李杰平；张平；张书杰；于小华；何平平
目的 研究腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建及其在神经干细胞(NSCs)中的表达.方法 通过RT-PCR从大鼠海马中获得BDNF基因,通过基因克隆、HEK293包装,获得含增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体pAd-BDNF-EGFP,将其感染原代培养的神经干细胞,观察EGFP及BDNF 2种基因的表达,镜下测定转染率,并检测RT-PCR产物,证实BDNF的存在.转染后的神经干细胞经G418筛选,抗性细胞传代扩增后获得成功转染BDNF基因的NSCs克隆.结果 荧光显微镜下可见感染后的NSCs表达EGFP而发出绿色荧光;通过RT-PCR证明感染后的NSCs具有表达BDNF的能力;用ELISA鉴定细胞上清中分泌的BDNF,72 h的含量达到高值,为12.78 ng/mL;证明通过构建病毒的感染可以使神经干细胞获得分泌BDNF的能力,且EGFP基因可作为神经干细胞移植研究中良好的示踪剂.结论 腺病毒病毒介导EGFP基因及BDNF基因在大鼠胚胎神经干细胞中成功表达,为应用以神经干细胞直接作为基因靶细胞,介导基因治疗中枢神经系统疾病奠定了基础.
作者：李少华；文会龙；顾昕；汪洋；吕立夏；李艳娜；那曼丽；崔银江 刊期： 2008年第01期
目的 探讨MRI检查对子宫内膜癌的术前诊断及分期价值.方法 对27例子宫内膜癌患者术前行盆腔MRI检查,将MRI诊断结果与术后病理诊断比较.结果 27例子宫内膜癌,MRI均检出,24例MRI检查能够清楚显示瘤灶的形态及大小,并对肌层、宫颈或邻近结构的侵犯做出正确分期,过高分期1例,Ⅰb期诊断为Ⅰc期,过低分期2例,Ⅲa期诊断为Ⅰc期,Ⅲc期诊断为Ⅰc期.结论 MRI在子宫内膜癌的诊断和分期中有重要临床价值.
作者：赵绘萍；赵国库；周宏伟 刊期： 2008年第01期
目的 研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏中的表达状况及意义.方法 用昆明小鼠感染尾蚴复制小鼠日本血吸虫病肝纤维化模型;RT-PCR和免疫组化分别检测小鼠肝脏CTGFmRNA和蛋白的表达,免疫组化方法 观察各阶段肝脏α-SMA阳性细胞的表达.结果 模型组10周时形成典型的肝纤维化,此时模型组小鼠肝脏CTGFmRNA和蛋白表达、α-SMA+细胞数达高峰,10周、14用、18用时与治疗组相比均有明显的统计学差异(P均＞0.05);CTGFmRNA和蛋白表达水平与α-SMA+细胞数均呈直线相关性.结论 CTGF基因和蛋白表达增高与小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成有密切关系;CTGF在小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成过程中的作用可能主要通过作用于活化的肝星状细胞来实现的.
作者：余治健；向选东；蔡胜蓝；谭德明；李萍 刊期： 2008年第01期
目的 探讨稀释式自身输血(HAT)在外科手术应用中的有效性和可行性.方法 选择2001年至今使用HAT的70例外科择期手术病例为治疗组;使用异体输血法的70例外科手术病例为对照组.记录2组患者术中接受不同输血治疗的情况,对其输血前后的免疫功能指标和血常规指标变化进行统计分析.结果 HAT能避免和减少输用异体血液;治疗组无输血不良反应;免疫功能指标和免疫球蛋白变化:在治疗组输血前后差异无显著性(P＞0.05);对照组的差异有显著性(P＜0.05);两组组间比较差异有显著性(P＜0.05).血常规指标变化两组间差异无显著性(P＞0.05).结论 HAT应用于外科手术中是安全有效和可行的,值得推广应用.
