学术投稿

培养肝细胞在蛋白质组学研究中的应用

刘友平;丁慧荣;何涛;代荣阳;李洪

关键词:肝细胞培养, 蛋白质组学, 乳小鼠, SDS-PAGE, 双向电泳
摘要:目的研究一种简便的肝细胞培养方法以培养出足够量的单一类型细胞,从而获得尽可能多的蛋白量进行细胞蛋白质组学分析.方法采用肝组织块贴壁法培养并传一代(目的是去组织块及其他间质细胞).收集细胞蛋白并进行SDS-PAGE及双向凝胶电泳.结果本实验方法可获得高密度、高纯度、高活力的肝实质细胞,细胞裂解后得到的蛋白质电泳图谱效果好.结论实验方法操作简单、经济、高效,能够满足一般实验室进行细胞蛋白质组学分析.
中国现代医学杂志相关文献
  • 瑞血新对同步放化疗后骨髓抑制的作用

    目的探讨瑞血新对头颈部进展期鳞癌同步放化疗后白细胞减少症的防治.方法71例头颈部进展期鳞癌患者随机分成治疗组(瑞血新+同步放化疗)和对照组(利血生等+同步放化疗).结果治疗组骨髓抑制有效率30/36(83.3%),对照组有效率16/35(45.7%)两组间有显著性差异P<0.01.结论瑞血新在头颈部进展期鳞癌同步放化疗中有良好的防治白细胞减少的作用.

    作者:类健翔;陈平;汤翠菊 刊期: 2005年第03期

  • 腔内激光治疗术治疗下肢浅静脉曲张

    目的探讨静脉腔内激光治疗术治疗下肢浅静脉曲张的安全性和有效性.方法回顾分析240例(282条肢体)下肢浅静脉曲张患者应用DIOMED 810 m激光治疗仪的临床治疗效果及近期随访结果.结果该组所有患者术后均恢复良好,临床症状消失,无复发.经1~12个月随访观察,治疗静脉均完全闭塞,无再通发生.结论静脉腔内激光治疗术治疗下肢浅静脉曲张安全、有效、费用少;作为一种新的微创技术有望取代传统的开放手术.

    作者:赵堂海;黄英;蒋米尔;于永山;王海波;解远峰;郭明金 刊期: 2005年第03期

  • 小剂量盐酸胺碘酮致肺间质纤维化1例

    1 临床资料患者男,60岁,因阵发性心悸3 a,气短、干咳2个月,于2003年8月4日入院.既往吸烟史30余年,10支/d,至今未戒.否认慢性肺部疾病,结缔组织疾病及遗传性疾病史.患者于2000年6月出现阵发性心悸、活动后加重,无胸闷、憋气、胸痛.平静和动态心电图检查示:频发性室性期外收缩,呈Ⅱ、Ⅲ联律,胸片:心肺无异常.曾接受美西律、盐酸普罗帕酮、阿替洛尔等抗心律失常药物长期治疗,效果不佳,仍频繁发作,影响工作和休息.

    作者:王亚真;苏轮;贾金兰 刊期: 2005年第03期

  • 有机磷中毒性周围神经病的电生理观察(附5例腓肠神经活检报告)

    目的研究有关有机磷中毒性周围神经病的肌电图及肌活检改变.方法对208块肌肉进行肌电图检查及5例腓浅皮神经的电镜观察.结果肌电图表现为100%出现失神经电位,肌肉电压幅度降低,运动单位时限增宽,124条周围神经传导速度(MCV)均有不同程度的病损.5例腓浅皮神经活检,发现周围神经髓鞘和轴索在有机磷中毒性周围神经病同时受累,或为病变的不同阶段.但以周围轴突变性为主,产生典型的神经源性肌萎缩.结论电生理检查有助于该病的诊断

    作者:姜海燕;羊毅;肖岚 刊期: 2005年第03期

  • 围产期心肌病预后因素探讨

    目的评价影响围产期心肌病预后的临床因素.方法回顾分析该科37例围产期心肌病病例,总结其临床症状、体征、心电图、超声心动图特征,评价其与预后的关系.结果11例病人预后不良,7例死于心衰恶化,2例死于器官栓塞,1例死于严重肺部感染,1例死于心律失常.26例随访1年,5例发生心功能不全,无心源性猝死、恶性心律失常发生.结论围产期心肌病预后主要与心功能状况及并发症(器官栓塞、心律失常、感染)有关.

