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正交试验法优选HepG2细胞佳培养条件

王爽;梁伟伶;刘斯斯;尹继云;徐馨;秦学功

关键词:HepG2, 细胞培养, 条件, 正交试验
摘要:目的 优选HepG2细胞佳培养条件.方法 分别以培养基、细胞接种密度、血清含量、双抗浓度、pH、Hanks清洗次数、胰酶浓度和消化时间为量化指标设计正交试验,SPSS11.0统计软件分析,得方差分析及多重比较结果.结果 含15%胎牛血清的DMEM培养基,接种密度为4×104个/mL,双抗浓度为0.5%,pH为7.2;在汇合度达95~100%时,Hanks洗3次,0.05%胰酶-EDTA-Na2H2O消化1 min,传代效果好,条件易于控制,且细胞能顺利生长.结论 本法为HepG2细胞佳培养条件的确定提供了可靠的实验数据.
中国现代医学杂志相关文献
  • 肺部肉芽肿性炎症的PET/CT特点

    目的 本文就肺部肉芽肿性炎症的PET/CT特点进行分析.方法 2002~2006年我院共10例肺部肉芽肿性炎症患者行PET/CT检查,分析病灶大小与FDG摄取的关系.结果 10例患者18个病灶:结核性肉芽肿7例(11个病灶),肺隐球菌病2例(6个病灶),炎性假瘤1例(1个病灶).病灶大小0.8~7 cm,SUVave值范围从1.8~14.1,平均值5.09,中位数5.50,其中SUVave<2.5的3个,5.5>SUVave≥2.5的6个,SUVave≥5.5的9个.≤2 cm的病灶7个,其SUVave、SUVmax、延迟SUVave、延迟SUVmax值分别为(4.09±1.41)、(5.34±2.22)、(4.31±2.18)、(5.91±3.41);>2cm的病灶11个,其SUVave、SUVmax、延迟SUVave、延迟SUVmax值分别为(5.74±3.55)、(7.24±4.32)、(4.67±2.61)、(6.77±4.04).两组病灶在SUVave、SUVmax、延迟SUVave和延迟SUVmax4项指标之间差异无显著性(P>0.05).在≤2cm的7个病灶中,延迟显相的SUV值稍增加,但与早期显相的SUV值差异无显著性(P>0.05).在>2 cm的11个病灶中,延迟显相的SUV值稍减低,与早期显相的SUV值亦差异无显著性(P>0.05).结论 肺部肉芽肿性炎症的PEF/CT容易产生假阳性结果,诊断时应仔细鉴别,延迟显相或其他造影剂联合应用可能有助于提高诊断的准确性.

    作者:李军;郑智;潘铁成;汤应雄;陈涛;刘立刚;贾清 刊期: 2007年第13期

  • 交变磁场介导下半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对兔VX2肝癌的影响研究

    目的 探讨半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对兔VX2肝癌的磁介导热疗作用.方法 将成模后的荷瘤白兔随机分成6组:A组,对照组,即生理盐水组;B组,游离阿霉素组;C组,半乳糖磁性阿霉素纳米粒组;D组,Fe3O4纳米粒组;E组,阿霉素磁性纳米粒组;F组,半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒组化白蛋白.各组经肝动脉插管灌注药物(按2 mg/kg阿霉素计算),除C组外,其它各组置交变磁场中作用30min,期间监测癌中心区、癌边缘区、正常肝组织和直肠的温度变化;观察治疗后14d的肝癌体积、肝癌的生长率、肝癌及正常肝组织的病理改变.结果 D、E、F组癌中心区和边缘区温度显著高于正常肝组织和直肠(P<0.001);A、B、C组各部位的温度无明显升高.治疗后14d,F组肿瘤体积明显缩小,肿瘤生长率为-15%;肝癌细胞可见大面积坏死,平均在70%以上,癌灶及癌边缘可见栓塞的铁磁微粒,而右肝未见铁磁微粒的沉积;其它各组体积增大3.5~13倍,肿瘤生长率显著增加(127%~568%),肝癌细胞中至轻度坏死(0%~70%).结论 交变磁场下,A、B、C组癌组织升温达到42℃以上;半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对肝癌组织有独特的靶向作用,表现出明显的热化疗协同增效的治疗效果.

