陈雪
目的 建立SYBR-Green1荧光定量PCR检测弓形虫的方法,并进行实验室方法学评价.方法 常规PCR扩增弓形虫RH株高度保守的B1基因部分序列,经TA克隆后转化入大肠埃希菌JM109中.提取重组质粒,PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR-Green1荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验,对桂弓、B36虫株及恶性疟原虫、血吸虫基因组DNA、30份孕产妇标本、1 221份无偿献血者标本进行检测.结果 用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数0.997,平均试验间变异系数0.81%,检测桂弓、B36虫株均为阳性,而检测血吸虫、恶性疟原虫基因组DNA均为阴性;孕产妇检测阳性率16.7%,平均拷贝数为1.19×105copies/μl;无偿献血者阳性率为0.74%,平均拷贝数为1.17×105 copies/μl.结论 成功建立了检测弓形虫B1基因的SYBR-Green1荧光定量PCR方法,较常规PCR技术更快捷、敏感、准确,适合临床实验室及无偿献血者的筛查使用.
作者：朱祥明；杨通汉；杨国庆；赵杨；姚富柱 刊期： 2007年第06期
目的 探讨苦参合剂对隐孢子虫感染BALB/c小鼠免疫功能的保护机制.方法 建立隐孢子虫病(CPS)小鼠模型,给小鼠苦参合剂,4周后剖杀,进行脾细胞的分离和培养,采用氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入技术体外免疫实验法和四唑盐比色试验(MTT整体免疫实验)检测小鼠T淋巴细胞的转化增殖情况,实验设有单纯模型组、PHA阳性对照组及正常对照组.结果 3H-TdR掺入技术体外免疫实验中,500、250、125、62.5和31.25 μg/ml剂量组的β射线放射活性(cpm值)均显著高于正常小鼠和CPS模型小鼠不给药对照组(P＜0.05或P＜0.01),以62.5 μg/ml浓度组强;MTT法整体实验中,苦参合剂(0.2 ml/只)用药组的吸光度(A)值与正常对照组相比显著升高(P＜0.05).结论 苦参合剂能刺激T淋巴细胞的转化,增强T淋巴细胞的增殖,提高机体的细胞免疫功能.
作者：崔巍；梁瑞文；辛玲；汲蕊；刘娟娟 刊期： 2007年第06期
目的 探讨纯化华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原在华支睾吸虫病免疫诊断中的应用价值.方法 使用SDS-PAGE和电洗提法,从可溶性华支睾吸虫成虫抗原中分离纯化14～33 ku抗原,用此抗原经ELISA方法检测华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、日本血吸虫病、姜片虫病患者血清及健康人血清特异性IgG抗体,并与粗制可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA结果相比较.结果 检测63例华支睾吸虫病患者血清,纯化华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原ELISA阳性率为76.2%,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA阳性率均为100%;检测25例卫氏并殖吸虫病、85例日本血吸虫病、27例姜片虫病患者血清,14～33 ku抗原的ELISA交叉反应阳性率分别为8.0%、3.5%、0,而可溶性成虫抗原分别为80.0%、62.4%、14.8%,可溶性成虫脱脂抗原分别为64.0%、55.3%、7.4%;检测127例健康人血清,14～33 ku抗原的ELISA假阳性率为0,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原的假阳性率分别为5.5%、3.1%.结论 纯化华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原用于华支睾吸虫病免疫诊断的特异性优于粗抗原,但敏感性较低.
作者：华万全；曹国群；许永良；余传信；娄培安；张志才 刊期： 2007年第06期
十堰市1995～2006年疟疾发病259人,年均发病率0.32/10万～0.92/10万;发病有明显的季节性,患病年龄主要为15～44岁,男性多于女性,职业以农民、民工为主,以输人性病例为主,本地发病较少.