    作者:方志成;周昌娥;王斌;王玮 刊期: 2005年第03期

  • 传统肺减容术和肺叶切除后兔肺功能及组织结构的比较

    目的对比传统肺减容术(LVRS)和肺叶切除术后阻塞性肺气肿兔的肺功能和组织结构变化.方法40只肺气肿兔随机等分为4组:肺气肿组(A组)、传统LVRS组(B组)、肺叶切除组(C组)和假手术组(D组),8周后进行肺功能和肺组织学检查.结果与A组比较,B组和C组的潮气量、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3),FEV0.3/FVC(用力肺活量)、PaO2、平均肺泡数和肺泡隔面密度增加,功能残气量、paCO2、肺总容积和肺泡直径降低(P<0.05),而D组变化不明显(P>0.05).B组和C组肉眼及光镜下可见肺气肿改善,而D组无明显变化.B组和C组之间上述各指标无显著差异(P>0.05).结论传统的LVRS和肺叶切除术均可有效改善阻塞性肺气肿兔的肺功能和组织结构.

    作者:谭群友;王如文;蒋耀光;龚太乾;李东亮 刊期: 2005年第03期

  • 新西兰狼疮鼠抗染色质抗体易感基因染色体定位研究

    目的确定新西兰小鼠自身抗染色质抗体的遗传易感基因染色体定位.方法建立新西兰黑色品系(NZB)与新西兰白色品系(NZW)F1×NZB回交小鼠模型.采用覆盖小鼠19条染色体的微卫星遗传标记及数量性状位点(QTL)分析进行基因定位.结果确定了自身抗染色质抗体产生的两个遗传易感基因,一个位于NZW小鼠第9染色体中段30厘摩临近;另一个易感基因位于NZW小鼠第17染色体近中心端19厘摩处(Lods值>3).结论(NZB×NZW)F1小鼠自身抗染色质抗体的产生受多基因调控,候选易感基因不仅来自于NZB,也来自于NZW.

    作者:李丽;王春华;祁赞梅;李艳秋;陈洋;陈东;姜奕 刊期: 2005年第03期

  • cTnI诊断轻中度急性一氧化碳中毒患者心肌损伤的研究

    目的探讨心肌肌钙蛋白I(cTnI)在急性一氧化碳中毒(ACOP)患者心肌损伤诊断中的意义.方法30例我院1999年1月~2004年1月轻度(n=14)及中度(n=16)ACOP患者,检测接诊后0 h,8 h,1 d,3d及7 d时血清cTnI水平、心肌酶学及心电图,比较cTnI和其他单项或综合指标对轻度及中度ACOP患者心肌损伤检出率的差异.结果中度中毒组cTnI升高例数显著高于轻度中毒组(P<0.01),而其他各单项指标异常例数的差异无显著性(P>0.05).两组间心肌酶学升高或心电图异常例数的差异无显著性(P>0.05);综合心肌酶学及心电图检查结果后,中度中毒组检出率例数显著高于轻度中毒组(P<0.05).并且cTnI升高的例数显著高于其他单一或综合指标异常的例数(P<0.05).结论应用血清cTnI的检测能明显提高ACOP患者心肌损伤的检出率,其灵敏度明显优于心肌酶学及心电图检查.

