学术投稿

10种食源性疾病病原体高通量LAMP分子鉴别检测体系的建立及应用

孙边成;长如胜;宋克云;欧新华;姚栋;苏良;叶文;陈法明

关键词:食源性疾病, 病原体, 环介导等温扩增, 分子鉴别检测, 高通量
摘要:目的 建立一种LAMP分子鉴别检测体系,应用于10种食源性疾病病原体的分子鉴别检测.方法 针对8种细菌(沙门菌属、志贺菌属、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、EHECO157:H7、奇异变形杆菌、霍乱弧菌和单增李斯特菌)和2种病毒(Norwalk病毒和轮状病毒)分别建立LAMP和RT-LAMP方法,分别对25种常见肠道细菌和病毒进行LAMP扩增,水浴箱内65℃扩增60 min(LAMP)或120 min(RT-LAMP),扩增完成后利用电泳和肉眼进行结果判断.对365份食源性疾病患者呕吐物、肛拭子和食品等标本进行10种食源性疾病病原体LAMP分子检测.结果 10种食源性疾病病原体LAMP或RT-LAMP方法均只对靶病原体出现阳性结果,电泳显示为LAMP特异性梯状条带,加SYBRGreenⅠ后肉眼观察反应液变为绿色;8种细菌性病原体LAMP检测方法的敏感度为3×100~1.2×102 cfu/ml,其中6种LAMP方法敏感度高于PCR方法,其他病原体(霍乱弧菌、EHEC O157:H7、Norwalk病毒和轮状病毒)敏感度与PCR方法相同.从365份标本中检出沙门菌属11份、志贺菌属6份、金黄色葡萄球菌13份、EHEC O157:H7 2份、副溶血性弧菌2份、单增李斯特菌2份、Norwalk病毒12份和轮状病毒7份.结论 建立了一个较为完整的LAMP分子鉴别检测体系,可以在一台水浴箱内同时对10种食源性疾病病原体进行高通量的分子鉴别检测,具有快速、不需要特殊仪器和肉眼判断结果的优势,适合基层单位的实验室开展食源性疾病的分子鉴别诊断.
实用预防医学杂志相关文献
  • 经脐单孔无气腹腹腔镜下治疗精索静脉曲张性不育的效果观察

    目的 了解经脐单孔法无气腹腹腔镜精索静脉高位结扎术治疗精索静脉曲张性不育的临床疗效.方法 选取精索静脉曲张患者40例,行经脐单孔法无气腹腹腔镜精索静脉高位结扎术,观察患者的手术时间、术后住院天数、术后并发症及术后3个月时精液质量改善情况.结果 40例患者术后均顺利完成,无明显出血影响手术操作,无严重手术并发症,术后阴囊坠胀不适感均消失或减轻,阴囊触诊扩张迂曲的静脉明显缩小,Valsava试验阴性.其中单侧患者手术时间为18~25 min,平均24.2 min;双侧患者手术时间为35~47 min,平均36.7 min.平均住院时间2.4d.经过3个月随访,无复发病例,术后3个月复查精液常规,精液质量明显改善,术后精子密度、活率、(A+B)级精子比例与术前比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 经脐单孔腹腔镜精索静脉高位结扎术可作为治疗精索静脉曲张性不育的一种可选术式,可取得良好的临床疗效.

