项锋钢;吴翠娇;杨东霞;牛兆山;沈毅
目的 探讨稳定转染靶向端粒酶调节相关基因TRAP的小发夹RNA对胃癌细胞株SGC-7901的长效影响.方法 构建特异性作用于TRAP mRNA的小发夹RNA质粒表达载体,转入SGC-7901细胞.,筛选的阳性克隆细胞继续压力培养3个月,采用RT-PCR法检测TRAP mRNA的表达,MTT法检测细胞生长,同时检测细胞凋亡、hTERT mRNA、端粒酶活性.结果 稳定转染ShRNA-TRAP后,SGC-7901细胞的TRAP mRNA表达明显下降,hTERT mRNA和端粒酶活性降低;细胞增殖能力降低,细胞凋亡率增加.结论 ShRNA-TRAP能长效的抑制TRAP mRNA的表达,下调hTERT mRNA转录及端粒酶活性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,可作为抑制端粒酶的肿瘤基因治疗策略的补充.
作者:钱晓彬;成静;王瑛;姜润秋;陶艳;乔纯;冯振卿 刊期: 2008年第01期
医学教学中临床见习是非常重要的教学方式,通过对儿科见习教学方式进行了一系列改革,收到很好效果.本文通过对教学改革的方式进行探讨,寻找更适合现代医学教育的教学方式.教学改革的内容包括教学内容的优化、调整和教学方式的多元化.通过改革,培养学生的临床思维,提高学生实际工作能力及科研能力.
作者:刘晓艳;张建江;胡劲涛;王成;王秀英;张星星 刊期: 2008年第01期
目的 探讨MRI检查对子宫内膜癌的术前诊断及分期价值.方法 对27例子宫内膜癌患者术前行盆腔MRI检查,将MRI诊断结果与术后病理诊断比较.结果 27例子宫内膜癌,MRI均检出,24例MRI检查能够清楚显示瘤灶的形态及大小,并对肌层、宫颈或邻近结构的侵犯做出正确分期,过高分期1例,Ⅰb期诊断为Ⅰc期,过低分期2例,Ⅲa期诊断为Ⅰc期,Ⅲc期诊断为Ⅰc期.结论 MRI在子宫内膜癌的诊断和分期中有重要临床价值.
作者:赵绘萍;赵国库;周宏伟 刊期: 2008年第01期
目的 评价瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在游离皮瓣移植术中的临床效果及安全性.方法 选择ASA Ⅰ~Ⅱ级需行游离皮瓣移植术病例40例,随机分成R组(瑞芬太尼复合异丙酚组)和F组(芬太尼复合异丙酚组)各20例.入手术室后静脉注射咪唑安定0.05mg/kg诱导后,R组:瑞芬太尼O.25μg/(kg·min)、异丙酚100~200 μg/(kg·min);F组:芬太尼0.25μg/(kg·min)、异丙酚100~200 μg/(kg·min)持续泵入维持麻醉,观察相关指标.结果 2组术中麻醉效果差异无显著性(P>0.05),术后复苏均安静,R组镇痛作用强于F组,R组术后恢复明显比F组快(P<0.01).结论 在游离皮瓣移植术中瑞芬太尼比芬太尼更优越、更安全.
作者:王白云;吴礼平;候立力;梁娜;罗红菱 刊期: 2008年第01期
目的 比较萨勃1007型心肺复苏机与传统的人工心肺复苏效果,以评价萨勃机在临床应用的价值.方法 回顾性分析248例使用萨勃机心肺复苏患者和223例采用人工心肺复苏的患者,排除原发病、就诊时间影响因素后比较两种方法 的心肺复苏成功率及存活率,并比较两种方法 并发症发生率.结果 萨勃心肺机复苏成功率、存活率较人工心肺复苏高,P<O.05,前者分别是34%、14%,后者为21%和5%,P<0.05;两者并发症发生率无显著差别,P<0.05.结论 萨勃机是目前理想的一种完全可替代以往人工心肺复苏的新型仪器,值得临床推广使用.
作者:颜鲲;唐国茂;李亚勇 刊期: 2008年第01期
目的 制备克林霉素磷酸酯脂质体并测定包封率及粒径.方法 采用蒸发超声法制备克林霉素磷酸酯脂质体,高效液相色谱法检测克林霉素磷酸酯包封率,用激光粒度仪测定其平均粒径.结果 运用正交设计方法,优化脂质体的制备工艺和处方为:磷脂:胆固醇为5:1,超声时间为6 min,蒸发温度为35℃,磷脂:克林霉素为5:3,磷脂:海藻糖为2:1.克林霉素磷酸酯在5.0~50 μg/mL范围内线性关系良好.3组克林霉素磷酸酯脂质体包封率分别为52.26%、50.13%和53.75%.结论 克林霉素磷酸酯脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确.
