唐细生；胡平
目的 为了解肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)在深圳市幼儿园健康儿童中的隐性感染情况,进一步探讨儿童手足口病(HFMD)隐性感染的危险因素.方法 采用酶联免疫(ELISA)法检测某幼儿园所有健康儿童血清中抗EV71和CoxA16的IgM抗体水平,同时采用病例对照研究分析EV71和CoxA 16病毒隐性感染的危险因素.结果 调查的350名健康儿童中,32名儿童感染了EV71或CoxA16病毒,隐性感染率为9.1％,其中CoxA16病毒感染率为7.4％,EV71病毒感染率为3.1％,同时感染CoxA16和EV71两种病毒的感染率为1.4％;暴发班级的感染率为17.0％,非暴发班级的感染率为6.5％.每天洗手3次及以上(OR=0.40,95％CI:0.19～0.85)、洗手使用清洁剂(OR=0.33,95％CI:0.16～0.68)为EV71、CoxA16病毒隐性感染保护因素；所在班级出现HFMD的聚集性病例(OR-3.80,95％CI:1.81～7.99)和儿童有咬玩具、咬手指习惯(OR=2.29,95％CI:1.06～4.92)为EV71、CoxA 16病毒隐性感染危险因素.结论 隐性感染在一定程度上影响着HFMD的流行,加强病人的密切接触者管理和宣传教育,尽可能降低隐性感染者的比例,对控制HFMD的暴发及流行有着重要的意义.
作者：陈兵；余光清；饶东平；陈亿雄；朱奕；吴泰顺 刊期： 2013年第04期
目的 分析宜昌市2010-2011年新型农村合作医疗(以下简称新农合)中肺结核病患者医疗费用情况,探讨合理应用新农合经费,促进结核病防治工作.方法 收集宜昌市新型农村合作医疗肺结核病患者医疗费用报销相关文件、宜昌市2010-2011年参合肺结核病患者门诊和住院费用结算资料,经EXCEL统计分析.结果 2010-2011年两年期间,宜昌市新农合共补偿了5 045例肺结核患者,两年医疗总花费为14 778 314元,新农合总支出6 608 937元,患者自付8 169 377元,报销比例为44.72％,人均医疗费用2 929.30元.2011年享受新农合报销政策的肺结核患者数增加了231例,住院人次增加了145例,住院比例增加了0.38％.新农合支出费用增加了1 382 317元,患者平均费用增加了653元,报销比例略有增加,增幅为4.79％.结论 新农合是肺结核病患者的一项重要保障措施,成为当前结核病防治工作的重要推动力量.但尚需加强管理,制订更为科学合理的补偿办法,以充分发挥新农合在补偿结核病方面的作用.
作者：刘晓俊；周萍；程云舫；张培；袁凤花 刊期： 2013年第04期
目的 探讨白细胞总数、粒细胞计数、C反应蛋白(CRP)、血糖变化在小儿病毒性脑炎(VE)病情发展中的意义.方法 以47例VE患儿为观察组,21例化脓性脑膜炎(PM)为对照组,两组均进行白细胞计数、粒细胞计数、CRP、血糖动态监测,并对治疗前后结果进行比较.结果 观察组和对照组患儿急性期均存在白细胞、粒细胞、CRP、血糖升高,观察组经治疗后白细胞、粒细胞、CRP、血糖下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05),而对照组下降无统计学意义(P＞0.05).结论 动态监测白细胞、粒细胞、CRP、血糖对指导临床诊断及判断预后十分重要.
作者：邱建武；李湘玲；肖小兵；邱燕玲；何敏 刊期： 2013年第04期
目的 研究水通道蛋白4(AQP-4)在广州管圆线虫感染大小鼠脑组织中的表达水平及其与脑水肿的关系.方法 在不同感染时期(0d、7d、14 d、21 d),用Realtime PCR法检测大鼠感染不同时间组,及米诺环素给药+感染组和单纯感染组小鼠脑组织中AQP-4的表达水平,测定各组小鼠脑组织含水量.结果 大鼠感染广州管圆线虫后脑组织中AQP-4的表达水平在7d时有升高,而其他时间都无明显变化.小鼠感染广州管圆线虫后,脑组织中的AQP-4水平明显升高,且成持续升高状态.用米诺环素抑制小胶质细胞后,给药组小鼠脑内AQP-4的水平明显下降,脑组织含水量也低于单纯感染组.结论 AQP-4与广州管圆线虫感染所致的小鼠脑水肿密切相关,小胶质细胞可能是参与调节这一过程的重要细胞.
