学术投稿

原子力显微镜观察不同Aβ聚集状态的研究

王建秀;王德生;段淑荣;赵敬堃;王景贺

关键词:原子力显微镜, β-淀粉样蛋白, 寡聚体, Alzheimer病
摘要:目的 应用原子力显微镜(AFM)观察比较Aβ25-35、Aβ 42和Aβ 42寡聚体的聚集状态.方法 制备终浓度为50μmol/L的Aβ 42寡聚体、Aβ 42和Aβ 25-35溶液.在云母片上制作各种Aβ样品,用原子力显微镜的轻敲模式观察不同时间、温度条件下的Aβ 42寡聚体状态.比较Aβ 42寡聚体与Aβ25-35和Aβ 42聚集形态的差异.结果 4℃、48h内经HFIP作用的Aβ42以单体、寡聚体形式存在;室温、72h时未经HFIP作用的Aβ42以纤维聚集态存在.Aβ42寡聚体纤维随时间延长而延长,室温条件下更利于纤维聚集.Aβ25-35纤维较Aβ42短.结论 Aβ寡聚体是Aβ存在的一种主要状态.Aβ25-35、Aβ 42相同条件下聚集状态不完全相同.利用原子力显微镜可观察不同Aβ活性片段的聚集情况,AFM是研究Aβ的有效手段.
中国现代医学杂志相关文献
  • 1007型萨勃心肺复苏机临床应用

    目的 比较萨勃1007型心肺复苏机与传统的人工心肺复苏效果,以评价萨勃机在临床应用的价值.方法 回顾性分析248例使用萨勃机心肺复苏患者和223例采用人工心肺复苏的患者,排除原发病、就诊时间影响因素后比较两种方法 的心肺复苏成功率及存活率,并比较两种方法 并发症发生率.结果 萨勃心肺机复苏成功率、存活率较人工心肺复苏高,P<O.05,前者分别是34%、14%,后者为21%和5%,P<0.05;两者并发症发生率无显著差别,P<0.05.结论 萨勃机是目前理想的一种完全可替代以往人工心肺复苏的新型仪器,值得临床推广使用.

    作者:颜鲲;唐国茂;李亚勇 刊期: 2008年第01期

  • 瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在游离皮瓣移植术中的应用

    目的 评价瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在游离皮瓣移植术中的临床效果及安全性.方法 选择ASA Ⅰ~Ⅱ级需行游离皮瓣移植术病例40例,随机分成R组(瑞芬太尼复合异丙酚组)和F组(芬太尼复合异丙酚组)各20例.入手术室后静脉注射咪唑安定0.05mg/kg诱导后,R组:瑞芬太尼O.25μg/(kg·min)、异丙酚100~200 μg/(kg·min);F组:芬太尼0.25μg/(kg·min)、异丙酚100~200 μg/(kg·min)持续泵入维持麻醉,观察相关指标.结果 2组术中麻醉效果差异无显著性(P>0.05),术后复苏均安静,R组镇痛作用强于F组,R组术后恢复明显比F组快(P<0.01).结论 在游离皮瓣移植术中瑞芬太尼比芬太尼更优越、更安全.

    作者:王白云;吴礼平;候立力;梁娜;罗红菱 刊期: 2008年第01期

  • 灌洗、筋膜蒂皮瓣及外固定架Ⅰ期治疗胫骨感染性不愈合、骨外露

    目的 评价灌洗、筋膜蒂皮瓣及外固定架Ⅰ期治疗胫骨感染性不愈合、骨外露的疗效.方法 对15例胫骨骨折感染性不愈合、骨外露患者,应用病灶内抗生素持续灌洗、骨外露处软组织缺损筋膜蒂皮瓣修复、骨折不愈合外固定架加压固定综合方法 Ⅰ期治疗,对骨感染治疗情况、骨外露软组织缺损修复情况及骨折愈合情况进行评价.结果 15例患者骨折全部愈合,愈合时间3~6 个月,骨外露软组织缺损处筋膜蒂皮瓣全部成活,伤口Ⅰ期愈合13例,Ⅱ期愈合2例,骨感染经1~1.5 年随访无复发.结论 灌洗、筋膜蒂皮瓣及外固定架Ⅰ期综合治疗方法 ,具有兼顾控制感染、消灭软组织缺损创面和促进骨折愈合的优点,是治疗胫骨感染性不愈合、骨外露的有效、可行的方法 .

