学术投稿

培养肝细胞在蛋白质组学研究中的应用

刘友平;丁慧荣;何涛;代荣阳;李洪

关键词:肝细胞培养, 蛋白质组学, 乳小鼠, SDS-PAGE, 双向电泳
摘要:目的研究一种简便的肝细胞培养方法以培养出足够量的单一类型细胞,从而获得尽可能多的蛋白量进行细胞蛋白质组学分析.方法采用肝组织块贴壁法培养并传一代(目的是去组织块及其他间质细胞).收集细胞蛋白并进行SDS-PAGE及双向凝胶电泳.结果本实验方法可获得高密度、高纯度、高活力的肝实质细胞,细胞裂解后得到的蛋白质电泳图谱效果好.结论实验方法操作简单、经济、高效,能够满足一般实验室进行细胞蛋白质组学分析.
中国现代医学杂志相关文献
  • 改良胸腹联合切口贲门癌术后不放置胸腔闭式引流管106例临床分析

    目的探索老年贲门癌患者手术方式的改进及其临床应用观察.方法回顾性分析106例老年贲门癌患者应用改良胸腹联合切口贲门癌术后不放置胸腔闭式引流管的临床疗效及其临床应用价值.结果该组106例老年贲门癌患者,采用本手术方式治疗,其中5例术后存在少量胸腔积液,2例较少,1周后自行吸收;另3例经胸腔穿刺抽液后消失.本组病例术后均顺利康复.结论改良胸腹联合切口贲门癌术后不放置胸腔闭式引流管在老年贲门癌患者中有其临床优越性,有一定的临床应用价值,值得进一步发展和探讨.

    作者:赵国强;高新芳;邹芳 刊期: 2005年第03期

  • MRI的白质高信号与帕金森病的临床相关性研究

    目的探讨MRI的白质高信号与帕金森病(Parkinson's disease,PD)的临床特征之间的关系.方法对90例PD患者和60例年龄匹配的健康对照者进行MRI检查,对比分析PD组和对照组中MRI的白质高信号(包括侧脑室周围和半卵圆中心的白质高信号)的发生率,并研究白质高信号和PD的病程和病情等临床特征之间的关系.结果PD组比对照组侧脑室周围白质高信号的发生率明显增高(P<0.05),并且有侧脑室周围白质高信号的PD患者比无侧脑室周围白质高信号的PD患者具有更短的病程和更严重的病情(P<0.05).但是,PD组的半卵圆中心白质高信号的发生率与对照组无明显差异(P>0.05),并且有卵圆中心白质高信号的PD患者的病程和病情与无半卵圆中心白质高信号PD患者无明显差异(P>0.05).结论侧脑室周围白质高信号也许是PD的一个具有更快神经变性过程的临床亚型的标志.

    作者:黄海东;邓敬兰;宦怡;杨春敏;赵海涛;葛雅丽 刊期: 2005年第03期

  • 通腑合剂不同用药途径防治便秘的效果观察

    目的优选防治脑卒中患者便秘的用药方法.方法将186例脑卒中便秘患者随机分为观察组(65例)、对照1组(62例)和对照2组(59例),采用通腑合剂灌肠、口服通便灵胶囊和口服通腑合剂进行对比研究,观察疗效并比较效果.结果观察组第一次排便时间、再发便秘例数短于或少于对照组,再发便秘时间长于对照组;对照2组再发便秘时间长于对照组.结论通腑合剂灌肠防治便秘效果优于口服用药.

    作者:潘亚兰;葛莉 刊期: 2005年第03期

  • 慢性肝炎患者肝脏B超形态学、周围血细胞计数与肝纤维化分期之间的关系

    目的探讨慢性病毒性肝炎患者肝脏B超形态学改变、周围血细胞计数与肝纤维化病理分期之间的关系.方法对120例慢性病毒性肝炎患者行B超引导下肝活检及肝组织学纤维化分期;B超检查测定门静脉为主(MPV)、脾静脉(SPV)宽度及脾脏厚度;同时检测周围血细胞计数.比较上述指标之间的关系.结果120例慢性肝炎患者肝纤维化分期结果为:S0期15例,S1期40例,S2期25例,S3期24例,S4期16例.从S1~S4期,MPV、SPV增宽及脾脏增厚的比率逐渐上升,但MPV、SPV增宽的比率各期差别不大(P>0.05),而脾脏增厚的发生率各期差别较大(0.01<P<0.025).从S1~S4期,周围血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)及血小板(PLT)计数逐渐下降,尤以PLT下降明显,S3、S4期显著低于S1、S2期(P分别<0.05、0.01),其中S4期已在正常下限以下.RBC,WBC在S1、S2、S3期之间并无显著性差异(P>0.05),S4期则较前面各期显著下降(P分别<0.05,0.01).结论肝脏B超形态学改变、周围血细胞计数对慢性肝炎患者早期肝纤维化的诊断价值是有限的.脾脏肿大、SPV增宽、PLT计数下降可能对较严重的肝纤维化(S3或S4期)的诊断有一定作用.