    作者:孙安琼;杨新平;李卓成;陈剑雄;罗蓉 刊期: 2005年第03期

  • 肩胛骨骨折15例临床分析

    目的探讨手术治疗不稳定的肩胛骨骨折的疗效.方法回顾1998年~2003年收治的15例肩胛骨骨折的临床资料.根据AO分型方法:稳定的关节外骨折3例,不稳定的关节内骨折5例和不稳定的关节外骨折7例.通过后方入路,前方入路及前后联合入路对不稳定的12例肩胛骨骨折进行了骨折切开复位,拉力螺钉及重建钢板固定.结果12个手术病例随访12~36个月.Neer评定,优良9例,不满意2例,失败1例.结论对于移位严重的肩胛体部骨折和骨突部骨折及不稳定的关节内、外骨折采用手术治疗,可以获得满意的疗效.

    作者:尹擘;王少卿;于强;甄鑫刚;周振山 刊期: 2005年第03期

  • 纳洛酮治疗急性海洛因中毒的临床疗效观察

    我院急诊科自2003年8月~2003年12月应用纳洛酮抢救22例急性海洛因中毒,成功21例,抢救成功率达95.4%.现报告如下:

    作者:陈志雄;黄琼;姚静 刊期: 2005年第03期

  • 经尿道等离子体双极电切术治疗良性前列腺增生症(附38例报告)

    目的探讨经尿道等离子体电切术治疗前列腺增生症(BPH)的疗效和安全性.方法采用经尿道等离子体双极前列腺电切术(PKRP)治疗BPH 38例.结果切除前列腺组织重量(51.0±28.4)g;手术时间(64.0±42.5)min;出血量(78.0±66.0)mL;无电切综合征(TURS)和闭孔神经反射发生.大尿流率(Qmax)由术前的(5.8±3.2)nL/s上升至术后的(20.4±5.6)mL/s;国际前列腺症状评分(IPSS)由术前的(27.2±4.3)分下降至术后的(7.3±2.8)分;生活质量评分(QOL)由术前的(5.7±0.7)分下降至术后的(1.9±0.6)分.结论经尿道等离子体双极电切术出血少,并发症少,无电切综合征和闭孔神经反射发生,是治疗BPH的一种安全、有效的手术方法.

    作者:刘劲戈;黄亚特;郑文喜;刘新益;阳新华;欧雄广 刊期: 2005年第03期

  • 循证医学自我教育模式在内科实习中的应用

    目的改变传统的灌输式内科实习模式,使学生独立思考、解决问题的能力得到充分锻炼,成为终身的自我教育者.方法2004年在中山三院内科实习生30人.采用循证医学以问题为基础的自我教育模式,学习循证医学的临床实践方法.结果通过实践,学生们不但增加了有关循证医学的知识,而且提高了临床思维能力,锻炼了检索文件的能力,学会了如何评价研究证据的真实性、临床重要性和实用性,终提高了临床诊疗水平.结论采用循证医学以临床问题为基础的自我教育模式,有利于临床医学生多种能力的培养,避免学习的盲从性,提高独力思考能力,并成为终身的自我教育者.

    作者:刘金来;陈璘;赵长林;彭朝权 刊期: 2005年第03期

  • 微创术治疗幕上自发性脑出血的预后判别分析

    目的探讨影响自发性幕上脑出血患者微创术治疗预后的危险因素,建立微创术治疗脑出血术后30 d内预后的判别模型.方法回顾性分析97例经微创术治疗的脑出血患者的临床资料,对影响微创术治疗预后的危险因素进行单因素和多元逐步判别分析.结果97例患者中,术后30 d死亡27例(27.8%).单因素分析表明:意识水平、出血量、出血半球、伴发缺血性心脏病和微创手术时间是影响其预后的危险因素(意识水平P<0.001,余均P<0.05).多元逐步判别分析结果显示,仅有意识障碍、出血量2个危险因素可作为判别因子,应用建立的判别模型方程进行组内回代检验,显示判别模型方程准确度为75.3%.结论意识水平、出血量是影响脑出血患者微创术治疗预后的重要危险因素,由此建立的30 d生存和死亡的判别模型对临床具有一定的指导意义.

