学术投稿

类风湿关节炎患者血清中高迁移率族蛋白1的作用及其与MMP2、TIMP2的关系

郭惠芳;刘淑霞;马丽艳;靳洪涛;张明峰;王志会

关键词:关节炎, 类风湿, 高迁移率族蛋白, Toll样受体, 胞外基质金属蛋白酶诱导因子, 基质金属蛋白酶
摘要:目的 初步探讨高迁移率族蛋白(NMGB)1、基质金属蛋白酶(MMP)2及其组织抑制因子(TIMP)2在类风湿关节炎(RA)中的作用及可能作用机制.方法 收集61例RA患者和24例健康志愿者外周血.采用ELISA方法检测血清中HMGB1、MMP2和TIMP2蛋白表达量.采用流式细胞术分析外周血单个核细胞(PBMC)表面Toll样受体(TLR)4和CD147的表达.同期进行ESR、CRP、RF和双手正位X线检查等相关指标检测.结果 RA患者血清中,HMGB1浓度较健康对照组显著升高[(9.34±2.25 vs 7.40±1.06)ng.mL-1]](P<0.01).而MMP2和TIMP2浓度明显低于健康对照组(571.26±81.95 vs 633.76±26.92)和(259.27±18.90 vs273.85±26.31)(P<0.01和P<0.05).PBMC中TLR_4~+CD_(147)~+和CD_(14)~+CD_(147)~+细胞比例和平均荧光强度显著高于健康对照组(P<0.01).HMGB1水平与ESR、CRP、RF及X线分期均呈正相关(P<0.05或P<0.01),亦与CD_(14)~+CD_(147)~+和TLR_4~+CD_(147)~+的平均荧光强度呈显著正相关(P<0.01).而MMP2水平与之呈负相关(P<0.05和P<0.01).结论 胞外HMGB1通过激活PBMC表达粘附分子CD147而发挥其致炎效应,并直接或间接下调了保护性因子MMP2的表达,加速关节炎进展.HMGB1可能成为RA治疗新靶点.
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    目的 探讨短期胰岛素强化治疗对2型糖尿病患者外周血单核细胞上单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和核因子-κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)表达的影响.方法 选择健康成人20例,新诊断2型糖尿病患者20例,分为正常对照组和糖尿病组,糖尿病组采取胰岛素强化治疗,疗程2周.留取清晨空腹肘静脉血5mL,分离出单核细胞,采用流式细胞仪检测胰岛素强化治疗前后单核细胞上MCP-1和NF-κB的表达;同时检测治疗前后Homa-IR、WBC、N%. 结果短期胰岛素强化治疗后:外周血单核细胞上MCP-1和NF-κB的表达水平显著降低(P<0.01),由治疗前的(0.89±0.26)%、(15.53±2.49)%分别下降为(0.50±0.18)%、(12.22±2.80)%;Homa-IR,WBC和N%明显降低;单核细胞MCP-1和NF-κB表达水平与Homa-IR、WBC和N%变化无明显相关性.结论 2型糖尿病患者体内存在增强的低度炎症反应,胰岛素强化治疗可降低外周血单核细胞上MCP-1和NF-κB蛋白的表达,提示胰岛素除降糖作用外,尚有一定的抗炎作用.

    作者:翟斐;李素梅;叶山东;林杨;何媛媛;陈若平;陈超;荆春艳;翟志敏 刊期: 2010年第02期

  • 犬骨髓间充质干细胞的培养及生物学特性

    目的 研究探讨犬骨髓间充质干细胞的分离、培养方法以及生长增殖特性.方法 无菌技术抽取比格犬骨髓,密度梯度离心法获取细胞.加入含胎牛血清体积分数为0.1的低糖DMEM培养基中进行原代培养;待细胞生长至80%~90%融合时,1:3传代培养.倒置显微镜观察细胞形态.MTT法测定3、5和10代细胞生长曲线.流式细胞仪检测第5代细胞的表面抗原分子.结果 原代培养24h后看见微少贴壁细胞,初起为小圆形,3 d后可见梭形类成纤维细胞呈漩涡样生长.10代以后细胞逐渐有宽大梭形样变,增殖逐渐减缓,偶有细胞飘零.流式细胞仪检测传5代细胞有96%表达CD44,95%表达CD29,而只有5%表达CD34.生长曲线显示,传3、5代骨髓间充质干细胞均有较强的增殖能力,其中传3代细胞更为明显,而传10代细胞的增殖能力较前有所减弱.结论 犬骨髓间充质干分离提取操作简便易行,且有较强的生长增殖能力,能够长期培养,符合组织工程种子细胞的基本条件.