作者：邹文；纪红星；王鑫；姜敏；刘培贤 刊期： 2008年第01期
目的 评价瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在游离皮瓣移植术中的临床效果及安全性.方法 选择ASA Ⅰ～Ⅱ级需行游离皮瓣移植术病例40例,随机分成R组(瑞芬太尼复合异丙酚组)和F组(芬太尼复合异丙酚组)各20例.入手术室后静脉注射咪唑安定0.05mg/kg诱导后,R组:瑞芬太尼O.25μg/(kg·min)、异丙酚100～200 μg/(kg·min);F组:芬太尼0.25μg/(kg·min)、异丙酚100～200 μg/(kg·min)持续泵入维持麻醉,观察相关指标.结果 2组术中麻醉效果差异无显著性(P＞0.05),术后复苏均安静,R组镇痛作用强于F组,R组术后恢复明显比F组快(P＜0.01).结论 在游离皮瓣移植术中瑞芬太尼比芬太尼更优越、更安全.
作者：王白云；吴礼平；候立力；梁娜；罗红菱 刊期： 2008年第01期
目的 研究贝那普利对原发性高血压患者血浆生长素水平和血管内皮功能的影响.方法 70例原发性高血压患者分为治疗组、对照组,观察比较治疗前后血浆生长素水平(Ghrelin)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)及血管性假性血友病因子(vWF)变化.结果 治疗后Ghrelin升高,ET-1水平、vWF水平降低,NO浓度升高,差异均有显著性.结论 贝那普利降压治疗同时可以提高血浆生长素水平,改善原发性高血压病人的血管内皮功能.
作者：宋月霞；钟雪莲；韩素桂；王希柱；张小民；宋巧凤 刊期： 2008年第01期
目的 检测HBV感染后人绒毛膜滋养层细胞的HBV标志物的表达和细胞的形态学变化,探讨HBV对滋养层细胞的感染与HBV宫内传播的关系.方法 将HBV感染的血清与原代培养的人早孕绒毛膜滋养层细胞及传代细胞JEG-3共同孵育8～48 h,通过倒置显微镜观察细胞的形态及细胞间连接,细胞免疫荧光方法 检测滋养层细胞中HBsAg的表达,荧光定量PCR方法 检测细胞中的HBV DNA,TUNEL方法 检测滋养层细胞的凋亡.结果 滋养层细胞与HBV感染的血清共同孵育后,滋养层细胞的形态及细胞间连接无明显变化;但通过免疫荧光方法 检测到滋养层细胞中HBsAg的阳性表达,并通过荧光定量PCR方法 检测到滋养层细胞中HBV DNA的存在;同时,细胞凋亡检测结果表明,与HBV感染的血清共同孵育后,滋养层细胞的凋亡数量明显增加.结论 HBV可以感染体外培养的滋养层细胞;HBV感染可以诱导滋养层细胞凋亡,滋养层细胞的感染和凋亡可能与HBV的宫内传播机制有关.
作者：白菡；何丽霞；张琳；冯国和；石理兰；窦晓光；赵桂珍 刊期： 2008年第01期
目的 探讨溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin b,CB)在肺纤维化发病中的作用.方法 应用博莱霉素(5mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,采用HE染色、Masson三联染色、免疫组织化学染色、RT-PCR等方法,观察实验性大鼠肺纤维化的发病过程及其肺组织中Cathepsin B蛋白及mRNA表达水平的动态变化.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、纤维组织增生(14 d)及稳定的肺纤维化(28～35 d)等表现;Cathepsin B在正常肺组织表达较弱,在肺纤维化组7 d时表达增强,14 d进一步增强,28 d明显增强,35 d时较28 d开始减弱,但仍强于正常组;Cathepsin B mRNA在正常肺组织中表达较弱,在肺纤维化组7 d时表达增强,14 d进一步增强,28 d明显增强,35 d时较28 d开始减弱,但仍强于正常组.结论 Cathepsin B在实验性大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,其过度表达可能参与了肺纤维化的发生发展过程.