    作者:贺莲香;张阳德;何剪太;李年丰 刊期: 2007年第13期

  • 吗啡复合罗哌卡因硬膜外腔术后镇痛对高血压病患者应激反应的影响

    目的 探讨吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛对高血压病患者内皮素(ET),肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的影响.方法 40例拟行腹式全子宫切除术的高血压病患者随机分为两组:A组为对照组,术后根据需要间断肌注哌替啶镇痛;B组术后行吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛(PCEA).采用放免法测定术前、术毕3 h、术后24 h及术后48 h血浆ET、肾素活性(PRA)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度;监测心率、血压及VAS评分.结果 B组术毕3h、术后24h及48h血浆ET值显著低于A组(P<0.01),而且B组术毕3h及术后24 h血浆PRA,AngⅡ值低于A组,B组术后收缩压(SBP)及VAS评分显著低于A组同期值(P<0.01).结论 吗啡复合罗哌卡因硬膜外自控术后镇痛,能有效减轻病人疼痛,抑制高血压患者ET、PRA和Ang Ⅱ释放和应激反应,维持血流动力学稳定.

    作者:李雅兰;胡冬华;彭雪梅;王小平;周长忍;蔡明雪;陈雷;邹鹏 刊期: 2007年第13期

  • 川芎嗪治疗新生儿缺血缺氧性脑病疗效观察以及机制研究

    目的 川芎嗪治疗新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)的疗效观察以及机制研究.方法 40名HIE患儿随机分为治疗组(n=20)和对照组(n=20),两组均给以一般治疗的同时治疗组以于川芎嗪治疗.两组治疗前后分别测定血浆神经元特异性烯醇化酶(NSE)、红细胞总钙量(EryCaT)、脑型肌酸激酶(CK-BB)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和超氧化物歧化酶(SOD),并观察临床疗效.同时与20例正常新生儿作健康对照组.结果 治疗组治疗后NSE、EryCaT、CK-BB、MDA和NO水平均较治疗前明显下降,而SOD则明显升高(均P<0.01).对照组治疗后,除EryCaT明显降低外,其余指标无明显变化.治疗后,治疗组NSE、EryCaT、CK-BB、MDA和NO水平均较对照组明显降低(P<0.01或P<0.05),而SOD则较对照组明显升高(P<0.01).治疗组HIE治疗总有效率明显高于对照组(P<0.01).结论 川芎嗪对HIE新生儿脑组织有保护作用,机制可能和抑制钙超载和清除自由基有关.

    作者:郭小芳;张丽范;黄胜起 刊期: 2007年第13期

  • 几丁糖预防术后肠粘连的临床对照观察

    目的 观察医用几丁糖预防术后肠粘连的效果.方法 2004年9月~2006年2月共143例病人行剖腹手术,随机分成试验组和对照组,试验组(72例)应用医用几丁糖预防术后肠粘连,对照组(71例)术后直接关腹.结果 试验组经过至少6个月的随访无1例发生肠粘连,对照组出现10例肠粘连症状,3例严重者出现粘连性肠梗阻.结论 医用几丁糖是一种较理想的预防术后肠粘连的生物材料.

    作者:陈建安;张阳德;张金成;汤治平;丁纪伟;梁志宏 刊期: 2007年第13期

  • 妇科恶性肿瘤介入治疗致膀胱输尿管损伤探讨

    目的 探讨妇科恶性肿瘤介入治疗致膀胱输尿管损伤坏死的原因、诊断和防治方法.方法 回顾性分析89例妇科恶性肿瘤患者,采用Seldimger's穿刺技术,用顺铂或卡铂、表阿霉素、平阳霉素经髂内动脉前干或子宫动脉灌注化疗的临床资料.结果 89例介入治疗后有11例出现膀胱输尿管不同程度的损伤坏死,其中8例在广泛全宫切十盆腔淋巴结清扫术同期作相应手术治愈,1例再发输尿管漏尿;1例置J型导管后转外院;1例服中药后自愈.结论 熟悉影像学表现,熟练导管操作技术,选用适当的导管和栓塞材料,超选靶器官的供血动脉,是预防膀胱输尿管损伤的关键.一旦出现此类并发症,可在3、4周内与泌尿外科医师同期手术,可获得补救措施.