    作者:廖前德;严安;钟达;尹科;周星;翁晓军;卢吉平 刊期: 2010年第02期

  • 呼吸机管道不同消毒方法的效果分析

    目的 探讨不同消毒方法用于呼吸机管道系统的消毒效果,以选择目前条件下呼吸机管道系统的佳消毒方式.方法 回收本院各科室病人连续使用3 d的呼吸机管道,随机分为4组:采用84消毒液浸泡(A组)、2%戊二醛熏蒸(B组)、全自动清洗消毒器消毒(C组)和全自动清洗消毒器消毒+蒸汽灭菌消毒(D组),每组各150套.各组分别于消毒前、消毒后、放置7 d采样,进行细菌培养及细菌菌落计数,比较4组各时间段的细菌杀灭率、细菌阳性卒.结果 全自动清洗消毒器和全自动清洗消毒器消毒+蒸汽灭菌消毒的效果佳.结论 全自动清洗消毒器是对呼吸机管道系统消毒的佳方案.

    作者:肖树;戴红辉;张艳梅;查晓红 刊期: 2010年第02期

  • Bryan人工颈椎间盘置换治疗脊髓型颈椎病的中期随访观察

    目的 探讨Bryan人工颈椎间盘置换治疗脊髓型颈椎病的中期效果.方法 回顾性分析2006年5月~2009年3月收治的脊髓型颈椎痛患者8例,均为单节段病变.全部患者均采用Bryan人工颈椎间盘置换,中期随访行JOA评分,摄置换节段前屈后伸位、左右侧屈住X射线平片,观察假体置入后的稳定性及置换颈椎节段的活动度.结果 8例患者均进行门诊随访,随访时间24~42个月,所有患者置换后症状明显缓解.JOA评分由置换前平均8.7分增加到15.2分,末次随访时置换节段前屈后伸活动范围平均5.3°(4.3°~6.1°);左右侧屈活动范围分别为平均3.4°(2.8°~4.3°)和3.5°(2.9°~4.3°).假体无偏移或下沉.末次随访未发现置换节段异位骨化、假体松动、下沉或颈椎生理曲度的改变.结论 Bryan人工椎间盘置换治疗脊髓型颈椎病中期临床效果良好,能维持颈椎正常的活动范围和生理曲度.

    作者:张军;廖文波 刊期: 2010年第02期

  • Ezrin蛋白及其磷酸化水平在皮肤鳞癌、基底细胞癌、脂溢性角化中的表达及其临床意义

    目的 探讨Ezrin蛋白及磷酸化Ezrin(phos-Ezrin)在SK、BCC、SCC中的表达及其与临床病理参数之间的相关性.方法 采用免疫组化法检测36例SCC、27例BCC和20例SK、10例正常人皮肤(normal skin,NS)中Ezrin、phos-Ezrin蛋白表达水平.结果 ①Ezrin、phos-Ezrin蛋白在NS、SK、BCC、SCC中的阳性表达率分别为20.0%,10.0%;25.0%,15.0%;66.7%,77.7%和91.3%,97.2%,各组之间比较差异有显著性(P<0.01).②Ezrin、phos-Ezrin蛋白表达水平与皮肤肿瘤的类型、恶性程度(SCC的病理分级)及淋巴结转移密切相关(R1,r~1=0.87,0.89;R2,r~2=0.80,0.86;R3,r~3=0.89,0.91,P<0.01).结论 Ezrin、phos-Ezrin阳性表达水平在SK、BCC、SCC组织中与皮肤肿瘤的类型、恶性程度(病理分级)和淋巴结转移有关,两者呈平行表达关系,联合检测可能成为预测皮肤恶性肿瘤转移及预后的重要指标.

