毕振强;李德新
目的 通过研究小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群及TH1/TH2型细胞因子的表达,进一步探讨小儿慢性丙型肝炎的免疫发病机制.方法 (1)流式细胞仪(FACS)检测16例慢性丙型肝炎患儿及10例正常对照外周血T细胞亚群.(2)将慢性丙型肝炎患儿和正常对照外周血单个核细胞(PBMC)体外培养72 h后,用ELISA法检测培养上清中THl型细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-12和TNF-γ)和TH2型细胞因子(IL-4、IL-10)的浓度.结果 (1)CD4+细胞无明显变化.CD8+细胞与正常对照比较明显升高(P<0.05).CD3+细胞升高,CD4+/CD8+比值下降,但与正常对照比较无统计学意义(P>0.05).(2)PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高(P<0.01),而没有检测到IL-2、IL4、IL-12的基础分泌.结论 慢性丙型肝炎患儿体内T淋巴细胞存在数量和功能的异常,CD8+细胞数升高,CD4+细胞功能异常,表现在以TH2型细胞因子的分泌为主.这可能与丙肝病毒(HCV)感染的慢性化有关.
作者:董漪;张鸿飞;陈昊;李靖;杨晓晋;朱世殊;程云 刊期: 2007年第01期
目的 了解CD4+T淋巴细胞的活化在长期感染非进展者(LTNP)及典型进展者(TP)之间的差异,探讨HIV感染的免疫基础.方法 收集24例HIV-1感染患者(7名LTNP患者,17名TP患者)及15例健康对照的抗凝血标本,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞的活化标志物CD38并检测其CD4计数等指标;bDNA方法检测患者体内的病毒载量.结果 与正常人相比,LTNP患者的CD4+T淋巴细胞的活化的差异无统计学意义(P>0.05)而TP患者的活化程度明显增高(P<0.01);HIV感染者CD4+T淋巴细胞CD38的表达水平与CD4计数呈正相关,与病毒载量呈负相关.结论 随着疾病的进展,CD4+T淋巴细胞的活化程度逐渐增高;LTNP患者CD4+T淋巴细胞的活化程度没有明显增高可能是其疾病长期不进展的原因之一.
作者:焦艳梅;福军亮;张政;张晖;金磊;周春保;付宝云;王福生;吴昊 刊期: 2007年第01期
目的 探讨血清肝纤维化标志物和超声结合对肝纤维化的诊断价值.方法 检测 100例慢性乙型肝炎或肝硬化患者8项超声指标和6项肝纤维化相关血清学指标,并与其病理检查结果进行相关分析.结果 经过筛选,血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)+透明质酸(HA)+肝实质回声(LPEC)+脾长径(SL)诊断S2以上纤维化的Se、Spe高,为90.7%、85.4%.结论 血清学和超声优势指标组合能提高诊断的灵敏度和特异度,优于单项或多项血清学和超声指标,是诊断肝纤维化较好的无创性方法.
作者:于静;贾长河;王琦;许泼实;张昊;赵玉琴;申全;郝延瑞;蔡桂芬 刊期: 2007年第01期
目的 探讨红色诺卡菌细胞壁骨架(nocardia rubra cell wall skeleton,Nr-CWS)对人乳头状瘤病毒阳性的宫颈癌细胞株-HeLa生长的影响.方法 体外培养HeLa细胞,并将细胞分为研究组和对照组两组.其中研究组加入Nr-CWS的终浓度值至30μg/ml,对照组加入等量PBS,利用MTT法分别于24 h~120 h(1~5 d)检测细胞活力,绘制细胞生长曲线,比较两组细胞生长差异.加药7 d后用流式细胞仪测定细胞处于周期各时相的比例,比较两组细胞DNA合成差异.同时进行Scid鼠体内抑瘤实验,将HeLa细胞接种Scid小鼠皮下,待呈现肉眼可见肿块后,按临床剂量在研究组肿瘤部位注射Nr-CWS,对照组注入等量PBS,比较Nr-CWS对HeLa细胞移植瘤生长的影响.结果 MTT结果比较显示:两组在不同时间点A490吸光度值差异有统计学意义,研究组明显抑制HeLa细胞生长.流式细胞仪测定细胞周期各时相中,研究组中处于静止期(G0~G1)细胞明显多于对照组,而增殖期(S+G2~M)细胞明显少于对照组.动物体内实验表明:研究组肿块体积和重量均低于对照组.结论 红色诺卡菌细胞壁骨架对人乳头状瘤病毒阳性的宫颈癌细胞株-HeLa有抑制作用.
