何庆文;李琳
目的研究有氧胁迫下幽门螺杆菌(H.pylori)由螺旋体转变成球形体的适应性调节蛋白.方法运用双向电泳技术比较H.pylori螺旋体与球形体的全菌蛋白表达谱,差异蛋白进行胶内酶切,肽混合物使用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索.结果获得6个与H.pylori球形体形成相关的适应性调节蛋白,即翻译延长因子Tu、丙酮酸-黄素蛋白氧化还原酶、黄素氧化还原蛋白、尿素酶G、烷基化氢化氧化酶、超氧化物歧化酶.结论上述蛋白的鉴定对深入研究有氧胁迫下H.pylori球形体的形成机制,筛选具有潜在价值的抗H.pylori药物靶位和疫苗候选表位具有参考价值.
作者:曾浩;邹全明;郭刚;毛旭虎;童文德 刊期: 2006年第13期
目的探讨醛固酮(aldosterone,ALD)对人肾小管上皮细胞基质金属蛋白酶-2(matris metalloproteinase-2,MMP-2)表达及细胞增殖的影响.方法应用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)技术,观察ALD诱导人近端肾小管上皮细胞系(HK2)合成MMP-2的情况,四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法观察不同浓度的ALD对HK2增殖的影响.结果在无ALD刺激的情况下,HK2细胞中有基础量的MMP-2 mRNA的表达,ALD以剂量和时间依赖的方式抑制HK2细胞合成MMP-2 mRNA,同时ALD以剂量和时间依赖的方式促进HK2细胞的增殖.结论ALD可抑制体外培养的人近端肾小管上皮细胞表达MMP-2,促进人近端肾小管上皮细胞的增殖,提示ALD可能抑制了肾小管上皮细胞细胞外基质的降解,促进了肾纤维化的进展.
作者:魏冬梅;郭志军;高山林;王建 刊期: 2006年第13期
目的研究乳腺癌和乳腺小叶增生组织中SKP2和P27蛋白的表达及其临床病理意义.方法45例乳腺癌和15例乳腺小叶增生组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,SKP2和P27蛋白染色方法均为SP免疫组化法.结果乳腺癌SKP2阳性率明显高于乳腺小叶增生,差异有显著性,但P27则相反;组织学分级Ⅰ级及淋巴结未转移乳腺癌SKP2阳性率明显低于组织学分级Ⅲ级和淋巴结转移病例,但P27则相反(80.0%vs35.0%,P<0.05;76.5%vs 40.0%,P<0.05);SKP2和P27蛋白在乳腺癌中表达呈密切负相关(χ2=11.75,P<0.01).结论SKP2和P27蛋白表达是反映乳腺癌发生、发展及预后的重要生物学标记物,两者在乳腺癌中表达存在相互调控作用.
作者:黄江生;杨竹林 刊期: 2006年第13期
目的探讨Caspase8表达对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y(SY5Y)细胞凋亡的影响及其发生机制.方法应用RT-PCR方法和免疫组化法检测IFNγ作用前后SY5Y细胞Caspase8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测IFNγ、TRAIL、IFNγ+TRAIL及IFNγ+Caspase8抑制剂+TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响.结果SY5Y细胞不表达Caspase8,IFNγ作用48h后的SY5Y细胞Caspase8表达明显增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经IFNγ诱导表达Caspase8的SY5Y细胞对TRAIL敏感,且与TRAIL浓度有关,Caspase8抑制剂可明显降低TRAIL对表达Caspase8的SY5Y细胞的杀伤作用.结论IFNγ通过诱导Caspase8表达而逆转SY5Y细胞对TRAIL诱导凋亡的耐受.
