贾丽萍；克晓燕
研究重组人白细胞介素11(迈格尔)对慢性再生障碍性贫血的血小板减少症的治疗作用.选择经过传统药物治疗而血小板仍处于较低水平的10例慢性再生障碍性贫血患者,在传统治疗的基础上每天皮下注射迈格尔0.75 mg,治疗1-2疗程,每个疗程15天.结果表明:治疗后所有患者血小板数明显增加,与此同时病人的临床出血症状也随之改善,取得了较满意的效果.结论:迈格尔对慢性障碍性贫血的血小板减少症有较好的治疗效果.
作者：王维秀；龚翠玲 刊期： 2002年第04期
在肿瘤抑制基因中,p15INK4b基因由于在骨髓增生异常综合征(MDS)演进过程中的重要作用而逐渐受到关注.系列的研究表明,随着MDS向AML的演进,p15INK4b基因由于其外显子1启动子区的5＇CpG岛发生高度甲基化而失活.这种类型的甲基化限于MDS细胞克隆,用甲基化特异性PCR法可较为敏感地将其检测到.p15INK4b基因的失活抑制了细胞因子如Fas抗原、TGF-β和碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)蛋白介导的细胞凋亡.由于p15INK4b基因甲基化与MDS的密切关系,调节其甲基化状态可能会成为治疗MDS的一个新途径.
作者：王震；李扬秋 刊期： 2002年第04期
为了解作用于早期造血的细胞因子受体Flt3和c-kt在脐血CD34+造血干/祖细胞中的表达及功能,从蛋白和基因水平对其进行了研究.采用常规双色直接免疫荧光标记法,使用流式细胞术测定新鲜分离的和体外不同培养时间的脐血CD34+造血干/祖细胞中Flt3和c-kit蛋白水平的表达,用RT-PCR法测定Flt3和c-kit的mRNA水平表达,并在体外对受体功能进行了探讨.研究结果显示,新鲜脐血CD34+细胞中(68.8±15.4)%为Flt3+,(50.6±12.7)%为c-kit+,随着体外培养时间的延长,二者表达逐渐下降.结论:脐血CD34+造血干/祖细胞在体外液体培养条件下Flt3和c-kit阳性表达可维持2-3周,其配体FL和SCF在培养的第1周内对细胞扩增效果显著.
作者：马艳萍；邹萍；肖娟；黄世昂 刊期： 2002年第04期
探讨多发性骨髓瘤细胞系培养上清液对人骨髓来源内皮细胞系(HBMEC)的增殖、迁移及血管新生的作用.用含2%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养液培养骨髓瘤细胞系获得上清液,将此培养液培养HBMEC,研究其对HBMEC的增殖及迁移的影响,并将此液放入含有携带HBMEC微珠的三维纤维蛋白中,研究其对血管新生的影响.结果表明,与含2%FBS的RPMI 1640培养液比较,骨髓瘤细胞系培养液对HBMEC的增殖有明显促进作用(P＜0.001),并促进HBMEC的迁移,诱导毛细血管管腔的形成(长度及宽度)(P＜0.001).结论:骨髓瘤细胞系可能通过分泌某些细胞因子促进HBMEC增殖、迁移及血管新生.
