学术投稿

双抗体夹心ELISA定量检测血清Cap43蛋白方法的建立与评价

张志强;何萍;隋承光;孟凡东;姜又红

关键词:Cap43蛋白, 肺癌, 双抗体夹心ELISA, 定量, 血清学检查
摘要:目的 建立定量检测血清Cap43蛋白表达双抗体夹心ELISA法,并初步探讨血清Cap43蛋白表达水平在肺癌患者与正常人群间有无差异,以及该蛋白表达水平的高低与肺癌组织学分型间的关系.方法 建立双抗体夹心ELISA方法对肺癌患者与正常人群血清中Cap43蛋白的含量进行定量检测.结果 双抗夹心ELISA包被Ⅰ抗羊抗人NDRG1多克隆抗体(PcAb)、Ⅰ抗兔抗人Cap43 PcAb以及辣根酶(HRP)标记的羊抗兔Ⅱ抗的佳工作浓度分别为1∶750,1∶1200,1∶350,标准蛋白曲线的回归方程为:y=0.53566+0.00046x,R2=0.9939,P<0.0001.应用该方法初步检测结果显示:肺癌组血清标本Cap43蛋白含量明显高于正常对照组(P<O.01),且肺腺癌组病人血清Cap43含量高于肺鳞癌组(P<0.01).该方法的敏感度(SE)为84.51%,特异度(SP)为35.00%.结论 建立了一种敏感度高,重复性好的定量检测血清中Cap43蛋白的双抗体夹心ELISA方法;Cap43蛋白在肺癌患者血清中呈现高表达,且在肺腺癌组病人血清中表达水平高于肺鳞癌组.
中国现代医学杂志相关文献
  • 膳食因素与4种不同类型尿结石关系的对照研究

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    作者:曹秋生;曹欣;胡燕霞;黄士杰;黄存嫦;胡永轩 刊期: 2007年第13期

  • AG490对混合淋巴细胞培养中人淋巴细胞增殖及分化的影响

    目的 探讨AG490对混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture,MLC)中人淋巴细胞增殖和分化的影响.方法 应用MLC法诱导人淋巴细胞产生增殖,观察在不同干预剂(AG490、CsA、FK 506)作用下人淋巴细胞增殖的抑制率及淋巴细胞亚群分化的变化.结果 AG490在体外实验中,对人淋巴细胞(T、B混合存在)增殖反应均有明显的抑制作用.尤其是对CD3细胞及CD4细胞其抑制作用更为明显.结论 AG 490可能是一种潜在的免疫抑制剂,具有较大的研究和应用前景.

    作者:王彬;冯新顺;薛武军 刊期: 2007年第13期

  • 凝血酶对血脑屏障通透性的影响及细胞凋亡机制的研究

    目的 探讨凝血酶(thrombin,TM)对血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性的影响和细胞凋亡(Apoptosis)的可能机制.方法 108只SD大鼠随机分为A、B、C 3组,分别向大鼠右侧基底节区注入凝血酶、凝血酶加组织蛋白酶G(Cathepsin G,CATG)、生理盐水,于注射后6、24、48和72 h取脑组织,测定BBB通透性(Evans-blue法)、脑水含量(干湿重法)以及Caspase-3蛋白表达(Western-blot).结果 TM脑内注射后6 h同侧基底节区BBB通透性明显增加(P<0.05),24 h时达高峰(P<0.01),持续至48 h(P<0.05),然后逐渐消退;脑水含量的变化规律与BBB通透性的变化类似.TM脑内注射后6 h Caspase-3蛋白开始增加(P<0.01),24 h达高峰(P<0.01),然后逐渐下降.TM+CATG组在各个时间点BBB通透性、脑水含量和Caspase-3蛋白表达与对照组比较均无明显差异(P>0.05).结论 TM增加BBB通透性是其诱发脑水肿形成的主要机制.TM对BBB通透性的影响可能是通过激活蛋白酶激活受体-1(protease activated receptor-1,PAR-1)实现的;凝血酶可能通过激活PAR-1受体诱导凋亡.

