冯俊杰；罗雅艳；周俊梅；方丹云；曾谷城；晏辉钧；江丽芳
目的 通过研究旋毛虫感染鼠在过敏性哮喘发病时血清及支气管肺泡灌洗液中IL-4和IL-5的水平变化,探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘的作用.方法 取雌性、8周龄BALB/c小鼠20只,随机分为4组,A组为空白对照组,B组为单纯过敏性哮喘组,C组为感染旋毛虫后哮喘组,D组为单纯感染旋毛虫组.C、D组小鼠经灌胃法感染旋毛虫囊包幼虫200～300条；4周后,以卵清白蛋白(OVA)分别对B、C组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型；8周后,取小鼠血清、肺泡灌洗液,用ELISA法检测IL-4和IL-5水平.结果 血清中A、B、C、D组小鼠IL-4水平分别为(136.4948±31.1670)、(209.8004±21.5652)、(162.7892± 17.6829)、(182.7092±12.0841) pg/L; IL-5水平分别为(7.3101±1.8600)、(15.9997±2.28208)、(9.2411±1.7280)、(11.4135±2.10776) ng/L;与B组比较,C组小鼠IL-4、IL-5水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).肺泡灌洗液中A、B、C、D组小鼠IL-4水平分别为(169.1636±9.9997)、(232.9076± 17.9501)、(172.3508± 19.1895)、(193.0676± 16.5708) pg/L; IL-5水平分别为(12.8618±1.7799)、(23.8460±5.507)、(15.7560±4.5419)、(20.3440±3.9713) ng/L;与B组比较,C组小鼠IL-4、IL-5水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠IL-4、IL-5的表达有抑制作用.
作者：马萍；邢杰；闫玉文 刊期： 2013年第04期
目的 以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法,探索用于诺如病毒检测的可行性.方法 以387型菌株(GⅡ.4型)诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY.采用过碘酸钠法对IgY进行酶标.以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系.评价其灵敏度、特异度及重复性.并将其与金标准进行比较.结果 本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系低检测限达20 ng/ml,批内变异系数为1.021％,批间变异系数为1.150％.临床应用评价显示真阳性率为82.5％,真阴性率为81.82％.与金标准比较,检出率差异无统计学意义(P=0.629).结论 建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体Igy的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性.
作者：王云芸；戴迎春；聂军；蔡渊钧；胡婷婷；李建栋 刊期： 2013年第04期
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者在干扰素治疗过程中出现E抗原(HBeAg)/E抗体(抗-HBe)双阳性现象的临床意义.方法 回顾性分析317例CHB患者,观察聚乙二醇化干扰素(PEG-IFN-α)或普通干扰素(IFN-α)治疗过程中HBeAg/抗-HBe双阳性的发生率、持续时间和临床转归.结果 HBeAg阳性CHB患者在干扰素治疗过程中,HBeAg/抗-HBe双阳性发生率为25.2％.HBeAg/抗-HBe双阳性时HBeAg滴度中位数(范围)为3.45(1.03～187.54)S/CO,抗-HBe滴度为0.52(0.03～0.99)S/CO,均接近于各自截断值.出现过HBeAg/抗-HBe双阳性患者的HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率及HBeAg血清转换率分别为76.2％、62.5％、61.2％,高于未出现者的49.8％、35.9％、29.1％,差异均有统计学意义(P均＜0.05).二分类Logistic回归显示,HBeAg阳性患者中,男性更易出现HBeAg/抗-HBe双阳性(OR=1.887；95％ CI:1.013～3.518).结论 干扰素治疗过程中,CHB患者出现HBeAg/抗-HBe双阳性的现象并不罕见；其终临床转归显示更易获得HBeAg血清学转换.
作者：张健；张艳茹；李威；王俊洁；张浩；陈金军；周元平 刊期： 2013年第04期
目的 掌握肇庆市15岁以上居民高血压的流行及知晓情况,为开展高血压病人管理以及制定相关预防控制措施提供科学依据.方法 采用多阶段分层整群随机抽样方法,抽取1 212名15岁以上的常住居民开展调查.调查内容包括调查问卷、体格检查以及实验室检查.结果 调查共发现高血压患者235人,患病率为19.39％,标化患病率为16.21％;高血压与年龄的增长、肥胖和超重、高血脂症、吸烟和饮酒等因素有关(P＜0.01)；高血压危险因素和预防知识知晓率偏低.结论 通过多种方式和途径,进一步加强高血压防治知识的宣传及干预,倡导健康生活方式.
