王怡;高敏;李响;卢诚震;董萌;邱春婷;张万增
艾滋病毒(HIV)于1982年随血液制品第Ⅷ因子从美国进入中国,1983年感染第一个中国公民.随后HIV通过静脉吸毒、性途径不断传人我国,并在国内继续传播,使HIV-1流行形势越来越严峻.
作者:曾毅 刊期: 2007年第01期
目前的研究已经表明了乙型肝炎病毒具有泛噬性,即不仅存在于肝组织中,病毒还可侵袭到不同的组织和器官中,已有报道肝炎患者的心肌、肾脏、胰腺、精细胞、前列腺、唾液腺、肝内胆管细胞、骨髓细胞和外周血单个核细胞中均存在乙型肝炎病毒抗原.
作者:杨丽华;龚作炯;唐智娇 刊期: 2007年第01期
目的 获得表达量高、抗原性强的基因工程重组抗原.检测不同地区的丁肝患者血清,初步验证其抗原性及在检测不同地区丁肝血清方面的差异.方法 从内蒙古某丁肝患者血清中提取丁肝病毒,经RT-PCR与PCR,使用PET43a表达质粒及HDV L-Ag 5'和3'端引入His标签获得丁型肝炎病毒L-Ag 重组表达质粒,转化BL21(Rosetta)宿主菌,IPTG诱导表达.表达产物经饱和硫酸胺沉淀与亲和层析柱纯化后,采用EIA竞争法分析其抗原性.结果 经与ABBOTT Murex anti-Delta(total)试剂盒同步检测15份阳性和10份阴性血清,一致率100%.结论 EIA检测,证明具有良好的抗原性,基因工程表达的抗原蛋白在检测不同地区丁肝血清方面未见差异,故可用于丁肝的诊断及相关研究.
作者:杨英超;伊瑶;赵洪兰;张文英;陈斯勇;毕胜利 刊期: 2007年第01期
乙型肝炎病毒各个区变异的研究是当前的研究热点.已经知道,HBV有S区、C区、P区和X区四个区.
作者:孙梅;刘新钰;张汉荣 刊期: 2007年第01期
α干扰素联合利巴韦林已成为CHC的标准抗病毒治疗方案.本研究随机、对照观察了聚乙二醇α干扰素(PEGIFNα)抗慢性丙肝病毒(HCV)感染的近、远期疗效,及药物耐受性,报道如下.
作者:姜天俊;闫子国;闫慧颖;赵鹏;石磊 刊期: 2007年第01期
目的 观察自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK细胞)治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效.方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗,在体外培养前后以及回输体内后检测CD3+、CD3+ CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+、CD25+细胞以及mDC和pDC.比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化.结果 培养结束以及回输体内后,CD3+细胞、CD3+CD8+细胞、CD3+CD56+细胞较培养前显著升高,mDC和pDC在回输后也明显增高.12例患者HBV DNA阴转,4例患者拷贝数下降大于2个log.在14例HBeAg阳性患者中有10例阴转,2例出现HBeAb转换.肝脏功能较治疗前有所好转.所有患者均能耐受治疗.结论 CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量,具有一定的抗病毒效应作用,毒副作用低.
作者:苏海滨;李捍卫;赵洪兰;施明;张冰;汤紫荣;雷周云;王慧芬;王福生 刊期: 2007年第01期
自从1983年首次报道儿童HIV-1感染以来,二十余年间,儿童HIV-1感染病例剧增,平均每天有2000多名儿童成为HIV-1感染者,每年死于艾滋病(AIDS)的儿童达58万,HIV/AIDS已成为全球儿童的一个主要死因[1].
作者:张麒;王临虹;蒋岩;邢文革 刊期: 2007年第01期
目的 探讨采用新型微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在良恶性肝病及肝癌预警中的作用.方法 应用装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)的微量离心柱分离甲胎蛋白异质体,采用化学发光法检测AFP和AFP-L3,并计算AFP-L3在AFP中的含量比例[AFP-L3(%)],分析AFP-L3(%)升高者与良恶性肝病的关系.结果 肝细胞癌患者血清中AFP-L3(%)明显高于其他肝病患者,P值均<0.001,以AFP-L3(%)≥10作为诊断指标,在已经确诊为肝癌的患者中灵敏度是90.9%.结论 微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在预警肝细胞癌诊断及鉴别诊断中具有重要临床价值,特别是对低甲胎蛋白含量的肝病鉴别具有重要临床价值.
