氧化氮合成增多,红细胞内镁升高.结论:妊高征患者红细胞内镁降低,使Ca2+ATP酶活性受损细胞内钙离子堆积,细胞外钙离子缺乏,钙离子依赖型、结构型一氧化氮合酶﹙cNOS﹚活性降低,一氧化氮合成减少.低镁是导致妊高征钙、镁离子紊乱的基础.

    作者:张晓平;黄海燕;麻爽 刊期: 2003年第02期

  • 血清胆汁酸谱对肝癌无水乙醇注射治疗监测的临床价值

    目的:探讨血清胆汁酸谱检测对肝内肿瘤无水乙醇注射治疗的指导意义.方法:应用高效液相色谱法对无水乙醇瘤内注射或术中同时行肝动脉化疗栓塞治疗前、后原发性肝癌及肝硬化、正常对照的9种血清胆汁酸进行检测.结果:肝癌血清总胆汁酸和甘氨结合型胆汁酸高于正常对照组(P<0.05),而明显低于肝硬化组(P<0.01).治疗后胆酸/鹅脱氧胆酸比值一过性增高;甘氨结合型胆汁酸/总胆汁酸比值下降;总胆汁酸增高,第7天尚未恢复.结论:血清胆汁酸谱作为肝功能有效指标对肝癌治疗监测有一定价值.

    作者:鞠新华;夏振龙;张玉奎 刊期: 2003年第02期

  • 老年人AMI合并急性左心衰竭20例临床分析

    通过对老年人急性心机梗死(AMI)合并急性左心衰竭20例临床特点的分析,探讨本病发病机制,为临床诊断和治疗提供参考.

    作者:李雅洁;蔡冬梅;胡健 刊期: 2003年第02期

  • 原核细胞中人神经生长因子基因的克隆

    目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备.方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌.结果:βNGF cDNA经BamHI 和PstI双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆.结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA.

    作者:尹元琴;马萍;隋承光;任常山 刊期: 2003年第02期

  • 多发性骨骺发育不良患者软骨寡聚物基质蛋白基因突变的研究

    目的: 探讨我国多发性骨骺发育不良患者中软骨寡聚物基质蛋白(COMP)基因的突变情况.方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)结合DNA直接测序对我国临床诊断为多发性骨骺发育不良的10例患者,其10名父母及30名正常对照进行COMP基因第10,13和14外显子区域突变分析.结果:正常对照SSCP分析均表现为相同带型.1例散发重型患者COMP基因外显子14区检测到单链泳动变位,测序结果显示第14内含子的近5′端存在纯合性G→A变异.结论:该变异可能是一种新型点突变,与患儿临床表型有关,也可能是COMP基因第14内含子中的一种单核苷酸多态.

    作者:刘晓梅;麻宏伟;姜俊;王阳;王岳平;王立 刊期: 2003年第02期

中国医科大学学报杂志

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