学术投稿

巢式PCR在腺病毒F亚属引起的致腹泻肠道感染检测中的应用

张志华;王华洪;兰喆

关键词:巢式PCR, 检测, 肠道腺病毒, 基因测序
摘要:目的 建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况. 方法 根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引物扩增靶基因片段,扩增后片段长度为520 bp,另根据相对保守序列设计一对特异性的引物以第一次PCR扩增后的产物为模板,再进行PCR扩增,片段长度为300 bp.通过ABI3130基因检测仪来评价该方法的特异性;对腺病毒模板做10倍比系列稀释后进行巢式PCR检测,并对其敏感性进行分析,对PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定. 结果肠道致腹泻肠道感染中通过巢式PCR扩增反应可检出腺病毒F亚属,通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;在敏感性检测中PCR检测肠道腺病毒模板的下限为2.08×10-4μg/ml. 结论本研究建立了一个快速、特异、敏感的肠道腺病毒PCR检测方法,适用于流行病学调查及临床检测.
实用预防医学杂志相关文献
  • 大肠杆菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测及药敏分析

    目的 了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶的情况及耐药性分析,为临床合理用药提供依据.并对17种抗菌药做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对12种抗菌药的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据. 方法 菌株来源于2006年4月-2008年12月东莞市太平人民医院住院患者送检合格标本中分离的大肠埃希菌80株、肺炎克雷伯菌101株.应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,用三维试验抑制试验及AmpC酶诱导试验对表型可疑产AmpC酶的菌株进行检测.以K-B琼脂扩散法做药敏试验,并采用MIC法进行验证. 结果在181株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,64株(35.4%)产AmpC酶,产酶株对亚胺培南、头孢吡肟耐药率低,另外MIC法显色药敏检测板与K-B法有较高符合率,能提供准确的耐药提示. 结论产生AmpC酶是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢类抗菌药物耐药的又一重要机制,实验室应对其检测与监测给予足够重视,以指导临床合理选用抗菌药物、减缓对细菌耐药的选择性压力、避免医院感染的发生和流行.治疗应以亚胺培南为首选,头孢吡肟可作为选用药物之一,应推广使用MIC法.

    作者:杨卫东;莫润田;李明;周湧 刊期: 2009年第06期

  • 儿童咳嗽变异性哮喘误诊180例临床分析

    目的 探讨小儿咳嗽变异性哮喘的误诊原因,提高其诊断水平. 方法 总结180例误诊的咳嗽变异性哮喘患儿临床资料,分析其误诊原因. 结果咳嗽变异性哮喘以慢性咳嗽为主要表现,缺少肺部体征,临床极易误诊,本组病例在确诊前均被误诊,其中误诊为支气管炎51例,迁延性肺炎32例、反复呼吸道感染30例,支原体肺炎22例,过敏性咳嗽12例,慢性咽炎9例,慢性扁桃体炎8例、百日咳7例、结核感染3例、支气管异物3例,支气管扩张2例,胃食道返流1例. 结论对该病的认识不足、询问病史不详、缺乏必要的辅助检查、滥用抗生素、激素及凭经验诊治对病情缺乏全面分析等是造成误诊的主要原因,减少误诊的关键是认识该病的特点,提高医师对该病的诊治水平.

    作者:陈艳萍;孟燕妮 刊期: 2009年第06期

  • 沂蒙山区中学生性相关问题调查

    目的 了解沂蒙山区中学生性观念、性行为、性知识、性教育现状及对性知识的需求状况,从而有效指导中学生的青春期性健康教育工作. 方法 采用问卷调查的方式对沂源县1 800名中学生进行调查. 结果大多数中学生对性科学知识的了解相对贫乏,接受性知识的途径局限,而且有较多机会接触黄色书刊和色情网站,革命老区传统的性观念受到了强烈的冲击,大多数中学生渴望了解更多的性健康教育方面知识. 结论在中学中开展以青春期性知识为主的健康教育势在必行,需要学校、家庭、社会的相互配合.

    作者:王爱丽 刊期: 2009年第06期

  • 长沙市城区职业人群血脂紊乱和高血糖、高血压及代谢综合征患病率的调查

    目的 了解长沙市城区职业人群血脂异常,高血糖、高血压及代谢综合征(MS)的患病率及其特点. 方法 调查该城区来湖南省马王堆医院体检的公务员、公司职员、教科卫生人员共9 880名的身高、体重和血压、血检测血糖、血脂.采用中华医学会糖尿病学分会(CDS)诊断标准确定MS患者. 结果被调查人群中血脂紊乱的患病率为33.5%(3 310例),符合高血糖诊断标准的共有504例,患病率为5.1%,高血压的患病率15.5%(1 531例),超重肥胖(OB/OW)共检出2 915例,总患病率为29.5%.MS的患病率为11.6%(1 144例),男性患病率(13.5%)高于女性(9.2%),在不同性别组MS患病率均随年龄的增长而上升.调查人群中Ms的4个组分中至少有一项阳性的比例高达55%(5 434例). 结论长沙市城区职业人群中MS的患病率较高,高脂血症的患病率和高血压患病率也比较高,因此在人们生活水平提高的同时,加强膳食平衡的营养教育,使居民的饮食更加合理,并应增加体育运动.