作者:何剪太;周伟华;张阳德;郭讯枝;曾昭武;李珍发;刘星言;谭斐;赵劲风;潘一峰 刊期: 2008年第01期
目的 对薄层液基细胞学筛查宫颈病变的敏感性进行评价.方法 以组织学及HPVDNA检测结果为金标准,通过对1400例受检病例进行薄层液基细胞学、传统巴氏细胞学检测,评价薄层液基细胞学对宫颈病变的筛查价值.结果 细胞学筛查高度鳞状上皮内病变(HSIL)的敏感性高于筛查低度鳞状上皮内病变(LSIL)的敏感性,但差异无显著性(P>0.05).薄层液基细胞学诊断HSIL的敏感性(96.3%)高于传统巴氏细胞学(72.7%),但两者差异无显著性(P>0.05);薄层液基细胞学诊断LSIL的敏感性(94.2%)高于传统巴氏细胞学(46.7%),两者差异有显著性(P<0.05).HPV感染发生率为11.6%,在各年龄段的差别无统计学意义.薄层液基细胞学的检出率(62.5%)高于传统巴氏细胞学(23.5%),两者差异有显著性(P<0.05).结论 薄层液基细胞学筛查各级宫颈病变及HPV感染相关病变的敏感性高于传统巴氏细胞学.
作者:宋丽君;魏波;李英勇 刊期: 2008年第01期
目的 了解雌激素受体基因的Pvu Ⅱ、XbaⅠ多态性在湖南汉族人的分布.方法 采用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)方法 检测了108例正常湖南汉族人的雌激素受体基因PvuⅡ和XbaⅠ多态性,并与不同种族和地区人群的ER基因多态性分布进行比较.结果 湖南正常汉族人群中雌激素受体基因以pp、xx基因型和p、x等位基因的分布频率为高,PP、XX基因型和P、X等位基因低,且男女间、以及与日本比较差异无显著性(P>0.05);但与瑞典人群中的分布有显著性差异(P>0.05).结论 雌激素受体基因多态性在不同种族间的分布差异显著.
作者:龚先琼;谢建萍 刊期: 2008年第01期
目的 研究腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建及其在神经干细胞(NSCs)中的表达.方法 通过RT-PCR从大鼠海马中获得BDNF基因,通过基因克隆、HEK293包装,获得含增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体pAd-BDNF-EGFP,将其感染原代培养的神经干细胞,观察EGFP及BDNF 2种基因的表达,镜下测定转染率,并检测RT-PCR产物,证实BDNF的存在.转染后的神经干细胞经G418筛选,抗性细胞传代扩增后获得成功转染BDNF基因的NSCs克隆.结果 荧光显微镜下可见感染后的NSCs表达EGFP而发出绿色荧光;通过RT-PCR证明感染后的NSCs具有表达BDNF的能力;用ELISA鉴定细胞上清中分泌的BDNF,72 h的含量达到高值,为12.78 ng/mL;证明通过构建病毒的感染可以使神经干细胞获得分泌BDNF的能力,且EGFP基因可作为神经干细胞移植研究中良好的示踪剂.结论 腺病毒病毒介导EGFP基因及BDNF基因在大鼠胚胎神经干细胞中成功表达,为应用以神经干细胞直接作为基因靶细胞,介导基因治疗中枢神经系统疾病奠定了基础.
作者:李少华;文会龙;顾昕;汪洋;吕立夏;李艳娜;那曼丽;崔银江 刊期: 2008年第01期
目的 宫内发育迟缓(IUGR)是胰岛素抵抗的独立危险因素,通过检测IUGR胎鼠肝脏糖代谢相关酶的表达,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制.方法 通过孕期蛋白质营养不良法建立大鼠IUGR模型,孕21天时剖宫产,测量胎鼠的体重和肝重,采用RT-PCR和蛋白印迹技术检测胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK的mRNA及蛋白表达的变化.结果 与正常对照相比,IUGR胎鼠肝脏PGC-1的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.01),肝中PEPCK mRNA的表达也明显增高(P<0.01).结论 IUGR胎鼠肝脏PGC-1表达增加诱导了糖异生关键酶PEPCK的表达,促进肝脏糖异生,这是IUGR鼠成年后发生胰岛素抵抗的原因之一.