    作者:邓长青;原玉珍 刊期: 2005年第03期

  • 148例脑弥漫性轴索损伤的预后分析

    目的分析影响脑弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)预后的因素.方法将该科自1997年1月~2003年10月收治的148例DAI病人的各项指标分别数量化,用后退法逐步回归分析影响预后的因素.结果影响预后的因素排列顺序为:昏迷程度、CT表现、瞳孔变化、昏迷时间、脑挫伤程度、年龄大小.结论影响DAI预后的主要因素是昏迷程度,它可作为判断DAI预后的指标.

    作者:王知非;刘飞;廖达光 刊期: 2005年第03期

  • 可手术非小细胞肺癌淋巴结转移情况的分析

    目的探讨可手术的非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴转移的特点及其与淋巴结大直径的关系.方法回顾性分析行肺叶切除加系统性纵隔淋巴结清扫术的可切除的NSCLC淋巴结的病理特点.结果可手术的NSCLC 56例,淋巴结转移36例,占64.3%,纵隔(N2)和肺内(N1)淋巴结转移均超过50.0%.N2站淋巴结按其大直径≤1.0 cm,>1.0 cm且≤2.0 cm,>2.0 cm分为三个等级,其转移率分为24.0%,46.0%和80.0%,两者间的相关分析:x2=28.751,v=2,P<0.001,rp=0.31;同样地,N1站淋巴结的转移率分别为32.6%,44.9%和64.7%,两者间的相关分析:x2=7.014,v=2,0.025<P<0.05,rp=0.20.结论可手术的NSCLC淋巴结转移相当的常见,淋巴结转移随其大直径的增加相应增加,两者间呈正相关关系.

    作者:翁毅敏;吴一龙;谷力加;冯卫能;程超;钟文昭;黄邵洪 刊期: 2005年第03期

  • 妇科恶性肿瘤P16基因甲基化研究

    目的探讨妇科恶性肿瘤中p16基因甲基化及临床意义.方法采用甲基化特异性PCR(MSp)方法,检测不同病理类型和临床分期的206例妇科恶性肿瘤组织中p16基因启动子区域5'CpG岛甲基化状态,其中包括84例卵巢上皮性癌,62例子宫内膜癌和60例宫颈癌.结果正常对照组织及癌旁p16基因无甲基化;在卵巢上皮性癌、子宫内膜癌和宫颈癌中,甲基化率分别为5.95%(5/84)、24.19%(15/62)和21.67%(13/60).结论p16基因甲基化在妇科恶性肿瘤发生中起着重要作用.

    作者:原继荣;李佩玲;刘丽荣;李璞 刊期: 2005年第03期

  • PTA术后内皮细胞再生动力学实验研究

    目的探讨大鼠颈动脉球囊导管扩张术后,损伤动脉内皮细胞的再生动力学规律.方法建立大鼠颈动脉气囊导管损伤模型,伊文思蓝染色标记缺乏内皮覆盖的血管区域,动态观测内皮细胞再生规律;免疫组织化学染色观测损伤后不同时期动脉壁内TGFβ1的表达情况;计算机图像分析技术检测损伤动脉内皮细胞再生部位与乏内皮覆盖区内膜及中膜增生面积.结果术后9 d前内皮再生缓慢,术后9~28d再生速度较前显著增高(1.19±0.14)mm/d vs(0.44±0.25)mm/d,P<0.01,术后28 d后内皮再生趋于停滞.术后早期(9 d以内)TGFβ1在动脉内壁内的高表达,而14d后,TGFβ1表达显著减少.结论PTA术后早期内皮再生受抑制,早期再生速度较慢,9 d后再生速度明显加快,28 d后再生趋于停滞.术后早期(9 d以内)TGFβ1在动脉壁内的高表达可能是内皮再生受抑制的直接原因之一.