作者：钟伟强；林绍良；陆素颖 刊期： 2013年第04期
目的 探讨腹腔镜诊治极早期异位妊娠的临床应用价值.方法 回顾性分析2009年3月至2012年3月嘉峪关市第二人民医院门诊收治的拟诊异位妊娠50例(未破裂型)患者实施腹腔镜诊断手术,判断术前术后诊断的符合率.结果 经腹腔镜检查明确早期非破裂输卵管妊娠47例,明确诊断率94％(47/50),其中24例为流产型,23例为未破裂型,术中不能明确诊断3例,术后经观察明确为异位妊娠,予MTX治愈.结论 腹腔镜用于极早期的异位妊娠的诊治是很好的选择,但宜选择合适的手术时机.
作者：杨宏燕；宋菁华；胡春香；吕晓梅；孙明婧 刊期： 2013年第04期
目的 构建过表达和干扰RN181基因的肝癌MHCC97L重组细胞系,并研究RN181对该细胞体外增殖的影响.方法 基于基因克隆技术,构建plncx2-GFP-IRES/RN181重组载体,常规鉴定后,与pVSV-G共转染GP2-293细胞包装逆转录病毒.该病毒与RN181干扰慢病毒分别感染MHCC97L细胞,流式分选表达绿色荧光的细胞,RT-PCR、Western blotting鉴定后,CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖情况.结果 重组载体构建成功,重组细胞荧光良好,RT-PCR、Western blotting分别证实重组细胞中RN181的mRNA和蛋白表达水平在重组细胞系间均出现差异有统计学意义(P＜0.05).增殖实验显示RN181上调后细胞生长减慢,克隆数也显著少于对照组(P＜0.05),而RN181干扰后上述现象可得到逆转.结论 成功构建了过表达和干扰RN181的MHCC97L重组细胞系,初步证实了RN181在体外对MHCC97L细胞增殖的抑制作用.
作者：王小波；彭迎霞；张贤；尹江丽；李明 刊期： 2013年第04期
目的 为了解肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)在深圳市幼儿园健康儿童中的隐性感染情况,进一步探讨儿童手足口病(HFMD)隐性感染的危险因素.方法 采用酶联免疫(ELISA)法检测某幼儿园所有健康儿童血清中抗EV71和CoxA16的IgM抗体水平,同时采用病例对照研究分析EV71和CoxA 16病毒隐性感染的危险因素.结果 调查的350名健康儿童中,32名儿童感染了EV71或CoxA16病毒,隐性感染率为9.1％,其中CoxA16病毒感染率为7.4％,EV71病毒感染率为3.1％,同时感染CoxA16和EV71两种病毒的感染率为1.4％;暴发班级的感染率为17.0％,非暴发班级的感染率为6.5％.每天洗手3次及以上(OR=0.40,95％CI:0.19～0.85)、洗手使用清洁剂(OR=0.33,95％CI:0.16～0.68)为EV71、CoxA16病毒隐性感染保护因素；所在班级出现HFMD的聚集性病例(OR-3.80,95％CI:1.81～7.99)和儿童有咬玩具、咬手指习惯(OR=2.29,95％CI:1.06～4.92)为EV71、CoxA 16病毒隐性感染危险因素.结论 隐性感染在一定程度上影响着HFMD的流行,加强病人的密切接触者管理和宣传教育,尽可能降低隐性感染者的比例,对控制HFMD的暴发及流行有着重要的意义.
作者：陈兵；余光清；饶东平；陈亿雄；朱奕；吴泰顺 刊期： 2013年第04期
目的 探讨霉酚酸衍生物(JU95-07B)对人外周血单个核细胞(PBMC)产生IL-17和IFN-γ的抑制作用,为临床治疗炎症及自身免疫性疾病提供依据.方法 用anti-CD3+anti-CD28刺激PBMC,酶联免疫吸附法(ELISA)检测加入不同浓度JU95-07B及作用不同时间点的IL-17和IFN-γ水平.用流式细胞术(FCM)检测JU95-07B对T细胞不同亚群表达IL-17和IFN-γ的影响.用RT-PCR法测定JU95-07B对IL-17和IFN-γ mRNA的作用.结果 JU95-07B对anti-CD3 +anti-CD28诱导PBMC产生的IL-17和IFN-γ均呈剂量依赖性的抑制,与作用时间有关,早期无明显的抑制现象,12h后开始出现有统计学意义的抑制效果(P＜0.05),培养时间越长抑制效果越明显.JU95-07B可明显降低CD4+和CD8+T细胞产生IL-17和IFN-γ的比例,对IL-17的抑制率高于IFN-γ.此外,JU95-07B抑制IL-17和IFN-γmRNA的表达.结论 JU95-07B能有效抑制T细胞产生IL-17和IFN-γ.