作者：李杰平；张平；张书杰；于小华；何平平 刊期： 2008年第01期
目的 检测肾移植受者外周血中共刺激分子CD28与CD40/CD154表达的动态变化情况.方法 对同种异体移植肾患者于术前1、术后1、3、7、14、21和28 d分别取外周血,对AR受体,在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血.对白细胞进行免疫荧光双标记,用流式细胞仪检测各共刺激分子在外周血淋巴细胞中的表达.结果 术后1、3 d内CD28+、CD4+CD28+、CD8+CD28+细胞比率均有显著下降,但术后7 d逐渐恢复至术前水平;AR时表达上升,其中CD28+和CD4+CD28+细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后下降至术前水平.AR时CD40+和CD154+细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后恢复至术前水平.结论 外周血淋巴细胞CD28、CD40、CD154在移植后排斥反应时表达上调,提示外周血淋巴细胞共刺激分子的表达在临床肾移植急性排斥反应中起重要作用.
作者：李辉；石理华；叶启发；明英姿；李瑛 刊期： 2008年第01期
如何在医学生中开展新发传染病的教学是摆在医学教育工作者面前的一项艰巨任务;该科从二十世纪九十年代开始在国内率先进行了新发传染病教学的实践,包括编写教材,课堂讲授和讲座,开展网络教学以及开展多种教学活动等多种形式,并取得了良好的效果.
作者：全俊；范学工；鲁猛厚；刘国珍 刊期： 2008年第01期
目的 研究紫玉盘茎叶石油醚部位的抗肿瘤活性.方法 乙醇回流提取后分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取有效部位.应用小鼠S180实体瘤模型,研究紫玉盘茎叶石油醚部位的体内抗肿瘤作用.采用MTT检测法检测紫玉盘茎叶石油醚部位的体外抗肿瘤活性.结果 紫玉盘茎叶石油醚部位对S180实体瘤呈剂量依赖性抑制作用,600 mg/kg组的瘤重抑制百分率达51.04%,与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.01).MTT检测显示,紫玉盘茎叶石油醚20μg/mL对SMMC-7721、SGC-7901和KB细胞的增殖有明显抑制作用,与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 紫玉盘茎叶石油醚部位具有一定的抗肿瘤作用,其机制有待进一步研究.
作者：戴支凯；郭志军；徐庆 刊期： 2008年第01期
目的 制备克林霉素磷酸酯脂质体并测定包封率及粒径.方法 采用蒸发超声法制备克林霉素磷酸酯脂质体,高效液相色谱法检测克林霉素磷酸酯包封率,用激光粒度仪测定其平均粒径.结果 运用正交设计方法,优化脂质体的制备工艺和处方为:磷脂:胆固醇为5:1,超声时间为6 min,蒸发温度为35℃,磷脂:克林霉素为5:3,磷脂:海藻糖为2:1.克林霉素磷酸酯在5.0～50 μg/mL范围内线性关系良好.3组克林霉素磷酸酯脂质体包封率分别为52.26%、50.13%和53.75%.结论 克林霉素磷酸酯脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确.
作者：何剪太；周伟华；张阳德；郭讯枝；曾昭武；李珍发；刘星言；谭斐；赵劲风；潘一峰 刊期： 2008年第01期
目的 研究N-末端脑钠素原(NT-ProBNP)对扩张型心肌病(dilatedcardiomyopathy,DCM)慢性心力衰竭(心衰)患者心功能的评价作用,并与炎症因子高敏C反应蛋白(hsCRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相比较.方法 入选45例DCM心衰患者,分别用ELISA法检测NT-ProBNP、hsCRP、IL-6、TNF-α浓度,超声心动图测左室射血分数(LVEF),并与正常对照组20例进行比较.心衰患者随访2个月.结果 hsCRP、IL-6、TNF-α在心衰组虽高于正常对照组,但差异无显著性(P＞0.05);亚组分析显示hsCRP在心功能Ⅳ级与正常组之间差异有显著性(P＜0.05).而LN(NT-ProBNP)在正常组与各心功能分级间差异均有显著性(P均＜0.05).NT-ProBNP与心功能分级明显相关(r=0.826),与LVEF呈明显负相关(r=-0.772).事件组LN(NT-ProBNP)、EF明显高于非事件组(P＜0.00,P＜0.05).结论 NT-ProBNP在定量评价DCM心衰患者心功能时明显优于hsCRP、IL-6、TNF-α,优于或与LVEF相似,可作为临床评价DCM患者心功能及预后的生化指标.