作者：魏洁；陈炜；吴峰；梁锦仪；郑焕钦；孙希；吕志跃；张萍；吴忠道 刊期： 2013年第04期
目的 评估江门市各辖市区脊髓灰质炎野病毒输入与传播风险,科学指导制定预防控制策略.方法 根据输入风险、AFP病例监测、人群免疫情况等指标综合分析评价,评估江门市各市区脊灰野病毒输入与传播的风险.结果 2009-2011年报告35例AFP病例,报告后48 h内调查率为97.14％；各市区脊灰疫苗接种率和脊灰疫苗快速评估接种率均≥95％;2010年随机抽查56人进行脊灰抗体检测,脊灰Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IgG抗体阳性率分别为91.07％、94.64％、92.86％.3年麻疹平均发病率为0.51/10万,高的是蓬江区2.21/10万,其他市区均＜1/10万；开平市、江海区风险评估的综合评分为45、42分,为高风险地区.结论 江门市存在脊灰野毒株输入的风险,各市区尤其是高风险市区应完善AFP病例监测工作.
作者：黄国；叶秀华；陈成连 刊期： 2013年第04期
目的 研制一种无血清培养基,并与其他三种常用无血清培养基进行比较,探讨自主研发无血清培养基在肝细胞培养上的可行性.方法 以肝C3A细胞株为目标细胞,四组无血清培养基组均采取逐渐降低血清浓度方法(10％、5％、2.5％、0％),以达到完全无血清培养,与完全培养基组(阳性对照)及基础培养基组(阴性对照)在细胞活力、生长曲线、功能及相关功能基因上进行比较.结果 细胞培养24 h后开始生长,并保持与阳性组相似的生长率.从第2天起,自主研发无血清培养基组尿素合成率就明显高于阳性及阴性对照组(P＜0.001),在白蛋白合成上,实验组与阳性组比较差异无统计学意义.Real-time qPCR结果提示,在UGT、GST、AFP和ALB表达上,实验组与阳性组比较差异无统计学意义(P=0.640、0.075、0.504、1.000),但在CK18、CK19和HNF4α表达上,却明显低于阳性组(P＜0.001).结论 新研发的无血清培养基在肝细胞培养中与完全培养基基本相同,能维持细胞形态、活力及主要功能,使肝细胞能更好地应用于生物人工肝治疗中.
作者：蔡理全；赵逸超；汪艳；高毅 刊期： 2013年第04期
目的 探讨孕鼠孕期低剂量十溴联苯醚(BDE-209)暴露联合窒息对新生仔鼠海马组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.方法 12周龄SD雌性大鼠自妊娠0d起随机分成A组:空白对照,B、C组:0.6、6 mg/kg BDE-209暴露组,D组:孕期窒息15 min,E、F组:0.6、6 mg/kg BDE-209暴露+孕期窒息15 min.B、C、E、F组雌鼠从孕0天开始胃灌BDE-209,A、D组胃灌等量的花生油直至孕第21天(即孕22 d),A、B、C组孕鼠行剖宫产术直接取出仔鼠,D、E、F组孕鼠行剖宫产建立孕期窒息模型后再取出仔鼠.各组随机选取10只雄性仔鼠,在出生24 h内检测海马MDA含量及SOD活性.结果 各实验组仔鼠MDA含量随BDE-209暴露剂量增加而增高,SOD活性随BDE-209暴露剂量增加而降低,在BDE-209暴露剂量相同的情况下,孕期窒息能够增加MDA含量,降低SOD活性,组间两两比较,差异有统计学意义(P=0.000).孕期低剂量BDE-209暴露联合窒息对SOD活性的影响存在交互作用(P=0.002).结论 孕期低剂量的BDE-209暴露联合窒息可以使仔鼠海马SOD活性下降,MDA含量升高,出现氧化应激状态,导致神经系统的氧化损伤.孕期低剂量BDE-209暴露与孕期窒息之间存在一定的交互作用.
作者：刘传鑫；林琳；孙斌；何玉甜；宋杰；曾洁；杜培丽；张慧丽；杜丽丽 刊期： 2013年第04期
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者在干扰素治疗过程中出现E抗原(HBeAg)/E抗体(抗-HBe)双阳性现象的临床意义.方法 回顾性分析317例CHB患者,观察聚乙二醇化干扰素(PEG-IFN-α)或普通干扰素(IFN-α)治疗过程中HBeAg/抗-HBe双阳性的发生率、持续时间和临床转归.结果 HBeAg阳性CHB患者在干扰素治疗过程中,HBeAg/抗-HBe双阳性发生率为25.2％.HBeAg/抗-HBe双阳性时HBeAg滴度中位数(范围)为3.45(1.03～187.54)S/CO,抗-HBe滴度为0.52(0.03～0.99)S/CO,均接近于各自截断值.出现过HBeAg/抗-HBe双阳性患者的HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率及HBeAg血清转换率分别为76.2％、62.5％、61.2％,高于未出现者的49.8％、35.9％、29.1％,差异均有统计学意义(P均＜0.05).二分类Logistic回归显示,HBeAg阳性患者中,男性更易出现HBeAg/抗-HBe双阳性(OR=1.887；95％ CI:1.013～3.518).结论 干扰素治疗过程中,CHB患者出现HBeAg/抗-HBe双阳性的现象并不罕见；其终临床转归显示更易获得HBeAg血清学转换.