    作者:于海龙;司良敏;王雪冬;李永刚;杨利 刊期: 2011年第12期

  • 孕期苯染毒对母鼠其子鼠血T淋巴细胞亚群和体液免疫功能的影响

    目的 探讨妊娠期接触苯对其子鼠免疫功能的影响.方法 40只孕鼠被随机等分为空气对照组和5.0、10.0、15.0 mg/m3三个不同浓度的苯染毒组,各组从孕7d开始,连续染毒至分娩,每天染毒2h.分别在分娩后1d及7d,每组取5只母鼠和5只子鼠取血检测T淋巴细胞亚群和血清免疫球蛋白的含量.结果 在子鼠出生后1d和7d,等浓度组的母鼠和子鼠的血T淋巴细胞亚群、血免疫球蛋白的含量差异均无统计学意义(P>0.05);低浓度苯染毒组与对照组比较,CD3+、CD4+、CD4+ /CD8+和血各种免疫球蛋白的含量差异均无统计学意义(P>0.05);但在中、高浓度组CD3+ 、CD4+和CD4+/CD8+和血各种免疫球蛋白的含量均较对照组低(P<0.05),并呈明显的剂量-效应关系(P<0.01).但无论是母鼠还是子鼠,在两个时间点间的T淋巴细胞亚群和血各种免疫球蛋白的含量变化差异无统计学意义(P>0.05).结论 妊娠期鼠吸入苯可抑制母鼠及其子鼠细胞免疫和体液免疫功能.

    作者:李紫;邹学敏;李纯颖;旷亦乐;杨双波;吴成秋 刊期: 2011年第12期

  • 重症肝病患者凝血指标监测对预防继发性出血的临床意义

    目的 观察重症肝病患者凝血指标特点并探讨其预防继发性出血的临床意义.方法 选择本院2009年1月-2011年5月收治的重症肝病患者80例作为观察组,其中重型肝炎患者32例,肝硬化患者30例,肝癌患者18例(未进行放、化疗),检测患者的凝血指标,包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及纤维蛋白原(FIB),并以同期随机选择的健康体检者30例作为对照组,总结重症肝病患者凝血指标变化特点.结果 重型肝炎、肝硬化、肝癌患者的PT、APTT均明显延长,FIB明显减低,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 重症肝病患者凝血指标异常,患者血液处于明显低凝状态、具有出血倾向,其监测有助于及早发现重症肝病患者的凝血机制障碍,对预防继发性出血及改善预后有重要的临床意义.

    作者:舒海英 刊期: 2011年第12期

  • 1024份果蔬农药残留状况监测

    目的 掌握蔬菜水果中农药残留水平,为安全食用提供科学依据.方法 定期采样共计1 024份,按本实验室的方法检测有机磷、有机氯和拟除虫菊酯类农药残留水平,依据GB2763-2005进行评价.结果 有机磷类农药检出率为30.76%,超标2.86%;有机氯类农药检出率为15.23%,无超标;拟除虫菊酯类农药检出率为40.23%,超标1.94%.结论 各种农药在蔬菜中使用非常普遍,应采取综合措施,严把农药采购关,选择低毒种类农药,从根本上做到“从土壤到餐桌”的安全.

    作者:秦珑;杨梦祺;王建营;姜德全;曹巧玲 刊期: 2011年第12期

  • 黔东南州2010年麻疹疫苗强化免疫结果分析

    目的 评价黔东南州麻疹疫苗强化免疫活动效果.方法 采用描述流行病学方法,对2010年黔东南州麻疹疫苗(MV)强化免疫的各种数据进行分析.结果 全州儿童报告接种率为98.33%,其中本地儿童报告接种率为98.40%;抽样调查接种率为97.43%;州统计局公布人口数估算接种率为92.57%.结论 本次MV强化免疫达到了预期目标.

    作者:潘宏;段林李;郭豫;邓茂铭;吴念标 刊期: 2011年第12期

  • 北京市昌平区大学生艾滋病哨点监测结果分析

    目的 了解北京市昌平区大学生对艾滋病知晓及性行为情况,为今后在大学生中开展艾滋病宣传教育的内容及方法提供科学依据.方法 采用整群随机抽样方法,运用自填式问卷调查北京市昌平区某所大学800名学生,收集大学生对艾滋病认知情况.结果 大学生的艾滋病知识知晓率为89.00%,传播途径知晓率较高.有46人(5.75%)报告曾有过性行为,但安全套使用率并不高.未检测出HIV抗体阳性者,梅毒抗体和丙肝抗体阳性率分别为0.12%.结论 大学生对艾滋病知识的掌握还不全面,存在不安全性行为.加强大学生性生理健康教育及艾滋病性病教育,对控制艾滋病性病的传播、促进青少年性健康具有重要意义.