作者：成永霞；钟国强 刊期： 2008年第01期
目的 探讨血浆D-二聚体水平对血栓形成性脑梗死(CI)患者并发出血性脑梗死(HI)、多脏器功能障碍(MODS)影响的临床意义.方法 应用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法,对66例CI患者及46例正常人血浆D-二聚体定量分析,对66例血浆D-二聚体水平不同程度持续增高CI患者HI、MODS发生率进行分析.结果 CI患者病后第4天及第14天血浆D-二聚体水平明显高于正常人(P＜0.01),CI患者急性期、亚急性期血浆D-二聚体水平越高,HI、MODS发生率越高(P＜0.01).结论 CI患者急性期、亚急性期血浆D-二聚体水平持续增高,提示高凝状态是CI重要病理生理基础.CI患者急性期、亚急性期血浆D-二聚体水平与HI、MODS发生率呈正相关,提示检测D-二聚体水平,可为临床评估重症CI患者的病情、疗效及预后提供有价值依据.
作者：詹海涛；黄峰；陈钢 刊期： 2008年第01期
目的 研究丙酮酸脱氢酶激动剂二氯醋酸二异丙胺(DADA)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的功能的影响及可能机制.方法 以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,进行了以下研究:1.DADA对高糖诱导的血管EC功能指标一氧化氮(NO)和可溶性细胞间黏附分子-1 (sICAM-1)的影响;2.用激光共聚焦显微镜及Western blotting杂交分别观察高糖诱导的PKCα、PKC δ的位置变化及蛋白表达量的影响;实验分组:对照组:浓度为5.5 mM;高糖组:浓度为30 mM;DADA(1×10-5 M,1×10-4 M or 1×10-3 M)+高糖组.结果 1.30 mM高糖可诱导EC功能紊乱:高糖可诱导EC功能紊乱:NO浓度降低,sICAM-1水平增加,DADA可抑制高糖诱导的上述变化;高糖可诱导HUVECs的PKCα及PKC δ表达位置转移;PKCδ表达增强,但对PKCα表达影响不明显.结论 DADA可以纠正高糖所致内皮细胞功能紊乱,可能部分是通过PKCα及PKCδ途径来实现的.
作者：万沁；钟海花；徐勇；何建华；童南伟 刊期： 2008年第01期
目的 探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系.方法 选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测.结果 扩增产物电泳显示,在中国河南汉族人群中,发现VNTR的6种基因型:AC、BC、BD、CC、CD、DD.本研究未发现VNTR各基因型及等位基因与冠心病的发生间存在明显相关性.P值均大于0.05.与其他基因型相比,在CD基因型中,Gensini冠状动脉评分≥40组与评分＜40组间的差异具有显著性,P＜0.05,OR=2.3(95%可信区间1.2～4.4).结论 血小板膜GPIbα基因巨糖肽区VNTR的CD基因型与冠心病的严重程度有关.
作者：赵洛沙；张静华；郑红；毋淑珍；杨文；薛国华；杨帆；王培 刊期： 2008年第01期
目的 探讨稳定转染靶向端粒酶调节相关基因TRAP的小发夹RNA对胃癌细胞株SGC-7901的长效影响.方法 构建特异性作用于TRAP mRNA的小发夹RNA质粒表达载体,转入SGC-7901细胞.,筛选的阳性克隆细胞继续压力培养3个月,采用RT-PCR法检测TRAP mRNA的表达,MTT法检测细胞生长,同时检测细胞凋亡、hTERT mRNA、端粒酶活性.结果 稳定转染ShRNA-TRAP后,SGC-7901细胞的TRAP mRNA表达明显下降,hTERT mRNA和端粒酶活性降低;细胞增殖能力降低,细胞凋亡率增加.结论 ShRNA-TRAP能长效的抑制TRAP mRNA的表达,下调hTERT mRNA转录及端粒酶活性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,可作为抑制端粒酶的肿瘤基因治疗策略的补充.