    作者:伍斌;谢红付;张江林;李吉 刊期: 2010年第02期

  • 糖尿病周围血管病患者内皮祖细胞一氧化氮、内皮型一氧化氮合酶含量的变化

    目的 观察糖尿病周围血管病患者内皮祖细胞(endothelial progentior cells,EPC)一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的变化.方法 采用硝酸还原酶法测定NO的浓度,免疫印迹杂交法(Western blot)半定量测定eNOS的含量.结果 糖尿病合并周围血管病组EPCs数量少,增殖、迁移和黏附能力降低,No和eNOS表达弱,糖尿病无血管痛组表达增强,对照组表达多,差异具有统计学意义(P<0.05).No和eNOS的表达与EPC的数量呈正相关(r=0.651,P<0.05).结论 糖尿病合并周围血管病患者EPC数量减少,功能降低,可能与eNOS、NO表达减弱有关.

    作者:付秀立;赵湜;王红祥;李竞 刊期: 2010年第02期

  • 强化控制对2型糖尿病患者颈动脉内膜中层厚度的影响

    目的 探讨强化控制对2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内膜中层厚度(IMT)的影响.方法 选取140例无血管并发症及血脂异常的初发T2DM患者,随机分为两组.A组64例,给予强化降糖+降压治疗;B组76例,给予强化降糖+降压+他汀类药物治疗.随诊12个月,检测治疗前后患者颈动脉IMT的变化及其代谢控制情况.结果 ①强化控制12个月后,A组患者颈动脉IMT较治疗前有所增厚(P<0.01),B组患者颈动脉IMT与治疗前相比无明显改变,但与A组治疗后相比,差异具有统计学意义(P<0.01);②组患者TC及LDL-C水平较治疗前明显下降,并显著低于A组(P<0.01);③COX回归分析显示,舒张压升高、HDL-C降低和有高血压家族史均是T2DM患者劲动脉IMT增厚的危险因素.结论 在强化降糖、降压基础上加用他汀类药物治疗,更有利于减少初发T2DM患者动脉粥样硬化的发生,对防治糖尿病血管病变有一定的积极意义.

    作者:宁小方 刊期: 2010年第02期

  • 老年冠心病患者抑郁状态与白细胞介素-17的相关性研究

    目的 探讨老年冠心病抑郁状态患者血浆白细胞介素-17浓度的变化.方法 选择38例老年冠心病抑郁状态患者做为研究对象,同时以30例老年冠心病非抑郁状态患者为对照组,采用夹心酶联免疫吸附法(ELISA):捡测血浆中白细胞介素-17(IL-17)浓度.结果 ①老年冠心病抑郁状态组患者血浆IL-17高于对照组[(341.72±134.28)pg/mL、(214.33±82.51)pg/mL,P<0.011;②老年冠心病抑郁状态患者中,急性冠脉综合征组较稳定型心绞痛组血浆IL-17浓度明显增高[(382.17±165.35)pg/mL,(305.47±119.75)pg/mL,P<0.01].③老年冠心病轻-中度抑郁状态患者及重度抑郁状态患者血浆IL-17明显高于对照组[分别为(310.27±138.25)Pg/mL,(395.42±158.75)pg/mL.(214.33+82.51)pg/mL,P<0.05],且重度抑郁状态组高于轻-中度抑郁状态组(P<0.05).④老年冠心痛抑郁状态组血浆IL-17浓度与抑郁评分呈正相关(r=0.674,P<0.05).结论 IL-17在老年冠心病抑郁状态的发病机理中可能起重要的作用.

    作者:王秀华;王小清;何国平 刊期: 2010年第02期

  • 长沙地区汉族人群脑出血患者血脂水平与载脂蛋白B基因G12669A多态性的关系

    目的 分析长沙地区汉族人群脑出血患者血脂水平与载脂蛋白B基因(apolipoprotein B,apoB)G12669A多态性的关系.方法 收集93例散发性脑出血患者和100例正常对照者的外周血标本.采用氧化酶法测定血清甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein cholesterol,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein cholesterol,LDL)水平,酶联免疫吸附法测定LP(a)浓度,免疫比浊法测定apoB100及apoAI浓度;聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析法(Pblymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism,PCR-RFLP)和DNA直接测序法检测apoB基因G12669A多态性.结果 ①长沙地区汉族人群脑出血患者的TC、TG、LDL-C和LP(a)显著高于正常对照组,而HDL-C显著降低(P<0.05);②脑出血组中,G/A基因型的TC、TG、LDL-C较之G/G型显著增高,而HDL-C则显著降低(P<0.05),其他指标无显著性差异(P>0.05);③脑出血组及对照组apoB基因G12669A多态A等住基因频率分别为0.097、0.045,脑出血组apoB基因G12669A多态A等位基因频率显著高于对照组(P<0.05).结论 长沙地区汉族人群脑出血患者的血脂水平升高,可能与apoB基因G12669A多态A等位基因存在相关性.