    作者:马树波;陈国敏;曾毅 刊期: 2011年第12期

  • 女大学生痛经的流行病学调查

    目的 了解日前在校女大学生的痛经发病状况,为原发性痛经的防治提供依据.方法 采用问卷调查的形式,运用无记名随机抽样的方法,对某大学527名女大学生进行调查,对495份有效样本采用SPSS18.0统计软件进行统计分析.结果 1)月经初潮年龄小为10岁,大为17岁,平均为(13.44±1.16)岁;2)495人中有216人发生过不同程度的痛经,其发生率为43.6%,其中轻度为56.4%,中度为34.3%,重度为9.3%;3)痛经经期伴随症状中,心烦易怒者占71.8%,忧郁者占45.4%,神经过敏者占28.7%.结论 原发性痛经在女大学生中发生率较高,女生在经期易出现心烦易怒、抑郁、神经过敏等负性情绪,提示不良情绪会诱发或加重痛经,因此,在防治原发性痛经时应该关注痛经的伴随症状防治,进一步研究痛经伴随症状发生的机理.

    作者:苏程果;周友龙;陈晓燕;段艳丽;刘伟;付荣耀 刊期: 2011年第12期

  • 血浆(1,3)-β-D葡聚糖的检测对侵袭性真菌感染诊断价值

    目的 探究血浆(1,3)-β-D葡聚糖对侵袭性(深部)真菌感染(invasive fungal infection,IFI)诊断价值.方法 用两种不同方法检测67例疑似IFI患者的标本,了解其真菌感染情况;分析比较健康和确诊IFI两组血浆(1,3)-β-D葡聚糖的水平.结果 G试验动态浊度法和传统真菌培养阳性率分别为47.8%和22.4%,两者差异有统计学意义(x2 =9.47,P<0.01);IFI组血浆(1,3)-β-D葡聚糖水平(475.3±375.6)pg/ml明显高于健康人群组(6.2±5.6)pg/ml(t=8.94,P<0.01);血浆(1,3)-β-D葡聚糖使用临界值为20.0 pg/ml,诊断真菌感染的阳性预测值、阴性预测值和准确 率分别为83.0% 、100.0%和91.1%.结论 血浆(1,3)-β-D葡聚糖是反映IFI的一个良好指标,可用于IFI的早期诊断,又可为IFI患者的疗效评价指标.

    作者:顾小红;蒋汉茂;邹良慧 刊期: 2011年第12期

  • 肺结核患者生命质量测定量表QLICD-PT研制中的条目筛选研究

    目的 初步得出肺结核患者生命质量测定量表特异性模块.方法 采用议题小组和核心小组的程序化决策方式,通过定性访谈和定量调查分析相结合的方法对条目进行初步筛选、评价和修改形成初步量表,随机抽取30名肺结核患者和19名医务工作者进行问卷调查,采用变异系数法、相关分析、因子分析、医生重要性评分及病人重要性评分法对结果进行分析.结果 采用上述5种方法分别选出11、10、10、8和11个条目,终得出包含12个条目的特异模块,包含症状、副作用和心理等小方面.结论 肺结核生命质量测定量表特异模块按严格程序筛选得出,具有较好的代表性和内容效度.

    作者:陈留萍;李微;万崇华;张晓磬;许传志;许琳 刊期: 2011年第12期

  • 湘南地区临床分离大肠埃希菌的耐药性变迁

    目的 了解湘南地区大肠埃希菌的耐药性,为临床用药提供参考.方法 采用WHONET5.3软件对2008-2010年郴州地区11所医院(9所二级医院,2所三级医院)临床标本中分离的2 584株大肠埃希菌的耐药性进行回顾性统计分析.结果 湘南地区2008-2010年三年间共检出大肠埃希菌2 584株,在药敏结果中除碳青霉烯类抗菌药物外,其余抗菌药物中产ESBLs菌株较非产ESBLs菌株的耐药性明显增高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 应加强对大肠埃希菌的耐药性监测,合理规范使用抗菌药物.

