于宏；康富标；孙晓云
目的 建立一种准确、快速的检测胸腺输出功能的方法.方法 根据TCRδ基因序列,设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环(TRECs)的方法;并用于检测正常人及慢乙肝PBMCs中TRECs的含量.结果 建立了测定TRECs含量的实时荧光定量PCR方法,产物与预计长度相符,序列正确;低可扩增出5 copies的模板;重复五次,Ct值的变异系数为1.06%.正常人21～45岁组的TRECs含量为(7767.4±2369.5)copies/106PBMCs,16～20岁组为(28 374.4±7820·4)copies/106PBMCs,21～45岁慢乙肝组(6480.9±2031.2)copies/106 PBMCs,正常人21～45岁组分别与16～20岁组、同龄慢乙肝组比较差异均有统计学意义,P＜0.05.结论 实时荧光定量PCR检测TRECs的方法特异性强,灵敏度高,重复性好.正常人21～45岁组的胸腺输出功能低于16～21岁组,慢乙肝组低于同龄正常人.
作者：李红兵；陈明；汪莉萍；朱学文；葛国洪；李秀华 刊期： 2007年第01期
目的 了解CD4+T淋巴细胞的活化在长期感染非进展者(LTNP)及典型进展者(TP)之间的差异,探讨HIV感染的免疫基础.方法 收集24例HIV-1感染患者(7名LTNP患者,17名TP患者)及15例健康对照的抗凝血标本,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞的活化标志物CD38并检测其CD4计数等指标;bDNA方法检测患者体内的病毒载量.结果 与正常人相比,LTNP患者的CD4+T淋巴细胞的活化的差异无统计学意义(P＞0.05)而TP患者的活化程度明显增高(P＜0.01);HIV感染者CD4+T淋巴细胞CD38的表达水平与CD4计数呈正相关,与病毒载量呈负相关.结论 随着疾病的进展,CD4+T淋巴细胞的活化程度逐渐增高;LTNP患者CD4+T淋巴细胞的活化程度没有明显增高可能是其疾病长期不进展的原因之一.
作者：焦艳梅；福军亮；张政；张晖；金磊；周春保；付宝云；王福生；吴昊 刊期： 2007年第01期
2005年南通市冬春季节发生麻疹暴发流行,我院1～6月共收治163例儿童麻疹患者,现对其临床资料分析如下.
作者：徐建中；张沛枫；孙伟；朱浩然；赵云 刊期： 2007年第01期
急性呼吸道感染(acute respiratory tract infection,ARTI)是婴幼儿和儿童的常见病、多发病.据估计,全世界每年有400万5岁以下婴幼儿和儿童死于ARTI[1].
作者：毕振强；李德新 刊期： 2007年第01期
Epstein-Barr病毒(EBV)属于疱疹病毒科γ亚科,具有噬B淋巴细胞的特性,能够在B淋巴细胞中建立起潜伏感染,刺激细胞的增生和转化.人群中有大于90%的感染率.
作者：杨松梅；周玲；曾毅 刊期： 2007年第01期
水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白中糖蛋白E(gE)的免疫活性强,本试验成功构建了VZV糖蛋白E的原核表达载体,所表达的重组蛋白可以有效激活小鼠的免疫反应.
作者：李福民；闫薇；冉玉平；段德鉴；周光平 刊期： 2007年第01期
自从1983年首次报道儿童HIV-1感染以来,二十余年间,儿童HIV-1感染病例剧增,平均每天有2000多名儿童成为HIV-1感染者,每年死于艾滋病(AIDS)的儿童达58万,HIV/AIDS已成为全球儿童的一个主要死因[1].
作者：张麒；王临虹；蒋岩；邢文革 刊期： 2007年第01期
乙型肝炎病毒各个区变异的研究是当前的研究热点.已经知道,HBV有S区、C区、P区和X区四个区.
作者：孙梅；刘新钰；张汉荣 刊期： 2007年第01期
目的 建立错配PCR-限制性片段长度多态性(mPCR-RFLP)检测乙型肝炎病毒(HBV)前C区A1896变异的方法,与直接测序法比较,评估其应用价值.方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194 bp的基因片段,扩增产物经限制性内切酶Bsu36I酶切,琼脂糖凝胶电泳,根据酶切图谱多态性,建立检测HBV前C A1896变异的方法,对134份乙肝患者血清进行分析,酶切同时测序.2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性.结果 134份血清中117(87.31%)份能用酶切、109(81.34%)份能用测序成功分析HBV前C A1896状况.酶切与测序均成功的10l份血清中,54份为前C区A1896变异株,47份为前C区G1896野株,酶切与测序的结果完全一致.1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异株的5个克隆子均为前C区A1896变异株;1份酶切鉴定为混合感染标本的5个克隆子中,1个为前C区A1896变异株,另外4个为前C区G1896野株.酶切分析结果与克隆测序结果完全相符.结论 与测序法相比,本方法简便、特异性强,能鉴定混合感染,适合大样本分析,可用于临床及流行病学调查.