作者：钱晓彬；成静；王瑛；姜润秋；陶艳；乔纯；冯振卿 刊期： 2008年第01期
目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在肺癌中表达的临床意义,及其与癌细胞增殖活性的关系.方法 采用免疫组化PV-9000法检测75例经手术切除并具有完整随访记录的人体肺癌标本(术前均未行放、化疗)HIF-1α及Ki-67的表达.结果 在不同组织病理类型间,HIF-1α的表达差异具有极显著性(χ2=14.021,P=0.001),小细胞肺癌的表达强度显著高于鳞、腺癌(P=0.000,0.012),而鳞、腺癌间的表达差异无显著性(P=0.113).其表达强度随肺癌组织学分级的增加(χ2=29.470,P=0.000)、发生淋巴结转移(Z=-2.576,P=0.010)及术后生存时间的缩短而增加(χ2=20.681,P=0.000);各组织病理类型中,Ki-67指数(Ki-67 Index,KI)的差异也有极显著性(F=10.049,P=0.000),小细胞肺癌的KI显著高于鳞癌和腺癌(P=0.000,0.000),而鳞、腺癌间的差异无显著性(P=0.602).随组织学分级的增加、病人生存期的缩短,KI明显升高(F=13.411,15.053;P=0.000,0.000);75例肺癌组织中HIF-1 α的表达强度与KI呈高度正相关(r=0.501,P=0.000).结论 小细胞肺癌的HIF-1α表达显著高于非小细胞肺癌;HIF-1 α的表达与肺癌组织学分级、淋巴结转移及人术后存活期有关;小细胞肺癌的KI显著高于非小细胞肺癌;KI与肺癌细胞分化程度、病人生存期有关;HIF-1α的表达与肺癌细胞增殖活性呈正相关,HIF-1 α的表达受肺癌细胞增殖能力的影响;HIF-1 α和Ki-67亦可作为评估肺癌分子生物学行为的重要指标.
作者：项锋钢；吴翠娇；杨东霞；牛兆山；沈毅 刊期： 2008年第01期
目的 通过转染显性负突变hTERT探讨其在TSA诱导宫颈癌细胞株Hela凋亡中的作用.方法PCR-TRAP-ELISA法检测转染显性负突变,野生型hTERT和对照质粒以后Hela细胞的端粒酶活性.磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法检测细胞生长率;Annexin V/PI法检测各组转染细胞在TSA作用下的早期凋亡.结果 转染显性负突变hTERT的Hela细胞的端粒酶活性显著低于对照组,2μmol/L TSA作用对照细胞Hela-puro、Hela-DNhTERT和Hela-WThTERT细胞,Hela-DNhTERT相对于Hela-puro生长率差异明显,Hela-DNhTERT细胞凋亡率明显高于Hela-WThTERT和Hela-puro组.结论 转染DNhTERT对TSA诱导的Hela细胞凋亡具有协同作用.
作者：吴鹏；奚玲；陈刚；卢运萍；周剑锋；马丁 刊期： 2008年第01期
目的 探讨三种不同体积(100%、50%和30%)大鼠原位肝移植术后生存时间,肝功能变化等情况.评估移植物体积对于大鼠原位肝移植的影响.方法 建立100%、50%和30%体积的大鼠原位肝移植模型,观察术后生存时间,术后肝功能改变及肝脏组织病理改变.结果 术后14 d生存率分别为:85%、70%和10%.术后肝功能变化表明30%肝移植组术后损伤较重.病理显示50%及30%肝移植组术后肝脏损害严重,30%组尤为明显.结论 移植物的体积对于术后存活率具有明显影响,但外科技术的改进可能提高小移植物受体的术后存活率.
作者：仲跻巍；李相成；姚爱华；刘现忠；马跃峰 刊期： 2008年第01期
中国现代医学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