    作者:陈志斌;关景霞;袁昆雄;蔡美华;曹学兵;苏庆杰;王埮 刊期: 2007年第13期

  • 氯酯醒治疗血管性痴呆的有效性和安全性研究

    目的 评价氯酯醒胶囊治疗血管性痴呆的有效性及安全性.方法 选择56例血管性痴呆患者,用氯酯醒进行12周的治疗(0.2Tid),治疗前后用简易精神状态量表(MMSE)、临床痴呆量表(CDR)及日常生活自理量表(ADL)评分,判定疗效.结果 氯酯醒治疗12周后与治疗前相比,MMSE、CDR及ADL分数分别改善4.69、0.82和4.71分,差异具有显著性意义.在用药初期3例出现血压轻度升高,2例出现头晕、头痛,1例出现胃部不适、恶心,2例出现兴奋或失眠等症状.结论 氯酯醒能有效治疗血管性痴呆患者,对患者的认知功能、痴呆程度和日常生活自理能力均有改善,且安全性较好.

    作者:付剑亮;孙晓江;赵玉武;黄流清;邵福源 刊期: 2007年第13期

  • 正交试验法优选HepG2细胞佳培养条件

    目的 优选HepG2细胞佳培养条件.方法 分别以培养基、细胞接种密度、血清含量、双抗浓度、pH、Hanks清洗次数、胰酶浓度和消化时间为量化指标设计正交试验,SPSS11.0统计软件分析,得方差分析及多重比较结果.结果 含15%胎牛血清的DMEM培养基,接种密度为4×104个/mL,双抗浓度为0.5%,pH为7.2;在汇合度达95~100%时,Hanks洗3次,0.05%胰酶-EDTA-Na2H2O消化1 min,传代效果好,条件易于控制,且细胞能顺利生长.结论 本法为HepG2细胞佳培养条件的确定提供了可靠的实验数据.

    作者:王爽;梁伟伶;刘斯斯;尹继云;徐馨;秦学功 刊期: 2007年第13期

  • 妇科恶性肿瘤介入治疗致膀胱输尿管损伤探讨

    目的 探讨妇科恶性肿瘤介入治疗致膀胱输尿管损伤坏死的原因、诊断和防治方法.方法 回顾性分析89例妇科恶性肿瘤患者,采用Seldimger's穿刺技术,用顺铂或卡铂、表阿霉素、平阳霉素经髂内动脉前干或子宫动脉灌注化疗的临床资料.结果 89例介入治疗后有11例出现膀胱输尿管不同程度的损伤坏死,其中8例在广泛全宫切十盆腔淋巴结清扫术同期作相应手术治愈,1例再发输尿管漏尿;1例置J型导管后转外院;1例服中药后自愈.结论 熟悉影像学表现,熟练导管操作技术,选用适当的导管和栓塞材料,超选靶器官的供血动脉,是预防膀胱输尿管损伤的关键.一旦出现此类并发症,可在3、4周内与泌尿外科医师同期手术,可获得补救措施.

    作者:李化升;徐旭军;罗常华;刘翠;郑业辉;侯琼梅;谢学胡 刊期: 2007年第13期

  • 单层缝合的临床可行性实验研究

    目的 评估单层缝合在胃肠道吻合中的可行性及安全性.方法 将24只新西兰大白兔按照年龄、性别、体重随机平均分成A、B两组.其中A组行单层间断缝合,B组行双层缝合(胃肠的端端吻合),并于术后2、4、7d作吻合口的内径,压力测试实验及光镜、电镜、免疫组化切片观察新生肉芽组织的生成情况.结果 A、B两组之间的吻合口漏与狭窄的发生率无统计学意义;而两组之间的吻合口的耐压、壁厚、内径均有显著的统计学差异(P<0.05).两种吻合术均无吻合口大出血.结论 单层缝合与双层缝合的安全性的差别无统计学意义,但是单层缝合组的肉芽组织生成早,愈合快,并且节约了手术时间及手术费用,故为一种安全、可靠的缝合方法.

    作者:罗强;陈勇军;俞亚红;周松;陈坤;丁志强 刊期: 2007年第13期

  • 几丁糖预防术后肠粘连的临床对照观察

    目的 观察医用几丁糖预防术后肠粘连的效果.方法 2004年9月~2006年2月共143例病人行剖腹手术,随机分成试验组和对照组,试验组(72例)应用医用几丁糖预防术后肠粘连,对照组(71例)术后直接关腹.结果 试验组经过至少6个月的随访无1例发生肠粘连,对照组出现10例肠粘连症状,3例严重者出现粘连性肠梗阻.结论 医用几丁糖是一种较理想的预防术后肠粘连的生物材料.

