黄国；叶秀华；陈成连
目的 探讨腹腔镜诊治极早期异位妊娠的临床应用价值.方法 回顾性分析2009年3月至2012年3月嘉峪关市第二人民医院门诊收治的拟诊异位妊娠50例(未破裂型)患者实施腹腔镜诊断手术,判断术前术后诊断的符合率.结果 经腹腔镜检查明确早期非破裂输卵管妊娠47例,明确诊断率94％(47/50),其中24例为流产型,23例为未破裂型,术中不能明确诊断3例,术后经观察明确为异位妊娠,予MTX治愈.结论 腹腔镜用于极早期的异位妊娠的诊治是很好的选择,但宜选择合适的手术时机.
作者：杨宏燕；宋菁华；胡春香；吕晓梅；孙明婧 刊期： 2013年第04期
目的 以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法,探索用于诺如病毒检测的可行性.方法 以387型菌株(GⅡ.4型)诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY.采用过碘酸钠法对IgY进行酶标.以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系.评价其灵敏度、特异度及重复性.并将其与金标准进行比较.结果 本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系低检测限达20 ng/ml,批内变异系数为1.021％,批间变异系数为1.150％.临床应用评价显示真阳性率为82.5％,真阴性率为81.82％.与金标准比较,检出率差异无统计学意义(P=0.629).结论 建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体Igy的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性.
作者：王云芸；戴迎春；聂军；蔡渊钧；胡婷婷；李建栋 刊期： 2013年第04期
目的 分析广州市2011年登革热疫情流行病学特征,为登革热预防控制工作提供参考依据.方法 对广州市疫情监测与报告信息系统和实验室监测信息系统,以及相关的现场调查报告、疫情简报等进行统计与分析.结果 广州市201 1年报告登革热病例51例,本地感染33例,输入性病例18例,累计发病率0.4/10万,无死亡病例,输入性病例占全年报告病例的35.29％.除1、2、7月外,其余月份均有病例；共报告突发公共卫生事件1起,为海珠区龙凤街登革热暴发疫情(16例).实验室监测表明,2011年广州市病毒流行株为登革Ⅰ型病毒.结论 2011年广州市登革热流行处于散发流行状态,输入性病例或异地来广州就诊的登革热病例对广州市登革热流行存在潜在风险.
作者：曹庆；罗雷；景钦隆；李意兰；魏跃红 刊期： 2013年第04期
目的 评估江门市各辖市区脊髓灰质炎野病毒输入与传播风险,科学指导制定预防控制策略.方法 根据输入风险、AFP病例监测、人群免疫情况等指标综合分析评价,评估江门市各市区脊灰野病毒输入与传播的风险.结果 2009-2011年报告35例AFP病例,报告后48 h内调查率为97.14％；各市区脊灰疫苗接种率和脊灰疫苗快速评估接种率均≥95％;2010年随机抽查56人进行脊灰抗体检测,脊灰Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IgG抗体阳性率分别为91.07％、94.64％、92.86％.3年麻疹平均发病率为0.51/10万,高的是蓬江区2.21/10万,其他市区均＜1/10万；开平市、江海区风险评估的综合评分为45、42分,为高风险地区.结论 江门市存在脊灰野毒株输入的风险,各市区尤其是高风险市区应完善AFP病例监测工作.
作者：黄国；叶秀华；陈成连 刊期： 2013年第04期
目的 建立大鼠肝缺血再灌注模型,探讨该模型的制备及评价方法.方法 大鼠麻醉、开腹后用血管夹钳夹支配肝左叶、中叶的肝蒂,造成70％肝脏缺血,1h后放开血管夹恢复血供造成缺血再灌注损伤.根据再灌注时间不同分为2h组、4h组和24 h组,假手术组不进行钳夹肝蒂操作,观察各组肝脏生化指标及组织形态学变化.结果 整个手术过程大鼠均能耐受.与假手术组比较,缺血再灌注2、4、24 h组大鼠血清中谷丙转氨酸(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝组织匀浆MDA水平以及肝脏病理组织学Suzuki's评分均明显升高,且在4h组达到高(P＜0.05).结论 缺血1h后再灌注4h可制备佳的肝缺血再灌注模型.该模型操作简单,为临床肝缺血再灌注损伤研究提供了基础.
