学术投稿

原子力显微镜观察不同Aβ聚集状态的研究

王建秀;王德生;段淑荣;赵敬堃;王景贺

关键词:原子力显微镜, β-淀粉样蛋白, 寡聚体, Alzheimer病
摘要:目的 应用原子力显微镜(AFM)观察比较Aβ25-35、Aβ 42和Aβ 42寡聚体的聚集状态.方法 制备终浓度为50μmol/L的Aβ 42寡聚体、Aβ 42和Aβ 25-35溶液.在云母片上制作各种Aβ样品,用原子力显微镜的轻敲模式观察不同时间、温度条件下的Aβ 42寡聚体状态.比较Aβ 42寡聚体与Aβ25-35和Aβ 42聚集形态的差异.结果 4℃、48h内经HFIP作用的Aβ42以单体、寡聚体形式存在;室温、72h时未经HFIP作用的Aβ42以纤维聚集态存在.Aβ42寡聚体纤维随时间延长而延长,室温条件下更利于纤维聚集.Aβ25-35纤维较Aβ42短.结论 Aβ寡聚体是Aβ存在的一种主要状态.Aβ25-35、Aβ 42相同条件下聚集状态不完全相同.利用原子力显微镜可观察不同Aβ活性片段的聚集情况,AFM是研究Aβ的有效手段.
中国现代医学杂志相关文献
  • 克林霉素磷酸酯脂质体的制备

    目的 制备克林霉素磷酸酯脂质体并测定包封率及粒径.方法 采用蒸发超声法制备克林霉素磷酸酯脂质体,高效液相色谱法检测克林霉素磷酸酯包封率,用激光粒度仪测定其平均粒径.结果 运用正交设计方法,优化脂质体的制备工艺和处方为:磷脂:胆固醇为5:1,超声时间为6 min,蒸发温度为35℃,磷脂:克林霉素为5:3,磷脂:海藻糖为2:1.克林霉素磷酸酯在5.0~50 μg/mL范围内线性关系良好.3组克林霉素磷酸酯脂质体包封率分别为52.26%、50.13%和53.75%.结论 克林霉素磷酸酯脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确.

    作者:何剪太;周伟华;张阳德;郭讯枝;曾昭武;李珍发;刘星言;谭斐;赵劲风;潘一峰 刊期: 2008年第01期

  • 瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在游离皮瓣移植术中的应用

    目的 评价瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在游离皮瓣移植术中的临床效果及安全性.方法 选择ASA Ⅰ~Ⅱ级需行游离皮瓣移植术病例40例,随机分成R组(瑞芬太尼复合异丙酚组)和F组(芬太尼复合异丙酚组)各20例.入手术室后静脉注射咪唑安定0.05mg/kg诱导后,R组:瑞芬太尼O.25μg/(kg·min)、异丙酚100~200 μg/(kg·min);F组:芬太尼0.25μg/(kg·min)、异丙酚100~200 μg/(kg·min)持续泵入维持麻醉,观察相关指标.结果 2组术中麻醉效果差异无显著性(P>0.05),术后复苏均安静,R组镇痛作用强于F组,R组术后恢复明显比F组快(P<0.01).结论 在游离皮瓣移植术中瑞芬太尼比芬太尼更优越、更安全.

    作者:王白云;吴礼平;候立力;梁娜;罗红菱 刊期: 2008年第01期

  • 贝那普利对原发性高血压患者生长素水平和内皮功能影响的临床研究

    目的 研究贝那普利对原发性高血压患者血浆生长素水平和血管内皮功能的影响.方法 70例原发性高血压患者分为治疗组、对照组,观察比较治疗前后血浆生长素水平(Ghrelin)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)及血管性假性血友病因子(vWF)变化.结果 治疗后Ghrelin升高,ET-1水平、vWF水平降低,NO浓度升高,差异均有显著性.结论 贝那普利降压治疗同时可以提高血浆生长素水平,改善原发性高血压病人的血管内皮功能.