    作者:李化升;徐旭军;罗常华;刘翠;郑业辉;侯琼梅;谢学胡 刊期: 2007年第13期

  • 来氟米特抑制结缔组织生长因子诱导的肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的研究

    目的 探讨来氟米特(LEF)对人肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的影响.方法 在体外培养的人肾间质成纤维细胞中,加入不同浓度来氟米特活性代谢产物A771726和重组人结缔组织生长因子(rhCT-GF),MTT法测定两者单独及同时干预下细胞增殖情况;ELISA法测定细胞合成Ⅰ、Ⅳ型胶原的含量.结果 经不同浓度的rhCTGF刺激,成纤维细胞增殖和细胞合呈Ⅰ型、Ⅳ型胶原均成剂量依赖性增加(P<0.01);而来氟米特作用细胞后,细胞增殖及胶原合成均呈剂量依赖性减少(P<0.01);在来氟米特与结缔组织生长因子(CTGF)共同作用下,细胞的增殖和胶原的合成较单用同剂量的CTGF时减少(P<0.05).结论 rhCTGF能够促进人肾间质成纤维细胞的增殖及Ⅰ、Ⅳ型胶原合成;来氟米特则抑制细胞的增殖及细胞合成Ⅰ、Ⅳ型胶原;来氟米特对rhCTGF诱导的胶原合成增加有一定的拮抗作用.

    作者:王玉柱;周春华 刊期: 2007年第13期

  • 应用基因芯片技术检测耐利福平结核分枝杆菌基因型

    目的 研制一种新型DNA芯片,用于快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变.方法 根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计探针并制作DNA芯片,用TAMRA标记的引物扩增结核分枝杆菌rpoB基因突变热点的片断,与DNA芯片杂交,同时以PCR-SSCP和DNA测序法为对照.结果 240株结核分枝杆菌临床分离株中,55株全敏感株和66株耐其他药物的利福平敏感株的PCR-SSCP和DNA芯片杂交结果与结核分枝杆菌标准株完全相同;119株耐RFP临床分离株中DNA芯片杂交有117株检测到rpoB基因突变,其中111株单位点突变,78株为531位密码子TCG→TTG(Ser→Leu)、TCG→TGG(Ser→Trp)和TCG→TAC(Ser→Tyr)突变;24株为526位密码子CAC→TAC(His→Tyr)、CAC→GAC(His→Asp)、CAC→CCC(His→Pro)、CAC→CTC(His→Leu)和CAC→CGC(His→Arg)突变;4株为516位密码子GAC→GTC(Asp→Val)和GAC→GGC(Asp→Gly)突变;3株为533位密码子CTG→CCG(Leu→Pro)突变;1株为511位密码子CTG→CCG(Leu→Pro)突变;1株为513位密码子CAA→AAA(Gln→Lys)突变;6株为双位点突变,其中3株511和516位联合突变,2株533和515位联合突变,1株517位密码子CAG→CAC(Gln→His)和518位密码子AAC→GAC(Asn→Asp)联合突变.DNA测序结果与DNA芯片杂交结果完全一致.1株516位GAC-TAC(Asp→Tyr)突变的分离株及1株516位GAC-TAC(Asp→Tyr)和518位AAC-CAC(Asn→His)联合突变的分离株DNA芯片检测阴性,是因为芯片上无相应的探针.结论 用DNA芯片可快速、特异地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变,可用于临床耐药性的检测,指导临床用药.