作者：陈文明；吴垠；朱嘉芷；Jeannette Soria；Massoud Mirshhi 刊期： 2002年第04期
为探讨脐血采集、分离过程中病原微生物污染的概率及不同检测方法的有效性,采用BACTEC 9050细菌培养系统和改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃)及硫乙醇酸盐(35℃)培养法对60份脐血同时进行采集后及分离后细菌和真菌的培养;对206份脐血血清标本采用ELISA法检测HBsAg,Anti-HBC,Anti-HCV,Anti-HCMV-IgM,HTL V-1, HTLV-2,HIV-1及HIV-2;用分子生物学方法检测HBV DNA和HCV RNA;用红细胞凝集法检测TPHA.研究结果显示:采用BACTEC 9050细菌培养系统,采集后脐血中细菌污染率为3.33%,真菌污染率为0%;细胞分离后细菌和真菌污染率分别增高到6.67%和1.67%;在该系统中,厌氧菌的阳性检出率远高于改马丁/硫乙醇酸盐(22℃和35℃).脐血血清病原菌检测结果表明:采用ELISA方法,HBsAg阳性率2.4%,Anti-HBC单项阳性率29.4%,Anti-HCMV-IgM阳性率1.89%;采用分子生物学方法,HBV DNA阳性率5.8%,HBsAg阴性而HBCAb单项阳性标本中HBV DNA阳性率6.7%,HCV RNA阳性率2.4%.结论:采集及分离后脐血细胞中病原微生物阳性率甚高;目前沿用的改良马丁/硫乙醇酸盐(22℃和35℃)培养系统,会导致脐血中厌氧菌漏检,有必要更新该培养方法,如采用先进的BACTEC 9050培养体系.分子生物学方法可弥补ELISA等常规脐血传染病检测方法的缺陷,从而提高脐血造血细胞移植的安全系数.
作者：朱美玲；陈汝光；奚永志；胡燕芬；欧阳玲；张健；黄建国 刊期： 2002年第04期
为探讨特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)的临床意义,用ELISA双抗夹心法动态检测了34例ITP病人血浆可溶性IL-2受体(SIL-2R)水平,并与34例正常人对照.结果显示,12例慢性ITP血浆SIL-2R水平明显高于正常对照组(P＜0.001)和急性ITP组(P＜0.01),而7例缓解期ITP病人血浆SIL-2R水平与正常组间无显著差异.经VLAP方案(长春新碱、左旋咪唑、氨肽素和泼尼松)治疗有效的急性及慢性ITP病人血浆SIL-2R水平均较治疗前明显降低(P＜0.001),而治疗无效者无明显下降(P＞0.05).结论:T细胞活化与ITP病情发展有关,血浆SIL-2R水平可做为判断ITP预后的一个指标.
作者：任殿钦；李志春；郭超 刊期： 2002年第04期
为了解AML-M2a细胞体外诱导TCR Vβ亚家族T细胞的表达和克隆性增殖情况,利用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)体外获取AML-M2a细胞诱导的T细胞,并以RT-PCR扩增4例M2a患者外周血单个核细胞和4例AML-M2a细胞诱导的T细胞中的24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区3(CDR3).阳性产物进一步经基因扫描分析从而确定AML-M2a细胞体内外诱导的TCR Vβ亚家族T细胞的克隆性增殖情况.结果显示:4例AML-M2a细胞体内外诱导的Vβ亚家族T细胞表达情况相似,其中3例AML-M2a细胞体内外诱导的一个或两个Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖特点.结论:AML-M2a细胞体内外选择性诱导不同的TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖可能是患者T细胞对AML-M2a细胞相关抗原刺激所产生的一种特异性细胞免疫反应.体内外环境的不同对Vβ亚家族T细胞的克隆性增殖情况有一定的影响.
作者：李荣福；李扬秋；陈少华；杨力建；曾慧兰；郁志 刊期： 2002年第04期
为探讨骨髓间充质干细胞(MSC)诱导异体T细胞反应性下降的机制,应用流式细胞术检测了异体T细胞与骨髓间充质干细胞共培养前后CD4,CD8,CD25和CD28等的变化,同时应用RT-PCR测定MSC是否表达IL-4,IFN-γ和TGF-β1等细胞因子,并用ELISA的方法验证培养上清中蛋白的存在.结果显示,异体T细胞与MSC共培养后,CD8+细胞增多,CD25+细胞减少.RT-PCR检测结果证明MSC高表达TGF-β1基因,但不表达IL-4和IFN-γ基因.ELISA证实MSC培养上清存在TGF-β1蛋白,其72小时分泌量约为1 ng/ml.结论:骨髓MSC在体外可使异体T细胞对异体抗原的反应性减低,这种作用体现在细胞亚群的改变与MSC分泌TGF-β1有关.这一研究结果为预防HLA不相合骨髓移植中GVHD的发生提出了一条新的思路.