    作者:宋月霞;钟雪莲;韩素桂;王希柱;张小民;宋巧凤 刊期: 2008年第01期

  • 显性负突变hTERT在TSA诱导Hela细胞凋亡中的作用

    目的 通过转染显性负突变hTERT探讨其在TSA诱导宫颈癌细胞株Hela凋亡中的作用.方法PCR-TRAP-ELISA法检测转染显性负突变,野生型hTERT和对照质粒以后Hela细胞的端粒酶活性.磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法检测细胞生长率;Annexin V/PI法检测各组转染细胞在TSA作用下的早期凋亡.结果 转染显性负突变hTERT的Hela细胞的端粒酶活性显著低于对照组,2μmol/L TSA作用对照细胞Hela-puro、Hela-DNhTERT和Hela-WThTERT细胞,Hela-DNhTERT相对于Hela-puro生长率差异明显,Hela-DNhTERT细胞凋亡率明显高于Hela-WThTERT和Hela-puro组.结论 转染DNhTERT对TSA诱导的Hela细胞凋亡具有协同作用.

    作者:吴鹏;奚玲;陈刚;卢运萍;周剑锋;马丁 刊期: 2008年第01期

  • 保留人体器官和功能是内镜微创外科治疗的高境界——论内镜下保胆取石、摘息肉

    胆囊结石是临床上一种常见病,多发病.其发病率占正常人群中的10%,即每10个人中就有一个胆囊结石病人.按这个比例计算,中国约有1.3亿个胆囊结石患者,并且随着人民生活水平的提高,其发病率还有增高的趋势.

    作者:张阳德 刊期: 2008年第01期

  • HIF-1α在肺癌中表达的预后意义及与癌细胞增殖活性的关系

    目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在肺癌中表达的临床意义,及其与癌细胞增殖活性的关系.方法 采用免疫组化PV-9000法检测75例经手术切除并具有完整随访记录的人体肺癌标本(术前均未行放、化疗)HIF-1α及Ki-67的表达.结果 在不同组织病理类型间,HIF-1α的表达差异具有极显著性(χ2=14.021,P=0.001),小细胞肺癌的表达强度显著高于鳞、腺癌(P=0.000,0.012),而鳞、腺癌间的表达差异无显著性(P=0.113).其表达强度随肺癌组织学分级的增加(χ2=29.470,P=0.000)、发生淋巴结转移(Z=-2.576,P=0.010)及术后生存时间的缩短而增加(χ2=20.681,P=0.000);各组织病理类型中,Ki-67指数(Ki-67 Index,KI)的差异也有极显著性(F=10.049,P=0.000),小细胞肺癌的KI显著高于鳞癌和腺癌(P=0.000,0.000),而鳞、腺癌间的差异无显著性(P=0.602).随组织学分级的增加、病人生存期的缩短,KI明显升高(F=13.411,15.053;P=0.000,0.000);75例肺癌组织中HIF-1 α的表达强度与KI呈高度正相关(r=0.501,P=0.000).结论 小细胞肺癌的HIF-1α表达显著高于非小细胞肺癌;HIF-1 α的表达与肺癌组织学分级、淋巴结转移及人术后存活期有关;小细胞肺癌的KI显著高于非小细胞肺癌;KI与肺癌细胞分化程度、病人生存期有关;HIF-1α的表达与肺癌细胞增殖活性呈正相关,HIF-1 α的表达受肺癌细胞增殖能力的影响;HIF-1 α和Ki-67亦可作为评估肺癌分子生物学行为的重要指标.

    作者:项锋钢;吴翠娇;杨东霞;牛兆山;沈毅 刊期: 2008年第01期

  • 宫内发育迟缓胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK基因的表达变化

    目的 宫内发育迟缓(IUGR)是胰岛素抵抗的独立危险因素,通过检测IUGR胎鼠肝脏糖代谢相关酶的表达,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制.方法 通过孕期蛋白质营养不良法建立大鼠IUGR模型,孕21天时剖宫产,测量胎鼠的体重和肝重,采用RT-PCR和蛋白印迹技术检测胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK的mRNA及蛋白表达的变化.结果 与正常对照相比,IUGR胎鼠肝脏PGC-1的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.01),肝中PEPCK mRNA的表达也明显增高(P<0.01).结论 IUGR胎鼠肝脏PGC-1表达增加诱导了糖异生关键酶PEPCK的表达,促进肝脏糖异生,这是IUGR鼠成年后发生胰岛素抵抗的原因之一.