    作者:胡中扬;张乐;曾艺;刘宝琼;许宏伟;刘运海;杜小平;夏健;杨期东 刊期: 2010年第02期

  • 肺癌VEGF-C表达的器官差异性与淋巴结转移度及肿瘤细胞凋亡的关系

    目的 探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)在肺癌原发灶和转移淋巴结中表达的差异,以及与淋巴结转移度(LNR)和肺癌细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组织化学和TUNEL法染色,检测并分析肺癌原发灶和转移淋巴结中肿瘤细胞VEGF-C的表达,及其与LNK及肿瘤细胞凋亡的关系.结果 原发灶和LNM灶肿瘤细胞中,LNM灶VEGF-C表达水平明显高于原发灶(P<0.05);两者的VEGF-C表达均与LNR显著相关(P<0.05,P<0.01),LNM灶的表达水平与LNR的相关系数明显高于原发灶(P<0.05);原发灶VEGF-C的表达与肿瘤细胞凋亡率无显著相关(P>0.05),而LNM灶VEGF-C的表达与凋亡率呈显著负相关(P<0.01).结论 肺癌VEGF-C在原发灶和LNM灶中的表达差异具有统计学意义,而LNM灶表达水平与LNK的关系更为密切,且与LNM灶中肺癌细胞的凋亡相关.

    作者:郭旭峰;陈勇兵;徐忠恒;徐中华;杨文涛;钱永跃 刊期: 2010年第02期

  • 重庆市嫖客梅毒感染及影响因素分析

    目的 了解分析重庆市嫖客梅毒感染及影响因素.方法 对2008年4~10月到重庆市10家医疗机构的性病门诊就诊者(嫖客)进行调查.调查内容包括社会人口学、艾滋痛知识知晓率、对艾滋病歧视态度、性行为及安全套使用情况等,同时采血作梅毒抗体检测.结果 514名调查对象中,梅毒检出率为12.3%(66/514);单因素分析结果显示,被调查者的文化程度、与临时性伴近一次性关系时安全套使用情况与梅毒感染率有关.多因素Logistic回归分析显示,与临时性伴近一次性关系时是否使用安全套是梅毒感染的保护因素.结论 应充分利用性病门诊优势,加强对高危男性人群的知识教育、不良行为阻断和梅毒的主动监测,控制梅毒流行.

    作者:吴音;雷山川;邓庆素;夏雨;贾瑜;周玲;徐世明;唐政;朱晓玲;黄河 刊期: 2010年第02期

  • 基因芯片技术筛选大鼠ARDS差异表达基因的研究

    目的 用全基因表达谱芯片技术筛选大鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的差异表达基因并对其进行分析,以进一步阐明ARDS发病的分子机制.方法 分别从正常和ARDS大鼠肺组织中提取总RNA,分离纯化mRNA,经逆转录合成掺入生物素标记的cDNA探针,然后与基因芯片(涵盖27044转录本,代表22012个基因)杂交,扫描芯片荧光信号图像,用Sam3.0进行统计处理,用博奥生物分子功能注释系统V4.0进行功能分析.随机选择3个差异表达基因,用荧光定量KT-PCR.验证.结果 芯片检测结果显示,在ARDS大鼠肺组织中,表达上调1.5倍以上的基因有73个,下调1.5倍以上的基因有298个.其中,代谢相关基因上调的有1个,下调的有34个;免疫相关基因上调的有3个,下调的有7个;信号传导相关基因上调的有2个,下调的有9个;神经相关的基因上调的有3个,下调的有3个.结论 全基因表达谱芯片技术是筛选AR.DS差异表达基因的有效方法,用该法筛选出一些差异表达基因,为初步阐明ARDS的发病机制奠定了基础.