作者：陈健琳；郭子宽；徐晨；李欲航；侯春梅；毛宁；陈虎 刊期： 2002年第04期
为了观察化疗药物三尖杉酯碱(HRT)、长春新碱(VCR)和依托泊苷(VP-16)抑制肝癌细胞系SMMC7721和白血病细胞系K562细胞增殖、促进细胞凋亡过程中端粒酶活性及细胞外调节蛋白激醇(ERK)磷酸化蛋白表达水平的变化,应用MTT、流式细胞术、端粒重复序列扩增法(TRAP)、生物发光分析及Western印迹等方法进行了检测和分析.研究结果发现,一定浓度的化疗药物作用24小时后,可以抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡;在同样作用条件下,端粒酶活性和磷酸化ERK1/2的表达也受到一定程度的抑制,其中以HRT的作用明显.结论:HRT,VCR和VP-16可能是通过抑制Ras/Raf/MEK/ERK1/2信号传导通路、降低ERK活性、减少ERK1/2靶基因的转录活化、间接下调端粒酶活性这一共同的作用机制而发挥作用的;细胞凋亡是端粒持续缺失的的结果.
作者：李登举；张瑶珍；孟凡凯；张东华；刘文励 刊期： 2002年第04期
为了研究系统性红斑狼疮相关性血液病(SLERHD)患者血液学异常的临床特点,探讨鉴别诊断的依据,采用SPSS/PC软件对92例SLERHD患者的血液学检查资料进行回顾性分析总结.结果发现:此类患者临床表现及血像缺乏特异性,但所有病人都具备SLE相关的多种自身抗体阳性、血清球蛋白增高及不同程度的皮肤、关节症状.以贫血为首发症状者67例(72.8%),以皮肤粘膜紫癜为主要表现者39例(42.4%),以溶血性贫血为首发症状者17例(18.5%),白细胞减少56例(60.9%),血小板减少54例(58.7%),全血细胞减少者41例(44.6%).骨髓有核细胞增生良好,其中活跃者57例(61.9%),明显活跃者35例(38.1%);粒/红(G/E)多数正常,＞3者59例(64.1%),＜3者33例(35.9%),17例溶血性贫血者Coombs试验均为阳性,G/E＜1;巨核细胞增多者80例(86.9%),正常者11例(11.9%),＜7个/片者1例(1.1%),中性粒细胞硷性磷酸酶(NAP)积分均为阴性.结论:虽然SLERHD临床表现多种多样、血像缺乏特异性,但所有病人都具备SLE相关的多种自身抗体阳性、血清球蛋白增高及不同程度的皮肤关节症状,属于增生性贫血,Ret,G/E和骨髓粒、红、巨核三系细胞数增多或正常,NAP阴性,可与再生障碍性贫血(AA)鉴别;细胞形态基本正常、无病态造血可与骨髓增生异常综合征(MDS)鉴别;多种自身抗体阳性可与单纯的原发性血小板减少性紫癜(ITP)、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)及Evans综合征鉴别.
作者：王桂菊 刊期： 2002年第04期
研究脐血采集后的放置、单个核细胞的分离、冻存等的影响因素.方法为血液采集后,离心分离单个核细胞,进行冷冻保存及复苏后洗涤.结果优选为采集后4℃或室温放置24小时内,羟乙基淀粉2次离心法分离单个核细胞,50%二甲亚砜加自身血浆为保护剂冻存、复苏后洗涤等程序.结论:本研究的优化方法可有效地保存脐血单个核细胞.