作者：孙萍萍；陈杰；袁芳；黎曙霞 刊期： 2013年第04期
目的 掌握肇庆市15岁以上居民高血压的流行及知晓情况,为开展高血压病人管理以及制定相关预防控制措施提供科学依据.方法 采用多阶段分层整群随机抽样方法,抽取1 212名15岁以上的常住居民开展调查.调查内容包括调查问卷、体格检查以及实验室检查.结果 调查共发现高血压患者235人,患病率为19.39％,标化患病率为16.21％;高血压与年龄的增长、肥胖和超重、高血脂症、吸烟和饮酒等因素有关(P＜0.01)；高血压危险因素和预防知识知晓率偏低.结论 通过多种方式和途径,进一步加强高血压防治知识的宣传及干预,倡导健康生活方式.
作者：钟伟强；林绍良；陆素颖 刊期： 2013年第04期
目的 建立登革病毒2型(DENV-2)前膜蛋白(prM)的原核稳定表达系统,并制备prM多克隆抗体,研究登革病毒特异性prM抗体的中和作用及抗体依赖性感染增强作用(ADE).方法 应用大肠杆菌表达系统表达全长DENV-2 prM蛋白,经电洗脱法纯化重组蛋白,免疫家兔,制备兔抗prM蛋白多抗；应用空斑减数中和试验(PRNT)和流式细胞术(FCM)分别检测prM兔多克隆抗体的中和作用和ADE效应.结果 重组prM蛋白在原核系统可获得高效表达,prM蛋白的表达量占大肠杆菌全菌蛋白的15％左右；其免疫血清经Western blotting法证实为登革病毒特异性prM多克隆抗体,用ELISA法检测效价为1:800 000.PRNT表明,prM抗体对成熟和不成熟DENV-2感染C6/36细胞中和作用有限,大中和程度分别为49.84％和50.22％；FCM结果表明,prM抗体能在较大的抗体稀释度范围(10-2～10-6)增强成熟和不成熟DENV-2感染,且在10-3稀释度时达到高峰.结论 重组DENV-2prM蛋白有很强的免疫原性,其诱生的prM抗体对登革病毒仅有较弱的中和活性,但却呈现出较强的ADE作用,揭示prM抗体是一种感染增强性抗体.
作者：冯俊杰；罗雅艳；周俊梅；方丹云；曾谷城；晏辉钧；江丽芳 刊期： 2013年第04期
目的 了解乙肝疫苗免疫失败者的HBV S基因的变异情况.方法 采用流行病学、ELISA与分子生物学方法,筛选乙肝疫苗免疫失败者.采用聚合酶链反应(PCR)、基因克隆和测序的方法,对乙肝疫苗免疫失败者的HBVS基因进行分析,并与HBV参考序列S基因进行比较,分析其变异情况.结果 从2 564份受检者中,筛选出2例(0.78‰)HBsAg(-)/HBeAg (+)/HBcAb(+)乙肝疫苗免疫失败者(HBs1、HBs2),经HBV DNA荧光定量PCR检测和HBV S基因PCR扩增,结果均为阳性,为B基因型.其S基因序列与参考序列(JX429908.1)相比,同源性为98.57％,且乙肝疫苗免疫失败者S基因在第363位和第467位分别南野生型的C变为A、G变为A,HBsAg 121位和156位氨基酸C和W缺失.结论 乙肝疫苗免疫失败者HBV S基因上第363位和第467位碱基存在错义突变(C→A和G→A),改变了HBsAg的结构和抗原性.
作者：蒋海青；朱平安；谢锦尧；金娴；肖娜；樊春卉；赵毅 刊期： 2013年第04期
目的 观察硝普钠与硝酸甘油治疗高血压危象并急性左心功能不全患者的疗效.方法 选择深圳市龙岗中心医院2008年8月至2012年8月患高血压危象并急性左心功能不全的患者52例为研究对象,随机分为硝普钠组和硝酸甘油组,每组26例；在综合治疗的基础上硝普钠组使用微量泵注射硝普钠治疗,硝酸甘油组则给予硝酸甘油治疗,两组治疗后观察3h,监测患者血压、呼吸、心率等情况.结果 治疗后两组患者在血压、呼吸及心率方面均较治疗前改善,但硝普钠组患者血压、呼吸及心率改善程度优于硝酸甘油组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).硝普钠组总有效率为92.3％,硝酸甘油组为69.2％,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后硝普钠组收缩压、舒张压、心率恢复正常的时间较硝酸甘油组快,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在抢救高血压危象并急性左心功能不全患者时使用硝普钠的疗效优于硝酸甘油,值得推广应用.