作者：辜伟伟；梁洪新 刊期： 2007年第06期
采集726份阴道炎等患者阴道分泌物,分别用生理盐水涂片法、瑞氏染色法、革兰氏染色法、快速染色法(简称CTB染色法)检查滴虫、霉菌及淋菌,其中滴虫检出率分别为10.9%、11.7%、15.2%、15.7%,霉菌检出率分别为11.4%、12.7%、16.4%、17.1%,淋菌检出率分别为0、1.7%、3.4%、3.6%.以CTB染色法的检测效果好,具有较高的实用价值.
作者：罗思红；罗晓红；段朝晖；王英 刊期： 2007年第06期
目的 对性病门诊4 386例性传播疾病(STD)病人资料进行综合分析,了解感染病原和接受治疗情况.方法 将确诊STD病人的资料按年龄、性别、职业、传染来源、就诊症状、感染病种及复发等情况进行分类整理,用EPI info软件进行统计.结果 STD患者以21～30岁比例高(占50.55%),其次为31～40岁(占29.21%);男性占72.09%,女性占27.91%;非婚性接触占78.98%,其中男性占87.07%,女性58.09%;男性就诊以尿路感染症状为主(占52.72%),女性以外阴新生物为主(占34.88%);病种:非淋菌性尿道炎(NGU)占28.80%,尖锐湿疣(CA)占26.84%,淋病(GC)占17.03%,病原体为支原体(UU)、衣原体(CT)和淋病双球菌(GC),以及CT和/或UU与GC混合感染;复发病人占7.89%,其中CA复发率较高,为25.06%.结论 非婚性接触是STD高发的主要原因,NGU发病较多,混合感染占有一定比例,对尿路感染或宫颈炎的治疗应选择联合、足量、早期、规范用药的原则.
作者：高中静；渠慎稳；王连顺；高秀芬；孔令斌 刊期： 2007年第06期
目的 亚克隆金葡菌野生株S407030肠毒素B(SEB)基因,并在大肠埃希菌(E.coli)中表达,以获得重组SEB(Rseb)蛋白.方法 将含有SEB基因的质粒Pmd-18T/SEB双酶切获得目的片段,插入表达载体Pgex-4T-2中构建重组子Pgex-4T-2/SEB,并转化E.coli JM109感受态菌,阳性克隆以双酶切和PCR法鉴定;含重组质粒的工程菌以IPTG诱导表达Rseb蛋白;表达产物进行SDS-PAGE分析,并采用B-PER GST融合蛋白试剂盒纯化重组Rseb,Western blot鉴定其免疫反应性.结果 重组质粒经双酶切和PCR扩增鉴定均获得约705 bp的基因片段,与预期结果相一致;诱导表达的含GST的融合重组Rseb蛋白分子质量单位约为53 ku,纯化后作SDS-PAGE电泳显示一条蛋白带,Western blot显示Rseb能够被兔抗SEB抗体识别.结论 金葡菌野生株SEB在大肠埃希氏菌中得到有效表达,并获得电泳级纯度的重组Rseb,重组蛋白具有一定的免疫活性,为进一步研究其生物毒性与开发诊断试剂提供了生物材料.
作者：高世同；张仁利；刘会娟；秦莉；耿艺介；黄达娜；吴少庭 刊期： 2007年第06期
目的 探讨EDTA与金属离子对钉螺酚氧化酶活性的影响.方法 将钉螺软体匀浆、离心获取粗制酶液,再经盐析、透析及凝胶过滤层析得到部分纯化的酚氧化酶制剂.以在测活系统中分别加入不同浓度的EDTA、NaCl、KCl、Na2SO4、K2SO4、CuSO4、CaSO4、ZnSO4及MgSO4,以邻苯二酚为底物测定PO活性,计算相对活力.结果 Na+和K+对钉螺酚氧化酶活性既无抑制作用也无增强效应;各浓度的EDTA对钉螺酚氧化酶活性均有明显抑制作用;Zn2+对该酶活性亦有抑制作用,但较EDTA弱;Mg2+和Ca2+有增强酶活性作用,低浓度Cu2+可提高酶活性,高浓度Cu2+则可降低酶活性,其IC50为0.57 mmol/L.结论 EDTA及多种金属离子均可影响钉螺酚氧化酶活性,为研发以该酶为靶标的新型灭螺剂提供了理论基础.