作者：兰炯采；刘忠；甘茂州；陈强；张印则；孟庆宝 刊期： 2002年第04期
为探讨B7共刺激分子在T细胞活化和分化中的作用,利用脂质体介导的转基因技术将B7基因导入恶性血液病细胞系Raji和Jurkat细胞,用流式细胞术检测转基因前、后B7-1基因的表达,用RT-PCR检测T细胞表面细胞因子IL-2,IL-4和IFN-γ mRNA的表达及这3种细胞因子在转基因后4,12,20及48小时的时间动态变化.结果发现,B7+Raji细胞可诱导T细胞分泌细胞因子IL-2,IL-4和IFN-γ,B7+Jurkat细胞可诱导IL-2和IFN-γ的分泌,而B7-Raji细胞及B7-Jurkat细胞均未诱导细胞因子的分泌.IL-2和IL-4在T细胞活化4小时即可检测到,IFN-γ在T细胞活化12小时可检测到,在20小时出现峰值.结论:B7-1基因的导入可有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞,B7-1在T细胞活化和分化中起着更主要的作用.
作者：贾丽萍；克晓燕 刊期： 2002年第04期
探索用流式细胞术测定动员外周血中CD34+细胞的简便有效的方法,以便在干细胞动员中进行有效的动态监测,及时收取干细胞,把握佳移植效果.将经药物动员的移植供者的外周血用CD34和CD45荧光抗体标记,用红细胞裂解液将红细胞裂解后经流式细胞仪检测.运用恰当的分析窗口、有效的设门分析结合干细胞的生物学特性,确定CD34+细胞在窗口中的确切位置,统计CD34+细胞在有核细胞中的比例.结果表明,通过本方法可有效地测定0.05%-0.1%的CD34+细胞的相对含量,在药物动员的第5或6天,多数患者外周血中CD34+细胞达到峰值,某些患者外周血中CD34+细胞可超过1%.结论:通过标记中的有效阻断和多参数分析,本方法可对动员外周血中微量的CD34+细胞进行有效的动态监测,对适时采集干细胞进行移植提供了重要的参考.
作者：宋文刚；张明徽；章卫平；曲迅；宋宪民；王健民；曹雪涛 刊期： 2002年第04期
作者： 刊期： 2002年第04期
检测慢性特发性中性粒细胞减少症(CIN)患者血清粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平并探讨其意义.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定CIN患者40例血清G-CSF水平,并与系统性红斑狼疮(SLE)并中性粒细胞减少患者40例及正常对照组40例血清G-CSF水平进行比较分析.结果发现,正常对照组及SLE组血清G-CSF检出率分别为11/40和10/40,两者血清G-CSF水平无差别,分别为(27.34±8.00)ng/L及(26.76±7.26)ng/L;CIN患者血清G-CSF检出率为27/40,血清G-CSF水平为(134.04±89.29)ng/L,高于正常对照组及SLE组(P＜0.01).结论:CIN患者可能存在G-CSF利用障碍.
作者：王春森；董巍；张晋琳；王晓冬；唐义平；祝彪；万纯黔；甘茂州 刊期： 2002年第04期
为探讨慢性粒细胞白血病临床分期与端粒酶活性的关系,采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)测定骨髓细胞端粒酶活性.结果发现,正常骨髓细胞端粒酶活性低,慢性粒细胞白血病各期端粒酶活性均高于正常骨髓组(P＜0.05),加速期和急变期高于慢性期(P＜0.05),但加速期和急变期两组无差别.结论提示,端粒酶活性可做为慢性粒细胞白血病分期和判断预后的有用指标.
作者：王瑞丽；赵元锰；李云东 刊期： 2002年第04期
WT1基因编码的锌指转录因子能调控下游基因的转录,其中很多靶基因涉及调节细胞周期和增殖分化,而WT1本身也接受其上游基因的调控,如NF-κB和GATA-1等,这样便构成WT1介导的转录调控通路,参与造血系统发育的调控.如果转录因子的表达脱调控以及随之而来的正常基因表达态势受干扰,常会引起造血细胞的增殖、分化及凋亡动态平衡的紊乱,终导致白血病.本文就WT1介导的转录调控通路与白血病的关系作一综述.