作者:张继红;佟海侠;滕绍春;张可仞;张锦华 刊期: 2006年第13期
目的研究人大肠癌高、低分化组织及癌旁正常黏膜之间蛋白质组表达差异,寻找和鉴定癌组织与正常黏膜之间以及高、低分化癌组织之间差异表达蛋白.方法收集新鲜大肠癌标本;根据病理诊断结果将大肠癌标本分为高分化癌组、低分化癌组,以癌旁正常肠黏膜作为对照.提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳,比较得到高分化与低分化组织之间表达差异点.将这些差异蛋白点进行肽指纹图分析及网上数据库鉴定.应用Western blot验证蛋白质组筛选结果.结果在两组癌标本中均存在钙网硬蛋白前体、O98007蛋白类似物的特异表达以及AAH10915、AAH75839蛋白表达上调;在高分化癌组中存在E980237蛋白的特异表达以及三磷酸异构酶、肝脂肪酸结合蛋白表达上调;在低分化癌组中存在2HHEB(氧化血红蛋白变异体)和锌指蛋白312类似物的特异表达以及Q9TQL5蛋白(Fragment)类似物表达上调.Western blot检测HSP27和LFBP表达的结果与蛋白质组分析结果一致.结论高分化癌组织与低分化癌组织之间存在蛋白质组差异表达,这些蛋白与大肠癌细胞分化有关.
作者:裴海平;SHEN Liang-fang;申良方;朱红;曾亮;甘毅 刊期: 2006年第13期
目的观察参芪扶正注射液对昏迷病人清醒的临床疗效.方法随机将60例昏迷病人分为两组,治疗组30人,对照组30人;两组病人的综合治疗措施相同(吸氧、利尿、降压、降血糖等).治疗组参芪扶正注射液静脉点滴7~10 d,对照组纳洛酮2~8mg/d,静脉点滴7~10d,所有病人均观察病人清醒时间、治疗前后血气分析、血小板、纤维蛋白原变化.结果治疗组病人清醒时间平均为38.9 h,对照组病人清醒时间平均为52.1 h,治疗组血小板、纤维蛋白原无影响,血气分析治疗前后有明显改变.结论参芪扶正注射液对昏迷的治疗有明显改善临床症状的疗效,值得作为昏迷病人急救联合应用药物的推荐.
作者:蔡振林;刘梅;郑挺;程德山 刊期: 2006年第13期
目的通过测定亚低温情况下脓毒症(sepsis)大鼠肝组织腺苷酸及乳酸含量改变,并结合肝细胞超微结构的变化,初步探讨亚低温能否减轻脓毒症大鼠组织损伤的程度.方法24只Wistar大鼠均分为正常对照组(NC组)、内毒素组(LPS组)、亚低温组(MHT组),应用高效液相色谱法及生化法分别测定各组肝组织腺嘌呤核苷酸及乳酸水平,并在透射电镜下观察肝细胞超微结构的变化.结果内毒素组大鼠肝组织腺苷酸水平[ATP(4.093±0.424),ADp(1.331±0.136),AMP(1.331±0.312)μmol/g·wet]和亚低温组大鼠肝组织腺苷酸水平[ATP(4519±0.028),ADP(1.483±0.108),AMP(1.544±0.301)μmol/g·wet]均较正常对照组腺苷酸水平[ATP 4.990±0.455,ADP 1.632±0.181,AMP 1.737±0.407 mol/g·wet]降低,尤以内毒素组明显.亚低温组肝组织腺苷酸水平较内毒素组明显升高;亚低温组肝乳酸含量为[(1.424±0.213)mmol/g·prot,明显低于内毒素组(1.676±0.267)mmol/g·prot,P<0.05],而与对照组比较差异无显著性[(1.379±0.314)mmol/g·prot,P>0.05];电镜下可见亚低温组肝细胞超微结构损伤明显轻于内毒素组.结论亚低温可减缓脓毒症大鼠肝组织能量的消耗,减轻肝组织损伤,可考虑作为防治脓毒症的一种新方法.
作者:刘春峰;张趣 刊期: 2006年第13期
目的Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在多数恶性肿瘤组织中丰富表达.因此,观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡、增殖、细胞对化疗药物敏感性的影响.方法设计合成针对Survivn mRNA特异性的ASODN,透射电镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测各组细胞增殖指数(proliferative index,PI)和凋亡指数(apoptotic index,AI),RT-PCR法分析转染后Survivn mRNA及Caspase-3 mRNA的变化,Western Blot法检测各组Survivn蛋白表达情况,荧光分光光度法测定Caspase-3的活性水平;MTT实验测定T24细胞对丝裂霉素(mitomycin,MMC)的敏感性.结果ASODN转染组透射电镜下观察到凋亡的征象,而各对照组未见凋亡证据;各转染组细胞AI明显高于各对照组,PI明显低于各对照组(P<0.01),且在一定范围内呈量-效关系,各对照组间差异无显著性(P>0.05);各转染组细胞Survivin mRNA、Survivin的表达较各对照组明显下调(P<0.01),各对照组间差异无显著性(P>0.05);Caspase-3 mRNA的表达在各组细胞间差异无显著性(P>0.05);各转染组细胞Caspase-3活化水平较各对照组明显提高(P<0.01),各对照组间差异无显著性(P>0.05);MTT实验显示,转染组MMC半数抑制浓度(IC50)较对照组明显下降,ASODN可提高T24细胞对MMC的敏感性.结论Survivin ASODN转染T24细胞后可特异性封闭Survivin的表达,对Caspase-3 mRNA的表达无明显作用,能激活Caspase-3无活性前体,从而诱导T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,提高T24细胞对化疗药物MMC的敏感性.