作者：刘悦晖；丁静娟 刊期： 2007年第01期
目的 通过研究小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群及TH1/TH2型细胞因子的表达,进一步探讨小儿慢性丙型肝炎的免疫发病机制.方法 (1)流式细胞仪(FACS)检测16例慢性丙型肝炎患儿及10例正常对照外周血T细胞亚群.(2)将慢性丙型肝炎患儿和正常对照外周血单个核细胞(PBMC)体外培养72 h后,用ELISA法检测培养上清中THl型细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-12和TNF-γ)和TH2型细胞因子(IL-4、IL-10)的浓度.结果 (1)CD4+细胞无明显变化.CD8+细胞与正常对照比较明显升高(P＜0.05).CD3+细胞升高,CD4+/CD8+比值下降,但与正常对照比较无统计学意义(P＞0.05).(2)PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高(P＜0.01),而没有检测到IL-2、IL4、IL-12的基础分泌.结论 慢性丙型肝炎患儿体内T淋巴细胞存在数量和功能的异常,CD8+细胞数升高,CD4+细胞功能异常,表现在以TH2型细胞因子的分泌为主.这可能与丙肝病毒(HCV)感染的慢性化有关.
作者：董漪；张鸿飞；陈昊；李靖；杨晓晋；朱世殊；程云 刊期： 2007年第01期
目的 研究5-氨基酮戊酸光动力学疗法(ALA-PDT)在体内外抗单纯疱疹病毒(HSV)的作用.方法 以HSV-Ⅰ感染豚鼠皮肤的动物模型以及HSV-Ⅰ和HSC-Ⅱ感染的Vero细胞为实验系统,观察ALA-PDT抗单纯疱疹病毒的疗效.结果 ALA-PDT在体外具有抑制HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ的作用,与阳性药物无环鸟苷作用基本一致.体内实验中,外用ALA对HSV-Ⅰ型豚鼠皮肤感染仅进行一次PDT治疗,对皮肤病变就产生了剂量依赖性的治疗效果,中、高剂量组疗效显著.结论 ALA-PDT能够有效地灭活单纯疱疹病毒,治疗该病毒引发的皮肤病变.为该疗法用于病毒性疾病的治疗提供了依据.
作者：陶纪宁；段淑敏；李军 刊期： 2007年第01期
目前的研究已经表明了乙型肝炎病毒具有泛噬性,即不仅存在于肝组织中,病毒还可侵袭到不同的组织和器官中,已有报道肝炎患者的心肌、肾脏、胰腺、精细胞、前列腺、唾液腺、肝内胆管细胞、骨髓细胞和外周血单个核细胞中均存在乙型肝炎病毒抗原.
作者：杨丽华；龚作炯；唐智娇 刊期： 2007年第01期
α干扰素联合利巴韦林已成为CHC的标准抗病毒治疗方案.本研究随机、对照观察了聚乙二醇α干扰素(PEGIFNα)抗慢性丙肝病毒(HCV)感染的近、远期疗效,及药物耐受性,报道如下.
作者：姜天俊；闫子国；闫慧颖；赵鹏；石磊 刊期： 2007年第01期
本研究对14例基因型1b型慢性丙型肝炎患者血清HCV基因组中E2/NS1(含HVR1和HVR2)、NS5A区准种异质性进行了检测,对HVR区准种异质性程度与干扰素(IFN)疗效的关系、NS5A2209-2248区是否存在干扰素敏感决定区(ISDR)等热点问题进行了探讨,为1b型慢性丙型肝炎患者应用IFN抗病毒治疗时进行疗效预测提供理论依据.
作者：张琳；白菡；黄芬；赵桂珍；李颖 刊期： 2007年第01期
目的 评估两种不同的α-干扰素联合治疗对儿童HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效.方法 选择HBeAg阳性慢性乙型肝炎儿童120例,随机分为3组,每组各40例:第1组(A组)为α-干扰素(IFN-α)组;第2组(B组)为IFN-α+拉米夫定(LAM)组.第3组(C组)为α-干扰素(IFN-α)+乙肝疫苗组.其中干扰素疗程6个月,拉米夫定疗程6个月,所有病例均观察至12个月.结果 治疗结束时丙氨酸转氨酶(ALT)复常率3组无差异.治疗6个月和12个月时B组HBeAg阴转率和HBV DNA的阴转率明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 α-干扰素与拉米夫定联合治疗对HBeAg阳性慢性乙型肝炎儿童的病毒学应答(VR)疗效明显优于单用α-干扰素组和α-干扰素+乙肝疫苗组.