    作者:张俊仙;吴雪琼;邢婉丽;张琼;梁建琴;张洪恩;陆阳;张广宇;李洪敏;阳幼荣 刊期: 2007年第13期

  • 一种中医脉象研究的仿真方法

    提出脉搏波形成的场论思想,建立血液循环系统的仿电路研究模型,论证中医脉诊的现代科学方法和客观化描述的5项指标,并以桡、尺动脉为例研究中医脉诊的物理意义和生理意义,对中医基础理论的计算机仿真和建模方法进行了有益的尝试和探索.

    作者:徐学军;陈志刚;李安琪 刊期: 2007年第13期

  • 法洛氏四联症一期根治术后早期急性肺损伤相关危险因素分析

    目的 分析法洛氏四联症(TOF)一期根治术后并发早期急性肺损伤(ALI)的危险因素,探讨预防的相关措施.方法 分析147例法洛氏四联症Ⅰ期根治术围手术期的相关情况.其中,男63例,女84例.术后ALI包括灌注肺、严重低氧血症、肺不张或液气胸等.利用单因素分析及Logistic逐步回归统计分析ALI发生的相关危险因素.结果 紫绀发病年龄<3.2个月,Nakata指数<140 mm2/m2,AO/PA比值>2.6,跨瓣环补片,体外循环时间>107 min,主动脉阻断时间>81 min以及术后呼吸机辅助呼吸时间<11h等因素与术后ALI发生有关.结论 Nakata指数<140mm2/m2、体外循环时间>107 min、主动脉阻断时间>81 min是TOF术后早期肺损伤发生的危险因素.

    作者:徐盛松;葛建军;周汝元;林敏;葛圣林;高晴云 刊期: 2007年第13期

  • 纳米金标记法在HIV检测中的应用

    目的 制备金纳米颗粒人类获得性免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)基因探针,研究其在检测HIV中的应用.方法 采用枸橼酸还原金氯酸法制备Au纳米颗粒.Au纳米颗粒通过Au-S共价键与烷烃硫醇修饰的寡核苷酸结合制备检测探针.检测探针通过与靶序列在液相中杂交,形成Au纳米颗粒聚集体,采用电镜观察结果.结果 制备的Au纳米颗粒粒径为(12±5)nm,分散良好,在520nm有大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,大吸收峰改变为524 nm.液相杂交后采用电镜观察可检测低至1 fmol/L的合成靶序列.结论 Au纳米颗粒HIV cDNA基因探针,通过液相杂交技术检测HIV cDNA,可以缩短检测窗口期,做到早期诊断和预防.

    作者:张平;习东;宁琴;罗小平 刊期: 2007年第13期

  • CT引导下经皮穿刺肺内小结节病变的应用价值

    目的 探讨CT引导下经皮穿刺肺内小结节病变的应用价值.方法 经细胞学、组织学或临床随访证实的病例39例,病灶直径为1.0~3.0 cm(平均直径2.1 cm).穿刺后即刻至7 d内行CT复查及临床观察,看有无并发症的发生.病例随访时间为3~28个月,平均13个月.结果 39例中,经手术后病理检查或临床随访确诊为恶性肿瘤者21例,其中,穿刺与手术或临床随访结果一致者17例;经手术后病理检查或临床随访确诊为良性病变18例,其中穿刺与手术或临床随访结果一致者14例.恶性肿瘤的准确性为81%(17/21),良性病变的准确性为73%(14/18).发生并发症者8例(20%),其中气胸6例(15%),咯血2例(5%).结论 CT引导下经皮穿刺活检对肺内小结节病变的定性有重要价值.