作者:刘晓梅;卢岩;李书琴 刊期: 2008年第01期
目的 研究丙酮酸脱氢酶激动剂二氯醋酸二异丙胺(DADA)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的功能的影响及可能机制.方法 以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,进行了以下研究:1.DADA对高糖诱导的血管EC功能指标一氧化氮(NO)和可溶性细胞间黏附分子-1 (sICAM-1)的影响;2.用激光共聚焦显微镜及Western blotting杂交分别观察高糖诱导的PKCα、PKC δ的位置变化及蛋白表达量的影响;实验分组:对照组:浓度为5.5 mM;高糖组:浓度为30 mM;DADA(1×10-5 M,1×10-4 M or 1×10-3 M)+高糖组.结果 1.30 mM高糖可诱导EC功能紊乱:高糖可诱导EC功能紊乱:NO浓度降低,sICAM-1水平增加,DADA可抑制高糖诱导的上述变化;高糖可诱导HUVECs的PKCα及PKC δ表达位置转移;PKCδ表达增强,但对PKCα表达影响不明显.结论 DADA可以纠正高糖所致内皮细胞功能紊乱,可能部分是通过PKCα及PKCδ途径来实现的.
作者:万沁;钟海花;徐勇;何建华;童南伟 刊期: 2008年第01期
目的 研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用.方法 以PCR方法 从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的 基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi).将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的 基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况.结果 RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达.结论 RNAi技术能抑制目的 基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具.
作者:谢书阳;王萍玉;王桂兰;白咸勇;李有杰;张公文 刊期: 2008年第01期
目的 对冠状动脉造影(CAG)显示轻中度狭窄病变进行了血管内超声(IVUS)的检查,识别冠状动脉轻中度狭窄斑块的病变特征及探讨其临床意义.方法 患者96例.其中,CAG检查显示冠状动脉轻中度狭窄(直径狭窄率20%~70%)者68例,冠状动脉重度狭窄(直径狭窄率>70%)者28例.所有患者行冠状动脉造影期间同时行血管内超声检查.血管内超声对病变血管分别进行测量外弹力膜内横截面积(EEM CSA)、小管腔面积(MLA)、斑块面积(EEM CSA-MLA)、斑块负荷(斑块面积/EEM CSA)、纤维帽的厚度、脂核大小、脂核比例、重塑指数(RJ)、夹层和血栓的比例等指标.结果 所有患者均进行了冠状动脉造影和IVUS检查,在CAG检查中轻度狭窄的病变,在IVUS检查中可见到不稳定斑块的存在.轻中度狭窄组冠状动脉内软斑块、偏心斑块和薄纤维帽多见,正性重构多见而钙化少,斑块破裂的比例明显高于重度狭窄组(P<0.05).重度狭窄组斑块多表现为硬斑块、钙化、无重构和负性重构(P<0.05).结论 CAG显示轻、中度狭窄的患者进行IVUS检查是必要的.IVUS诊断不稳定斑块有较高的特异性和敏感性,临床上可作为冠状动脉轻中度狭窄病变是否需介入干预的重要依据.
作者:张阳德;杨希立;肖长华;周昭仑;李结源 刊期: 2008年第01期
目的 探讨溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin b,CB)在肺纤维化发病中的作用.方法 应用博莱霉素(5mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,采用HE染色、Masson三联染色、免疫组织化学染色、RT-PCR等方法,观察实验性大鼠肺纤维化的发病过程及其肺组织中Cathepsin B蛋白及mRNA表达水平的动态变化.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、纤维组织增生(14 d)及稳定的肺纤维化(28~35 d)等表现;Cathepsin B在正常肺组织表达较弱,在肺纤维化组7 d时表达增强,14 d进一步增强,28 d明显增强,35 d时较28 d开始减弱,但仍强于正常组;Cathepsin B mRNA在正常肺组织中表达较弱,在肺纤维化组7 d时表达增强,14 d进一步增强,28 d明显增强,35 d时较28 d开始减弱,但仍强于正常组.结论 Cathepsin B在实验性大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,其过度表达可能参与了肺纤维化的发生发展过程.
作者:李杰平;张平;张书杰;于小华;何平平 刊期: 2008年第01期
目的 通过转染显性负突变hTERT探讨其在TSA诱导宫颈癌细胞株Hela凋亡中的作用.方法PCR-TRAP-ELISA法检测转染显性负突变,野生型hTERT和对照质粒以后Hela细胞的端粒酶活性.磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法检测细胞生长率;Annexin V/PI法检测各组转染细胞在TSA作用下的早期凋亡.结果 转染显性负突变hTERT的Hela细胞的端粒酶活性显著低于对照组,2μmol/L TSA作用对照细胞Hela-puro、Hela-DNhTERT和Hela-WThTERT细胞,Hela-DNhTERT相对于Hela-puro生长率差异明显,Hela-DNhTERT细胞凋亡率明显高于Hela-WThTERT和Hela-puro组.结论 转染DNhTERT对TSA诱导的Hela细胞凋亡具有协同作用.