    作者:黄红卫;张林;熊劲芝;黄强;刘巧突 刊期: 2011年第12期

  • 血清白蛋白的变化与急性重型颅脑损伤颅内出血的关系研究

    目的 探讨急性重型颅脑损伤颅内出血患者血清白蛋白(Alb)水平变化及其临床意义.方法 选择本院收治的急性重型颅脑损伤颅内出血患者54例为研究组,另选择同期于本院健康体检者30例为正常对照组,采用日本AU-2700型全自动生化分析仪检测各组不同时间段血清Alb水平.结果 研究组重型与轻型患者入院后第1、3、7、14 d血清Alb水平较正常对照组明显降低(P<0.05),重型患者入院第7、14 d的血清Alb水平较轻型患者明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).根据重型颅脑损伤颅内出血患者出院时的预后分为死亡组37例,存活组17例.死亡组入院后第1d血清Alb水平与存活组差异无统计学意义(P>0.05),但入院后3、7、14 d血清Alb水平明显低于存活组(P<0.05).结论 血清白蛋白的动态观察对评估急性重症颅脑损伤颅内出血患者的病情发展疗效和预后具有重要临床价值.

    作者:丁山;林岚;陈辉;林莹芬 刊期: 2011年第12期

  • 珠海市斗门区人群甲型H1N1流感病毒抗体影响因素分析

    目的 了解珠海市斗门区人群甲型H1N1流感病毒感染状况及抗体水平,探讨影响普通人群血清甲型H1N1流感病毒抗体阳性的因素.方法 采用多阶段随机抽样方法,从斗门区2个镇选取480人进行问卷调查,并采集血液标本进行甲型H1N1流感病毒血凝抑制(HI)检测.结果 甲型H1N1流感抗体阳性人数为110人,阳性率为22.92%6(110/480).单因素和多因素二项Logistic分析均显示职业、接种甲型H1N1流感疫苗、调查前曾患过感冒与血清甲型H1N1流感病毒抗体阳性有关.结论 珠海市斗门区人群甲型H1N1流感病毒抗体水平不高.接种甲型H1N1流感疫苗是预防甲型H1N1流感的重要手段.

    作者:赵超敏;陈斌;周伴群;吴水滨;焦亮;罗志华 刊期: 2011年第12期

  • 植物化学物预防乳腺癌作用的研究进展

    乳腺癌是女性常见恶性肿瘤之一,是全球女性常见的肿瘤和首要的肿瘤死亡原因[1].其发病率近年来在世界范围内呈逐年上升的趋势,但在不同国家和地区之间存在着差异.流行病学研究发现中国、日本及一些亚洲国家的乳腺癌发病率较美国及欧洲国家低[2],生态和移民研究显示这种差异很大程度上是因为环境因素的改变引起,如饮食习惯等[3].众多的科学家通过人群或动物实验发现了饮食结构中可能对乳腺癌有影响的组成部分.其中,引入注目的便是蔬菜和水果.大量的流行病学结果证明蔬菜和水果中所富含的植物化学物多数都有防止人类癌症发生的潜在作用,从不同的实验系统(离体、动物)也可获得有关蔬菜水果以及提取的植物化学物的抗癌作用资料.大约有30余种植物化学物质在降低人群癌症发病率方面可能具有实际意义.本文就目前世界上研究较热门,可能对乳腺癌的发生起到保护作用的几类植物化学物进行了综述.