    作者:姚章喜;范天凤;陈欣志;康少英;田小运;张增芳 刊期: 2008年第01期

  • 克林霉素磷酸酯脂质体的制备

    目的 制备克林霉素磷酸酯脂质体并测定包封率及粒径.方法 采用蒸发超声法制备克林霉素磷酸酯脂质体,高效液相色谱法检测克林霉素磷酸酯包封率,用激光粒度仪测定其平均粒径.结果 运用正交设计方法,优化脂质体的制备工艺和处方为:磷脂:胆固醇为5:1,超声时间为6 min,蒸发温度为35℃,磷脂:克林霉素为5:3,磷脂:海藻糖为2:1.克林霉素磷酸酯在5.0~50 μg/mL范围内线性关系良好.3组克林霉素磷酸酯脂质体包封率分别为52.26%、50.13%和53.75%.结论 克林霉素磷酸酯脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确.

    作者:何剪太;周伟华;张阳德;郭讯枝;曾昭武;李珍发;刘星言;谭斐;赵劲风;潘一峰 刊期: 2008年第01期

  • 保留人体器官和功能是内镜微创外科治疗的高境界——论内镜下保胆取石、摘息肉

    胆囊结石是临床上一种常见病,多发病.其发病率占正常人群中的10%,即每10个人中就有一个胆囊结石病人.按这个比例计算,中国约有1.3亿个胆囊结石患者,并且随着人民生活水平的提高,其发病率还有增高的趋势.

    作者:张阳德 刊期: 2008年第01期

  • 宫内发育迟缓胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK基因的表达变化

    目的 宫内发育迟缓(IUGR)是胰岛素抵抗的独立危险因素,通过检测IUGR胎鼠肝脏糖代谢相关酶的表达,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制.方法 通过孕期蛋白质营养不良法建立大鼠IUGR模型,孕21天时剖宫产,测量胎鼠的体重和肝重,采用RT-PCR和蛋白印迹技术检测胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK的mRNA及蛋白表达的变化.结果 与正常对照相比,IUGR胎鼠肝脏PGC-1的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.01),肝中PEPCK mRNA的表达也明显增高(P<0.01).结论 IUGR胎鼠肝脏PGC-1表达增加诱导了糖异生关键酶PEPCK的表达,促进肝脏糖异生,这是IUGR鼠成年后发生胰岛素抵抗的原因之一.

    作者:刘晓梅;卢岩;李书琴 刊期: 2008年第01期

  • 血小板膜糖蛋白Ibα基因VNTR多态性与冠心病相关性的研究

    目的 探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系.方法 选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测.结果 扩增产物电泳显示,在中国河南汉族人群中,发现VNTR的6种基因型:AC、BC、BD、CC、CD、DD.本研究未发现VNTR各基因型及等位基因与冠心病的发生间存在明显相关性.P值均大于0.05.与其他基因型相比,在CD基因型中,Gensini冠状动脉评分≥40组与评分<40组间的差异具有显著性,P<0.05,OR=2.3(95%可信区间1.2~4.4).结论 血小板膜GPIbα基因巨糖肽区VNTR的CD基因型与冠心病的严重程度有关.

    作者:赵洛沙;张静华;郑红;毋淑珍;杨文;薛国华;杨帆;王培 刊期: 2008年第01期

  • 神经末端脑钠素原对扩张型心肌病慢性心力衰竭心功能评价的作用

    目的 研究N-末端脑钠素原(NT-ProBNP)对扩张型心肌病(dilatedcardiomyopathy,DCM)慢性心力衰竭(心衰)患者心功能的评价作用,并与炎症因子高敏C反应蛋白(hsCRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相比较.方法 入选45例DCM心衰患者,分别用ELISA法检测NT-ProBNP、hsCRP、IL-6、TNF-α浓度,超声心动图测左室射血分数(LVEF),并与正常对照组20例进行比较.心衰患者随访2个月.结果 hsCRP、IL-6、TNF-α在心衰组虽高于正常对照组,但差异无显著性(P>0.05);亚组分析显示hsCRP在心功能Ⅳ级与正常组之间差异有显著性(P<0.05).而LN(NT-ProBNP)在正常组与各心功能分级间差异均有显著性(P均<0.05).NT-ProBNP与心功能分级明显相关(r=0.826),与LVEF呈明显负相关(r=-0.772).事件组LN(NT-ProBNP)、EF明显高于非事件组(P<0.00,P<0.05).结论 NT-ProBNP在定量评价DCM心衰患者心功能时明显优于hsCRP、IL-6、TNF-α,优于或与LVEF相似,可作为临床评价DCM患者心功能及预后的生化指标.