    作者:刘晓梅;卢岩;李书琴 刊期: 2008年第01期

  • 血小板膜糖蛋白Ibα基因VNTR多态性与冠心病相关性的研究

    目的 探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系.方法 选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测.结果 扩增产物电泳显示,在中国河南汉族人群中,发现VNTR的6种基因型:AC、BC、BD、CC、CD、DD.本研究未发现VNTR各基因型及等位基因与冠心病的发生间存在明显相关性.P值均大于0.05.与其他基因型相比,在CD基因型中,Gensini冠状动脉评分≥40组与评分<40组间的差异具有显著性,P<0.05,OR=2.3(95%可信区间1.2~4.4).结论 血小板膜GPIbα基因巨糖肽区VNTR的CD基因型与冠心病的严重程度有关.

    作者:赵洛沙;张静华;郑红;毋淑珍;杨文;薛国华;杨帆;王培 刊期: 2008年第01期

  • 应用RNA干扰抑制目的基因在小鼠体内表达

    目的 研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用.方法 以PCR方法 从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的 基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi).将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的 基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况.结果 RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达.结论 RNAi技术能抑制目的 基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具.

    作者:谢书阳;王萍玉;王桂兰;白咸勇;李有杰;张公文 刊期: 2008年第01期

  • 介入合并硬化剂治疗食道静脉曲张破裂出血临床疗效

    目的 观察经皮经肝胃冠状静脉栓塞与硬化合并治疗食道静脉曲张破裂出血的疗效.方法 16例肝硬化食道静脉曲张破裂出血患者行及经皮经肝胃冠状静脉栓塞和内镜下硬化治疗,观察止血效果并发症.结果 15例患者均1次止血成功,1例治疗后8h再次出血,行急诊手术治疗.主要反应为胸骨后疼痛,持续时间为2~7 d,对症处理后消失,3、6个月后再次复查食道胃底曲张静脉明显改善,3例10d左右行内镜下再次硬化治疗(因第1次硬化剂量少或治疗不完全).结论 经皮经肝胃冠状静脉栓塞合并内镜下硬化是一种有效的食道胃底静脉曲张治疗方法 .

    作者:李楠;敖国昆;朱建华;陈伟;翟俊山;王艳梅 刊期: 2008年第01期

  • 紫玉盘茎叶石油醚部位抗肿瘤作用的研究

    目的 研究紫玉盘茎叶石油醚部位的抗肿瘤活性.方法 乙醇回流提取后分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取有效部位.应用小鼠S180实体瘤模型,研究紫玉盘茎叶石油醚部位的体内抗肿瘤作用.采用MTT检测法检测紫玉盘茎叶石油醚部位的体外抗肿瘤活性.结果 紫玉盘茎叶石油醚部位对S180实体瘤呈剂量依赖性抑制作用,600 mg/kg组的瘤重抑制百分率达51.04%,与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.01).MTT检测显示,紫玉盘茎叶石油醚20μg/mL对SMMC-7721、SGC-7901和KB细胞的增殖有明显抑制作用,与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.01).结论 紫玉盘茎叶石油醚部位具有一定的抗肿瘤作用,其机制有待进一步研究.