作者：唐泽丽；黄河；江玉霞；张燕楠；杨滨燕；吴长有 刊期： 2013年第04期
目的 建立大鼠肝缺血再灌注模型,探讨该模型的制备及评价方法.方法 大鼠麻醉、开腹后用血管夹钳夹支配肝左叶、中叶的肝蒂,造成70％肝脏缺血,1h后放开血管夹恢复血供造成缺血再灌注损伤.根据再灌注时间不同分为2h组、4h组和24 h组,假手术组不进行钳夹肝蒂操作,观察各组肝脏生化指标及组织形态学变化.结果 整个手术过程大鼠均能耐受.与假手术组比较,缺血再灌注2、4、24 h组大鼠血清中谷丙转氨酸(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝组织匀浆MDA水平以及肝脏病理组织学Suzuki's评分均明显升高,且在4h组达到高(P＜0.05).结论 缺血1h后再灌注4h可制备佳的肝缺血再灌注模型.该模型操作简单,为临床肝缺血再灌注损伤研究提供了基础.
作者：孙萍萍；陈杰；袁芳；黎曙霞 刊期： 2013年第04期
目的 分析宜昌市2010-2011年新型农村合作医疗(以下简称新农合)中肺结核病患者医疗费用情况,探讨合理应用新农合经费,促进结核病防治工作.方法 收集宜昌市新型农村合作医疗肺结核病患者医疗费用报销相关文件、宜昌市2010-2011年参合肺结核病患者门诊和住院费用结算资料,经EXCEL统计分析.结果 2010-2011年两年期间,宜昌市新农合共补偿了5 045例肺结核患者,两年医疗总花费为14 778 314元,新农合总支出6 608 937元,患者自付8 169 377元,报销比例为44.72％,人均医疗费用2 929.30元.2011年享受新农合报销政策的肺结核患者数增加了231例,住院人次增加了145例,住院比例增加了0.38％.新农合支出费用增加了1 382 317元,患者平均费用增加了653元,报销比例略有增加,增幅为4.79％.结论 新农合是肺结核病患者的一项重要保障措施,成为当前结核病防治工作的重要推动力量.但尚需加强管理,制订更为科学合理的补偿办法,以充分发挥新农合在补偿结核病方面的作用.
作者：刘晓俊；周萍；程云舫；张培；袁凤花 刊期： 2013年第04期
目的 建立快速的检测方法对腹泻患者中的小肠结肠炎耶尔森菌进行快速检测.方法 利用析因设计试验方法建立并优化检测小肠结肠炎耶尔森菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并与普通PCR法对临床腹泻标本进行检测比较.结果 析因设计试验确定LAMP佳反应体系:Mg2++为2.0 mmol,内引物FIP/BIP为1.6 μmol,dNTPs为1.6 mmol,时间为60 min,反应温度为63℃.对12种细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌获得阳性扩增结果,小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别为38.05 fg和15 CFU/ml.对腹泻样本进行直接检测,检测限为150 CFU/g.539例腹泻患者粪便标本中,LAMP成功检出13例样本中含有小肠结肠炎耶尔森菌,普通PCR检出11例,灵敏度为100％,特异度为99.62％.结论 本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高,且操作简单、快速、检测成本低,适合基层单位及现场应用.
作者：罗敏红；胡婷婷；冀新凤；李美青；黄燕惠；陈慧芳；姚月娴；陈清；俞守义 刊期： 2013年第04期
目的 了解广东省居民的吸烟现状及与吸烟有关的知识、态度、行为等,为进一步开展控烟工作和推动省级控烟立法提供依据.方法 使用2007年广东省慢性病及其危险因素监测调查数据,采用多阶段分层随机抽样的方法,随机选取6 647名15～69岁的调查对象进行调查.结果 人群现在吸烟率为27.59％,男、女分别为56.10％、1.61％,男性明显高于女性(x2=2462.156,P＜0.01)；戒烟率为12.42％;开始吸第1支烟年龄中位数为16.0岁,开始每天吸烟年龄中位数为18.0岁.39.51％的不吸烟者受到被动吸烟的危害,家里是被动吸烟的主要场所.结论 广东省居民的吸烟率仍维持在较高水平,需进一步加强吸烟有害健康的宣传教育,提高居民对吸烟有害健康的认识,禁止在公共场所吸烟,降低人群吸烟率.