    作者:曹典象;谭逵 刊期: 2009年第06期

  • 吸附无细胞百白破与吸附百白破疫苗接种反应观察

    目的 了解吸附无细胞百白破三联疫苗(ADPT)和吸附百白破三联疫苗(WDPT)用于儿童免疫的安全性.方法 2006-2008年在齐齐哈尔市第一医院预防保健科所属十个社区随机将3个月~2岁儿童分成2组,分别接种ADPT和WDPT,观察局部与全身反应. 结果接种ADPT和WDPT者,基础免疫全身反应发生率分别为2.81%、6.21%,局部反应发生率分别为3.26%、7.81%;加强免疫全身反应发生率分别为4.63%、13.16%,局部反应发生率分别为5.55%、16.36%.以上反应发生率均为WDPT组高于ADPT组,差异有统计学意义(P<0.001).随针次增加,接种副反应率有增加趋势. 结论 ADPT较WDPT接种副反应发生率低,用于儿童免疫安全性较好.

    作者:冯艳萍;赵蕊;郑晓红;周艳平;王翠英 刊期: 2009年第06期

  • 硝酸银比浊法测定饮用水中微量氯化物

    目的 探讨硝酸银比浊法测定饮用水中微量氯化物的方法. 方法 根据水中的氯化物在酸性介质中,能与硝酸银定量反应生成白色氯化银沉淀,而在水中形成乳浊液,通过浊度仪测定其浑浊度而准确测定水中氯化物含量.结果 氯化物含量在0.10~5.00 mg/L范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r=0.9998;方法的相对标准偏差为0.058%~1.8%;样品的加标回收率为98.5%~102.5%;方法的灵敏度、精密度和准确度均优于硝酸银容量法. 结论本方法不但具有快速、简便、灵敏度高、精密度和准确度好等优点,而且不需要配置大型精密的检验设备,便于一般基层单位广泛开展.

    作者:余涛 刊期: 2009年第06期

  • 巢式PCR在腺病毒F亚属引起的致腹泻肠道感染检测中的应用

    目的 建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况. 方法 根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引物扩增靶基因片段,扩增后片段长度为520 bp,另根据相对保守序列设计一对特异性的引物以第一次PCR扩增后的产物为模板,再进行PCR扩增,片段长度为300 bp.通过ABI3130基因检测仪来评价该方法的特异性;对腺病毒模板做10倍比系列稀释后进行巢式PCR检测,并对其敏感性进行分析,对PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定. 结果肠道致腹泻肠道感染中通过巢式PCR扩增反应可检出腺病毒F亚属,通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;在敏感性检测中PCR检测肠道腺病毒模板的下限为2.08×10-4μg/ml. 结论本研究建立了一个快速、特异、敏感的肠道腺病毒PCR检测方法,适用于流行病学调查及临床检测.

    作者:张志华;王华洪;兰喆 刊期: 2009年第06期

  • 沧州市不同年龄居民艾滋病相关知识和态度调查

    目的 了解沧州市不同年龄居民艾滋病相关知识、态度现状. 方法 问卷调查15~60岁居民3 491人.结果 回收有效问卷3 456份,其中95%以上的居民都听说过艾滋病,对三条主要传播途径知晓率较高,对非传播途径、政策法规等知晓率较低,对艾滋病病人有歧视倾向,不同年龄之间存在差异. 结论针对不同年龄人群有重点、有针对性的开展艾滋病知识宣传和行为干预,是艾滋病预防工作的重要内容.

    作者:陈瑞玲;陈俊荣;刘铁柱;刘立新;许郑林;张瑞兰 刊期: 2009年第06期

  • 未婚先孕人流对女性身心健康影响及干预措施

    对未婚先孕人流女性主客观因素、身心健康影响及保健需求进行调查分析,针对这一社会问题提出干预措施,提高未婚女性的性知识、人流知识水平和道德水平,提高全社会对这个问题的关注程度,减少和避免未婚先孕人流的发生,进一步提高未婚女性的生活质量.

    作者:罗煜;罗家友 刊期: 2009年第06期

  • 护理干预对腹膜透析常见并发症的影响

    目的 探讨护理干预对腹膜透析常见并发症的影响. 方法 2005年1月-2008年12月在我科行腹膜透析的50例患儿分为护理干预组和常规护理组(各25例),对出现常见的并发症进行比较. 结果两组腹膜透析常见并发症的发生率差异有统计学意义(P<0.05和0.01). 结论及时准确执行诊治方案,实施有效的护理干预可以减少腹膜透析常见并发症的发生,提高患儿的生活质量.