    作者:成永霞;钟国强 刊期: 2008年第01期

  • 不同体积大鼠原位肝移植的试验研究

    目的 探讨三种不同体积(100%、50%和30%)大鼠原位肝移植术后生存时间,肝功能变化等情况.评估移植物体积对于大鼠原位肝移植的影响.方法 建立100%、50%和30%体积的大鼠原位肝移植模型,观察术后生存时间,术后肝功能改变及肝脏组织病理改变.结果 术后14 d生存率分别为:85%、70%和10%.术后肝功能变化表明30%肝移植组术后损伤较重.病理显示50%及30%肝移植组术后肝脏损害严重,30%组尤为明显.结论 移植物的体积对于术后存活率具有明显影响,但外科技术的改进可能提高小移植物受体的术后存活率.

    作者:仲跻巍;李相成;姚爱华;刘现忠;马跃峰 刊期: 2008年第01期

  • 薄层液基细胞学筛查宫颈病变及HPV感染的价值

    目的 对薄层液基细胞学筛查宫颈病变的敏感性进行评价.方法 以组织学及HPVDNA检测结果为金标准,通过对1400例受检病例进行薄层液基细胞学、传统巴氏细胞学检测,评价薄层液基细胞学对宫颈病变的筛查价值.结果 细胞学筛查高度鳞状上皮内病变(HSIL)的敏感性高于筛查低度鳞状上皮内病变(LSIL)的敏感性,但差异无显著性(P>0.05).薄层液基细胞学诊断HSIL的敏感性(96.3%)高于传统巴氏细胞学(72.7%),但两者差异无显著性(P>0.05);薄层液基细胞学诊断LSIL的敏感性(94.2%)高于传统巴氏细胞学(46.7%),两者差异有显著性(P<0.05).HPV感染发生率为11.6%,在各年龄段的差别无统计学意义.薄层液基细胞学的检出率(62.5%)高于传统巴氏细胞学(23.5%),两者差异有显著性(P<0.05).结论 薄层液基细胞学筛查各级宫颈病变及HPV感染相关病变的敏感性高于传统巴氏细胞学.

    作者:宋丽君;魏波;李英勇 刊期: 2008年第01期

  • 显性负突变hTERT在TSA诱导Hela细胞凋亡中的作用

    目的 通过转染显性负突变hTERT探讨其在TSA诱导宫颈癌细胞株Hela凋亡中的作用.方法PCR-TRAP-ELISA法检测转染显性负突变,野生型hTERT和对照质粒以后Hela细胞的端粒酶活性.磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法检测细胞生长率;Annexin V/PI法检测各组转染细胞在TSA作用下的早期凋亡.结果 转染显性负突变hTERT的Hela细胞的端粒酶活性显著低于对照组,2μmol/L TSA作用对照细胞Hela-puro、Hela-DNhTERT和Hela-WThTERT细胞,Hela-DNhTERT相对于Hela-puro生长率差异明显,Hela-DNhTERT细胞凋亡率明显高于Hela-WThTERT和Hela-puro组.结论 转染DNhTERT对TSA诱导的Hela细胞凋亡具有协同作用.

    作者:吴鹏;奚玲;陈刚;卢运萍;周剑锋;马丁 刊期: 2008年第01期

  • 纳米磁靶向药物载体在肝癌治疗中的研究进展

    纳米磁靶向药物载体作为一种新型药物载体,能在特定的导向机制下,将药物高效的运输到靶器官,使药物在局部发挥作用,大大地降低了药物对全身的毒副作用.该文综述了磁性纳米微粒的现状及其在磁性靶向药物传递中作为药物载体在肝癌治疗中的应用研究进展.