作者:赵健;杜海军;廖秦平 刊期: 2007年第01期
目的 观察自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK细胞)治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效.方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗,在体外培养前后以及回输体内后检测CD3+、CD3+ CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+、CD25+细胞以及mDC和pDC.比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化.结果 培养结束以及回输体内后,CD3+细胞、CD3+CD8+细胞、CD3+CD56+细胞较培养前显著升高,mDC和pDC在回输后也明显增高.12例患者HBV DNA阴转,4例患者拷贝数下降大于2个log.在14例HBeAg阳性患者中有10例阴转,2例出现HBeAb转换.肝脏功能较治疗前有所好转.所有患者均能耐受治疗.结论 CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量,具有一定的抗病毒效应作用,毒副作用低.
作者:苏海滨;李捍卫;赵洪兰;施明;张冰;汤紫荣;雷周云;王慧芬;王福生 刊期: 2007年第01期
目的 应用酵母双杂交技术筛选人白细胞中与丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCV NS4A)相互作用的蛋白.方法 连接有HCV NS4A酵母表达的载体pGBKT7-NS4A,转化入单倍体酵母细胞AH109,与转化了人白细胞cDNA文库质粒的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-a-半乳糖(X-a-Gal)上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提取质粒,转化人大肠埃希细菌(DH5α),提取质粒并测序,进行生物信息学分析.对克隆重复率较高的蛋白编码基因进行克隆和回交验证.结果 筛选出在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基和在铺有X-a-gal的四缺培养基上均能生长并变成蓝色的真阳性菌落45个,其中钙离子信号调节亲环素配体(CAML)29个.对CAML基因成功克隆,回交验证了HCV NS4A与CAML的相互作用.结论 成功筛选出7种在人白细胞cDNA文库中与HCV NS4A特异性相互作用的蛋白,为进一步探讨HCV的致病机制提供了新的线索.
作者:程勇前;王琳;成军;刘妍;徐东平;钟彦伟;曲建慧;田江克;戴久增;李晓东 刊期: 2007年第01期
水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白中糖蛋白E(gE)的免疫活性强,本试验成功构建了VZV糖蛋白E的原核表达载体,所表达的重组蛋白可以有效激活小鼠的免疫反应.
作者:李福民;闫薇;冉玉平;段德鉴;周光平 刊期: 2007年第01期
目的 构建及表达抗红细胞(RBC)单链抗体(ScFv)和HIV抗原的融合蛋白,并做活性测试.方法 将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连,重组于高效表达载体中,并在大肠埃希菌中表达.结果 经ELISA检测和红细胞凝集检测,证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性,可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集.结论 融合蛋白构建成功,可用于HIV的快速检测.
作者:胡燕;杨健洋;朱雷;侯俊;沈宏辉;貌盼勇 刊期: 2007年第01期
目的 探讨不同基因型慢性乙型肝炎患者干扰素α-2b(IFN α-2b)治疗前后氧化损伤状态的变化及其与抗病毒疗效的关系.方法 35例符合干扰素治疗指征的慢性乙型肝炎患者,分别给予IFN α-2b300万U,肌内注射,每周3次,疗程12周.治疗前后化学比色法测定患者血清丙二醛和总抗氧化能力指标的变化,同时在治疗过程中定期复查患者肝功、胆红素、血常规、HBV DNA及病毒标志物的变化,核酸杂交-酶联免疫吸附法测定乙肝病毒基因分型,18例健康人作为正常对照.结果 慢性乙型肝炎患者血清丙二醛浓度明显高于健康对照组(P<0.05),总抗氧化能力明显低于健康对照组(P<0.05).不同基因型患者血清丙二醛水平及总抗氧化能力无显著差别(P>0.05).干扰素治疗后患者血清丙二醛水平明显低于治疗前水平(P<0.05),无效组治疗后的丙二醛浓度仍高于健康对照(P<0.05).干扰素治疗前有效组的血清总抗氧化能力明显高于无效组(P<0.05),治疗后血清总抗氧化能力明显升高(P<0.05).结论 IFNα-2b治疗可以明显改善慢性乙型肝炎患者的氧化.抗氧化损伤平衡障碍,抗病毒治疗中适当应用抗氧化剂可能有助于提高临床疗效.