    作者:舒芬华;柏华利;林丽;欧阳霞;杨娟 刊期: 2009年第06期

  • 7212例农村妇女病普查结果分析

    目的 了解农村妇女病发病情况,为今后妇女病防治工作提供依据,提高农村妇女健康水平. 方法 2006年11月-2007年11月对麻阳县12个乡镇农村妇女开展妇科病及乳腺疾病免费检查、优价治疗活动. 结果检查人数7 212人,妇科病患病人数5 398人,乳腺疾病937人,患病率分别为74.85%、13.00%,宫颈组织活检301人,确诊宫颈癌7人,乳腺癌2人,1 572人接受海极星(骤焦超声)治疗,海极星治疗率29%. 结论农村妇女妇科病患病率高,严重影响农村妇女身心健康,加强农村妇女健康教育,定期开展农村妇女病普查普治工作非常必要,探索适宜的诊疗方法,降低农村妇女病发病率,提高农村妇女生活质量任重道远.

    作者:钟玉兰 刊期: 2009年第06期

  • 胶原蛋白软胶囊改善皮肤水份人体试食实验研究

    目的 探讨胶原蛋白软胶囊对人体皮肤水份的改善情况. 方法 将自愿受试者按皮肤水份情况随机分为试食组和对照组,分别食用胶原蛋白软胶囊或安慰剂40 d后,再次测试受试者皮肤水份. 结果试食组皮肤水份在试食后明显提高,与试食前比较差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05),试食胶原蛋白软胶囊前后,血常规、血生化等各项检测指标均未见明显异常变化,也未观察到过敏及其它不良反应. 结论胶原蛋白软胶囊具有改善皮肤水份功能作用.

    作者:张兆强;胡余明;尹进;陈炜林;胡春生 刊期: 2009年第06期

  • 2型糖尿病患者糖尿病足的危险因素分析研究

    目的 探讨影响2型糖尿病(T2DM)患者糖尿病足(DF)发生的相关危险因素. 方法 将276例诊断为T2DM的患者按有无糖尿病足分为糖尿病组和糖尿病足组,搜集并记录所有患者的临床资料及实验室指标,比较两组在各临床危险因素之间的差异. 结果 2组年龄、病程、SBP、DBP,2 h PG、HbAIC、HDL-C、LDL-C,Fbg、Scr、BUN、总蛋白、白蛋白、糖尿病.肾病等因素差异有统计学意义(P<0.05);多因素非条件Logistic回归分析显示,糖尿病病程、HbA1c、Fbg、白蛋白及糖尿病肾病5个因素进入回归模型,是2型糖尿病患者发生糖尿病足的独立危险因素. 结论严格控制血糖、血黏度,积极治疗各种DM并发症能有效预防DF发生.

    作者:李蓉 刊期: 2009年第06期

  • ECP-IMAI-艾滋病临床治疗与病人管理培训的公共卫生学策略实践

    目的 为探索公共卫生学的方法应对庞大的病人管理所需要的复杂的艾滋病临床管理培训. 方法 运用世界卫生组织的IMAI临床治疗团队培训模式,结合中国的县、乡、村三级卫生服务网络进行基本医疗服务内容的培训,服务于病人的综合管理. 结果通过第三轮中国全球基金艾滋病项目和中国-世界卫生组织-瑞典综合防治项目的 实践,治疗工作得到扎实稳步推进.项目试点地区新增加治疗病人1年内完成7次随访比例由项目前的40.0%提高到88.6%,差异有统计学意义(X2=112.8,P<0.001).在项目点的带动下,项目省的治疗人数迅速扩大,前者7省累计治疗病人数从2005年底的19 558人增长到2008年底32 078人;后者一个项日省湖南从2006年底累计治疗人数为336人,增加到2008年底的1 289人,项目前后增加至近4倍.从而有利支持了项目治疗指标的完成. 结论 ECP-IMAI是一项推动艾滋病临床治疗培训与管理的公共卫生学策略,适应于中国的艾滋病临床队伍的培训,但是需要根据具体情况进行培训材料的修订和培训团队成员的选择.

    作者:胡翼飞;陈曦;魏秀青;杨北方;张治英;韩孟杰 刊期: 2009年第06期

  • 清新县中小学生乙型肝炎病毒感染状况调查

    目的 了解清新县中小学生乙型肝炎病毒感染状况,为制定有效的防控措施提供科学依据. 方法 采取整群抽样的方法,对辖区内中小学校部分在校学生采集全血分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs). 结果共采集学生血56 583份,HBsAg阳性率为4.04%,抗-HBs阳性率为30.04%;小学生HBsAg阳性率明显低于中学生;县城不同性别中小学生HBsAg阳性率、抗-HBs阳性率差异无统计学意义;不同片区的学生HBsAg阳性率差异有统计学意义. 结论今后应加大乙型肝炎防治知识的宣传力度,加强在校中小学生乙型肝炎疫苗接种工作,提高其免疫水平.