作者：张健；张艳茹；李威；王俊洁；张浩；陈金军；周元平 刊期： 2013年第04期
目的 对广州市及周边地区手足口病(HFMD)的流行病学和病原学特征进行分析.方法 收集2011年广州市及其周边地区手足口病病例968份,采用荧光定量RT-PCR方法对采集的标本进行肠道病毒(EV)核酸检测,将其分为肠道病71型(EV71)、萨克奇病毒A组16型(CA16)、非EV71、CA16阳性肠道病毒(N)三类,分离部分EV71毒株并进行全基因测序和分析.并用生物信息学软件进行病毒基因特征分析,经在线比对后进行EV型别鉴定.结果 分析显示2011年广州市及周边地区HFMD的高发年龄段为年龄小于4岁的儿童,1～2岁婴幼儿发病率高；5-7月为发病高峰期；EV71和CA16为HFMD的主要病原；但有24.79％的病例由其他肠道病毒(EV)型别引起.基于全基因序列构建种系发生进化树显示,所分离的6株EV71毒株与C4亚型毒株具有近的亲缘性和高的同源性.结论 2011年EV71和CA16为广州市及周边地区流行的主要病原,EV71病毒株分离株属于C4型,且遗传性较稳定,但存在部分其他型别EV引起HFMD.
作者：关琳琳；张定梅；徐霖；汪杨；罗燕芬；郑芸；曹开源 刊期： 2013年第04期
目的 分析广州市2011年登革热疫情流行病学特征,为登革热预防控制工作提供参考依据.方法 对广州市疫情监测与报告信息系统和实验室监测信息系统,以及相关的现场调查报告、疫情简报等进行统计与分析.结果 广州市201 1年报告登革热病例51例,本地感染33例,输入性病例18例,累计发病率0.4/10万,无死亡病例,输入性病例占全年报告病例的35.29％.除1、2、7月外,其余月份均有病例；共报告突发公共卫生事件1起,为海珠区龙凤街登革热暴发疫情(16例).实验室监测表明,2011年广州市病毒流行株为登革Ⅰ型病毒.结论 2011年广州市登革热流行处于散发流行状态,输入性病例或异地来广州就诊的登革热病例对广州市登革热流行存在潜在风险.
作者：曹庆；罗雷；景钦隆；李意兰；魏跃红 刊期： 2013年第04期
目的 建立快速的检测方法对腹泻患者中的小肠结肠炎耶尔森菌进行快速检测.方法 利用析因设计试验方法建立并优化检测小肠结肠炎耶尔森菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并与普通PCR法对临床腹泻标本进行检测比较.结果 析因设计试验确定LAMP佳反应体系:Mg2++为2.0 mmol,内引物FIP/BIP为1.6 μmol,dNTPs为1.6 mmol,时间为60 min,反应温度为63℃.对12种细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌获得阳性扩增结果,小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别为38.05 fg和15 CFU/ml.对腹泻样本进行直接检测,检测限为150 CFU/g.539例腹泻患者粪便标本中,LAMP成功检出13例样本中含有小肠结肠炎耶尔森菌,普通PCR检出11例,灵敏度为100％,特异度为99.62％.结论 本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高,且操作简单、快速、检测成本低,适合基层单位及现场应用.
作者：罗敏红；胡婷婷；冀新凤；李美青；黄燕惠；陈慧芳；姚月娴；陈清；俞守义 刊期： 2013年第04期
目的 了解深圳市手足口病的流行特征,并为制定预防控制措施提供依据.方法 对2010-2011年深圳市报告的手足口病病例及暴发疫情进行描述性流行病学分析.结果 2010-2011年深圳市共报告手足口病48 102例,年均发病率为234.32/10万；发病主要集中在4-7月,占总病例数的56.89％；全市8个区均有病例报告,发病率高的为龙岗区(558.68/10万),低为宝安区(59.67/10万),各地区间发病率差异有统计学意义(P＜0.001)；发病主要集中在6岁以下年龄组,占总病例数的94.19％；以散居儿童为主,占总病例数的75.05％；男性发病率高于女性(P＜0.001).245名重症病例中,1～4岁年龄组发病数较多,占重症病例总数的88.57％；仍以散居儿童为主,占重症病例总数的86.12％；病原学监测结果显示,病例主要以EV71感染为主.两年间,共报告暴发疫情189起,报告高峰期出现在4-6月,幼托机构是高发场所.结论 深圳市手足口病的发生存在明显的年龄、性别、职业和季节差异,应采取有效的预防控制措施降低发病.
