钟伟强；林绍良；陆素颖
目的 对广州市及周边地区手足口病(HFMD)的流行病学和病原学特征进行分析.方法 收集2011年广州市及其周边地区手足口病病例968份,采用荧光定量RT-PCR方法对采集的标本进行肠道病毒(EV)核酸检测,将其分为肠道病71型(EV71)、萨克奇病毒A组16型(CA16)、非EV71、CA16阳性肠道病毒(N)三类,分离部分EV71毒株并进行全基因测序和分析.并用生物信息学软件进行病毒基因特征分析,经在线比对后进行EV型别鉴定.结果 分析显示2011年广州市及周边地区HFMD的高发年龄段为年龄小于4岁的儿童,1～2岁婴幼儿发病率高；5-7月为发病高峰期；EV71和CA16为HFMD的主要病原；但有24.79％的病例由其他肠道病毒(EV)型别引起.基于全基因序列构建种系发生进化树显示,所分离的6株EV71毒株与C4亚型毒株具有近的亲缘性和高的同源性.结论 2011年EV71和CA16为广州市及周边地区流行的主要病原,EV71病毒株分离株属于C4型,且遗传性较稳定,但存在部分其他型别EV引起HFMD.
作者：关琳琳；张定梅；徐霖；汪杨；罗燕芬；郑芸；曹开源 刊期： 2013年第04期
目的 建立登革病毒2型(DENV-2)前膜蛋白(prM)的原核稳定表达系统,并制备prM多克隆抗体,研究登革病毒特异性prM抗体的中和作用及抗体依赖性感染增强作用(ADE).方法 应用大肠杆菌表达系统表达全长DENV-2 prM蛋白,经电洗脱法纯化重组蛋白,免疫家兔,制备兔抗prM蛋白多抗；应用空斑减数中和试验(PRNT)和流式细胞术(FCM)分别检测prM兔多克隆抗体的中和作用和ADE效应.结果 重组prM蛋白在原核系统可获得高效表达,prM蛋白的表达量占大肠杆菌全菌蛋白的15％左右；其免疫血清经Western blotting法证实为登革病毒特异性prM多克隆抗体,用ELISA法检测效价为1:800 000.PRNT表明,prM抗体对成熟和不成熟DENV-2感染C6/36细胞中和作用有限,大中和程度分别为49.84％和50.22％；FCM结果表明,prM抗体能在较大的抗体稀释度范围(10-2～10-6)增强成熟和不成熟DENV-2感染,且在10-3稀释度时达到高峰.结论 重组DENV-2prM蛋白有很强的免疫原性,其诱生的prM抗体对登革病毒仅有较弱的中和活性,但却呈现出较强的ADE作用,揭示prM抗体是一种感染增强性抗体.
作者：冯俊杰；罗雅艳；周俊梅；方丹云；曾谷城；晏辉钧；江丽芳 刊期： 2013年第04期
目的 研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系.方法 收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性；PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO mRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达.结果 本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高；所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87％,敏感菌株与耐药菌株均有CarO mRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义；SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同.结论 CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关.
作者：范敏；梁家隐；冼盈；李志涛；孙希；吴忠道；张扣兴 刊期： 2013年第04期
目的 探讨霉酚酸衍生物(JU95-07B)对人外周血单个核细胞(PBMC)产生IL-17和IFN-γ的抑制作用,为临床治疗炎症及自身免疫性疾病提供依据.方法 用anti-CD3+anti-CD28刺激PBMC,酶联免疫吸附法(ELISA)检测加入不同浓度JU95-07B及作用不同时间点的IL-17和IFN-γ水平.用流式细胞术(FCM)检测JU95-07B对T细胞不同亚群表达IL-17和IFN-γ的影响.用RT-PCR法测定JU95-07B对IL-17和IFN-γ mRNA的作用.结果 JU95-07B对anti-CD3 +anti-CD28诱导PBMC产生的IL-17和IFN-γ均呈剂量依赖性的抑制,与作用时间有关,早期无明显的抑制现象,12h后开始出现有统计学意义的抑制效果(P＜0.05),培养时间越长抑制效果越明显.JU95-07B可明显降低CD4+和CD8+T细胞产生IL-17和IFN-γ的比例,对IL-17的抑制率高于IFN-γ.此外,JU95-07B抑制IL-17和IFN-γmRNA的表达.结论 JU95-07B能有效抑制T细胞产生IL-17和IFN-γ.