作者:张轶庠;杨江根;章道恒;申鹏飞;齐范;陈湘;陈合群 刊期: 2006年第13期
目的探讨甲状腺功能障碍对人体血清leptin水平的影响.方法选取甲亢患者45例、甲减患者46例、正常对照组50例,应用免疫放射分析(IRMA)法测定血清lep血水平,并测甲状腺功能,计算体重指数(BMI)和体脂百分数(%Fat).结果甲亢患者leptin水平,男性(2.05±1.54)μg/L,女性(7.47±5.08)μg/L,显著低于正常组,而且扣除体脂因素后仍很明显(P<0.01).甲减组leptin水平与正常组相比显著升高,但排除体脂因素后,两组差异无显著性.3组leptin水平均与BMI显著正相关,与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3).游离甲状腺素(FT4)呈弱负相关,与促甲状腺激素(TSH)呈弱正相关,但无统计学意义.各组中女性leptin水平均为男性的2、3倍.结论甲功改变通过体脂含量间接影响leptin水平.
作者:侯英;孙世新;李贤厚;杨玉芝 刊期: 2006年第13期
目的探讨肝硬化门脉高压术后肠系膜静脉血栓形成的诊断与治疗.方法回顾性分析15例肝硬化门脉高压术后肠系膜静脉血栓形成的临床资料.结果脾切除、断流术后10例(66.6%).发生在术后4周内11例(73.3%).彩色多普勒超声确诊6例,CT确诊5例,剖腹探查确诊4例.11例行小肠及其受累系膜切除、小肠端端吻合,治愈8例,术后因中毒性休克、MODS死亡3例.经肠系膜上动脉导管由药泵给予溶栓、抗凝及激素治愈4例.12例出院后继续服抗凝药6个月,随访6个月~5年,除1例失访外,11例均无血栓复发.结论肝硬化门脉高压术后出现腹部隐痛、纳差、恶心、呕吐、腹胀、发热、血小板升高或腹泻时,应警惕肠系膜静脉血栓形成.及时彩色多普勒超声或CT检查是早期诊断的佳选择.对无腹膜炎体征者经肠系膜上动脉造影导管给予溶栓、抗凝及激素是理想的治疗方法.出现腹膜炎时急症手术是唯一有效的治疗手段.术后继续抗凝是巩固疗效、防止血栓复发的关键.
作者:叶金芳;华积德;胡军红;刘大晗 刊期: 2006年第13期
目的研究环氧合酶-2在卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌组织中的表达,以探讨其与这3种肿瘤发生、发展的关系.方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测卵巢浆液性癌、宫颈鳞癌及子宫内膜腺癌组织中COX-2 mRNA表达,并与相应组织比较.结果各种癌组织中COX-2 mRNA表达率及相对含量明显高于其相应的癌前病变或交界性肿瘤组织(P<0.01),且与良性肿瘤、慢性炎症或正常组织比较,差异有显著性(P<0.05).在有淋巴结转移的宫颈鳞癌组织中,COX-2 mRNA相对含量高于无淋巴结转移组(P<0.05).在中、低分化及有深肌层浸润的子宫内膜腺癌组织中COX-2 mRNA相对含量高于高分化及浅肌层浸润组,差异有显著性(P<0.05).在卵巢浆液性癌组织中COX-2 mRNA的表达与手术病理分期、组织学分级、有无腹水及淋巴结转移无关.结论COX-2可能在卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用,并与其生物学行为密切相关.