作者：何志辉；蔡秋茂；许晓君；许燕君；马文军 刊期： 2013年第04期
目的 探讨华支睾吸虫病的临床流行病学特征变化,为制定进一步的防治策略提供理论基础.方法 于2010年收集哈尔滨医科大学人体寄生虫病研究所就诊的疑似患者875人,采用Kato-Katz方法和酶联免疫方法分别对受检者的1 950份粪便样本和875份血清样本进行检测,同时收集患者的基本信息.结果 受检者中华支睾吸虫感染患者317例,感染率为36.23％,该病的流行多为散发病例.男性感染率为39.94％,明显高于女性的26.36％,差异有统计学意义(P＜0.001).感染率随年龄增长而上升,20～69岁人群感染率较高,其中40～49岁人群感染率高(42.71％).农村患者感染率(42.27％)高于城市(20.33％),反复感染患者常见,吃生鱼(虾)习惯具有高的感染风险(OR=28.507).结论 华支睾吸虫感染率较高,揭示该病流行病学特征和风险因素,将为加速控制和消灭华支睾吸虫病提供依据.
作者：韩甦；张晓丽；文景山；李懿宏；舒晶；董云霞；凌虹；张凤民 刊期： 2013年第04期
目的 了解广州地区无偿献血人群HBsAg阳性的流行状况,为制定及招募安全血源提供科学依据.方法 回顾性调查分析广州地区2000年1月至2010年12月无偿献血人群2 520 179例,对HBsAg检测结果进行统计分析.结果 2000-2010年广州地区无偿献血者HBsAg阳性率为0.93％,其中2007-2010年间HBsAg阳性率有升高趋势(x2=61.024,P＜0.001).HBsAg阳性率在不同性别、年龄、职业、学历间差异均有统计学意义(x2=3596,P＜0.001;x2=442.6,P＜0.001;x2=216.4,P＜0.001；x2=2013.0,P＜0.001).男性HBsAg阳性率高于女性；18～岁组HBsAg阳性率低于其他年龄组；工人、农民及学历较低者有较高的HBsAg阳性率.结论 广州地区无偿献血人群HBsAg保持较平稳流行率,2007-2010年有升高趋势,应进一步加强乙肝防控工作.鼓励年青人献血更有利于保障临床；输血安全.
作者：熊华平；戎霞；许茹；王敏；黄珂；黄杰庭；廖峭；付涌水 刊期： 2013年第04期
目的 研究2006年深圳市急性肠胃炎发病的主要病因.方法 收集深圳急性肠胃炎粪便样本200份(包含122份散发样本和78份暴发样本),采用RT-PCR的方法进行急性肠胃炎相关病毒检测.结果 44％ (88/200)的样本为诺如病毒阳性,9％(18/200)为轮状病毒A阳性,2％(4/200)为星状病毒阳性,2％ (4/200)为肠道腺病毒阳性,还有8％ (16/200)的样本为混合感染.其中散发样本中检出腺病毒、轮状病毒、星状病毒和诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ 5种病毒,而诺如病毒GⅡ是3次暴发样本中的唯一病原.对22例NoⅤ GⅡ阳性样本测序后的系统发育分析表明NoⅤ GⅡ.4 variants 2006b cluster是造成2006年深圳市肠胃炎暴发的主要诱因,其次为NoⅤ GⅡ.12和GⅡ.4 Hunter簇.结论 NoⅤ GⅡ.4是2006年流行于深圳的主要病毒株.
作者：谢飞飞；何雅青；程锦泉；姜君；杨洪；赵金银；张海龙；姚相杰；周俊宜 刊期： 2013年第04期
目的 建立登革病毒2型(DENV-2)前膜蛋白(prM)的原核稳定表达系统,并制备prM多克隆抗体,研究登革病毒特异性prM抗体的中和作用及抗体依赖性感染增强作用(ADE).方法 应用大肠杆菌表达系统表达全长DENV-2 prM蛋白,经电洗脱法纯化重组蛋白,免疫家兔,制备兔抗prM蛋白多抗；应用空斑减数中和试验(PRNT)和流式细胞术(FCM)分别检测prM兔多克隆抗体的中和作用和ADE效应.结果 重组prM蛋白在原核系统可获得高效表达,prM蛋白的表达量占大肠杆菌全菌蛋白的15％左右；其免疫血清经Western blotting法证实为登革病毒特异性prM多克隆抗体,用ELISA法检测效价为1:800 000.PRNT表明,prM抗体对成熟和不成熟DENV-2感染C6/36细胞中和作用有限,大中和程度分别为49.84％和50.22％；FCM结果表明,prM抗体能在较大的抗体稀释度范围(10-2～10-6)增强成熟和不成熟DENV-2感染,且在10-3稀释度时达到高峰.结论 重组DENV-2prM蛋白有很强的免疫原性,其诱生的prM抗体对登革病毒仅有较弱的中和活性,但却呈现出较强的ADE作用,揭示prM抗体是一种感染增强性抗体.