作者：唐泽丽；黄河；江玉霞；张燕楠；杨滨燕；吴长有 刊期： 2013年第04期
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者在干扰素治疗过程中出现E抗原(HBeAg)/E抗体(抗-HBe)双阳性现象的临床意义.方法 回顾性分析317例CHB患者,观察聚乙二醇化干扰素(PEG-IFN-α)或普通干扰素(IFN-α)治疗过程中HBeAg/抗-HBe双阳性的发生率、持续时间和临床转归.结果 HBeAg阳性CHB患者在干扰素治疗过程中,HBeAg/抗-HBe双阳性发生率为25.2％.HBeAg/抗-HBe双阳性时HBeAg滴度中位数(范围)为3.45(1.03～187.54)S/CO,抗-HBe滴度为0.52(0.03～0.99)S/CO,均接近于各自截断值.出现过HBeAg/抗-HBe双阳性患者的HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率及HBeAg血清转换率分别为76.2％、62.5％、61.2％,高于未出现者的49.8％、35.9％、29.1％,差异均有统计学意义(P均＜0.05).二分类Logistic回归显示,HBeAg阳性患者中,男性更易出现HBeAg/抗-HBe双阳性(OR=1.887；95％ CI:1.013～3.518).结论 干扰素治疗过程中,CHB患者出现HBeAg/抗-HBe双阳性的现象并不罕见；其终临床转归显示更易获得HBeAg血清学转换.
作者：张健；张艳茹；李威；王俊洁；张浩；陈金军；周元平 刊期： 2013年第04期
目的 建立快速的检测方法对腹泻患者中的小肠结肠炎耶尔森菌进行快速检测.方法 利用析因设计试验方法建立并优化检测小肠结肠炎耶尔森菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并与普通PCR法对临床腹泻标本进行检测比较.结果 析因设计试验确定LAMP佳反应体系:Mg2++为2.0 mmol,内引物FIP/BIP为1.6 μmol,dNTPs为1.6 mmol,时间为60 min,反应温度为63℃.对12种细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌获得阳性扩增结果,小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别为38.05 fg和15 CFU/ml.对腹泻样本进行直接检测,检测限为150 CFU/g.539例腹泻患者粪便标本中,LAMP成功检出13例样本中含有小肠结肠炎耶尔森菌,普通PCR检出11例,灵敏度为100％,特异度为99.62％.结论 本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高,且操作简单、快速、检测成本低,适合基层单位及现场应用.
作者：罗敏红；胡婷婷；冀新凤；李美青；黄燕惠；陈慧芳；姚月娴；陈清；俞守义 刊期： 2013年第04期
目的 评估江门市各辖市区脊髓灰质炎野病毒输入与传播风险,科学指导制定预防控制策略.方法 根据输入风险、AFP病例监测、人群免疫情况等指标综合分析评价,评估江门市各市区脊灰野病毒输入与传播的风险.结果 2009-2011年报告35例AFP病例,报告后48 h内调查率为97.14％；各市区脊灰疫苗接种率和脊灰疫苗快速评估接种率均≥95％;2010年随机抽查56人进行脊灰抗体检测,脊灰Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IgG抗体阳性率分别为91.07％、94.64％、92.86％.3年麻疹平均发病率为0.51/10万,高的是蓬江区2.21/10万,其他市区均＜1/10万；开平市、江海区风险评估的综合评分为45、42分,为高风险地区.结论 江门市存在脊灰野毒株输入的风险,各市区尤其是高风险市区应完善AFP病例监测工作.
作者：黄国；叶秀华；陈成连 刊期： 2013年第04期
目的 观察硝普钠与硝酸甘油治疗高血压危象并急性左心功能不全患者的疗效.方法 选择深圳市龙岗中心医院2008年8月至2012年8月患高血压危象并急性左心功能不全的患者52例为研究对象,随机分为硝普钠组和硝酸甘油组,每组26例；在综合治疗的基础上硝普钠组使用微量泵注射硝普钠治疗,硝酸甘油组则给予硝酸甘油治疗,两组治疗后观察3h,监测患者血压、呼吸、心率等情况.结果 治疗后两组患者在血压、呼吸及心率方面均较治疗前改善,但硝普钠组患者血压、呼吸及心率改善程度优于硝酸甘油组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).硝普钠组总有效率为92.3％,硝酸甘油组为69.2％,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后硝普钠组收缩压、舒张压、心率恢复正常的时间较硝酸甘油组快,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在抢救高血压危象并急性左心功能不全患者时使用硝普钠的疗效优于硝酸甘油,值得推广应用.