    作者:黄彩琼;江莉;朱宝仪 刊期: 2009年第06期

  • 社区老年高血压患者焦虑与C-反应蛋白的相关性研究

    目的 探讨社区老年高血压患者焦虑情感障碍与血清炎性标记物(C-反应蛋白、白介素-1、白介素-18)之间的相关性. 方法 采用自行设计的一般情况问卷、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、社会支持评定量表(SSRS)对上海市黄埔区半淞园社区老年高血压患者1 187例进行评定分析;采用酶联免疫反应(ELISA)方法检测血清中C-反应蛋白、白介素-1、白介素-18的表达水平. 结果社区老年高血压患者焦虑自评量表总分与血清C-反应蛋白的表达呈正相关(男性rho=0.21,P=0.01;女性rho=0.34,P=0.02);社区老年高血压患者焦虑自评量表总分与白介素-1、白介素-18之间相关性差异无统计学意义. 结论社区老年高血压患者焦虑与血清C-反应蛋白有一定的相关性,炎症反应可能参与老年高血压焦虑的发病过程.

    作者:周序锋;王瑾;周礼明;盛净;陈玮华;丁芝英;杜勤 刊期: 2009年第06期

  • 1690例标本中486株假丝酵母菌的分布及药敏分析

    目的 了解假丝酵母菌的临床分布,以及对常用抗真菌药物的耐药性. 方法 采用回顾性资料分析2008年1月-2009年4月间,临床各种送检标本中假丝酵母菌的分离及耐药性情况. 结果从临床送检的痰、尿、分泌物等1 690例标本中检出5种假丝酵母菌共486株,检出率为28.61%,其中白色假丝酵母菌检出325株占66.87%;在各年龄段念珠菌的分布中,60岁以上患者所占比例大为69.96%;体外药敏试验显示5种假丝酵母菌对两性霉素B、伊曲康唑、制霉菌素的敏感率均在93%以上,对氟康唑的耐药率达到11.5%. 结论白色假丝酵母菌仍是第一位的致病性真菌,并且以呼吸道假丝酵母菌感染常见.5种假丝酵母菌对氟康唑的耐药率高.

    作者:李虹玲;刘文恩;周杰英;张运丽 刊期: 2009年第06期

  • 儿童注意缺陷多动障碍与微量元素锌、铅关系

    目的 检测注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童血液中微量元索锌、铅的水平,探讨ADHD与锌和铅的关系.方法 在本地区儿童健康检查中,我院采用原子吸收分光光度法测定了锌、铅,根据检测结果分成铅未超标组(A组)与铅超标组(A1组)、锌正常组(B组)与低锌组(B1组),然后分析铅超标组和低锌组中儿童ADHD的发生率,并与铅未超标及锌正常组中儿童ADHD的发生率进行比较. 结果共检测学龄前及学龄儿童852例,其中铅超标221例(26%),铅超标儿童中ADHD 68例,占铅中毒儿童30.8%;铅不超标儿童631例,其中ADHD38例,占6.0%.两组ADHD发生率差异有统计学意义(X2=92.02,P<0.01).血锌检查852例,锌低306例(30%),其中ADHD 83例,占27.1%;锌正常546例,其中ADHD 31例,占5.7%.锌低与锌正常两组ADHD发生率差异有统计学意义(X2=77.82,P<0.01). 结论儿童ADHD与微量元素锌、铅失衡有关.

    作者:杨波;招强光;翁坤荣 刊期: 2009年第06期

  • 32例甲亢患者心率变异性分析的临床意义

    目的 通过对甲亢患者进行心率变异性(HRV)分析,了解自主神经功能受损程度,从而更好的指导治疗、判断预后. 方法 采用24 h动态心电图对32例甲亢患者和35例健康人进行心率变异性(HRV)指标分析. 结果甲亢患者HRV指标与健康对照组比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.01). 结论通过对甲亢病人的心率变异性分析,定期观察HRV改变情况,积极改善自主神经功能,对防治甲亢患者心脏的损害十分必要.

    作者:李济洪;肖桂林;郭莹;盛建平;陈静芳 刊期: 2009年第06期

  • 骨龄检测的方法及其应用

    本文综述了骨龄检测的方法及临床意义,为骨龄检测在儿童及青少年生长发育状况评估中的应用提供了资料.

    作者:郭静 刊期: 2009年第06期

实用预防医学杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中华预防医学会 湖南省预防医学会