作者:范玉琛;王凯;韩利岩;李心河;王惠敏;王磊一;侯云德 刊期: 2007年第01期
艾滋病毒(HIV)于1982年随血液制品第Ⅷ因子从美国进入中国,1983年感染第一个中国公民.随后HIV通过静脉吸毒、性途径不断传人我国,并在国内继续传播,使HIV-1流行形势越来越严峻.
作者:曾毅 刊期: 2007年第01期
目的 研究5-氨基酮戊酸光动力学疗法(ALA-PDT)在体内外抗单纯疱疹病毒(HSV)的作用.方法 以HSV-Ⅰ感染豚鼠皮肤的动物模型以及HSV-Ⅰ和HSC-Ⅱ感染的Vero细胞为实验系统,观察ALA-PDT抗单纯疱疹病毒的疗效.结果 ALA-PDT在体外具有抑制HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ的作用,与阳性药物无环鸟苷作用基本一致.体内实验中,外用ALA对HSV-Ⅰ型豚鼠皮肤感染仅进行一次PDT治疗,对皮肤病变就产生了剂量依赖性的治疗效果,中、高剂量组疗效显著.结论 ALA-PDT能够有效地灭活单纯疱疹病毒,治疗该病毒引发的皮肤病变.为该疗法用于病毒性疾病的治疗提供了依据.
作者:陶纪宁;段淑敏;李军 刊期: 2007年第01期
目的 探讨国产的HIV-1 p24抗原检测试剂盒进行药物筛选研究的可行性.方法 对国产试剂盒的使用性能与Biomerieux公司商品化的Vironostika试剂盒进行比较,评估国产试剂盒的敏感性、重复性及检验效能.结果 国产试剂盒具有较高的敏感性和重复性,在体外药效学筛选实验中国产试剂盒的阳性检出率及药物评价结果与Vironostika试剂盒差异无统计学意义(P>0.05).结论 国产试剂盒具有较好的使用特性,在药物筛选中可以用国产试剂盒替代Vironostika试剂盒.
作者:杨怡姝;王润田;张晓光;张红中;王惠芬;李泽琳;曾毅 刊期: 2007年第01期
目的 对我国首批8个美沙酮维持治疗试点门诊的工作效果进行评估.方法 在美沙酮门诊开诊时、运行6个月及1年后三个时点,对受治者的人口学特征及吸毒有关行为等进行问卷调查,比较吸毒、违法行为、家庭关系等变化情况.结果 共有585人、609人和468人分别参加了基线调查、6个月评估和1年评估调查.受治者过去1个月注射吸毒的比例从基线的69.1%分别下降到6个月后的8.9%和1年后的8.8%;在有注射行为人群中,过去1个月注射次数由参加治疗前的平均90次下降到6个月和1年后的平均2次;受治者有工作的比例从治疗前的22.9%上升到6个月后的43.2%和1年后的40.6%.自我报告过去1个月因吸毒而发生违法犯罪行为的比例从治疗前的20.7%下降到6个月后的3.6%和1年后的3.8%.自我感觉家庭关系良好的比例从治疗前的49.6%上升到1年评估时的65.8%.95.9%的受治者对试点门诊提供的服务表示满意.结论 首批美沙酮维持治疗试点工作已在减少毒品使用、减少与吸毒有关的高危行为、减少与吸毒有关的违法犯罪行为以及恢复受治者的社会家庭功能方面取得效果.美沙酮门诊可作为针对吸毒者开展多种形式综合服务的平台.
作者:庞琳;米国栋;王常合;罗巍;柔克明;李建华;吴尊友;社区药物维持治疗工作国家级工作组 刊期: 2007年第01期
本研究对14例基因型1b型慢性丙型肝炎患者血清HCV基因组中E2/NS1(含HVR1和HVR2)、NS5A区准种异质性进行了检测,对HVR区准种异质性程度与干扰素(IFN)疗效的关系、NS5A2209-2248区是否存在干扰素敏感决定区(ISDR)等热点问题进行了探讨,为1b型慢性丙型肝炎患者应用IFN抗病毒治疗时进行疗效预测提供理论依据.