    作者:戴支凯;郭志军;徐庆 刊期: 2008年第01期

  • 大鼠皮层神经元中磷酸化的细胞周期相关蛋白在发育过程中的表达

    目的 观察正常Wistar大鼠发育过程中皮层神经元的细胞周期相关蛋白及其磷酸化蛋白的表达,探讨发育过程中皮层神经元的细胞周期变化以及磷酸化细胞周期相关蛋白在其中的调控作用.方法 采用免疫荧光方法 观察不同发育时期CyclinD1、CDK2、P27以及磷酸化CDK2、磷酸化CDC2、磷酸化Rb表达的规律.结果 在各年龄组NeuN阳性细胞数量随着年龄增加而逐渐减少.细胞周期相关蛋白(CyclinD1、CDK2、P27)在皮层神经元中广泛表达,各组间差异无显著性;磷酸化CDK2、磷酸化Rb阳性细胞的数量随着年龄增加而逐渐增多,各组间差异有显著性;磷酸化CDC2阳性细胞在各年龄组神经元中均无表达.结论 随着年龄的增长,磷酸化CDK和Rb逐渐增多,使得进入细胞周期的皮层神经元增加.细胞周期相关蛋白的磷酸化调控作用可能与衰老时皮层神经元的凋亡有关.

    作者:解翠红;杜晓萍;朱舟;田代时;陈彬;张强;王伟 刊期: 2008年第01期

  • 实验性肺纤维化大鼠肺组织Cathepsin B表达的动态变化

    目的 探讨溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin b,CB)在肺纤维化发病中的作用.方法 应用博莱霉素(5mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,采用HE染色、Masson三联染色、免疫组织化学染色、RT-PCR等方法,观察实验性大鼠肺纤维化的发病过程及其肺组织中Cathepsin B蛋白及mRNA表达水平的动态变化.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、纤维组织增生(14 d)及稳定的肺纤维化(28~35 d)等表现;Cathepsin B在正常肺组织表达较弱,在肺纤维化组7 d时表达增强,14 d进一步增强,28 d明显增强,35 d时较28 d开始减弱,但仍强于正常组;Cathepsin B mRNA在正常肺组织中表达较弱,在肺纤维化组7 d时表达增强,14 d进一步增强,28 d明显增强,35 d时较28 d开始减弱,但仍强于正常组.结论 Cathepsin B在实验性大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,其过度表达可能参与了肺纤维化的发生发展过程.

    作者:李杰平;张平;张书杰;于小华;何平平 刊期: 2008年第01期

  • 稀释式自身输血在外科手术中的应用

    目的 探讨稀释式自身输血(HAT)在外科手术应用中的有效性和可行性.方法 选择2001年至今使用HAT的70例外科择期手术病例为治疗组;使用异体输血法的70例外科手术病例为对照组.记录2组患者术中接受不同输血治疗的情况,对其输血前后的免疫功能指标和血常规指标变化进行统计分析.结果 HAT能避免和减少输用异体血液;治疗组无输血不良反应;免疫功能指标和免疫球蛋白变化:在治疗组输血前后差异无显著性(P>0.05);对照组的差异有显著性(P<0.05);两组组间比较差异有显著性(P<0.05).血常规指标变化两组间差异无显著性(P>0.05).结论 HAT应用于外科手术中是安全有效和可行的,值得推广应用.

    作者:邹文;纪红星;王鑫;姜敏;刘培贤 刊期: 2008年第01期

  • 不同细胞因子对脐血CD34+细胞扩增的影响

    目的 探讨不同细胞因子促进脐血CD34+细胞扩增的效应,为下一步的临床应用奠定基础.方法 采用EasySep免疫磁珠阳性选择系统分离脐血中CD34+细胞,在无血清、无基质细胞培养体系中添加不同细胞因子培养2周,分组:A组,SCF+FL+TPO B组,SCF+FL+TPO+IL-3 C组,SCF+FL+TPO+G-CSF.结果 CD34+细胞数目于培养后7 d达到峰值,3组间差异无显著性;B组扩增至14d时细胞总数达(384.40±17.48)倍,显著高于另外2组.扩增7 d后的脐血细胞经体外培养可形成造血集落.结论 体外扩增脐血CD34+细胞理想的细胞因子组合为SCF+TPO+FL,以7 d为宜.