作者：唐细生；胡平 刊期： 2013年第04期
目的 了解乙肝疫苗免疫失败者的HBV S基因的变异情况.方法 采用流行病学、ELISA与分子生物学方法,筛选乙肝疫苗免疫失败者.采用聚合酶链反应(PCR)、基因克隆和测序的方法,对乙肝疫苗免疫失败者的HBVS基因进行分析,并与HBV参考序列S基因进行比较,分析其变异情况.结果 从2 564份受检者中,筛选出2例(0.78‰)HBsAg(-)/HBeAg (+)/HBcAb(+)乙肝疫苗免疫失败者(HBs1、HBs2),经HBV DNA荧光定量PCR检测和HBV S基因PCR扩增,结果均为阳性,为B基因型.其S基因序列与参考序列(JX429908.1)相比,同源性为98.57％,且乙肝疫苗免疫失败者S基因在第363位和第467位分别南野生型的C变为A、G变为A,HBsAg 121位和156位氨基酸C和W缺失.结论 乙肝疫苗免疫失败者HBV S基因上第363位和第467位碱基存在错义突变(C→A和G→A),改变了HBsAg的结构和抗原性.
作者：蒋海青；朱平安；谢锦尧；金娴；肖娜；樊春卉；赵毅 刊期： 2013年第04期
目的 研究水通道蛋白4(AQP-4)在广州管圆线虫感染大小鼠脑组织中的表达水平及其与脑水肿的关系.方法 在不同感染时期(0d、7d、14 d、21 d),用Realtime PCR法检测大鼠感染不同时间组,及米诺环素给药+感染组和单纯感染组小鼠脑组织中AQP-4的表达水平,测定各组小鼠脑组织含水量.结果 大鼠感染广州管圆线虫后脑组织中AQP-4的表达水平在7d时有升高,而其他时间都无明显变化.小鼠感染广州管圆线虫后,脑组织中的AQP-4水平明显升高,且成持续升高状态.用米诺环素抑制小胶质细胞后,给药组小鼠脑内AQP-4的水平明显下降,脑组织含水量也低于单纯感染组.结论 AQP-4与广州管圆线虫感染所致的小鼠脑水肿密切相关,小胶质细胞可能是参与调节这一过程的重要细胞.
作者：魏洁；陈炜；吴峰；梁锦仪；郑焕钦；孙希；吕志跃；张萍；吴忠道 刊期： 2013年第04期
目的 探讨华支睾吸虫病的临床流行病学特征变化,为制定进一步的防治策略提供理论基础.方法 于2010年收集哈尔滨医科大学人体寄生虫病研究所就诊的疑似患者875人,采用Kato-Katz方法和酶联免疫方法分别对受检者的1 950份粪便样本和875份血清样本进行检测,同时收集患者的基本信息.结果 受检者中华支睾吸虫感染患者317例,感染率为36.23％,该病的流行多为散发病例.男性感染率为39.94％,明显高于女性的26.36％,差异有统计学意义(P＜0.001).感染率随年龄增长而上升,20～69岁人群感染率较高,其中40～49岁人群感染率高(42.71％).农村患者感染率(42.27％)高于城市(20.33％),反复感染患者常见,吃生鱼(虾)习惯具有高的感染风险(OR=28.507).结论 华支睾吸虫感染率较高,揭示该病流行病学特征和风险因素,将为加速控制和消灭华支睾吸虫病提供依据.
作者：韩甦；张晓丽；文景山；李懿宏；舒晶；董云霞；凌虹；张凤民 刊期： 2013年第04期
目的 在原核系统中表达全长HIV-1 p24抗原,对其抗原性进行鉴定,探讨其对HIV早期诊断的价值.方法 利用PCR技术从含有HIV-1 gag基因质粒PTM-1中扩增p24蛋白基因,通过酶切消化后连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希菌BL21 (DE3),经IPTG诱导,表达p24抗原.通过ELISA和Western blotting (WB)法检测表达产物的免疫反应活性及特异性.结果 PCR产物和构建的重组质粒pET28a-p24经双酶切均显示约690 bpDNA片段,与预期p24抗原全基因片段大小一致.SDS-PAGE电泳可见纯化蛋白为1条相对分子量约26×103 Mr的外源表达蛋白带,与预期大小一致.ELISA及WB实验证实表达的p24抗原具有较好的活性及特异性.时间分辨荧光免疫双抗体夹心法显示与市售p24抗原线性一致.结论 构建了HIV-1 p24/pET28a原核高效表达系统,表达产物与市售的p24抗原具有相似的抗原性.