    作者:杨俊峰;任国峰 刊期: 2011年第12期

  • 东莞市茶山镇2010-2011年学生体检结核菌素试验结果分析

    目的 了解茶山镇学生结核菌感染情况,为该地区防控结核病提供依据.方法 对茶山镇2010年和2011年的入学新生开展PPD试验,采用统一的疫苗和接种方法,并按照有关标准进行阳性判断.结果 2 583名学生的阳性率为49.17%,强阳性占阳性者的42.05%,不同性别、户籍间的阳性率差异无统计学意义,12岁以上年龄组阳性率高于12岁以下年龄组,有卡痕组阳性率高于无卡痕组.结论 PPD试验是一种简单易行的监测结核感染的方法,根据试验结果采取不同防治措施,可有效控制结核病在学校的传播和流行.

    作者:钟艳芬;叶俊锋;潘小划 刊期: 2011年第12期

  • HIV检测结果对孕妇妊娠结局选择的影响分析

    目的 通过HIV检测结果对孕妇妊娠结局选择的影响分析,进一步了解孕妇对HIV检测结果与选择继续妊娠与否的理解水平,从而为开展艾滋病防治健康教育,宣传国家孕产妇艾滋病相关政策提供有效信息.方法 对2011年4月1日-6月30日期间来本院接受首次产前检查的867名孕妇进行问卷调查.结果 年龄、婚姻建立与否、文化程度、孕周、HIV母婴传播率、艾滋病相关知识获得等均对HIV检测结果的理解和是否选择继续妊娠及妊娠结局有明显的影响,差异有统计学意义(P<0.05).结论 年龄≥31岁、在婚、大专以上学历、孕周≥28周时选择结束妊娠的比率高;年龄<24岁、未婚、高中或中专学历、孕周<13周者选择继续妊娠的比率高;艾滋病相关知识获得的程度与孕妇选择妊娠结局呈相关性;母婴传播率的高低对妊娠结局有直接影响.

    作者:吴让香;曾宇东;钱红艳 刊期: 2011年第12期

  • 2001-2009年常德市结核病控制效果分析

    目的 分析常德市结核病控制项目实施9年的效果,为结核病防治工作可持续发展提供依据.方法 收集2001-2009年湖南省常德市中国疾病预防控制信息系统资料、13个县(市、区)中国结核病防治规划登记资料、相关纸质文书、报表等资料.按照《中国结核病防治规划实施工作指南》和其它相关要求进行统计分析.结果 常德市2002年启动现代结核病控制策略,2004年以县为单位DOTS策略覆盖率达到100%.2001-2009年全市共接诊结核病可疑症状者123 538例,可疑者年就诊率从2001年的113.74/10万上升到2009年的324.61/10万;发现涂阳肺结核患者25 758例,其中新涂阳患者21 800)例,新涂阳肺结核登记率平均为40.07/10万,新涂阳肺结核发现率平均为65.63%;初治涂阳平均治愈率为88.8%,复治涂阳平均治愈率为82.0%.结论 实施DOTS策略,可提高肺结核患者的发现率和治愈率,减少结核病的传播,产生明显的社会防治效益.

    作者:杨小红 刊期: 2011年第12期

  • 原花青素对氨基脲染毒小鼠免疫细胞活性的影响

    目的 观察原花青素(PC)对氨基脲(SEM)染毒小鼠免疫细胞活性的影响.方法 将50只成年KM小鼠,随机分为5组:溶剂对照组,SEM染毒组,SEM染毒+低、中、高剂量PC保护组;溶剂对照组,灌胃去离子水;SEM染毒组,前两周灌胃56.25 mg/kg·bw SEM溶液,后4周灌胃去离子水;低、中、高剂量PC保护组,前2周均灌胃56.25 mg/kg·bw SEM溶液,后4周分别灌胃100、200、400 mg/kg· bw PC溶液.末次灌胃24 h后,摘眼球采血后处死小鼠,测定相关检测指标.结果 SEM染毒组小鼠NK细胞活性、腹腔巨噬细胞的吞噬能力、抗体形成细胞数、淋巴细胞转化能力(SI)均低于溶剂对照组(P<0.05);而中、高剂量PC保护组小鼠NK细胞活性、腹腔巨噬细胞的吞噬能力、AFC及SI均高于SEM染毒组,其差异均有统计学意义(P<0.05).结论 适量的原花青素可减轻氨基脲致小鼠免疫细胞活性的损伤.