    作者:刘贵生;陈欣;王萍;袁农;王宪智;管湘平 刊期: 2005年第03期

  • 巴氏染色法在精子顶体研究中的应用

    目的应用巴氏染色方法对临床上精子顶体区是否正常进行区分.方法分别对该研究所门诊111例精子标本进行巴氏染色后,每例标本在显微镜油镜下记数200个精子,观察顶体区.结果111例标本中,5例为无顶体圆头精子,23例为小顶体区精子,83例顶体区正常精子.结论巴氏染色法在临床上可对精子顶体区是否正常作出准确的判断.

    作者:朱文兵;范立青;曾亚荣;卢光琇 刊期: 2005年第03期

  • 曲马多辅助颈丛麻醉的临床观察

    目的观察曲马多对颈丛麻醉的辅助作用.方法选择30例颈丛麻醉下行甲状腺次全切除术患者,随机分为两组,每组15例,1组为曲马多组(T),2组为对照组(C).消毒时T组静脉给予曲马多1.0mg/kg,持续静脉滴注曲马多2.0 mg/(kg·h)至术毕.分别于手术切皮(T0)、切断颈前肌群(T1)、分离甲状腺上极(T2)、分离甲状腺下极(T3)时用视觉模拟评分评估疼痛情况,术中监测血压、心率和氧饱和度的变化.结果T组于T1,T2,T3各时点镇痛优等率明显高于对照组(P<0.05),且血压和心率的升高明显低于C组(P<0.05).结论曲马多可改善颈丛麻醉的效果,减轻心血管反应.

    作者:李志坚 刊期: 2005年第03期

  • 强化健康检查人性化服务的伦理理念

    如何在体检人性化服务中强化道德观伦理理念,以提高医院体检工作的质量和水平是作为保健人员需要思考的问题,本文将对健康检查人性化服务作些伦理思考.

    作者:欧佩芳;林伟青 刊期: 2005年第03期

  • 多媒体在组胚教学中的应用

    多媒体教学是运用计算机技术和课件来开展的教学活动,它是集声音、图像和动画为一体的视听教材.该文对多媒体与网络技术在组胚教学中的运用进行了探讨,阐明了多媒体教学具有声、像并茂的趣味性;图像逼真的直观性;教学内容的灵活性;容量超大的实用性等优势,是传统教育模式无法比拟的一种为先进的教学手段.

    作者:唐平 刊期: 2005年第03期

  • 膀胱癌术后吡柔比星膀胱灌注预防复发临床观察

    目的探讨膀胱癌术后复发的有效预防方法.方法手术治疗37例膀胱癌患者,术后用吡柔比星(THP)膀胱灌注治疗,并做随访和疗效观察.结果所有患者均获6~24个月的随访,复发6例,复发率为16.2%,并发症和副作用较轻.结论THP膀胱灌注预防膀胱癌术后复发有较好的疗效,且毒副作用少.

    作者:韩惟青 刊期: 2005年第03期

  • 微创术治疗幕上自发性脑出血的预后判别分析

    目的探讨影响自发性幕上脑出血患者微创术治疗预后的危险因素,建立微创术治疗脑出血术后30 d内预后的判别模型.方法回顾性分析97例经微创术治疗的脑出血患者的临床资料,对影响微创术治疗预后的危险因素进行单因素和多元逐步判别分析.结果97例患者中,术后30 d死亡27例(27.8%).单因素分析表明:意识水平、出血量、出血半球、伴发缺血性心脏病和微创手术时间是影响其预后的危险因素(意识水平P<0.001,余均P<0.05).多元逐步判别分析结果显示,仅有意识障碍、出血量2个危险因素可作为判别因子,应用建立的判别模型方程进行组内回代检验,显示判别模型方程准确度为75.3%.结论意识水平、出血量是影响脑出血患者微创术治疗预后的重要危险因素,由此建立的30 d生存和死亡的判别模型对临床具有一定的指导意义.