作者:吴鹏;奚玲;陈刚;卢运萍;周剑锋;马丁 刊期: 2008年第01期
目的 研究N-末端脑钠素原(NT-ProBNP)对扩张型心肌病(dilatedcardiomyopathy,DCM)慢性心力衰竭(心衰)患者心功能的评价作用,并与炎症因子高敏C反应蛋白(hsCRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相比较.方法 入选45例DCM心衰患者,分别用ELISA法检测NT-ProBNP、hsCRP、IL-6、TNF-α浓度,超声心动图测左室射血分数(LVEF),并与正常对照组20例进行比较.心衰患者随访2个月.结果 hsCRP、IL-6、TNF-α在心衰组虽高于正常对照组,但差异无显著性(P>0.05);亚组分析显示hsCRP在心功能Ⅳ级与正常组之间差异有显著性(P<0.05).而LN(NT-ProBNP)在正常组与各心功能分级间差异均有显著性(P均<0.05).NT-ProBNP与心功能分级明显相关(r=0.826),与LVEF呈明显负相关(r=-0.772).事件组LN(NT-ProBNP)、EF明显高于非事件组(P<0.00,P<0.05).结论 NT-ProBNP在定量评价DCM心衰患者心功能时明显优于hsCRP、IL-6、TNF-α,优于或与LVEF相似,可作为临床评价DCM患者心功能及预后的生化指标.
作者:成永霞;钟国强 刊期: 2008年第01期
目的 探讨α2M在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义.方法 成年新西兰大白兔24只,根据文献采用石膏固定方法 制作骨关节炎动物模型,用免疫组化、原位末端标记技术(TUNEL)等方法 检测α2M在兔膝关节软骨细胞中的表达和软骨细胞凋亡情况.结果 在软骨细胞中α2M的表达实验组阳性率均高于对照组(P<0.05);实验组软骨细胞凋亡程度与α2M的表达呈负相关(P<0.05).结论α2M与骨关节炎发生发展有密切关系.
作者:张洪;张阳德;张宗久;赵明钢;王大平;熊建义;欧阳侃 刊期: 2008年第01期
目的 探讨脂质体介导的bFGF基因在前庭上皮支持细胞中的表达情况及生物学作用.方法 利用脂质体将携带绿色荧光蛋白的bFGF基因质粒导入前庭上皮细胞内,利用绿色荧光蛋白的表达以及RT-PCR技术检测基因的表达,并利用免疫组织化学等形态学技术手段观察其生物学作用.结果 脂质体介导的bFGF基因在细胞内表达良好,转染成功的细胞形态发生明显变化,但MvosinⅦa表达阴性.结论 脂质体介导的bFGF基因可以在前庭上皮细胞内获得良好表达,并促使细胞形态向毛细胞转化.
作者:郑贵亮;高宇红;郭维;翟所强 刊期: 2008年第01期
纳米磁靶向药物载体作为一种新型药物载体,能在特定的导向机制下,将药物高效的运输到靶器官,使药物在局部发挥作用,大大地降低了药物对全身的毒副作用.该文综述了磁性纳米微粒的现状及其在磁性靶向药物传递中作为药物载体在肝癌治疗中的应用研究进展.
作者:彭健;刘桦;邬力祥 刊期: 2008年第01期
目的 采用改良袖套法建立小鼠→大鼠颈部异位异种心脏移植动物模型,动态观察移植心脏病理特征.方法 NIH小鼠和Wistar大鼠作为供、受体,用聚乙烯硬膜外麻醉导管和静脉留置针管制作带短臂动、静脉套管,将小鼠升主动脉、肺动脉分别与大鼠右颈总动脉、右颈外静脉端端套入吻合,建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型.在移植术后3 h(n=4)、8 h(n=4)、16 h(n=4)、24 h(n=4)供心仍跳动时取心,另一组(n=16)在供心停跳时取心并以此决定移植心脏存活时间,未移植小鼠心脏设为对照组(n=4),各组标本作组织病理学检查.结果 移植手术40次,成功32次,移植成功率80.0%.移植心脏平均存活时间(49.3±16.2)h.移植心脏病理检查表现为血管内皮损伤、血栓形成、心肌实质损伤、间质出血、炎症细胞浸润等特征随移植术后时间逐渐加重趋势,完全排斥时部分心肌凝固性坏死及溶解、广泛间质出血、血管结构崩解及血管内血栓形成、严重炎症细胞浸润.结论 改良袖套法建立鼠颈部异位心脏移植模型操作简便、易于观察、稳定可靠,是研究异种移植较理想的动物模型.动态观察组织病理学特征可为异种移植排斥反应诊断提供依据.
作者:唐华;姚榛祥;刘盛春;杨光伦;黄平;罗诗谯 刊期: 2008年第01期