    作者:陈建安;张阳德;张金成;汤治平;丁纪伟;梁志宏 刊期: 2007年第13期

  • 乳腺癌中血管内皮生长因子-C的表达与淋巴结转移的关系

    目的 研究人乳腺癌组织中淋巴管内皮细胞生长因子-C的表达及临床意义.方法 应用免疫组化PV 9000二步法检测50例乳腺癌组织VEGF-C的表达.结果 50例患者中VEGF-C染色阳性33例,阳性率66%,阳性物质主要位于乳腺癌细胞胞浆内.乳腺癌组织中VEGF-C的表达与乳腺癌的淋巴结转移有关,有淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF-C阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织,但与乳腺癌组织病理学分型、肿瘤大小和临床分期无关.结论 VEGF-C表达与乳腺癌淋巴转移有关,可作为提示临床预后较差的指标.

    作者:张艳君;李荣;刘梅;钟梅 刊期: 2007年第13期

  • 瘦素mRNA和瘦素受体mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系

    目的 检测瘦素mRNA和瘦素受体mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺癌组织中的表达情况,并探讨二者之间及其与临床病理之间的关系.方法 采用逆转录多聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测48例乳腺癌合并肥胖症和36例乳腺良性病变合并肥胖症患者乳腺组织中瘦素mRNA和瘦素受体mRNA的表达,分析二者之间及其与临床病理之间的关系.结果 瘦素mRNA、瘦素长型受体[Leptin receptor long form,Lep-R(L)]mRNA及瘦素短型受体[Leptin receptor short form,LeP-R(S)]mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺组织中的表达水平分别为:(0.71±0.32)、(0.64±0.29)和(0.57±0.21),明显高于乳腺良性病变合并肥胖症患者[(0.41±0.26)、(0.34±0.19)和(0.30±0.17)],(P<0.05).乳腺组织中瘦素mRNA的表达水平与Lep-R(L)及Lep-R(S)mRNA水平呈显著正相关分别为:(r=0.4030,P=0.0002;r=0.3502,P=0.0014).瘦素mRNA和瘦素受体mRNA的表达与腋窝淋巴结转移、绝经、TNM分期及病理类型均无显著相关性.结论 瘦素可能以自分泌的方式参与了乳腺癌的发生.

    作者:李春蕊;刘文励;孙汉英;周剑峰 刊期: 2007年第13期

  • 大黄丹参对重症急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-10影响的临床研究

    目的 观察大黄、丹参对重症急性胰腺炎(SAP)时血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)的影响及其对SAP的治疗作用及机制.方法 将43例SAP患者随机分为治疗组和对照组,治疗组在西医综合治疗基础上加用大黄及丹参注射液,对照组仅采用西医综合治疗.检测治疗前及治疗后10 d两组血清TNF-α、IL-10水平,并评价两组的治疗有效率;白细胞、血淀粉酶恢复时间;腹痛缓解时间及平均住院时间.结果 治疗后治疗组白细胞、血淀粉酶恢复正常时间,腹痛缓解时间及平均住院时间较对照组明显缩短(P<0.01).两组TNF-α水平较治疗前明显下降(P<0.01);IL-10水平较治疗前明显增高(P<0.01),而治疗组较对照组变化更明显(P<0.01).结论 大黄、丹参能抑制TNF-α分泌,上调IL-10水平,对SAP具有良好的治疗作用.

    作者:郭莲怡;卢艳云 刊期: 2007年第13期

  • 法洛氏四联症一期根治术后早期急性肺损伤相关危险因素分析

    目的 分析法洛氏四联症(TOF)一期根治术后并发早期急性肺损伤(ALI)的危险因素,探讨预防的相关措施.方法 分析147例法洛氏四联症Ⅰ期根治术围手术期的相关情况.其中,男63例,女84例.术后ALI包括灌注肺、严重低氧血症、肺不张或液气胸等.利用单因素分析及Logistic逐步回归统计分析ALI发生的相关危险因素.结果 紫绀发病年龄<3.2个月,Nakata指数<140 mm2/m2,AO/PA比值>2.6,跨瓣环补片,体外循环时间>107 min,主动脉阻断时间>81 min以及术后呼吸机辅助呼吸时间<11h等因素与术后ALI发生有关.结论 Nakata指数<140mm2/m2、体外循环时间>107 min、主动脉阻断时间>81 min是TOF术后早期肺损伤发生的危险因素.