作者：杨进孙；唐小牛；周书林 刊期： 2007年第06期
目的 研究多房棘球绦虫(Em)重组质粒pGEX-EmⅡ/3-Em14-3-3在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达效率.方法 通过PCR扩增EmⅡ/3和Em14-3-3抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接EmⅡ/3和Em14-3-3,得到EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因;将该融合基因定向克隆于含有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的高效原核表达载体pGEX-1λT,经酶切鉴定后以IPTG诱导表达EmⅡ/3-Em14-3-3/GST融合蛋白;SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定.结果 PCR成功扩增出2 554 bp的EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因;双酶切证实EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因插入pGEX-1λT中,成功构建了pGEX-EmⅡ/3-Em14-3-3重组质粒;SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒转化宿主菌在IPTG诱导下高效表达了能被活动性泡球蚴病鼠血清识别的EmⅡ/3-Em14-3-3/GST融合蛋白,分子质量单位119 ku.结论 多房棘球绦虫EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因在大肠埃希菌中获得了高效融合表达,表达出的EmⅡ/3-Em14-3-3重组蛋白具有特异的抗原性.
作者：杨梅；李文桂；朱佑明 刊期： 2007年第06期
目的 获取白纹伊蚊β-肌动蛋白基因序列并探讨其作为基因表达内参照的作用.方法 根据昆虫β-肌动蛋白核苷酸序列的高度保守区设计引物,通过PCR的方法从白纹伊蚊C6/36细胞中扩增获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,进一步通过RT-PCR的方法验证其在稳定转染空载体和40S核糖体蛋白S4(RPS4)基因的白纹伊蚊C6/36细胞中的表达.结果 获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,长911 bp,与其他几种蚊β-肌动蛋白基因对应序列的相似性在89%以上.在稳定转染空载体和RPS4基因的C6/36细胞中,均可稳定地扩增出目的基因.结论 成功获得了白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,并且该片段完全可以用作基因表达差异分析时的内参照基因.
作者：焦健华；马磊；张东辉 刊期： 2007年第06期
应用区域阻滞联合心理干预治疗带状疱疹性神经痛病例30例,有效率100%.轻度者阻滞1～2次,重度者3～4次痊愈.
作者：刘金辉 刊期： 2007年第06期
收集感染犬钩口线虫新鲜犬粪便,称取1、0.2 g,分别采用青霉素瓶定量饱和盐水漂浮法作虫卵计数,出现虫卵的片数分别为25张和11张,克粪虫卵数(EPG)分别为1 648和1 425,表明标本量影响检验结果.称取1 g粪便,采用改良洪氏虫卵计数法检查,EPG为1 316,仅为青霉素瓶定量饱和盐水漂浮法的79.9%(1316/1648).
作者：周振座；申海光；何曲波 刊期： 2007年第06期
调查大连市少数民族学生寄生虫感染率为4.58%,汉族学生感染率2.33%,差异有显著性(P＜0.05).少数民族学生寄生虫感染率高可能与饮食习惯有关.