作者：钟旬华；邓欣；陈心春；周伯平 刊期： 2007年第01期
目的 对戊型肝炎(戊肝)诊断试剂进行质量评价.方法 选择北京万泰生物药业(万泰),北京现代高达生物技术(高达),上海科华生物工程(科华),GeneLabs Diagnostic Inc(GeneLabs),和河南华美生物工程(华美)共5家公司生产的检测戊肝病毒IgG(HEV-IgG)抗体的 ELISA 试剂,分别检测戊肝诊断试剂参比品、可疑戊肝临床患者和正常人群血清HEV抗体.结果 对24份阳性和30份阴性参比品检测,以万泰试剂检测符合率高,阳性和阴性符合率分别为95.83%(23/24)和96.67%(29/30),总符合率为96.30%,其次为高达试剂87.50%(21/24)和100%(30/30),总符合率为94.44%.华美试剂87.50%(21/24)和96.67%(29/30),总符合率92.59%,GeneLabs 66.67%(16/24)和100%(30/30),总符合率为85.18%,科华试剂45.83%(11/24)和100%(30/30),总符合率为75.93%.对42份可疑戊肝患者血清HEV抗体检测阳性率,高达试剂为100%(42),万泰和华美试剂均为97.62%(41),GeneLabs和科华试剂均为90.48%(38).对230份正常人群HEV抗体检测阳性率,从高到低依次为万泰试剂31.74%(73),华美试剂为23.91%(55),高达试剂为17.39%(40),CeneLabs和科华试剂分别是7.83%(18)和3.48%(8).结论 5家试剂检测急性期戊肝患者抗体阳性率均能达90%以上,具有很高的一致率,而应用于普通人群HEV感染的调查,其抗体阳性率从31.74%～3.48%不等.不同的试剂存在假阳性或和阳性漏检现象.依本室参比品和人群血清阳性率来看,万泰试剂检出率较高.
作者：江永珍；田瑞光；鲁建；毕胜利 刊期： 2007年第01期
目的 构建及表达抗红细胞(RBC)单链抗体(ScFv)和HIV抗原的融合蛋白,并做活性测试.方法 将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连,重组于高效表达载体中,并在大肠埃希菌中表达.结果 经ELISA检测和红细胞凝集检测,证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性,可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集.结论 融合蛋白构建成功,可用于HIV的快速检测.
作者：胡燕；杨健洋；朱雷；侯俊；沈宏辉；貌盼勇 刊期： 2007年第01期
目的 研究轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化.方法 收集3岁以下因急性轮状病毒腹泻来复旦大学附属儿科医院就诊的小儿 75例,以荧光定量RT-PCR方法检测外周血单个核细胞TLR 2,3、4、7、8 mRNA的表达情况.结果 起病时间在3 d以内的小儿外周血单个核细胞中TLR 2、3、4、7、8 mRNA的表达水平都有明显升高,P均＜0.05.其中TLR 2、3、8 mRNA表达在发病7 d和14 d时仍高于对照组,P均＜0.05.TLR 4 mRNA的表达在病情较重的患儿比较轻的患儿高,P＜0.05.结论 多种TLR参与了轮状病毒引发的宿主免疫应答反应的启动和调节.
作者：徐锦；杨毅；孙家娥；丁韵珍；苏犁云；邵彩虹 刊期： 2007年第01期
目的 探讨含HIV-lgag基因的重组腺病毒5型与35型嵌合病毒(rAd5/F35)在BALB/c小鼠中的免疫效果.方法 PCR,间接免疫荧光鉴定HIV-1 gag基因在重组腺病毒(rAd5/F35-mod.gag)的正确插入和体外细胞水平的表达,用rAd5/F35-mod.gag以不同的方式免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中的p24特异性抗体,细胞内细胞因子染色法检测小鼠的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.结果 重组腺病毒rAd5/F35-mod.gag在体外细胞水平可以很好的表达目的基因gag;在小鼠体内重组腺病毒rAd5/F35-mod.gag可诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应,用rAd5/F35单独免疫2次,所诱发的CTL和血清IgG反应强.但Ad5初次感染后,产生的抗Ad5抗体可以抑制rAd5/F35疫苗的特异性免疫反应.结论 重组腺病毒rAd5/F35-mod.gag单独免疫可在小鼠体内诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应.只改变Ad5纤突蛋白Fiber,不能避免抗Ad5抗体的抑制作用.
作者：刘新蕾；余双庆；冯霞；王小利；刘红梅；张晓梅；李红霞；周玲；李泽琳；曾毅 刊期： 2007年第01期
目的 应用酵母双杂交技术筛选人白细胞中与丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCV NS4A)相互作用的蛋白.方法 连接有HCV NS4A酵母表达的载体pGBKT7-NS4A,转化入单倍体酵母细胞AH109,与转化了人白细胞cDNA文库质粒的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-a-半乳糖(X-a-Gal)上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提取质粒,转化人大肠埃希细菌(DH5α),提取质粒并测序,进行生物信息学分析.对克隆重复率较高的蛋白编码基因进行克隆和回交验证.结果 筛选出在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基和在铺有X-a-gal的四缺培养基上均能生长并变成蓝色的真阳性菌落45个,其中钙离子信号调节亲环素配体(CAML)29个.对CAML基因成功克隆,回交验证了HCV NS4A与CAML的相互作用.结论 成功筛选出7种在人白细胞cDNA文库中与HCV NS4A特异性相互作用的蛋白,为进一步探讨HCV的致病机制提供了新的线索.
作者：程勇前；王琳；成军；刘妍；徐东平；钟彦伟；曲建慧；田江克；戴久增；李晓东 刊期： 2007年第01期
中华实验和临床病毒学杂志
主管:实验和临床病毒学杂志
主办：中国科学技术协会