    作者:徐盛松;葛建军;周汝元;林敏;葛圣林;高晴云 刊期: 2007年第13期

  • IL-13对肾小球系膜细胞的IL-12表达的影响

    目的 探讨白细胞介素13(IL-13)对肾小球系膜细胞分泌白细胞介素12(IL-12)的调节作用.方法 用酶联免疫吸附(ELISA)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测系膜细胞的IL-12蛋白水平和IL-12p40 mRNA的表达.结果 未受刺激的系膜细胞无IL-12 mRNA的表达及其蛋白分泌.LPS诱导系膜细胞的IL-12p40 mRNA的表达及其蛋白分泌.IL-13在1~100 ng/ml的浓度范围内呈剂量依赖性抑制LPS诱导的系膜细胞的IL-12分泌及其mRNA的表达.结论 LPS诱导系膜细胞分泌IL-12,而IL-13则抑制LPS诱导的系膜细胞IL-12的表达;IL-13可能通过抑制IL-12的产生,调整了体内Th1/Th2细胞因子的平衡,作为抗炎性细胞因子在肾小球肾炎发病机制中发挥一定的作用.

    作者:吴瑗;江黎明;陈孝文 刊期: 2007年第13期

  • 肺隔离症7例诊治体会

    目的 探讨7例肺隔离症的诊断和治疗.方法 对1992年11月~2006年4月7例肺隔离症患者的诊断和治疗进行分析.结果 全部治愈出院,无并发症.结论 肺隔离症是先天性肺发育畸形,要注意鉴别诊断,手术时应妥善处理异常血管.

    作者:古卫权;杨劼;叶国麟 刊期: 2007年第13期

  • 肺部肉芽肿性炎症的PET/CT特点

    目的 本文就肺部肉芽肿性炎症的PET/CT特点进行分析.方法 2002~2006年我院共10例肺部肉芽肿性炎症患者行PET/CT检查,分析病灶大小与FDG摄取的关系.结果 10例患者18个病灶:结核性肉芽肿7例(11个病灶),肺隐球菌病2例(6个病灶),炎性假瘤1例(1个病灶).病灶大小0.8~7 cm,SUVave值范围从1.8~14.1,平均值5.09,中位数5.50,其中SUVave<2.5的3个,5.5>SUVave≥2.5的6个,SUVave≥5.5的9个.≤2 cm的病灶7个,其SUVave、SUVmax、延迟SUVave、延迟SUVmax值分别为(4.09±1.41)、(5.34±2.22)、(4.31±2.18)、(5.91±3.41);>2cm的病灶11个,其SUVave、SUVmax、延迟SUVave、延迟SUVmax值分别为(5.74±3.55)、(7.24±4.32)、(4.67±2.61)、(6.77±4.04).两组病灶在SUVave、SUVmax、延迟SUVave和延迟SUVmax4项指标之间差异无显著性(P>0.05).在≤2cm的7个病灶中,延迟显相的SUV值稍增加,但与早期显相的SUV值差异无显著性(P>0.05).在>2 cm的11个病灶中,延迟显相的SUV值稍减低,与早期显相的SUV值亦差异无显著性(P>0.05).结论 肺部肉芽肿性炎症的PEF/CT容易产生假阳性结果,诊断时应仔细鉴别,延迟显相或其他造影剂联合应用可能有助于提高诊断的准确性.

    作者:李军;郑智;潘铁成;汤应雄;陈涛;刘立刚;贾清 刊期: 2007年第13期

  • 吗啡复合罗哌卡因硬膜外腔术后镇痛对高血压病患者应激反应的影响

    目的 探讨吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛对高血压病患者内皮素(ET),肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的影响.方法 40例拟行腹式全子宫切除术的高血压病患者随机分为两组:A组为对照组,术后根据需要间断肌注哌替啶镇痛;B组术后行吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛(PCEA).采用放免法测定术前、术毕3 h、术后24 h及术后48 h血浆ET、肾素活性(PRA)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度;监测心率、血压及VAS评分.结果 B组术毕3h、术后24h及48h血浆ET值显著低于A组(P<0.01),而且B组术毕3h及术后24 h血浆PRA,AngⅡ值低于A组,B组术后收缩压(SBP)及VAS评分显著低于A组同期值(P<0.01).结论 吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛,能有效减轻病人疼痛,抑制高血压患者ET、PRA和Ang Ⅱ释放和应激反应,维持血流动力学稳定.