作者：唐细生；胡平 刊期： 2013年第04期
目的 研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系.方法 收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性；PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO mRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达.结果 本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高；所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87％,敏感菌株与耐药菌株均有CarO mRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义；SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同.结论 CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关.
作者：范敏；梁家隐；冼盈；李志涛；孙希；吴忠道；张扣兴 刊期： 2013年第04期
目的 克隆家兔泛素样小分子修饰因子-2 (SUMO-2)基因,并预测其蛋白质结构和功能.方法 应用分子克隆技术从家兔肝组织中克隆SUMO-2基因,用DNAMAN、CBS等生物软件及网络分析平台分析克隆所得到的SUMO-2基因序列及其编码的蛋白结构.结果 测序结果显示成功克隆家兔SUMO-2基因片段,序列分析显示氢基酸序列与其他物种源性SUMO-2同源性较高,家兔SUMO-2蛋白氨基酸序列相对分子质量为10 826.9,等电点为4.70,蛋白主要以无规则卷曲形式存在(56.84％),可能含有1个N-糖基化位点,2个N-豆蔻酰化位点,1个丝氨酸磷酸化位点,2个苏氨酸磷酸化位点及2个蛋白激酶C磷酸化位点.元信号肽区域,元跨膜区,该蛋白可能为可溶性蛋白.结论 成功克隆家兔SUMO-2基因,为进一步研究SUMO-2与肝纤维化的关系及其功能奠定基础.
作者：郑科；沈天伦；张培；李思思；宋秋怡；张茹；朱丹丹；段义农 刊期： 2013年第04期
目的 构建过表达和干扰RN181基因的肝癌MHCC97L重组细胞系,并研究RN181对该细胞体外增殖的影响.方法 基于基因克隆技术,构建plncx2-GFP-IRES/RN181重组载体,常规鉴定后,与pVSV-G共转染GP2-293细胞包装逆转录病毒.该病毒与RN181干扰慢病毒分别感染MHCC97L细胞,流式分选表达绿色荧光的细胞,RT-PCR、Western blotting鉴定后,CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖情况.结果 重组载体构建成功,重组细胞荧光良好,RT-PCR、Western blotting分别证实重组细胞中RN181的mRNA和蛋白表达水平在重组细胞系间均出现差异有统计学意义(P＜0.05).增殖实验显示RN181上调后细胞生长减慢,克隆数也显著少于对照组(P＜0.05),而RN181干扰后上述现象可得到逆转.结论 成功构建了过表达和干扰RN181的MHCC97L重组细胞系,初步证实了RN181在体外对MHCC97L细胞增殖的抑制作用.
作者：王小波；彭迎霞；张贤；尹江丽；李明 刊期： 2013年第04期
目的 研制一种无血清培养基,并与其他三种常用无血清培养基进行比较,探讨自主研发无血清培养基在肝细胞培养上的可行性.方法 以肝C3A细胞株为目标细胞,四组无血清培养基组均采取逐渐降低血清浓度方法(10％、5％、2.5％、0％),以达到完全无血清培养,与完全培养基组(阳性对照)及基础培养基组(阴性对照)在细胞活力、生长曲线、功能及相关功能基因上进行比较.结果 细胞培养24 h后开始生长,并保持与阳性组相似的生长率.从第2天起,自主研发无血清培养基组尿素合成率就明显高于阳性及阴性对照组(P＜0.001),在白蛋白合成上,实验组与阳性组比较差异无统计学意义.Real-time qPCR结果提示,在UGT、GST、AFP和ALB表达上,实验组与阳性组比较差异无统计学意义(P=0.640、0.075、0.504、1.000),但在CK18、CK19和HNF4α表达上,却明显低于阳性组(P＜0.001).结论 新研发的无血清培养基在肝细胞培养中与完全培养基基本相同,能维持细胞形态、活力及主要功能,使肝细胞能更好地应用于生物人工肝治疗中.