    作者:余世荣;陈光斌;邹文远 刊期: 2007年第13期

  • 外周血IL-18受体的表达对肾移植排斥反应的诊断和治疗的临床意义

    目的 检测尿毒症患者肾移植前后外周血白细胞介素18受体(IL-18R)的变化,探讨IL-18R在肾移植急性排斥反应中的作用.方法 受试者分为:尿毒症组(n=32),肾功能稳定组(n=24),急性排斥组(n=8),长期存活组(n=12)和健康对照组(n=7).提取受试者的外周血淋巴细胞,加入双荧光标记的鼠抗人CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα单克隆抗体,利用流式细胞仪进行测定,计算机分析打印结果.结果 CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα在健康对照组(n=7)中的阳性率分别为(5.9±3.4)%和(14.9±4.6)%,而在尿毒症组的阳性率分别为(17.6±9.7)%和(28.0±5.6)%,两组比较差别有显著性(P=0.02,P=0.04).术后恢复顺利者及术后长期存活者外周血CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα的表达明显低于急性排斥反应患者.排斥反应发生时外周血CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα的阳性率分别为(31.9±11.6)%和(45.7±14.7)%,明显高于肾功能正常组;激素冲击治疗后其阳性率分别为(4.6±1.7)%和(11.2±3.8)%,与激素冲击治疗前比较明显降低.结论 利用流式细胞技术检测尿毒症患者肾移植前后外周血CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα的变化,可以较早预测肾移植后急性排斥反应,预测肾移植后恢复情况,评估排斥反应对激素治疗的效果,为排斥反应的早期诊断和选择抗排斥治疗方案提供简单、快速和非创伤性的检测方法.

    作者:郝俊文;闵志廉;李香铁;陈英剑;郑军华 刊期: 2007年第13期

  • 乳腺癌中血管内皮生长因子-C的表达与淋巴结转移的关系

    目的 研究人乳腺癌组织中淋巴管内皮细胞生长因子-C的表达及临床意义.方法 应用免疫组化PV 9000二步法检测50例乳腺癌组织VEGF-C的表达.结果 50例患者中VEGF-C染色阳性33例,阳性率66%,阳性物质主要位于乳腺癌细胞胞浆内.乳腺癌组织中VEGF-C的表达与乳腺癌的淋巴结转移有关,有淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF-C阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织,但与乳腺癌组织病理学分型、肿瘤大小和临床分期无关.结论 VEGF-C表达与乳腺癌淋巴转移有关,可作为提示临床预后较差的指标.

    作者:张艳君;李荣;刘梅;钟梅 刊期: 2007年第13期

  • 正交试验法优选HepG2细胞佳培养条件

    目的 优选HepG2细胞佳培养条件.方法 分别以培养基、细胞接种密度、血清含量、双抗浓度、pH、Hanks清洗次数、胰酶浓度和消化时间为量化指标设计正交试验,SPSS11.0统计软件分析,得方差分析及多重比较结果.结果 含15%胎牛血清的DMEM培养基,接种密度为4×104个/mL,双抗浓度为0.5%,pH为7.2;在汇合度达95~100%时,Hanks洗3次,0.05%胰酶-EDTA-Na2H2O消化1 min,传代效果好,条件易于控制,且细胞能顺利生长.结论 本法为HepG2细胞佳培养条件的确定提供了可靠的实验数据.

    作者:王爽;梁伟伶;刘斯斯;尹继云;徐馨;秦学功 刊期: 2007年第13期

  • 氯酯醒治疗血管性痴呆的有效性和安全性研究

    目的 评价氯酯醒胶囊治疗血管性痴呆的有效性及安全性.方法 选择56例血管性痴呆患者,用氯酯醒进行12周的治疗(0.2Tid),治疗前后用简易精神状态量表(MMSE)、临床痴呆量表(CDR)及日常生活自理量表(ADL)评分,判定疗效.结果 氯酯醒治疗12周后与治疗前相比,MMSE、CDR及ADL分数分别改善4.69、0.82和4.71分,差异具有显著性意义.在用药初期3例出现血压轻度升高,2例出现头晕、头痛,1例出现胃部不适、恶心,2例出现兴奋或失眠等症状.结论 氯酯醒能有效治疗血管性痴呆患者,对患者的认知功能、痴呆程度和日常生活自理能力均有改善,且安全性较好.