作者:王敏;孙颖;孙凤娟;王欣彦;高山;张淑兰 刊期: 2006年第13期
目的探讨B超对脾结核的诊断及鉴别诊断.方法观察了12例脾内多个低回声结节患者的脾脏声像图特征,并经脾穿刺活检病理学检查,X线胸片、腹水细胞学检查、淋巴结活检、结核菌纯蛋白衍生物(PPD)试验等多项检查及抗结核治疗好转而明确诊断.结果该组病例在缺乏其他临床资料时,B超检查仅2例因有明确肺结核病史,作出脾结核诊断,其余病例均提示脾脏多发低回声结节:脾恶性淋巴瘤可能?再次B超检查时,结合X线胸片结果、腹水细胞学检查、淋巴结活检、及PPD试验,作出脾结核诊断9例,脾转移癌1例.结论B超对脾结核诊断一定要结合其他相关临床资料,确诊可通过脾脏穿刺活检病理学检查.
作者:邱艳 刊期: 2006年第13期
目的观察大鼠肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的不同时间内肾组织和血液中IL-6水平的动态变化以及山莨菪碱(654-2)干预的影响.方法构建大鼠肾IRI模型:切除大鼠右肾,夹闭左肾动脉1 h,松开再灌注1、4、24 h;654-2分别于缺血和再灌注前10 min腹腔注射,12 h追加一次.用双抗体夹心ELISA法分别动态检测血清和肾组织中IL-6含量,同时做肾功能指标--血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和肾系数(RC)检测.结果缺血组IL-6含量低于对照组(P<0.05),而再灌注1 h(R1h)组显著高于缺血组(P<0.01).再灌注4 h组(R4h)和24 h组(R24h)与缺血组比无明显差异,两组肾组织中IL-6的含量均低于再灌注1 h组(P<0.05).肾组织中IL-6含量的动态变化和血液中IL-6含量的变化呈直线正相关(r=0.86,P<0.01).654-2干预可使R4h和R24h组的IL-6含量较未处理组增高(P<0.01),同时使R4h组SUN、Scr及肾系数也明显增高(P<0.01或P<0.05),使R24 h组的Scr明显降低(P<0.01),但SUN及肾系数无明显变化.结论在再灌注的早期,肾组织和血液中IL-6的含量升高,随之下降接近于单纯缺血水平.654-2预处置使IL-6增多的同时加重早期肾IRI,再灌注24 h后才显示其治疗作用.
作者:宋修勤;于小玲;徐晓慧;徐文华;彭俊 刊期: 2006年第13期
目的研究醛固酮(aldosteroen,ALD)及其受体拮抗剂螺内酯(spironolactone,SPI)对大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达的影响.方法以不同浓度的ALD(10-11、10-9、10-7mol/L)及/或10-7mol/L SPI刺激系膜细胞24 h后,应用半定量RT-PCR方法检测细胞TGF-β1 mRNA的表达;以10-9mol/L浓度的ALD刺激系膜细胞不同时间(12 h、24 h、48 h)后,应用半定量RT-PCR方法检测细胞TGF-β1 mRNA的表达.结果半定量RT-PCR结果显示,ALD促进培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1 mRNA的表达,且具有浓度依赖性和时间依赖性的特点,SPI能够拮抗ALD的作用.结论ALD促进肾小球系膜细胞TGF-β1的基因表达,进而导致肾小球硬化.SPI能够拮抗ALD的作用,从而可能有益于延缓肾小球硬化的进展.
作者:李晓东;郭志军;高山林;赵慧娟;张林霞;孙东立 刊期: 2006年第13期
目的研制离体肾脏灌流装置.方法自行设计、制造一种离体肾脏灌流装置,并进行6例新西兰白兔离体肾脏常温下灌流实验,以评估此灌流装置的工作性能.结果灌流装置能与尿量偶联自动补充灌流液,机器能持续工作,性能稳定.长灌流保存时间达80.65 h.灌流24、48 h,肾脏静脉流出液乳酸脱氢酶(LDH)活性、钾钠离子浓度和尿N-乙酰βD-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性无显著变化,肾组织形态学基本正常,当灌流65 h,肾静脉流出液LDH活性和钾离子浓度显著增高,钠离子浓度显著降低,尿NAG活性显著增高,肾小管上皮细胞变性肿胀.结论该肾脏体外灌流装置操作简单,使用方便,能满足医学科研的要求.