    作者:邓长青;原玉珍 刊期: 2005年第03期

  • 原发和复发直肠癌行全盆腔脏器切除术的疗效分析

    目的探讨局部进展期原发和复发直肠癌(locally advanced rectal cancer,LARC)行全盆腔脏器切除术(total pelvic exenteration,TPE)的疗效.方法对1989~2003年行TPE的28例原发癌和35例复发癌进行回顾性分析.结果全组根治性切除率85.7%,其中原发癌组92.9%,复发癌组80.0%.术后病理证实原发癌组盆腔脏器/组织受侵率67.9%,复发癌组盆腔脏器/组织受侵率100%.原发癌组仅14.3%侵犯盆壁组织;而复发癌组80.0%侵犯达盆壁组织.原发癌组、复发癌组手术死亡率分别为0、2.9%,术后并发症率分别为32.1%、51.4%.全组术后复发率68.4%、原发癌组61.5%、复发癌组72.0%.复发癌组盆腔局部复发率48.0%,高于原发癌组的15.4%(P<0.05).全组术后5年生存率23.7%,原发癌组、复发癌组分别为38.5%、16.0%(P>0.05).结论TPE是治疗LARC的有效方法,尽可能行根治性切除是改善LARC尤其是复发癌预后的关键.

    作者:潘义生;万远廉;刘玉村;汪欣;吴涛;赵建勋 刊期: 2005年第03期

  • 异氟醚预处理对猪心肺联合移植术后肺循环的影响

    目的观察异氟醚预处理对猪心肺联合移植后血液动力学的影响.方法健康猪20只,随机分为供体猪(n=10)和受体猪(n=10),受体猪再随机分为异氟醚组(n=5)及对照组(n=5),供体心肺均由4℃Eu-ro-Collni液保存20~30 min后移植入受体猪胸腔,术中异氟醚组1.16%异氟醚持续吸入(从切皮开始至心肺切下停止)加戊巴比妥钠维持麻醉,哌库溴铵维持肌松.对照组仅使用戊巴比妥钠维持麻醉,哌库溴铵维持肌松.结果两组猪在心脏复跳后半小时内MAP,CO与术前基础值相比均有明显降低(P<0.01),而PAP,PCWP,CVP,HR则较移植前显著升高(P<0.01).异氟醚组心脏复跳后30 min内HR,MAP,CO与对照组相比较无明显差异(P>0.05),而异氟醚组的PAP,PCWP,CVP却较对照组明显降低(P<0.05).结论异氟醚吸入预处理对心肺移植后的肺循环改变具有一定的保护作用.

    作者:覃军;徐道妙;郭曲练;申建初;蒋海河 刊期: 2005年第03期

  • 罗哌卡因复合吗啡、芬太尼术后镇痛对肠蠕动的影响

    目的比较罗哌卡因复合不同镇痛药物对手术后肠蠕动恢复情况的影响.方法选择180例择期手术病人,ASA Ⅰ,Ⅱ级,其中妇产科、普通外科各90例.各科手术病人根据不同的镇痛方案随机等分成3组,组Ⅰ:0.125%罗哌卡因+0.005%吗啡+0.005%氟哌利多,组Ⅱ:0.125%罗哌卡因+0.0005%芬太尼+0.005%氟哌利多,组Ⅲ:对照组(不实施病人术后自控镇痛).于镇痛治疗后4,8,12,24,36 h进行随访,观察疼痛程度、镇静状态、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、呼吸频率(RR)、脉搏氧饱和度(SpO2),并记录肠蠕动恢复时间.结果组Ⅰ与组Ⅱ均取得较好的镇痛效果,VAS评分显著低于组Ⅲ(P<0.01);普通外科病人肠蠕动恢复时间较妇产科病人长(P<0.05);组Ⅱ较组Ⅰ、Ⅲ肠蠕动恢复时间明显缩短(P<0.05).结论罗哌卡因复合吗啡、芬太尼行病人术后自控镇痛均能获得良好的效果,且罗哌卡因与芬太尼联用可缩短肠蠕动的恢复时间.

    作者:余奇劲;罗涛;蔡忠香;陈明森;周青山;黄海波 刊期: 2005年第03期

  • HO-1抗大鼠肾缺血/再灌注损伤的实验研究

    目的探讨诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达能否减轻随后的肾缺血/再灌注损伤(IRI)及其可能的机制.方法采用切除右肾,夹闭左肾动脉50 min/再灌注24 h的动物模型,30只雄性Wistar大鼠随机均分为3组:假手术组,缺血/再灌注(I/R)组,血晶素处理组(皮下注射血晶素30 mg/(kg·d),连续2 d),检测肾组织中HO-1蛋白表达及HO-1活力、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)和血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及组织形态学改变.结果血晶素明显诱导了肾内HO-1表达并使其活力增加,与I/R组比较,P<0.01;与假手术组比较,I/R组Cr,BUN,MDA升高(P<0.05),TAOC降低(P<0.05),组织学损伤严重.在I/R前血晶素诱导HO-1表达可逆转上述病理改变(P<0.05).结论肾内HO-1的诱导表达可明显改善大鼠随后的I/R性肾损伤,作用机制与其增强机体抗氧化能力有关.