作者：刘华琴；李鹏；吴英松；李珍；魏威；董文其；王萍 刊期： 2013年第04期
目的 克隆家兔泛素样小分子修饰因子-2 (SUMO-2)基因,并预测其蛋白质结构和功能.方法 应用分子克隆技术从家兔肝组织中克隆SUMO-2基因,用DNAMAN、CBS等生物软件及网络分析平台分析克隆所得到的SUMO-2基因序列及其编码的蛋白结构.结果 测序结果显示成功克隆家兔SUMO-2基因片段,序列分析显示氢基酸序列与其他物种源性SUMO-2同源性较高,家兔SUMO-2蛋白氨基酸序列相对分子质量为10 826.9,等电点为4.70,蛋白主要以无规则卷曲形式存在(56.84％),可能含有1个N-糖基化位点,2个N-豆蔻酰化位点,1个丝氨酸磷酸化位点,2个苏氨酸磷酸化位点及2个蛋白激酶C磷酸化位点.元信号肽区域,元跨膜区,该蛋白可能为可溶性蛋白.结论 成功克隆家兔SUMO-2基因,为进一步研究SUMO-2与肝纤维化的关系及其功能奠定基础.
作者：郑科；沈天伦；张培；李思思；宋秋怡；张茹；朱丹丹；段义农 刊期： 2013年第04期
目的 探讨吉非替尼(Gefitinib)与染料木黄酮(Genistein)联合应用对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975增殖与凋亡的影响.方法 采用MTT比色法观察两种药物单用及联用对人非小细胞肺癌细胞株H1975细胞增殖的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blotting检测凋亡相关基因PARP和caspase-3的蛋白水平.结果 Gefitinib与Genistein联合用药对H1975细胞的抗增殖效应优于Gefitinib单药组,协同增效作用明显,抑制率升高,并呈现剂量依赖的抗增殖效应,差异有统计学意义(P＜0.05)；两药联用细胞凋亡率为(68.70±7.13)％,与正常对照组的(3.12±0.75)％、Genistein组的(35.95±2.32)％、Gefitinib组的(42.03±4.38)％比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；与单药组比较,两药联用组PARP和caspase-3的断裂片段水平增加.结论 Genistein可以增强Gefitinib对H1975细胞的增殖抑制作用并促进肿瘤细胞的凋亡.
作者：张哲；郭进强；朱航；崔俊英；熊日波；万为人；罗炳德 刊期： 2013年第04期
目的 了解广州地区无偿献血人群HBsAg阳性的流行状况,为制定及招募安全血源提供科学依据.方法 回顾性调查分析广州地区2000年1月至2010年12月无偿献血人群2 520 179例,对HBsAg检测结果进行统计分析.结果 2000-2010年广州地区无偿献血者HBsAg阳性率为0.93％,其中2007-2010年间HBsAg阳性率有升高趋势(x2=61.024,P＜0.001).HBsAg阳性率在不同性别、年龄、职业、学历间差异均有统计学意义(x2=3596,P＜0.001;x2=442.6,P＜0.001;x2=216.4,P＜0.001；x2=2013.0,P＜0.001).男性HBsAg阳性率高于女性；18～岁组HBsAg阳性率低于其他年龄组；工人、农民及学历较低者有较高的HBsAg阳性率.结论 广州地区无偿献血人群HBsAg保持较平稳流行率,2007-2010年有升高趋势,应进一步加强乙肝防控工作.鼓励年青人献血更有利于保障临床；输血安全.
作者：熊华平；戎霞；许茹；王敏；黄珂；黄杰庭；廖峭；付涌水 刊期： 2013年第04期
目的 掌握肇庆市15岁以上居民高血压的流行及知晓情况,为开展高血压病人管理以及制定相关预防控制措施提供科学依据.方法 采用多阶段分层整群随机抽样方法,抽取1 212名15岁以上的常住居民开展调查.调查内容包括调查问卷、体格检查以及实验室检查.结果 调查共发现高血压患者235人,患病率为19.39％,标化患病率为16.21％;高血压与年龄的增长、肥胖和超重、高血脂症、吸烟和饮酒等因素有关(P＜0.01)；高血压危险因素和预防知识知晓率偏低.结论 通过多种方式和途径,进一步加强高血压防治知识的宣传及干预,倡导健康生活方式.