    作者:彭健;刘桦;邬力祥 刊期: 2008年第01期

  • 大鼠皮层神经元中磷酸化的细胞周期相关蛋白在发育过程中的表达

    目的 观察正常Wistar大鼠发育过程中皮层神经元的细胞周期相关蛋白及其磷酸化蛋白的表达,探讨发育过程中皮层神经元的细胞周期变化以及磷酸化细胞周期相关蛋白在其中的调控作用.方法 采用免疫荧光方法 观察不同发育时期CyclinD1、CDK2、P27以及磷酸化CDK2、磷酸化CDC2、磷酸化Rb表达的规律.结果 在各年龄组NeuN阳性细胞数量随着年龄增加而逐渐减少.细胞周期相关蛋白(CyclinD1、CDK2、P27)在皮层神经元中广泛表达,各组间差异无显著性;磷酸化CDK2、磷酸化Rb阳性细胞的数量随着年龄增加而逐渐增多,各组间差异有显著性;磷酸化CDC2阳性细胞在各年龄组神经元中均无表达.结论 随着年龄的增长,磷酸化CDK和Rb逐渐增多,使得进入细胞周期的皮层神经元增加.细胞周期相关蛋白的磷酸化调控作用可能与衰老时皮层神经元的凋亡有关.

    作者:解翠红;杜晓萍;朱舟;田代时;陈彬;张强;王伟 刊期: 2008年第01期

  • HBV的宫内传播与人绒毛膜滋养层细胞的HBV感染和凋亡关系的研究

    目的 检测HBV感染后人绒毛膜滋养层细胞的HBV标志物的表达和细胞的形态学变化,探讨HBV对滋养层细胞的感染与HBV宫内传播的关系.方法 将HBV感染的血清与原代培养的人早孕绒毛膜滋养层细胞及传代细胞JEG-3共同孵育8~48 h,通过倒置显微镜观察细胞的形态及细胞间连接,细胞免疫荧光方法 检测滋养层细胞中HBsAg的表达,荧光定量PCR方法 检测细胞中的HBV DNA,TUNEL方法 检测滋养层细胞的凋亡.结果 滋养层细胞与HBV感染的血清共同孵育后,滋养层细胞的形态及细胞间连接无明显变化;但通过免疫荧光方法 检测到滋养层细胞中HBsAg的阳性表达,并通过荧光定量PCR方法 检测到滋养层细胞中HBV DNA的存在;同时,细胞凋亡检测结果表明,与HBV感染的血清共同孵育后,滋养层细胞的凋亡数量明显增加.结论 HBV可以感染体外培养的滋养层细胞;HBV感染可以诱导滋养层细胞凋亡,滋养层细胞的感染和凋亡可能与HBV的宫内传播机制有关.

    作者:白菡;何丽霞;张琳;冯国和;石理兰;窦晓光;赵桂珍 刊期: 2008年第01期

  • 丙酮酸脱氢酶激动剂对糖诱导的内皮细胞功能紊乱的改善作用

    目的 研究丙酮酸脱氢酶激动剂二氯醋酸二异丙胺(DADA)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的功能的影响及可能机制.方法 以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,进行了以下研究:1.DADA对高糖诱导的血管EC功能指标一氧化氮(NO)和可溶性细胞间黏附分子-1 (sICAM-1)的影响;2.用激光共聚焦显微镜及Western blotting杂交分别观察高糖诱导的PKCα、PKC δ的位置变化及蛋白表达量的影响;实验分组:对照组:浓度为5.5 mM;高糖组:浓度为30 mM;DADA(1×10-5 M,1×10-4 M or 1×10-3 M)+高糖组.结果 1.30 mM高糖可诱导EC功能紊乱:高糖可诱导EC功能紊乱:NO浓度降低,sICAM-1水平增加,DADA可抑制高糖诱导的上述变化;高糖可诱导HUVECs的PKCα及PKC δ表达位置转移;PKCδ表达增强,但对PKCα表达影响不明显.结论 DADA可以纠正高糖所致内皮细胞功能紊乱,可能部分是通过PKCα及PKCδ途径来实现的.

    作者:万沁;钟海花;徐勇;何建华;童南伟 刊期: 2008年第01期

  • 重症脑梗死患者血浆D-二聚体测定的临床意义

    目的 探讨血浆D-二聚体水平对血栓形成性脑梗死(CI)患者并发出血性脑梗死(HI)、多脏器功能障碍(MODS)影响的临床意义.方法 应用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法,对66例CI患者及46例正常人血浆D-二聚体定量分析,对66例血浆D-二聚体水平不同程度持续增高CI患者HI、MODS发生率进行分析.结果 CI患者病后第4天及第14天血浆D-二聚体水平明显高于正常人(P<0.01),CI患者急性期、亚急性期血浆D-二聚体水平越高,HI、MODS发生率越高(P<0.01).结论 CI患者急性期、亚急性期血浆D-二聚体水平持续增高,提示高凝状态是CI重要病理生理基础.CI患者急性期、亚急性期血浆D-二聚体水平与HI、MODS发生率呈正相关,提示检测D-二聚体水平,可为临床评估重症CI患者的病情、疗效及预后提供有价值依据.