    作者:付剑亮;孙晓江;赵玉武;黄流清;邵福源 刊期: 2007年第13期

  • 单层缝合的临床可行性实验研究

    目的 评估单层缝合在胃肠道吻合中的可行性及安全性.方法 将24只新西兰大白兔按照年龄、性别、体重随机平均分成A、B两组.其中A组行单层间断缝合,B组行双层缝合(胃肠的端端吻合),并于术后2、4、7d作吻合口的内径,压力测试实验及光镜、电镜、免疫组化切片观察新生肉芽组织的生成情况.结果 A、B两组之间的吻合口漏与狭窄的发生率无统计学意义;而两组之间的吻合口的耐压、壁厚、内径均有显著的统计学差异(P<0.05).两种吻合术均无吻合口大出血.结论 单层缝合与双层缝合的安全性的差别无统计学意义,但是单层缝合组的肉芽组织生成早,愈合快,并且节约了手术时间及手术费用,故为一种安全、可靠的缝合方法.

    作者:罗强;陈勇军;俞亚红;周松;陈坤;丁志强 刊期: 2007年第13期

  • 类风湿性关节炎患者全膝关节置换术后肌力训练效果评价

    目的 探讨类风湿性关节炎全膝关节置换术后等速肌力训练的效果.方法 11例类风湿性膝关节炎患者(19膝)全膝关节置换术后10 d进行3周每周3次的等速肌力训练,伸膝肌和屈膝肌训练程度同等.前后测定60°/s、90°/s、120°/s等速运动的峰力矩、单次佳做功和力矩加速能,并对患者训练前后的膝关节评分(KSS)进行观察.结果 4周时,测定伸膝肌和屈膝肌各参数包括60°/s、90°/s、120°/s、等速运动的峰力矩、峰力矩/体重、力矩、单次大做功、总功率和膝关节评分,均比训练前有显著增加.结论 类风湿性关节炎全膝关节置换术后等速肌力训练对提高伸膝肌和屈膝肌肌力效果显著,可明显改善患者假体膝关节功能.

    作者:李雪萍;王黎明;于俊龙;陈安亮;扬婷;袁冰 刊期: 2007年第13期

  • 大黄丹参对重症急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-10影响的临床研究

    目的 观察大黄、丹参对重症急性胰腺炎(SAP)时血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)的影响及其对SAP的治疗作用及机制.方法 将43例SAP患者随机分为治疗组和对照组,治疗组在西医综合治疗基础上加用大黄及丹参注射液,对照组仅采用西医综合治疗.检测治疗前及治疗后10 d两组血清TNF-α、IL-10水平,并评价两组的治疗有效率;白细胞、血淀粉酶恢复时间;腹痛缓解时间及平均住院时间.结果 治疗后治疗组白细胞、血淀粉酶恢复正常时间,腹痛缓解时间及平均住院时间较对照组明显缩短(P<0.01).两组TNF-α水平较治疗前明显下降(P<0.01);IL-10水平较治疗前明显增高(P<0.01),而治疗组较对照组变化更明显(P<0.01).结论 大黄、丹参能抑制TNF-α分泌,上调IL-10水平,对SAP具有良好的治疗作用.

    作者:郭莲怡;卢艳云 刊期: 2007年第13期

  • 女性性传播疾病高危人群抑郁情绪及心理干预研究

    目的 研究女性性传播疾病(STD)高危人群抑郁情绪状况、及心理干预的效果.方法 分别对355名女性STD高危人群和208名女性对照采用了抑郁自评量表(Self-Rating Depression Scale,SDS)测试,分析两组人群的年龄、文化程度、婚姻状况、性病症状等因素对SDS的影响,并对170名女性STD高危人群进行心理干预和干预后SDS测试.结果 STD高危人群的SDS平均得分(57.94±9.84)高于对照组(45.51±10.52)(P<0.01);STD高危人群组分别在不同年龄、婚姻状况、有无症状等组间SDS得分无差别(P>0.05),小学以下和高中以上两组平均得分高于初中文化组(P<0.01).干预后女性STD高危人群SDS得分明显低于干预前(P<0.01).结论 女性STD高危人群有明显的抑郁情绪,心理干预能有效改善STD高危人群人群的抑郁情绪,减轻心理症状.

    作者:胡海霞;卫平民;陈斌 刊期: 2007年第13期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心