作者：钟伟强；林绍良；陆素颖 刊期： 2013年第04期
目的 分析广州市2011年登革热疫情流行病学特征,为登革热预防控制工作提供参考依据.方法 对广州市疫情监测与报告信息系统和实验室监测信息系统,以及相关的现场调查报告、疫情简报等进行统计与分析.结果 广州市201 1年报告登革热病例51例,本地感染33例,输入性病例18例,累计发病率0.4/10万,无死亡病例,输入性病例占全年报告病例的35.29％.除1、2、7月外,其余月份均有病例；共报告突发公共卫生事件1起,为海珠区龙凤街登革热暴发疫情(16例).实验室监测表明,2011年广州市病毒流行株为登革Ⅰ型病毒.结论 2011年广州市登革热流行处于散发流行状态,输入性病例或异地来广州就诊的登革热病例对广州市登革热流行存在潜在风险.
作者：曹庆；罗雷；景钦隆；李意兰；魏跃红 刊期： 2013年第04期
目的 以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法,探索用于诺如病毒检测的可行性.方法 以387型菌株(GⅡ.4型)诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY.采用过碘酸钠法对IgY进行酶标.以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系.评价其灵敏度、特异度及重复性.并将其与金标准进行比较.结果 本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系低检测限达20 ng/ml,批内变异系数为1.021％,批间变异系数为1.150％.临床应用评价显示真阳性率为82.5％,真阴性率为81.82％.与金标准比较,检出率差异无统计学意义(P=0.629).结论 建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体Igy的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性.
作者：王云芸；戴迎春；聂军；蔡渊钧；胡婷婷；李建栋 刊期： 2013年第04期
目的 建立大鼠肝缺血再灌注模型,探讨该模型的制备及评价方法.方法 大鼠麻醉、开腹后用血管夹钳夹支配肝左叶、中叶的肝蒂,造成70％肝脏缺血,1h后放开血管夹恢复血供造成缺血再灌注损伤.根据再灌注时间不同分为2h组、4h组和24 h组,假手术组不进行钳夹肝蒂操作,观察各组肝脏生化指标及组织形态学变化.结果 整个手术过程大鼠均能耐受.与假手术组比较,缺血再灌注2、4、24 h组大鼠血清中谷丙转氨酸(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝组织匀浆MDA水平以及肝脏病理组织学Suzuki's评分均明显升高,且在4h组达到高(P＜0.05).结论 缺血1h后再灌注4h可制备佳的肝缺血再灌注模型.该模型操作简单,为临床肝缺血再灌注损伤研究提供了基础.
作者：孙萍萍；陈杰；袁芳；黎曙霞 刊期： 2013年第04期
目的 为了解肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)在深圳市幼儿园健康儿童中的隐性感染情况,进一步探讨儿童手足口病(HFMD)隐性感染的危险因素.方法 采用酶联免疫(ELISA)法检测某幼儿园所有健康儿童血清中抗EV71和CoxA16的IgM抗体水平,同时采用病例对照研究分析EV71和CoxA 16病毒隐性感染的危险因素.结果 调查的350名健康儿童中,32名儿童感染了EV71或CoxA16病毒,隐性感染率为9.1％,其中CoxA16病毒感染率为7.4％,EV71病毒感染率为3.1％,同时感染CoxA16和EV71两种病毒的感染率为1.4％;暴发班级的感染率为17.0％,非暴发班级的感染率为6.5％.每天洗手3次及以上(OR=0.40,95％CI:0.19～0.85)、洗手使用清洁剂(OR=0.33,95％CI:0.16～0.68)为EV71、CoxA16病毒隐性感染保护因素；所在班级出现HFMD的聚集性病例(OR-3.80,95％CI:1.81～7.99)和儿童有咬玩具、咬手指习惯(OR=2.29,95％CI:1.06～4.92)为EV71、CoxA 16病毒隐性感染危险因素.结论 隐性感染在一定程度上影响着HFMD的流行,加强病人的密切接触者管理和宣传教育,尽可能降低隐性感染者的比例,对控制HFMD的暴发及流行有着重要的意义.
作者：陈兵；余光清；饶东平；陈亿雄；朱奕；吴泰顺 刊期： 2013年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