    作者:詹海涛;黄峰;陈钢 刊期: 2008年第01期

  • 儿科学课程见习教学方式的探讨

    医学教学中临床见习是非常重要的教学方式,通过对儿科见习教学方式进行了一系列改革,收到很好效果.本文通过对教学改革的方式进行探讨,寻找更适合现代医学教育的教学方式.教学改革的内容包括教学内容的优化、调整和教学方式的多元化.通过改革,培养学生的临床思维,提高学生实际工作能力及科研能力.

    作者:刘晓艳;张建江;胡劲涛;王成;王秀英;张星星 刊期: 2008年第01期

  • 小鼠日本血吸虫病肝纤维化肝脏CTGF的表达及意义

    目的 研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏中的表达状况及意义.方法 用昆明小鼠感染尾蚴复制小鼠日本血吸虫病肝纤维化模型;RT-PCR和免疫组化分别检测小鼠肝脏CTGFmRNA和蛋白的表达,免疫组化方法 观察各阶段肝脏α-SMA阳性细胞的表达.结果 模型组10周时形成典型的肝纤维化,此时模型组小鼠肝脏CTGFmRNA和蛋白表达、α-SMA+细胞数达高峰,10周、14用、18用时与治疗组相比均有明显的统计学差异(P均>0.05);CTGFmRNA和蛋白表达水平与α-SMA+细胞数均呈直线相关性.结论 CTGF基因和蛋白表达增高与小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成有密切关系;CTGF在小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成过程中的作用可能主要通过作用于活化的肝星状细胞来实现的.

    作者:余治健;向选东;蔡胜蓝;谭德明;李萍 刊期: 2008年第01期

  • 脂质体介导的bFGF-EGFP基因在前庭上皮支持细胞中的表达及生物学作用

    目的 探讨脂质体介导的bFGF基因在前庭上皮支持细胞中的表达情况及生物学作用.方法 利用脂质体将携带绿色荧光蛋白的bFGF基因质粒导入前庭上皮细胞内,利用绿色荧光蛋白的表达以及RT-PCR技术检测基因的表达,并利用免疫组织化学等形态学技术手段观察其生物学作用.结果 脂质体介导的bFGF基因在细胞内表达良好,转染成功的细胞形态发生明显变化,但MvosinⅦa表达阴性.结论 脂质体介导的bFGF基因可以在前庭上皮细胞内获得良好表达,并促使细胞形态向毛细胞转化.

    作者:郑贵亮;高宇红;郭维;翟所强 刊期: 2008年第01期

  • 原子力显微镜观察不同Aβ聚集状态的研究

    目的 应用原子力显微镜(AFM)观察比较Aβ25-35、Aβ 42和Aβ 42寡聚体的聚集状态.方法 制备终浓度为50μmol/L的Aβ 42寡聚体、Aβ 42和Aβ 25-35溶液.在云母片上制作各种Aβ样品,用原子力显微镜的轻敲模式观察不同时间、温度条件下的Aβ 42寡聚体状态.比较Aβ 42寡聚体与Aβ25-35和Aβ 42聚集形态的差异.结果 4℃、48h内经HFIP作用的Aβ42以单体、寡聚体形式存在;室温、72h时未经HFIP作用的Aβ42以纤维聚集态存在.Aβ42寡聚体纤维随时间延长而延长,室温条件下更利于纤维聚集.Aβ25-35纤维较Aβ42短.结论 Aβ寡聚体是Aβ存在的一种主要状态.Aβ25-35、Aβ 42相同条件下聚集状态不完全相同.利用原子力显微镜可观察不同Aβ活性片段的聚集情况,AFM是研究Aβ的有效手段.

    作者:王建秀;王德生;段淑荣;赵敬堃;王景贺 刊期: 2008年第01期

中国现代医学杂志

中国现代医学杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心