    作者:蒲庆华;赵渝;时德 刊期: 2005年第03期

  • 慢性肝炎患者肝脏B超形态学、周围血细胞计数与肝纤维化分期之间的关系

    目的探讨慢性病毒性肝炎患者肝脏B超形态学改变、周围血细胞计数与肝纤维化病理分期之间的关系.方法对120例慢性病毒性肝炎患者行B超引导下肝活检及肝组织学纤维化分期;B超检查测定门静脉为主(MPV)、脾静脉(SPV)宽度及脾脏厚度;同时检测周围血细胞计数.比较上述指标之间的关系.结果120例慢性肝炎患者肝纤维化分期结果为:S0期15例,S1期40例,S2期25例,S3期24例,S4期16例.从S1~S4期,MPV、SPV增宽及脾脏增厚的比率逐渐上升,但MPV、SPV增宽的比率各期差别不大(P>0.05),而脾脏增厚的发生率各期差别较大(0.01<P<0.025).从S1~S4期,周围血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)及血小板(PLT)计数逐渐下降,尤以PLT下降明显,S3、S4期显著低于S1、S2期(P分别<0.05、0.01),其中S4期已在正常下限以下.RBC,WBC在S1、S2、S3期之间并无显著性差异(P>0.05),S4期则较前面各期显著下降(P分别<0.05,0.01).结论肝脏B超形态学改变、周围血细胞计数对慢性肝炎患者早期肝纤维化的诊断价值是有限的.脾脏肿大、SPV增宽、PLT计数下降可能对较严重的肝纤维化(S3或S4期)的诊断有一定作用.

    作者:刘贵生;陈欣;王萍;袁农;王宪智;管湘平 刊期: 2005年第03期

  • 正常腹内压影响因素的临床研究

    目的探讨正常腹内压的影响因素,建立腹内压回归方程.方法应用膀胱测压法,测定106位住院患者的腹内压,并对年龄、性别、身高、体重、体质指数、既往和近期腹部手术史、住院原因、合并症情况及数量等14项因子与腹内压的关系进行分析.结果住院患者平均腹内压为5.5mmHg,范围为0.4~12.8mmHg.各级体质指数相应的腹内压差异显著(P<0.01).男性腹内压比女性高2.0mmHg,差异显著(P<0.01).其他12种因素对腹内压无明显影响(P>0.05).腹内压回归方程R=0.507(P<0.01).结论正常腹内压可能受性别和体质指数影响,存在明显的个体差异.

    作者:杨新平;黄卫民;姜洪池 刊期: 2005年第03期

  • 两种不同计算方法评价反眉型切口白内障超声乳化术后手术性散光

    目的采用简单相减法和矢量分析法评价反眉型无缝线巩膜隧道切口白内障超声乳化术联合人工晶体植入术后手术性散光.方法对65例(72眼)行反眉型无缝线巩膜隧道切口白内障超声乳化术联合人工晶体植入术患者于手术前、术后1周及1个月行角膜地形图检查,测定其角膜散光.分别使用简单相减法及矢量分析法计算其术后1周及1个月的手术性散光.并对术后1周及1个月的视力进行统计.结果术前、术后1周及1月的平均角膜散光分别为(0.9±0.75)D、(1.0±0.50)D和(0.85±0.25)D,术后1周与术前相比差异有显著性(t=1.912,P<0.05),术后1个月与术前相比差异无显著性(t=1.638,P>0.05).用两种不同方法计算发现术后1个月的手术性散光值均低于术后1周.用简单相减法计算,二者比较差异无显著性(t=1.346,P>0.05);用矢量分析法计算,二者比较差异有显著性(t=1.764,P<0.05).且其结果显示术后1周为逆规性散光改变,而术后1个月为顺规性散光改变.裸眼视力≥0.5在术后1周占88.9%,1个月占91.7%.其中裸眼视力≥1.0者,在术后1周、1个月分别为18%及28.3%.结论矢量分析法是一种较好的计算手术性散光的方法.白内障超声乳化手术采用反眉型无缝线巩膜隧道切口术后手术性散光小,回退快,视力恢复快;逆规性散光飘移在术后1月内消失.角膜地形图仪检查是观察白内障超声乳化术后角膜散光变化较全面准确可靠的方法.

    作者:袁平;刘双珍;谭浅 刊期: 2005年第03期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心