    作者:刘秀珍;刘凤;石增立;李娜;石磊 刊期: 2010年第02期

  • 重症监护病房鲍曼不动杆菌感染调查及泛耐药情况分析

    目的 了解该市某医院近3年来重症监护病房(ICU)鲍曼不动杆菌感染现状,分析其耐药谱变迁及泛耐药情况,金属酶产生情况,为临床了解及防治院内感染提供依据.方法 对该院ICU2005~2007年分离的鲍曼不动杆菌分布及耐药情况进行回顾性分析.细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK-32细菌鉴定仅,常规药敏试验采用K-B纸片法,采用头孢他啶和2-巯基丙酸的双纸片琼脂扩散表型协同试验筛选产金属酶菌株.结果 3年间共分离到鲍曼不动杆菌358株,其中2005年87株,2006年102株,2007年169株,其中通过呼吸道感染占82.12%.泛耐药菌株感染率呈现出逐年上升趋势,2005年3株(占3.45%),2006年8株(占7.84%),2007年有21株(占12.43%),且泛耐药菌株感染的发生率与住院时间相关.金属酶表型阳性株共检测出5株,阳性率为15.63%,其中2006年2株,2007年3株.结论 鲍曼不动杆菌感染呈逐年上升趋势,以呼吸道感染方式为主,其泛耐药菌株感染率呈上升趋势,金属酶产生率低,不是主要耐药机制.患者住院时间越长感染泛耐药菌株的几率越高.应加强ICU病房环境和人员消毒,加强抗生素的合理使用,控制鲍曼不动杆菌在医院内的定值和播散,重视泛耐药鲍曼不动杆菌监测.

    作者:段秀杰;陆建成;阴晴;高雁;王文凯 刊期: 2010年第02期

  • 神经系统疾病危重患者合并糖尿病预后分析及解决方案

    目的 探讨神经系统疾病危重患者低蛋白血症对预后的影响,明确患病糖尿病病史与低蛋白血症发生与否的关系,解决方法.方法 2008年1月1日-2009年7月31日入住北京安贞医院神经内科监护室(NICU)的全部患者共141例,观察并记录其合并症,低蛋白血症发生与否,入住监护室当日及4周时NIHSS及G1ASSCOW评分,感染情况,治疗总费用.对所有资料进行分析.结果 低蛋白血症直接造成感染加重(P=0.000),入住监护室时间延长(P=0.000),治疗总费用增加(P=0.000),预后不良NIHSS(P=0.016)及GLASSCOW(P=0.010)有显著性差异.而糖尿病痛史造成低蛋白血症的重要因素(P=0.001).结论 低蛋白血症造成神经系统疾病危重患者预后不良,糖尿病史是重要低蛋白血症致病因素,合理、有效的蛋白质营养供给是有效的解决方法.

    作者:王薇;毕齐 刊期: 2010年第02期

  • 急诊口服药物中毒患者洗胃管长度的研究

    目的 研究在急诊服毒患者洗胃时延长传统的洗胃管的长度的洗胃效果.方法 对364例口服药物中毒患者经口插胃管洗胃,随机分成两组,一组用传统的洗胃法,第二组(实验组)延长传统的洗胃长度10cm洗胃,在临床上观察洗胃的效果.结果 对照组洗胃法比传统组洗胃效果更彻底,时间也缩短,且减少了对胃粘膜的损伤.结论 延长传统的洗胃管的长度10 cm,能提高洗胃的效果.

    作者:黄伟;肖涛;刘燕;殷朝霞 刊期: 2010年第02期

  • 铁之缘片和乳酸亚铁改善缺铁性贫血的实验研究

    目的 研究铁之缘片和乳酸亚铁对大鼠缺铁性贫血的改善情况.方法 以低铁饲料喂饲雌性断乳Wistar大鼠4周建立缺铁性贫血大鼠模型.选血红蛋白含量低于100 g/L的动物随机分5组,分别为缺铁对照组和低、高铁之缘片组及低、高乳酸亚铁组.比较实验前后体重、血红蛋白(Hb)、红细胞内游离原卟啉(FEP)、血清铁(SI)及血清铁蛋白(sF)含量的变化.结果 铁之缘片和乳酸亚铁组均能显著增加缺铁性贫血大鼠的体重、血红蛋白、血清铁(SI)及血清铁蛋白(SF),能明显降低红细胞内游离原卟啉(FEP)含量,而且铁之缘片与乳酸亚铁组比较有显著性差异(P<0.05).结论 铁之缘片和乳酸亚铁具有改善大鼠缺铁性贫血的功能,且铁之缘片比乳酸亚铁的作用更显著.