作者：范庆华；张斌；李文斌；董文荣；姚伟 刊期： 2007年第06期
目的 分析我院志贺菌的流行菌株类型和耐药特点,研究志贺菌1类整合子的检出率、与耐药的相关性及其携带的耐药基因盒.方法 从本院肠道门诊腹泻患者的粪便标本分离出70株志贺菌,以K-B琼脂法测定药敏情况;PCR扩增1类整合子可变区并进行序列测定和基因盒分析.结果 70株志贺菌对四环素、复方新诺明、氨苄西林、利福平、萘啶酸的耐药率均＞60%;对喹诺酮类常用药诺氟沙星耐药率较低,为12.8%;对头孢菌素类的耐药率≤10%.多重耐药率较高,达到77.1%.16株(22.9%)志贺菌中检出1类整合子.其中8株检出大小约为1 900 bp的1类整合子,测序显示含有编码对甲氧苄啶耐药的基因盒dhfrXⅡ和对氨基糖苷类耐药的基因盒aadA2,另8株检出大小约为1 000 bp的1类整合子,测序显示含有编码对氨基糖苷类耐药的基因盒aadA2.结论 本院志贺菌流行株主要是福氏和宋内氏志贺杆菌,多重耐药率较高.志贺菌中存在1类整合子,与志贺菌的耐药具有相关性
作者：郑晓燕；温艳；阴赪宏；黄敏君；李威；栗绍刚；齐志群 刊期： 2007年第06期
本文总结了适于实验室培养幽门螺杆菌的方法和条件.结果表明,在适宜的固体培养基条件下幽门螺杆菌生长良好,培养基菌液浓度可达到109/20 ml.
作者：刘生杰；梁浩 刊期： 2007年第06期
采用赛特斯集体服药驱虫措施后,中小学生肠道蠕虫感染率显著下降,但农村学生感染率仍较高,建议采取每年2次驱虫,开展健康教育、粪便无害化处理等措施,进一步控制学生肠道蠕虫感染率.
作者：王军芳 刊期： 2007年第06期
目的 掌握贵州省重要寄生虫病流行分布现状.方法 按照《全国重要人体寄生虫病现状调查实施细则》要求进行.结果 土源性线虫病调查30个点15 958人,感染率为47.52%,其中蛔虫、钩虫、鞭虫、蛲虫感染率分别为42.41%、4.71%、10.77%和1.67%.绦/囊虫病调查16个点,其中问卷调查17 889人,无确诊绦虫病人;血清学检查6 669人,阳性16人,阳性率0.24%.华支睾吸虫病调查9个点5 195人,粪检虫卵阳性2人,感染率0.04%.包虫病调查2个点1041人,血清学阳性率8.26%;弓形虫病调查10个重点人群及3个点共4 933人,血清学阳性率16.81%.黑热病调查3个点1 442人,未发现患者或疑似患者,调查地亦未发现白蛉.结论 与1991年全国首次人体寄生虫分布调查结果相比,贵州省人体土源性线虫感染率明显下降,但感染率水平仍较高,并存在食源性寄生虫及弓形虫等感染.
作者：王世海；陈兆义；李安梅；唐丽娜；徐莉娜；林广初；王秀珍 刊期： 2007年第06期
通过对海盐县1988～2005年疟疾监测资料的分析,了解本地区疟疾的病原、传播媒介和流行规律.
作者：吴海平；徐佩华；周晓红；孙明华 刊期： 2007年第06期
本文对200例具有消化道症状的患者进行13C尿素呼气试验,结果13C尿素呼气试验与HPUT、细菌培养、PCR无明显差异;13C尿素呼气试验在诊断HP感染时,方便可靠、特异性和敏感性较高.
作者：陈雪 刊期： 2007年第06期
目的 了解安徽省疟疾流行趋势和特征,为制定防治措施提供依据.方法 使用Epi info3.3.2和Excel软件分析2003～2005年的全省疟疾发病资料.结果 安徽省2003～2005年疟疾发病率显著上升(x2=3167.6687,P＜0.01).其中2004年发病率13.84/10万,比2003年的12.43/10万,上升11.26%;2005年发病率24.19/10万,分别比2004年和2003年上升74.89%和94.60%.极少数行政村出现发病集中现象.结论 安徽省疟疾疫情回升,疟疾形势不容乐观.
作者：刘永孝 刊期： 2007年第06期
中国病原生物学杂志
主管:中国寄生虫病防治杂志
主办：中华人民共和国卫生部