    作者:姜昱竹;王跃嗣;胡涛;李建远;王海燕;孙汶生 刊期: 2008年第01期

  • 教学创新的探索/新发传染病的教学实践

    如何在医学生中开展新发传染病的教学是摆在医学教育工作者面前的一项艰巨任务;该科从二十世纪九十年代开始在国内率先进行了新发传染病教学的实践,包括编写教材,课堂讲授和讲座,开展网络教学以及开展多种教学活动等多种形式,并取得了良好的效果.

    作者:全俊;范学工;鲁猛厚;刘国珍 刊期: 2008年第01期

  • 儿科学课程见习教学方式的探讨

    医学教学中临床见习是非常重要的教学方式,通过对儿科见习教学方式进行了一系列改革,收到很好效果.本文通过对教学改革的方式进行探讨,寻找更适合现代医学教育的教学方式.教学改革的内容包括教学内容的优化、调整和教学方式的多元化.通过改革,培养学生的临床思维,提高学生实际工作能力及科研能力.

    作者:刘晓艳;张建江;胡劲涛;王成;王秀英;张星星 刊期: 2008年第01期

  • 子宫内膜癌术前MRI检查的价值

    目的 探讨MRI检查对子宫内膜癌的术前诊断及分期价值.方法 对27例子宫内膜癌患者术前行盆腔MRI检查,将MRI诊断结果与术后病理诊断比较.结果 27例子宫内膜癌,MRI均检出,24例MRI检查能够清楚显示瘤灶的形态及大小,并对肌层、宫颈或邻近结构的侵犯做出正确分期,过高分期1例,Ⅰb期诊断为Ⅰc期,过低分期2例,Ⅲa期诊断为Ⅰc期,Ⅲc期诊断为Ⅰc期.结论 MRI在子宫内膜癌的诊断和分期中有重要临床价值.

    作者:赵绘萍;赵国库;周宏伟 刊期: 2008年第01期

  • 肾移植受者外周血中共刺激分子CD28与CD40/CD154的表达研究

    目的 检测肾移植受者外周血中共刺激分子CD28与CD40/CD154表达的动态变化情况.方法 对同种异体移植肾患者于术前1、术后1、3、7、14、21和28 d分别取外周血,对AR受体,在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血.对白细胞进行免疫荧光双标记,用流式细胞仪检测各共刺激分子在外周血淋巴细胞中的表达.结果 术后1、3 d内CD28+、CD4+CD28+、CD8+CD28+细胞比率均有显著下降,但术后7 d逐渐恢复至术前水平;AR时表达上升,其中CD28+和CD4+CD28+细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后下降至术前水平.AR时CD40+和CD154+细胞比率显著高于术前水平,抗排斥治疗后恢复至术前水平.结论 外周血淋巴细胞CD28、CD40、CD154在移植后排斥反应时表达上调,提示外周血淋巴细胞共刺激分子的表达在临床肾移植急性排斥反应中起重要作用.

    作者:李辉;石理华;叶启发;明英姿;李瑛 刊期: 2008年第01期

  • 原子力显微镜观察不同Aβ聚集状态的研究

    目的 应用原子力显微镜(AFM)观察比较Aβ25-35、Aβ 42和Aβ 42寡聚体的聚集状态.方法 制备终浓度为50μmol/L的Aβ 42寡聚体、Aβ 42和Aβ 25-35溶液.在云母片上制作各种Aβ样品,用原子力显微镜的轻敲模式观察不同时间、温度条件下的Aβ 42寡聚体状态.比较Aβ 42寡聚体与Aβ25-35和Aβ 42聚集形态的差异.结果 4℃、48h内经HFIP作用的Aβ42以单体、寡聚体形式存在;室温、72h时未经HFIP作用的Aβ42以纤维聚集态存在.Aβ42寡聚体纤维随时间延长而延长,室温条件下更利于纤维聚集.Aβ25-35纤维较Aβ42短.结论 Aβ寡聚体是Aβ存在的一种主要状态.Aβ25-35、Aβ 42相同条件下聚集状态不完全相同.利用原子力显微镜可观察不同Aβ活性片段的聚集情况,AFM是研究Aβ的有效手段.

    作者:王建秀;王德生;段淑荣;赵敬堃;王景贺 刊期: 2008年第01期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心