    作者:卢连华;孙立明;杜征国;王猛;杨非;谢玮;姚文环 刊期: 2010年第02期

  • 老年肺栓塞45例临床分析

    目的 探讨老年人肺栓塞的临床特点,提高肺栓塞的诊治水平.方法 回顾性分析我院诊治的45例老年肺栓塞患者的临床表现、诊断方法及治疗.结果 老年人肺栓塞的临床表现更不典型,症状繁多.螺旋CT诊断率92.7%,溶栓和/或抗凝治疗者和非溶栓和/或非抗凝治疗者的死亡率分别为12.9%和69.2‰结论老年人肺栓塞症状多,以呼吸困难为主要表现,容易误诊为慢性心肺疾病急性发作.螺旋CT可作为老年人肺栓塞的首选和可靠的诊断方法,及时溶栓和抗凝可以降低死亡率.

    作者:符秀虹 刊期: 2010年第02期

  • 3.0T磁共振移植肾弥散加权成像的初步研究

    目的 评价用3.0T MR行移植肾弥散加权成像的可行性,评价ADC值在观察者间和观察者内的可重复性.方法 23例移植肾功能正常的患者分别行移植肾脏常规(T1WI及T2WI)、弥散加权成像(DWI),由一位医师在T1WI、T2WI和DWI图像上测量移植肾皮髓质信噪比.由两位医师分别对T1WI、T2WI及DWI图像按照4分法进行质量评价.使用工作站进行DWI图像重建后处理,由两位医师分别独立测量肾皮髓质ADC值,其中10例患者由一位医师2周后重复测量.测量及评价结果进行统计学处理.结果 移植肾图像信噪比良好,能满足成像要求;两观察者均认为95.6%(22/23)的T1WI和91.3%(21/23)的T2WI图像达到4分;82.6%(19/23)的DWI图像达到4分、95.6%(22/23)的DWI图像达到3分以上能够满足测量要求.不同观察者之间、同一观察者重复测量的cADC、mADC和totADC值差别亦无统计学意义.结论 3.0T MK行移植肾弥散加权成像所测数据在不同观察者间及同一观察者内的可重复性较好,能够用来进行移植肾功能成像的实验研究.

    作者:单人锋;彭贵主;周福庆;肖国胜;饶雪峰;吴波 刊期: 2010年第02期

  • 实时荧光定量PCR检测CD258在前列腺癌组织中的表达

    目的 应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测CD258(肿瘤坏死因子14,TNFSF14)在前列腺癌(PCa)组织中的表达,以探讨CD258基因与PCa的关系.方法 提取正常前列腺组织、良性前列腺增生(BPH)组织及经病理确诊的PCa组织中的总KNA,并逆转录为cDNA,应用RQ-PCR.法检测CD258的表达.结果 在正常前列腺、BPH及PCa组织,CD258的阳性表达率均为100%.在正常前列腺组织中,CD258基因平均相对表达强度为(10.2±1.53),BPH组织中为(9.91±2.01),而在PCa组织中为(3.14±1.72).BPH组及正常对照组比较无统计学差异(P>0.05),Pca组与BPH组及正常对照组比较有统计学意义(P<0.05).结论 CD258在PCa组织中出现较低的表达强度,提示其有可能与PCa的发病相关.

    作者:张轶庠;张朝霞;杨江根;黄东龙;黄建生;张泽键 刊期: 2010年第02期

  • 丙型肝炎病毒多表位抗原的融合表达及抗原性分析

    目的 表达HCV核心蛋白Core、非结构区NS3、NS4和NS5区的部分优势表面抗原的融合基因,为丙型肝炎病毒的检测提供合适抗原.方法 通过KT-PCK从HCV全长基因组中分别克隆Core、NS3、NS4和NS5区的部分优势表面抗原的基因片段,运用重叠延伸PCR技术将它们拼接成融合基因,将融合基因再克隆到表达裁体pBVIL-2中.转化大肠杆菌JM109,阳性克隆经42℃热诱导融合蛋白的表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定.重组蛋白经阳离子交换和分子筛纯化.结果 42℃诱导可高表达分子量约为43 kD的融合抗原,重组蛋白主要以包涵体形式存在.经过纯化目的 蛋白纯度达90%以上的,表达量约为886μg/mL.ELISA结果表明纯化蛋白具有良好的抗原性.结论 HCV复合多表位抗原融合蛋白可作为HCV诊断抗原提供了靶抗原.

    作者:聂东宋;冯惊涛;胡道奇;罗朝晖;周见远;赵劲风 刊期: 2010年第02期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心