作者：蔡理全；赵逸超；汪艳；高毅 刊期： 2013年第04期
目的 研究2006年深圳市急性肠胃炎发病的主要病因.方法 收集深圳急性肠胃炎粪便样本200份(包含122份散发样本和78份暴发样本),采用RT-PCR的方法进行急性肠胃炎相关病毒检测.结果 44％ (88/200)的样本为诺如病毒阳性,9％(18/200)为轮状病毒A阳性,2％(4/200)为星状病毒阳性,2％ (4/200)为肠道腺病毒阳性,还有8％ (16/200)的样本为混合感染.其中散发样本中检出腺病毒、轮状病毒、星状病毒和诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ 5种病毒,而诺如病毒GⅡ是3次暴发样本中的唯一病原.对22例NoⅤ GⅡ阳性样本测序后的系统发育分析表明NoⅤ GⅡ.4 variants 2006b cluster是造成2006年深圳市肠胃炎暴发的主要诱因,其次为NoⅤ GⅡ.12和GⅡ.4 Hunter簇.结论 NoⅤ GⅡ.4是2006年流行于深圳的主要病毒株.
作者：谢飞飞；何雅青；程锦泉；姜君；杨洪；赵金银；张海龙；姚相杰；周俊宜 刊期： 2013年第04期
目的 掌握本地区腹泻病的菌群分布和变化,为食源性疾病主动监测体系提供必要的监测数据.方法 分析2010-2011年龙岗区2个腹泻病监测哨点患者的粪便标本,检测沙门菌(SM)、志贺菌(SH)、霍乱弧菌(VC)、副溶血弧菌(VP)和致泻性大肠埃希菌(DEC)等病原菌结果.结果 3 271份粪便标本中,检出病原菌共797株,阳性率为24.37％,腹泻病原菌占前3位的分别为DEC、VP和SM.O25、O1和O164是DEC主要流行血清型,VP优势血清型为O3:K6和O4:K8,SM的优势血清型为肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌.VP和SM有明显季节性分布特点,主要在6-9月份阳性检出;沙门菌10岁以下儿童感染率高,VP和SM不同年龄组间差异有统计学意义(P=0.000；P=0.007).结论 本地区腹泻病原菌以DEC、VP和SM为主,肠炎沙门菌为SM主要流行血清型,初步揭示了深圳市龙岗区细菌性腹泻的病原谱及流行病学分布特征.
作者：叶晓涛；李迎惠；陈日炳；张旭；马焕丽；何国坚 刊期： 2013年第04期
目的 观察聚氧化乙烯(PEO)对急性后肢缺血大鼠运动耐力的影响,同时探讨其可能的作用机制.方法 Wistar大鼠进行适应性跑步训练后建立大鼠双侧股动脉结扎模型,并经颈静脉留置输液导管；术后继续跑步训练并剔除静脉导管堵塞及不能学会跑步的大鼠,后进入实验大鼠64只,随机分成2组,实验组(n=32)经颈静脉以7 ml/h的速度持续泵入PEO溶液10 min,对照组(n=32)以相同速度及时间持续泵入生理盐水,大鼠跑步至力竭,观察大鼠力竭运动时间,测全血乳酸(LD)、血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及腓肠肌的肌肉乳酸(LD)含量.结果 实验组力竭运动时间为(774.72±171.49)s,较对照组的(687.56±166.08)s明显延长,差异有统计学意义(P=0.043);实验组大鼠NO和SOD含量为(4.25±1.75) μmol/L、(62.97±8.70) U/ml,分别较对照组的(3.51±1.06) μmol/L、(58.79±6.75) U/ml升高或者增强,差异均有统计学意义(P=0.047、P=0.036);与对照组比较,实验组大鼠肌肉LD含量明显降低[(2.79±0.10)1g mmol/g vs (2.95±0.11)lgmmol/g,P＜0.01]；两组血清CK、LDH活力、全血LD含量则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PEO可延长急性后肢缺血大鼠的力竭运动时间从而改善运动耐力,发挥抗疲劳作用.