作者:袁发焕;光丽霞;谭红梅 刊期: 2006年第13期
目的探讨联合脏器切除治疗进展期胃癌的地位,总结分析手术经验.方法对1994年1月~2005年12月十二年间该院施行联合脏器切除的47例进展期胃癌的临床资料进行回顾性分析.结果联合脾脏切除14例,联合脾、胰体尾切除19例,联合部分横结肠切除5例,联合胰十二指肠切除2例,联合肝左外叶不规则切除3例,联合双侧卵巢切除2例,联合胆囊切除1例,联合脾、胰体尾加部分横结肠切除1例.围手术期死亡1例,占2.1%,随访42例,1、3、5年生存率分别为72.1%、34.9%和11.6%,中位生存时间为25.28个月.而同期随访的该院52例仅行姑息性手术(包括未联合其他脏器切除的姑息性胃切除术、胃空肠吻合术、空场造瘘术等)或剖腹探查术的进展期胃癌患者的1、3、5年生存率分别为44.2%、11.5%和0.0%(均P<0.01),中位生存时间为7.37个月.而与同期该院316例行标准胃癌根治术的患者相比术后并发症显著增多(P<0.05),住院天数相应较长.结论通过严格选择适应证,充分术前准备,加上良好的手术技巧和有效的术后处理,联合脏器切除可以挽救或明显延长一部分进展期胃癌患者的生命.
作者:郑幼伟;郑启昌;白明辉;薛玉龙 刊期: 2006年第13期
目的探讨综合性重症监护病房(ICU)内真菌感染的分布及其临床意义.方法收集2004年7月~2004年12月入住ICU患者的痰、血、尿、中心静脉穿刺针顶端及局部引流物进行真菌培养及药物敏感性试验.结果22例患者中共分离出病原菌32株,分离的部位以泌尿系为主,其次为下呼吸道,继之为血液、静脉导管顶端.长期使用广谱抗生素、留置尿管、老年患者诱发真菌感染率高.所有真菌菌株对大扶康、5氟胞嘧啶敏感,对两性霉素B及伊曲康唑部分耐药.结论ICU内真菌感染主要部位存在泌尿系,以念珠菌属居多,对大扶康敏感度好.
作者:李昂;段美丽;翁以炳;胡滨;张淑文 刊期: 2006年第13期
目的研究断流术后门静脉系统血栓形成的临床特征,为其防治提供线索.方法回顾性分析肝硬化门脉高压症行断流术病人194例,研究其门静脉系统血栓形成情况,与PT、KPTT及PLT的关系,再发上消化道出血及生存情况.结果该组门静脉系统血栓发生率为13.92%,血栓组与无血栓组PT、KPTT及PLT水平均无明显差异(P>0.05),无血栓形成组再出血率明显低于血栓形成组(P<0.05).结论断流术后预防门静脉系统血栓形成是降低再出血率的重要一环.抗凝药物应在术后早期(PLT超过正常前)使用.
作者:梅斌;陈孝平;刘飞龙 刊期: 2006年第13期
慢性中性粒细胞白血病(Chronic Neutrophilic Leukemia,CNL)是少见的慢性白血病.易与类白血病反应,慢性粒细胞白血病等混淆.常诊断不清或延误诊断.为了提高对本病的认识,笔者通过在临床上诊断过复杂的CNL病例,并查阅文献,现报告如下:
作者:谢桂岚;李志祥 刊期: 2006年第13期
目的探讨心理治疗及中西医结合的程序化治疗在输卵管炎性不孕症中的临床应用.方法选择46例输卵管阻塞引起的不孕症患者作为治疗组,采用抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)进行问卷调查,并进行心理治疗.在抗生素和中药灌肠及理疗的治疗阶段后,肌注胎盘组织液或口服桂枝茯苓胶囊以巩固疗效,后行子宫输卵管通液术.对照组32例采用抗生素或中药灌肠或子宫输卵管通液术单一方案治疗.结果治疗组痊愈率占52.1%,总有效率89%;对照组痊愈率占21%,总有效率46%.两组痊愈率、总有效率比较,P<0.05,具有显著性.结论输卵管炎性不孕症的程序化中西医结合治疗优于单一治疗方案,同时要重视不孕症的心理治疗.
作者:蔡雁;朱莉;高晓旭;于洋 刊期: 2006年第13期