作者:徐爱芳;王妙婵;眭东鸣;元幼红;陈刚;娄国强 刊期: 2007年第01期
目的 探讨HPV16感染及其E6/E7基因变异与宫颈病变的相关性.方法 采用导流杂交技术进行HPV感染分型检测,PCR扩增出80份HPV16阳性宫颈病变的E6/E7基因、克隆入pMD18-T载体,双向测序分析基因变异与宫颈病变相关性.结果 HPV16在宫颈病变患者中的检出率高为33.3%(154/463),与病变程度相关(P<0.05).E6/E7基因72份测序成功,DNA序列变异发生率为88.9%(64/72).氨基酸序列E6-D32E(T96G)和E7-N29S(A86G)位点突变同时伴随存在,D32E/N29S的检出率为38.9%(28/72),与宫颈病变程度相关(P<0.05).结论 HPV16是北京地区来源的宫颈病变中常见的致病型,其D32E/N29S变异与病变程度相关.
作者:杨英捷;赵健;廖秦平 刊期: 2007年第01期
目的 探讨红色诺卡菌细胞壁骨架(nocardia rubra cell wall skeleton,Nr-CWS)对人乳头状瘤病毒阳性的宫颈癌细胞株-HeLa生长的影响.方法 体外培养HeLa细胞,并将细胞分为研究组和对照组两组.其中研究组加入Nr-CWS的终浓度值至30μg/ml,对照组加入等量PBS,利用MTT法分别于24 h~120 h(1~5 d)检测细胞活力,绘制细胞生长曲线,比较两组细胞生长差异.加药7 d后用流式细胞仪测定细胞处于周期各时相的比例,比较两组细胞DNA合成差异.同时进行Scid鼠体内抑瘤实验,将HeLa细胞接种Scid小鼠皮下,待呈现肉眼可见肿块后,按临床剂量在研究组肿瘤部位注射Nr-CWS,对照组注入等量PBS,比较Nr-CWS对HeLa细胞移植瘤生长的影响.结果 MTT结果比较显示:两组在不同时间点A490吸光度值差异有统计学意义,研究组明显抑制HeLa细胞生长.流式细胞仪测定细胞周期各时相中,研究组中处于静止期(G0~G1)细胞明显多于对照组,而增殖期(S+G2~M)细胞明显少于对照组.动物体内实验表明:研究组肿块体积和重量均低于对照组.结论 红色诺卡菌细胞壁骨架对人乳头状瘤病毒阳性的宫颈癌细胞株-HeLa有抑制作用.
作者:赵健;杜海军;廖秦平 刊期: 2007年第01期
目的 建立一种准确、快速的检测胸腺输出功能的方法.方法 根据TCRδ基因序列,设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环(TRECs)的方法;并用于检测正常人及慢乙肝PBMCs中TRECs的含量.结果 建立了测定TRECs含量的实时荧光定量PCR方法,产物与预计长度相符,序列正确;低可扩增出5 copies的模板;重复五次,Ct值的变异系数为1.06%.正常人21~45岁组的TRECs含量为(7767.4±2369.5)copies/106PBMCs,16~20岁组为(28 374.4±7820·4)copies/106PBMCs,21~45岁慢乙肝组(6480.9±2031.2)copies/106 PBMCs,正常人21~45岁组分别与16~20岁组、同龄慢乙肝组比较差异均有统计学意义,P<0.05.结论 实时荧光定量PCR检测TRECs的方法特异性强,灵敏度高,重复性好.正常人21~45岁组的胸腺输出功能低于16~21岁组,慢乙肝组低于同龄正常人.
作者:李红兵;陈明;汪莉萍;朱学文;葛国洪;李秀华 刊期: 2007年第01期
Epstein-Barr病毒(EBV)属于疱疹病毒科γ亚科,具有噬B淋巴细胞的特性,能够在B淋巴细胞中建立起潜伏感染,刺激细胞的增生和转化.人群中有大于90%的感染率.
作者:杨松梅;周玲;曾毅 刊期: 2007年第01期
本研究对14例基因型1b型慢性丙型肝炎患者血清HCV基因组中E2/NS1(含HVR1和HVR2)、NS5A区准种异质性进行了检测,对HVR区准种异质性程度与干扰素(IFN)疗效的关系、NS5A2209-2248区是否存在干扰素敏感决定区(ISDR)等热点问题进行了探讨,为1b型慢性丙型肝炎患者应用IFN抗病毒治疗时进行疗效预测提供理论依据.