作者：李媛；牟瑾；廖玉学；路滟；谢旭；梅树江；周琳 刊期： 2013年第04期
目的 研究2006年深圳市急性肠胃炎发病的主要病因.方法 收集深圳急性肠胃炎粪便样本200份(包含122份散发样本和78份暴发样本),采用RT-PCR的方法进行急性肠胃炎相关病毒检测.结果 44％ (88/200)的样本为诺如病毒阳性,9％(18/200)为轮状病毒A阳性,2％(4/200)为星状病毒阳性,2％ (4/200)为肠道腺病毒阳性,还有8％ (16/200)的样本为混合感染.其中散发样本中检出腺病毒、轮状病毒、星状病毒和诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ 5种病毒,而诺如病毒GⅡ是3次暴发样本中的唯一病原.对22例NoⅤ GⅡ阳性样本测序后的系统发育分析表明NoⅤ GⅡ.4 variants 2006b cluster是造成2006年深圳市肠胃炎暴发的主要诱因,其次为NoⅤ GⅡ.12和GⅡ.4 Hunter簇.结论 NoⅤ GⅡ.4是2006年流行于深圳的主要病毒株.
作者：谢飞飞；何雅青；程锦泉；姜君；杨洪；赵金银；张海龙；姚相杰；周俊宜 刊期： 2013年第04期
目的 观察聚氧化乙烯(PEO)对急性后肢缺血大鼠运动耐力的影响,同时探讨其可能的作用机制.方法 Wistar大鼠进行适应性跑步训练后建立大鼠双侧股动脉结扎模型,并经颈静脉留置输液导管；术后继续跑步训练并剔除静脉导管堵塞及不能学会跑步的大鼠,后进入实验大鼠64只,随机分成2组,实验组(n=32)经颈静脉以7 ml/h的速度持续泵入PEO溶液10 min,对照组(n=32)以相同速度及时间持续泵入生理盐水,大鼠跑步至力竭,观察大鼠力竭运动时间,测全血乳酸(LD)、血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及腓肠肌的肌肉乳酸(LD)含量.结果 实验组力竭运动时间为(774.72±171.49)s,较对照组的(687.56±166.08)s明显延长,差异有统计学意义(P=0.043);实验组大鼠NO和SOD含量为(4.25±1.75) μmol/L、(62.97±8.70) U/ml,分别较对照组的(3.51±1.06) μmol/L、(58.79±6.75) U/ml升高或者增强,差异均有统计学意义(P=0.047、P=0.036);与对照组比较,实验组大鼠肌肉LD含量明显降低[(2.79±0.10)1g mmol/g vs (2.95±0.11)lgmmol/g,P＜0.01]；两组血清CK、LDH活力、全血LD含量则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PEO可延长急性后肢缺血大鼠的力竭运动时间从而改善运动耐力,发挥抗疲劳作用.
作者：邓远燕；张泉；张烨；查道刚 刊期： 2013年第04期
目的 了解女性生殖道病原体感染状况及季节性分布特征.方法 收集2011年1-12月唐山市妇幼保健院妇科门诊32 069名患者的就医资料,统计并比较生殖道病原体感染患者的季节分布及感染状况.结果 共14 071例生殖道感染患者,感染阳性率为43.88％；感染病原体以假丝酵母菌感染所占比例高为44.06％,其次是单纯细菌感染占40.77％,滴虫感染占6.95％,支原体感染占6.79％,线索细胞所占比例少为1.43％.夏、秋季感染患者阳性率为46.51％ 、47.78％,明显高于其他2个季节,差异有统计学意义(t=169.6,P＜0.05).结论 生殖道病原体感染以夏秋两季为主,临床以霉菌性阴道炎为多,应加强生殖道感染的临床观察.