作者：段卫明；陈子兴 刊期： 2002年第04期
利用精子载体技术通过人工授精观察人凝血因子Ⅷ基因在转基因小鼠体内的表达.将含有人FⅧBD(B-domain deleted)cDNA的质粒pRC/RSV-hFⅧBD转染至小鼠精子,通过人工授精使母鼠受孕.新生小鼠出生后第4周,应用PCR筛查hFⅧBD cDNA阳性转基因幼鼠,取转有人FⅧBD cDNA幼鼠的血液检测血浆中的人FⅧ抗原和抗体,分别用Northern印迹和Western印迹检测脾、肝、肺和肾组织中人FⅧBD cDNA的转录和表达.结果发现,人工授精后20只受体母鼠7只受孕,共产下11只仔鼠,存活9只.PCR筛检出3只转有人FⅧBD cDNA的阳性鼠.3只阳性鼠血浆中的人FⅧ抗原量分别为8.65 ng/ml,7.84 ng/ml和8.44 ng/ml,人FⅧ的抗体均为阴性.Northern印迹和Western印迹检测显示3只F1代阳性幼鼠的脾、肝、肺和肾组织中均有人FⅧBD cDNA的转录和表达.结论提示,利用精子载体法可以制备转有人凝血因子Ⅷ基因的转基因小鼠,并表达人FⅧ蛋白,这为用精子载体技术生产转基因动物并将之作为生物反应器生产人凝血因子Ⅷ提供了实验依据.
作者：尹俊；王鸿利；王学锋；璩斌；储海燕；李稻；陈红兵；康文英；段宝华；戚正武；王振义 刊期： 2002年第04期
为揭示难治性单系血细胞减少与骨髓增生异常综合征(MDS)之间关系,对13例以难治性单系血细胞减少为早期表现的MDS进行了回顾性分析.结果如下:(1)10年中以顽固性单系血细胞减少为早期表现的MDS患者共13例,占我院确诊219例MDS患者的5.9%,其中粒细胞减少者4例,红细胞减少者4例,血小板减少者5例.(2)患者从出现单系血细胞减少至确诊为MDS的平均时间为(48.5±55.3)月,其中粒细胞减少、红细胞减少和血小板减少的平均时间分别为(12.5±9.5)月,(53.8±54.6)月和(59.2±65.5)月.(3)13例患者有以下特点:①大红细胞增多,骨髓中红系中、晚幼红细胞比例升高;②偶有一过性个别细胞病态造血表现;③红细胞减少和血小板减少者均转为RA和RAS亚型,而粒细胞减少者大多转为RAEB;④部分患者有自身抗体.结论:部分难治性单系血细胞减少实质上为一种早期MDS的表现.
作者：陈书长；余延芳；梁文同；李淑兰；王毓洲；葛昌文；冯素芳；刘海丽 刊期： 2002年第04期
为了评价供者应用G-CSF的骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病的临床疗效,用HLA相合的、混合淋巴细胞培养阴性的同胞供者骨髓,对单一病种慢性粒细胞白血病行移植治疗.供者应用G-CSF 250微克/天,连用7天后供髓的32例为研究组,对照组18例常规采髓移植,在预处理方案,GVHD预防和支持治疗方法相同的情况下,比较研究组和对照组移植后在加速造血重建,降低GVHD发生和延长无病生存的疗效.移植结果显示,供者应用G-CSF在慢性粒细胞白血病移植中造血重建加速,中性粒细胞＞0.5×109/L和血小板＞20×109/L的中位天数分别是第15(10-22)天和第17.5(13-28)天,对照组是第21和24天(P＜0.01),研究组发生急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD2例(6.3%),对照组5例(27.8%),通过比较,两组差异有显著性(P＜0.05),慢性GVHD发生分别是24%和33.3%(P＞0.05).研究组移植相关死亡、复发和无病生存与对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:使用G-CSF动员供者的HLA相合的异基因骨髓移植,造血重建加快和重度急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD减轻,有可能提高CML移植的无病生存率.
作者：陈惠仁；纪树荃；王恒湘；阎洪敏 刊期： 2002年第04期
中国实验血液学杂志
主管:实验血液学杂志
主办：中国科学技术协会