作者:张琳;白菡;黄芬;赵桂珍;李颖 刊期: 2007年第01期
目的 调查绍兴市街头无偿献血者戊型肝炎病毒感染情况.方法 3701例无偿献血者标本采用ELISA方法检测抗-HEV IgG和抗-HEV IgM,RT-PCR检测抗-HEV IgM阳性血清HEV RNA.结果 本市无偿献血者抗-HEV IgG阳性率为29.91%(1107/3701);抗-HEV IgM阳性率为1.35%(50/3701);HEV RNA阳性6例,检出率为0.16%(6/3701),均为HEV基因1型;各季节抗-HEV IgG和抗-HEV IsM的阳性检出率无显著差异.结论 加强对献血者感染HEV情况的检测和研究,对保证用血安全,完善安全输血的保障体系有切实的意义.
作者:桑列勇;庄培芬;傅立强;刘祎;葛胜祥;张军 刊期: 2007年第01期
目的 评估两种不同的α-干扰素联合治疗对儿童HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效.方法 选择HBeAg阳性慢性乙型肝炎儿童120例,随机分为3组,每组各40例:第1组(A组)为α-干扰素(IFN-α)组;第2组(B组)为IFN-α+拉米夫定(LAM)组.第3组(C组)为α-干扰素(IFN-α)+乙肝疫苗组.其中干扰素疗程6个月,拉米夫定疗程6个月,所有病例均观察至12个月.结果 治疗结束时丙氨酸转氨酶(ALT)复常率3组无差异.治疗6个月和12个月时B组HBeAg阴转率和HBV DNA的阴转率明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 α-干扰素与拉米夫定联合治疗对HBeAg阳性慢性乙型肝炎儿童的病毒学应答(VR)疗效明显优于单用α-干扰素组和α-干扰素+乙肝疫苗组.
作者:钟旬华;邓欣;陈心春;周伯平 刊期: 2007年第01期
目的 获得表达量高、抗原性强的基因工程重组抗原.检测不同地区的丁肝患者血清,初步验证其抗原性及在检测不同地区丁肝血清方面的差异.方法 从内蒙古某丁肝患者血清中提取丁肝病毒,经RT-PCR与PCR,使用PET43a表达质粒及HDV L-Ag 5'和3'端引入His标签获得丁型肝炎病毒L-Ag 重组表达质粒,转化BL21(Rosetta)宿主菌,IPTG诱导表达.表达产物经饱和硫酸胺沉淀与亲和层析柱纯化后,采用EIA竞争法分析其抗原性.结果 经与ABBOTT Murex anti-Delta(total)试剂盒同步检测15份阳性和10份阴性血清,一致率100%.结论 EIA检测,证明具有良好的抗原性,基因工程表达的抗原蛋白在检测不同地区丁肝血清方面未见差异,故可用于丁肝的诊断及相关研究.
作者:杨英超;伊瑶;赵洪兰;张文英;陈斯勇;毕胜利 刊期: 2007年第01期
Epstein-Barr病毒(EBV)属于疱疹病毒科γ亚科,具有噬B淋巴细胞的特性,能够在B淋巴细胞中建立起潜伏感染,刺激细胞的增生和转化.人群中有大于90%的感染率.
作者:杨松梅;周玲;曾毅 刊期: 2007年第01期
α干扰素联合利巴韦林已成为CHC的标准抗病毒治疗方案.本研究随机、对照观察了聚乙二醇α干扰素(PEGIFNα)抗慢性丙肝病毒(HCV)感染的近、远期疗效,及药物耐受性,报道如下.
作者:姜天俊;闫子国;闫慧颖;赵鹏;石磊 刊期: 2007年第01期
丙型肝炎病毒(HCV)感染可导致肝脏炎症坏死和纤维化,抗病毒治疗是丙型肝炎治疗的根本疗法.我们对慢性丙型肝炎(CHC)患者分别采用聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)和干扰素α-2b(IFNα-2b)治疗,并对两种干扰素的临床疗效进行对比分析.
作者:王怡;高敏;李响;卢诚震;董萌;邱春婷;张万增 刊期: 2007年第01期