作者:张琳;白菡;黄芬;赵桂珍;李颖 刊期: 2007年第01期
目的 建立错配PCR-限制性片段长度多态性(mPCR-RFLP)检测乙型肝炎病毒(HBV)前C区A1896变异的方法,与直接测序法比较,评估其应用价值.方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194 bp的基因片段,扩增产物经限制性内切酶Bsu36I酶切,琼脂糖凝胶电泳,根据酶切图谱多态性,建立检测HBV前C A1896变异的方法,对134份乙肝患者血清进行分析,酶切同时测序.2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性.结果 134份血清中117(87.31%)份能用酶切、109(81.34%)份能用测序成功分析HBV前C A1896状况.酶切与测序均成功的10l份血清中,54份为前C区A1896变异株,47份为前C区G1896野株,酶切与测序的结果完全一致.1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异株的5个克隆子均为前C区A1896变异株;1份酶切鉴定为混合感染标本的5个克隆子中,1个为前C区A1896变异株,另外4个为前C区G1896野株.酶切分析结果与克隆测序结果完全相符.结论 与测序法相比,本方法简便、特异性强,能鉴定混合感染,适合大样本分析,可用于临床及流行病学调查.
作者:刘悦晖;丁静娟 刊期: 2007年第01期
目的 构建及表达抗红细胞(RBC)单链抗体(ScFv)和HIV抗原的融合蛋白,并做活性测试.方法 将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连,重组于高效表达载体中,并在大肠埃希菌中表达.结果 经ELISA检测和红细胞凝集检测,证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性,可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集.结论 融合蛋白构建成功,可用于HIV的快速检测.
作者:胡燕;杨健洋;朱雷;侯俊;沈宏辉;貌盼勇 刊期: 2007年第01期
目的 研究轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化.方法 收集3岁以下因急性轮状病毒腹泻来复旦大学附属儿科医院就诊的小儿 75例,以荧光定量RT-PCR方法检测外周血单个核细胞TLR 2,3、4、7、8 mRNA的表达情况.结果 起病时间在3 d以内的小儿外周血单个核细胞中TLR 2、3、4、7、8 mRNA的表达水平都有明显升高,P均<0.05.其中TLR 2、3、8 mRNA表达在发病7 d和14 d时仍高于对照组,P均<0.05.TLR 4 mRNA的表达在病情较重的患儿比较轻的患儿高,P<0.05.结论 多种TLR参与了轮状病毒引发的宿主免疫应答反应的启动和调节.
作者:徐锦;杨毅;孙家娥;丁韵珍;苏犁云;邵彩虹 刊期: 2007年第01期
目的 探讨国产的HIV-1 p24抗原检测试剂盒进行药物筛选研究的可行性.方法 对国产试剂盒的使用性能与Biomerieux公司商品化的Vironostika试剂盒进行比较,评估国产试剂盒的敏感性、重复性及检验效能.结果 国产试剂盒具有较高的敏感性和重复性,在体外药效学筛选实验中国产试剂盒的阳性检出率及药物评价结果与Vironostika试剂盒差异无统计学意义(P>0.05).结论 国产试剂盒具有较好的使用特性,在药物筛选中可以用国产试剂盒替代Vironostika试剂盒.
作者:杨怡姝;王润田;张晓光;张红中;王惠芬;李泽琳;曾毅 刊期: 2007年第01期
患者女性,38岁.因右上腹疼痛10d伴腹胀、尿黄、纳差2d,2003年11月11日入院.查皮肤巩膜重度黄染.血常规正常,尿胆红素2+,尿胆元±.
作者:于宏;康富标;孙晓云 刊期: 2007年第01期
急性呼吸道感染(acute respiratory tract infection,ARTI)是婴幼儿和儿童的常见病、多发病.据估计,全世界每年有400万5岁以下婴幼儿和儿童死于ARTI[1].
作者:毕振强;李德新 刊期: 2007年第01期
丙型肝炎病毒(HCV)感染可导致肝脏炎症坏死和纤维化,抗病毒治疗是丙型肝炎治疗的根本疗法.我们对慢性丙型肝炎(CHC)患者分别采用聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)和干扰素α-2b(IFNα-2b)治疗,并对两种干扰素的临床疗效进行对比分析.
作者:王怡;高敏;李响;卢诚震;董萌;邱春婷;张万增 刊期: 2007年第01期