    作者:张英;余鸿;汤军;郑福蓉;李著华 刊期: 2005年第03期

  • 妇科恶性肿瘤P16基因甲基化研究

    目的探讨妇科恶性肿瘤中p16基因甲基化及临床意义.方法采用甲基化特异性PCR(MSp)方法,检测不同病理类型和临床分期的206例妇科恶性肿瘤组织中p16基因启动子区域5'CpG岛甲基化状态,其中包括84例卵巢上皮性癌,62例子宫内膜癌和60例宫颈癌.结果正常对照组织及癌旁p16基因无甲基化;在卵巢上皮性癌、子宫内膜癌和宫颈癌中,甲基化率分别为5.95%(5/84)、24.19%(15/62)和21.67%(13/60).结论p16基因甲基化在妇科恶性肿瘤发生中起着重要作用.

    作者:原继荣;李佩玲;刘丽荣;李璞 刊期: 2005年第03期

  • 压力负荷心力衰竭大鼠心肌细胞内Rho/Rho激酶的表达及药物干预

    目的探讨升主动脉缩窄压力超负荷心力衰竭大鼠心肌细胞内Rho/Rho激酶的表达及法舒地尔(fasudil)--Rho/Rho激酶拮抗剂对心力衰竭的影响.方法制备升主动脉缩窄大鼠心力衰竭及假手术组(S组)模型.将升主动脉缩窄术后Wistar雌性大鼠随机分为2组,一组为心力衰竭组(H组),给予生理盐水0.1ml,腹腔注射,每日2次;一组为fasudil治疗组(F组),治疗组给予fasudil 5 mg/Kg,腹腔注射,每日2次;治疗4周.H组、F组及S组每组各10只大鼠.观察各组大鼠各项指标变化.结果H组鼠心肌细胞RhoA,Rho激酶mRNA表达显著增高,F组心肌细胞RhoA mRNA,Rho激酶mRNA表达下降.结论心肌细胞RhoA、Rho激酶表达与充血性心力衰竭密切相关,法舒地尔可有效降低心肌细胞内RhoA mRNA,Rho激酶mRNA表达,缓解心力衰竭症状,可能为一种新的、有效的治疗心力衰竭的血管扩张剂.

    作者:张曼;曾定尹 刊期: 2005年第03期

  • 严重胸外伤合并多发伤206例诊治体会

    目的探讨严重胸外伤合并多发伤的诊断和治疗.方法对收治的严重胸外伤伴多发伤206例患者,根据病史、临床表现、体检结果和必要的辅助检查,严密观察病情变化,作出早期诊断,并在保持患者呼吸道通畅、控制出血、防治休克和ARDS以及处理多发伤等方面作出相应的有效措施.结果治愈194例,死亡12例.结论对严重胸外伤伴多发伤患者,应详细全面检查,尽量避免误诊漏诊,首先处理严重威胁病人生命的外伤,争取在短的时间内对患者进行有效的救治.

    作者:王俊生 刊期: 2005年第03期

  • 腔内激光治疗术治疗下肢浅静脉曲张

    目的探讨静脉腔内激光治疗术治疗下肢浅静脉曲张的安全性和有效性.方法回顾分析240例(282条肢体)下肢浅静脉曲张患者应用DIOMED 810 m激光治疗仪的临床治疗效果及近期随访结果.结果该组所有患者术后均恢复良好,临床症状消失,无复发.经1~12个月随访观察,治疗静脉均完全闭塞,无再通发生.结论静脉腔内激光治疗术治疗下肢浅静脉曲张安全、有效、费用少;作为一种新的微创技术有望取代传统的开放手术.

    作者:赵堂海;黄英;蒋米尔;于永山;王海波;解远峰;郭明金 刊期: 2005年第03期

  • 研究生培养已成为学科发展的动力

    目的该文介绍了中国医科大学附属第二医院儿科系研究生招生以来所取得的成绩,证实了研究生培养加快了人才成长和梯队建设,促进学科医疗、教学、科研整体水平的提高,为学科今后发展奠定了基础.

    作者:郑秋兰;周文颖;王彬;赵立;李书琴 刊期: 2005年第03期

  • 培养肝细胞在蛋白质组学研究中的应用

    目的研究一种简便的肝细胞培养方法以培养出足够量的单一类型细胞,从而获得尽可能多的蛋白量进行细胞蛋白质组学分析.方法采用肝组织块贴壁法培养并传一代(目的是去组织块及其他间质细胞).收集细胞蛋白并进行SDS-PAGE及双向凝胶电泳.结果本实验方法可获得高密度、高纯度、高活力的肝实质细胞,细胞裂解后得到的蛋白质电泳图谱效果好.结论实验方法操作简单、经济、高效,能够满足一般实验室进行细胞蛋白质组学分析.

    作者:刘友平;丁慧荣;何涛;代荣阳;李洪 刊期: 2005年第03期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心