作者：刘娜；王振荣；郑建霞 刊期： 2013年第04期
目的 建立产后抑郁症动物模型,观察抑郁母鼠产后异常的母性行为,建立产后抑郁症动物模型的评估方案.方法 将32只受孕大鼠随机分为3组:地塞米松组(n=10),自受孕第1天起皮下注射生理盐水1 ml/(Kg·d),第15天起,注射地塞米松0·2 mg/(kg·d)至分娩；生理盐水对照组(n=8),孕全程给予生理盐水1 ml/(Kg·d)；空白对照组(n=5),自然饲养.母鼠分娩后,观察其对幼崽的关爱行为及自身积极和消极行为,行强迫游泳实验,记录幼崽第1周内的体重增量.结果 地塞米松组母鼠与空白对照组和盐水对照组比较,产后对幼崽关爱行为减少(P＜0.05),崽鼠生后1周内体重增长低(P＜0.01),自身积极活动较少(P＜0.05,P＜0.01),消极活动较多(P＜0.01)；在强迫游泳实验中,地塞米松组母鼠挣扎自救行为持续时间短(P＜0.01),较早进入不动绝望状态(P＜0.01),持续较长时间(P＜0.01).结论 孕晚期短期低剂量的地塞米松注射可诱导母鼠出现产后抑郁症状；观察母鼠在强迫游泳实验中的表现及其对幼崽的关爱行为能够对母鼠抑郁行为进行评估.
作者：万小妍；张婷珍；黄凯凯；黄增鸿；王雪萍；姜傥 刊期： 2013年第04期
以问题为基础的教学(PBL)模式具有良好教学效果,是一种能够适应当前医学模式转变的特色教学模式.本文通过将PBL模式应用于病原生物学教学的实践,对此模式所涉及的教学准备、实施及效果等问题进行了初步探讨,并对当前PBL应用于病原生物学教学所存在的问题做了分析.
作者：吴琛耘；张湘燕；吴健桦；徐大刚；王兆军 刊期： 2013年第04期
目的 在原核系统中表达全长HIV-1 p24抗原,对其抗原性进行鉴定,探讨其对HIV早期诊断的价值.方法 利用PCR技术从含有HIV-1 gag基因质粒PTM-1中扩增p24蛋白基因,通过酶切消化后连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希菌BL21 (DE3),经IPTG诱导,表达p24抗原.通过ELISA和Western blotting (WB)法检测表达产物的免疫反应活性及特异性.结果 PCR产物和构建的重组质粒pET28a-p24经双酶切均显示约690 bpDNA片段,与预期p24抗原全基因片段大小一致.SDS-PAGE电泳可见纯化蛋白为1条相对分子量约26×103 Mr的外源表达蛋白带,与预期大小一致.ELISA及WB实验证实表达的p24抗原具有较好的活性及特异性.时间分辨荧光免疫双抗体夹心法显示与市售p24抗原线性一致.结论 构建了HIV-1 p24/pET28a原核高效表达系统,表达产物与市售的p24抗原具有相似的抗原性.
作者：刘华琴；李鹏；吴英松；李珍；魏威；董文其；王萍 刊期： 2013年第04期
目的 以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法,探索用于诺如病毒检测的可行性.方法 以387型菌株(GⅡ.4型)诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY.采用过碘酸钠法对IgY进行酶标.以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系.评价其灵敏度、特异度及重复性.并将其与金标准进行比较.结果 本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系低检测限达20 ng/ml,批内变异系数为1.021％,批间变异系数为1.150％.临床应用评价显示真阳性率为82.5％,真阴性率为81.82％.与金标准比较,检出率差异无统计学意义(P=0.629).结论 建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体Igy的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性.
作者：王云芸；戴迎春；聂军；蔡渊钧；胡婷婷；李建栋 刊期： 2013年第04期
目的 构建过表达和干扰RN181基因的肝癌MHCC97L重组细胞系,并研究RN181对该细胞体外增殖的影响.方法 基于基因克隆技术,构建plncx2-GFP-IRES/RN181重组载体,常规鉴定后,与pVSV-G共转染GP2-293细胞包装逆转录病毒.该病毒与RN181干扰慢病毒分别感染MHCC97L细胞,流式分选表达绿色荧光的细胞,RT-PCR、Western blotting鉴定后,CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖情况.结果 重组载体构建成功,重组细胞荧光良好,RT-PCR、Western blotting分别证实重组细胞中RN181的mRNA和蛋白表达水平在重组细胞系间均出现差异有统计学意义(P＜0.05).增殖实验显示RN181上调后细胞生长减慢,克隆数也显著少于对照组(P＜0.05),而RN181干扰后上述现象可得到逆转.结论 成功构建了过表达和干扰RN181的MHCC97L重组细胞系,初步证实了RN181在体外对MHCC97L细胞增殖的抑制作用.
作者：王小波；彭迎霞；张贤；尹江丽；李明 刊期： 2013年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