作者：邓远燕；张泉；张烨；查道刚 刊期： 2013年第04期
目的 探讨经桡动脉途径冠状动脉介入术后桡动脉狭窄及闭塞的危险因素.方法 观察323例经桡动脉入路成功行冠状动脉介入术的患者,应用彩色多普勒超声评价患者是否发生桡动脉狭窄及闭塞,据此将观察病例分为正常组(n=256)和桡动脉狭窄及闭塞组(n=67).比较两组患者的临床特征,通过多因素Logistic回归分析探索引起术后桡动脉狭窄及闭塞的危险因素.结果 67例(20.74％)患者术后发生桡动脉狭窄甚至闭塞.单因素分析显示,桡动脉狭窄及闭塞组女性、糖尿病、既往TRI或TRA史、反复穿刺、留置鞘管患者的比例高于正常组,鞘管留置时间、压迫止血时间大于正常组;而桡动脉内径与鞘管外径的比值(RAID/SOD)及术中肝素用量小于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05).多因素Logistic回归分析显示糖尿病、RMD/SOD、术中肝素用量、鞘管留置时间及压迫止血时间是桡动脉狭窄及闭塞的独立危险因素.结论 选择与桡动脉内径匹配的动脉鞘管、足够强度的抗凝治疗、减少鞘管留置的时间及压迫止血的时间,有利于减少术后桡动脉狭窄及闭塞的发生,对糖尿病患者及桡动脉内径较小的患者更应注意采取预防措施.
作者：赵亚男；李志樑；刘芳 刊期： 2013年第04期
以问题为基础的教学(PBL)模式具有良好教学效果,是一种能够适应当前医学模式转变的特色教学模式.本文通过将PBL模式应用于病原生物学教学的实践,对此模式所涉及的教学准备、实施及效果等问题进行了初步探讨,并对当前PBL应用于病原生物学教学所存在的问题做了分析.
作者：吴琛耘；张湘燕；吴健桦；徐大刚；王兆军 刊期： 2013年第04期
目的 分析宜昌市2010-2011年新型农村合作医疗(以下简称新农合)中肺结核病患者医疗费用情况,探讨合理应用新农合经费,促进结核病防治工作.方法 收集宜昌市新型农村合作医疗肺结核病患者医疗费用报销相关文件、宜昌市2010-2011年参合肺结核病患者门诊和住院费用结算资料,经EXCEL统计分析.结果 2010-2011年两年期间,宜昌市新农合共补偿了5 045例肺结核患者,两年医疗总花费为14 778 314元,新农合总支出6 608 937元,患者自付8 169 377元,报销比例为44.72％,人均医疗费用2 929.30元.2011年享受新农合报销政策的肺结核患者数增加了231例,住院人次增加了145例,住院比例增加了0.38％.新农合支出费用增加了1 382 317元,患者平均费用增加了653元,报销比例略有增加,增幅为4.79％.结论 新农合是肺结核病患者的一项重要保障措施,成为当前结核病防治工作的重要推动力量.但尚需加强管理,制订更为科学合理的补偿办法,以充分发挥新农合在补偿结核病方面的作用.
作者：刘晓俊；周萍；程云舫；张培；袁凤花 刊期： 2013年第04期
目的 探讨高糖环境对大鼠肾小球系膜细胞增殖、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及NF-κB活化的影响.方法 将体外培养大鼠肾小球系膜细胞(MC)分为4组:正常对照组(含5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖1组(含15 mmol/L葡萄糖)、高糖2组(含20 mmol/L葡萄糖)和高糖3组(含25 mmol/L葡萄糖).MTT法检测细胞的增殖情况,ELISA法检测MCP-1的表达,Western blotting法检测IκBα以反映NF-κB的活性.结果 与正常对照组比较,高糖环境下24 h后细胞增殖明显,MCP-1表达明显增强(P＜0.01).高糖刺激30 min后,NF-κB结合蛋白IκBα明显降解,提示高糖可诱导MC NF-κB活化.结论 高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞的增殖及炎症因子MCP-1的高表达可能是通过NF-κB的活化来实现的.
作者：贾倩倩；王建成；赵艳；陈斯佳；龙海波 刊期： 2013年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