    作者:李雅兰;胡冬华;彭雪梅;王小平;周长忍;蔡明雪;陈雷;邹鹏 刊期: 2007年第13期

  • 纳米金标记法在HIV检测中的应用

    目的 制备金纳米颗粒人类获得性免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)基因探针,研究其在检测HIV中的应用.方法 采用枸橼酸还原金氯酸法制备Au纳米颗粒.Au纳米颗粒通过Au-S共价键与烷烃硫醇修饰的寡核苷酸结合制备检测探针.检测探针通过与靶序列在液相中杂交,形成Au纳米颗粒聚集体,采用电镜观察结果.结果 制备的Au纳米颗粒粒径为(12±5)nm,分散良好,在520nm有大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,大吸收峰改变为524 nm.液相杂交后采用电镜观察可检测低至1 fmol/L的合成靶序列.结论 Au纳米颗粒HIV cDNA基因探针,通过液相杂交技术检测HIV cDNA,可以缩短检测窗口期,做到早期诊断和预防.

    作者:张平;习东;宁琴;罗小平 刊期: 2007年第13期

  • 一种中医脉象研究的仿真方法

    提出脉搏波形成的场论思想,建立血液循环系统的仿电路研究模型,论证中医脉诊的现代科学方法和客观化描述的5项指标,并以桡、尺动脉为例研究中医脉诊的物理意义和生理意义,对中医基础理论的计算机仿真和建模方法进行了有益的尝试和探索.

    作者:徐学军;陈志刚;李安琪 刊期: 2007年第13期

  • 川芎嗪治疗新生儿缺血缺氧性脑病疗效观察以及机制研究

    目的 川芎嗪治疗新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)的疗效观察以及机制研究.方法 40名HIE患儿随机分为治疗组(n=20)和对照组(n=20),两组均给以一般治疗的同时治疗组以于川芎嗪治疗.两组治疗前后分别测定血浆神经元特异性烯醇化酶(NSE)、红细胞总钙量(EryCaT)、脑型肌酸激酶(CK-BB)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和超氧化物歧化酶(SOD),并观察临床疗效.同时与20例正常新生儿作健康对照组.结果 治疗组治疗后NSE、EryCaT、CK-BB、MDA和NO水平均较治疗前明显下降,而SOD则明显升高(均P<0.01).对照组治疗后,除EryCaT明显降低外,其余指标无明显变化.治疗后,治疗组NSE、EryCaT、CK-BB、MDA和NO水平均较对照组明显降低(P<0.01或P<0.05),而SOD则较对照组明显升高(P<0.01).治疗组HIE治疗总有效率明显高于对照组(P<0.01).结论 川芎嗪对HIE新生儿脑组织有保护作用,机制可能和抑制钙超载和清除自由基有关.

    作者:郭小芳;张丽范;黄胜起 刊期: 2007年第13期

  • 细菌伴侣蛋白Skp引起白细胞趋化运动的体内实验研究

    目的 细菌伴侣蛋白(Seventeen-Kilodalton protein,Skp)可以作用于C5a受体引起白细胞的趋化作用.该研究的目的Skp在生物体内和体外实验一样可以引起白细胞的趋化运动,且是细菌提取掖中主要的白细胞趋化因子.方法 制备Skp的特异性抗体,进行免疫吸收实验,进而豚鼠体内实验,观察组织标本.结果 E.Coli提取液中主要的白细胞趋化活性来自于Skp.Skp提纯物注射后可在豚鼠皮内发生单核细胞和PMNs的大量浸润.结论 细菌体内的Skp可能与在细菌壁发生补体系统激活产生的C5a共同引起白细胞的趋化反应.对于革兰氏阴性病原菌的先天性免疫具有重要意义.

    作者:施磊;冯影 刊期: 2007年第13期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心