作者：冯俊杰；罗雅艳；周俊梅；方丹云；曾谷城；晏辉钧；江丽芳 刊期： 2013年第04期
目的 研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系.方法 收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性；PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO mRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达.结果 本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高；所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87％,敏感菌株与耐药菌株均有CarO mRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义；SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同.结论 CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关.
作者：范敏；梁家隐；冼盈；李志涛；孙希；吴忠道；张扣兴 刊期： 2013年第04期
目的 了解宝安区感染性腹泻的病原菌构成情况,为控制感染性腹泻提供病原学依据.方法 采集辖区内2011年5月至2012年4月感染性腹泻患者的粪便标本,进行病原菌分离、鉴定,并对检测结果统计分析.结果 检测标本2 310份,病原菌的检出率为12.29％(284/2 310).分离菌株以副溶血性弧菌为主,其次是沙门菌和肠致泻性大肠埃希菌；夏秋季为高发季节,副溶血性弧菌检出高峰在6-9月;沙门菌感染中婴幼儿占52.56％,副溶血性弧菌在20～40岁多见.结论 副溶血性弧菌是辖区内感染性腹泻的主要病原菌,加强夏秋季海产品的监测和针对特定人群的饮食安全教育是腹泻防控的重要措施.
作者：余光清；雷蕾；茌静；郑晓晨；肖锦晖 刊期： 2013年第04期
目的 克隆家兔泛素样小分子修饰因子-2 (SUMO-2)基因,并预测其蛋白质结构和功能.方法 应用分子克隆技术从家兔肝组织中克隆SUMO-2基因,用DNAMAN、CBS等生物软件及网络分析平台分析克隆所得到的SUMO-2基因序列及其编码的蛋白结构.结果 测序结果显示成功克隆家兔SUMO-2基因片段,序列分析显示氢基酸序列与其他物种源性SUMO-2同源性较高,家兔SUMO-2蛋白氨基酸序列相对分子质量为10 826.9,等电点为4.70,蛋白主要以无规则卷曲形式存在(56.84％),可能含有1个N-糖基化位点,2个N-豆蔻酰化位点,1个丝氨酸磷酸化位点,2个苏氨酸磷酸化位点及2个蛋白激酶C磷酸化位点.元信号肽区域,元跨膜区,该蛋白可能为可溶性蛋白.结论 成功克隆家兔SUMO-2基因,为进一步研究SUMO-2与肝纤维化的关系及其功能奠定基础.
作者：郑科；沈天伦；张培；李思思；宋秋怡；张茹；朱丹丹；段义农 刊期： 2013年第04期
目的 建立产后抑郁症动物模型,观察抑郁母鼠产后异常的母性行为,建立产后抑郁症动物模型的评估方案.方法 将32只受孕大鼠随机分为3组:地塞米松组(n=10),自受孕第1天起皮下注射生理盐水1 ml/(Kg·d),第15天起,注射地塞米松0·2 mg/(kg·d)至分娩；生理盐水对照组(n=8),孕全程给予生理盐水1 ml/(Kg·d)；空白对照组(n=5),自然饲养.母鼠分娩后,观察其对幼崽的关爱行为及自身积极和消极行为,行强迫游泳实验,记录幼崽第1周内的体重增量.结果 地塞米松组母鼠与空白对照组和盐水对照组比较,产后对幼崽关爱行为减少(P＜0.05),崽鼠生后1周内体重增长低(P＜0.01),自身积极活动较少(P＜0.05,P＜0.01),消极活动较多(P＜0.01)；在强迫游泳实验中,地塞米松组母鼠挣扎自救行为持续时间短(P＜0.01),较早进入不动绝望状态(P＜0.01),持续较长时间(P＜0.01).结论 孕晚期短期低剂量的地塞米松注射可诱导母鼠出现产后抑郁症状；观察母鼠在强迫游泳实验中的表现及其对幼崽的关爱行为能够对母鼠抑郁行为进行评估.
作者：万小妍；张婷珍；黄凯凯；黄增鸿；王雪萍；姜傥 刊期： 2013年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