    作者:周艳;余明东;朱乐玫;杨双波;贺栋梁 刊期: 2011年第12期

  • 索他洛尔和普罗帕酮对心律失常患者QT离散度的影响及临床效果对比研究

    目的 比较索他洛尔和普罗帕酮对心律失常患者治疗前、后QT离散度(QTd)变化的影响及临床效果差异.方法 60例心律失常患者随机分为索他洛尔组30例和普罗帕酮组30例,索他洛尔组单独给予索他洛尔,起始剂量40mg/次,2次/d,治疗1周后如无效可逐步增加剂量,单次剂量增加40 mg/次,大量不超过120 mg/次,2次/d.普罗帕酮组患者均单独使用普罗帕酮,起始剂量150mg/次,3次/d,如疗效不佳则每隔5~7d增加单次剂量50 mg,大剂量不超过900 mg/d.2组治疗时间均为7周.治疗期间不合用其他抗心律失常药物.结果 索他洛尔和普罗帕酮两组治疗显效率分别为80%与70%,索他洛尔组较普罗帕酮组疗效稍好,但差异无统计学意义(P>0.05).索他洛尔组治疗后QT间期、QTd较治疗前差异有统计学意义(P<0.05),普罗帕酮组QT间期及QTd用药前、后差异无统计学意义(P>0.05).索他洛尔和普罗帕酮组治疗后的QT间期及QT离散度差异有显著性意义(P<0.05).结论 索他洛尔可引起QTd的降低,是其疗效较普罗帕酮好的重要因素.

    作者:龚尤贵;凌智瑜 刊期: 2011年第12期

  • EB病毒VCA-IgA在鼻咽癌筛查中的临床意义

    目的 探讨血清EB病毒衣壳抗原(EB-VCA IgA)在鼻咽癌筛查的临床意义.方法 以2009年7月-2011年6月期间在本院进行EB-VCA IgA筛查的3 820例居民为研究对象,用酶联免疫吸附法测定血清EB-VCA IgA;对结果异常者取鼻咽部黏膜脱落细胞或活体组织检查,分析EB-VCA IgA在鼻咽癌筛查中的意义.结果 在3 820例居民中,EB病毒抗体阳性48例(1.26%),确诊为鼻咽癌2例.结论 在鼻咽癌的高发地区,EB-VCA IgA可作为一项常规防癌检查项目,以有利于鼻咽癌的早期发现、早期诊断、早期治疗.

    作者:潘桂常;黄岩;潘辉林;原伟权;朱玉爱;汤锐明;王馨 刊期: 2011年第12期

  • 深圳市医务人员抑郁状况调查研究

    目的 了解深圳市宝安区医务人员抑郁状况并找出其影响因素.方法 通过对深圳市宝安区医务人员随机抽样调查获得样本数据,通过单因素分析卡方检验和多因素Ordinal回归分析找出有意义的影响因素.结果 共调查1 600名医务人员,有效问卷1 594份,有效率为99.63%.单因素分析显示性别、婚姻状况、职业、收入、每周加班时间、每周上晚班频率对焦虑的产生有统计学意义(P<0.05).Ordinal回归显示男性患抑郁症的概率为女性的0.89倍(OR=0.89);医生患抑郁症的概率是药剂人员的1.35倍(OR=1.35);随着收入降低,每周加班时间的增加、上晚班频率的增加,患抑郁症的概率随之增加.结论 调解医务人员压力时应关注女性身心健康、考虑增加医务人员每月收入、减少工作量和工作强度,减少人均加班时间和上晚班的频率,增加人力资源.

    作者:贺锋 刊期: 2011年第12期

实用预防医学杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中华预防医学会 湖南省预防医学会