刘传鑫；林琳；孙斌；何玉甜；宋杰；曾洁；杜培丽；张慧丽；杜丽丽
目的 构建过表达和干扰RN181基因的肝癌MHCC97L重组细胞系,并研究RN181对该细胞体外增殖的影响.方法 基于基因克隆技术,构建plncx2-GFP-IRES/RN181重组载体,常规鉴定后,与pVSV-G共转染GP2-293细胞包装逆转录病毒.该病毒与RN181干扰慢病毒分别感染MHCC97L细胞,流式分选表达绿色荧光的细胞,RT-PCR、Western blotting鉴定后,CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖情况.结果 重组载体构建成功,重组细胞荧光良好,RT-PCR、Western blotting分别证实重组细胞中RN181的mRNA和蛋白表达水平在重组细胞系间均出现差异有统计学意义(P＜0.05).增殖实验显示RN181上调后细胞生长减慢,克隆数也显著少于对照组(P＜0.05),而RN181干扰后上述现象可得到逆转.结论 成功构建了过表达和干扰RN181的MHCC97L重组细胞系,初步证实了RN181在体外对MHCC97L细胞增殖的抑制作用.
作者：王小波；彭迎霞；张贤；尹江丽；李明 刊期： 2013年第04期
目的 探讨高糖环境对大鼠肾小球系膜细胞增殖、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及NF-κB活化的影响.方法 将体外培养大鼠肾小球系膜细胞(MC)分为4组:正常对照组(含5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖1组(含15 mmol/L葡萄糖)、高糖2组(含20 mmol/L葡萄糖)和高糖3组(含25 mmol/L葡萄糖).MTT法检测细胞的增殖情况,ELISA法检测MCP-1的表达,Western blotting法检测IκBα以反映NF-κB的活性.结果 与正常对照组比较,高糖环境下24 h后细胞增殖明显,MCP-1表达明显增强(P＜0.01).高糖刺激30 min后,NF-κB结合蛋白IκBα明显降解,提示高糖可诱导MC NF-κB活化.结论 高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞的增殖及炎症因子MCP-1的高表达可能是通过NF-κB的活化来实现的.
作者：贾倩倩；王建成；赵艳；陈斯佳；龙海波 刊期： 2013年第04期
目的 探讨持续性血液透析联合活性碳血液灌流治疗重型肝炎的疗效.方法 将梅州市大埔县人民医院88例慢性重型肝炎患者随机分为两组,对照组(n=43)给予内科综合治疗及活性碳血液灌流治疗,观察组(n=45)在对照组基础上联用持续性血液透析治疗.观察两组治疗前、治疗结束时和治疗48 h后的临床疗效及生化指标的变化.结果 观察组的临床症状改善率达97.78％,显著高于对照组的81.39％,差异有统计学意义(P＜0.05)；低钾血症和低钠血症的复常率分别为100％和84.44％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).观察组肾功能明显改善,血BUN和Scr明显减低(P＜0.05)；且治疗后血总胆红素明显低于对照组,但两组下降幅度差异无统计学意义(P＞0.05),而治疗48 h后观察组总胆红素反弹幅度低于对照组(P＜0.05).结论 活性碳血液灌流联合持续性血液透析可显著改善慢性重型肝炎患者临床症状和肝肾功能,延缓胆红素治疗后反弹,值得推广应用.
作者：何丰海；刘成；黄伟崧；邱创衡 刊期： 2013年第04期
以问题为基础的教学(PBL)模式具有良好教学效果,是一种能够适应当前医学模式转变的特色教学模式.本文通过将PBL模式应用于病原生物学教学的实践,对此模式所涉及的教学准备、实施及效果等问题进行了初步探讨,并对当前PBL应用于病原生物学教学所存在的问题做了分析.
作者：吴琛耘；张湘燕；吴健桦；徐大刚；王兆军 刊期： 2013年第04期
目的 探讨吉非替尼(Gefitinib)与染料木黄酮(Genistein)联合应用对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株H1975增殖与凋亡的影响.方法 采用MTT比色法观察两种药物单用及联用对人非小细胞肺癌细胞株H1975细胞增殖的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blotting检测凋亡相关基因PARP和caspase-3的蛋白水平.结果 Gefitinib与Genistein联合用药对H1975细胞的抗增殖效应优于Gefitinib单药组,协同增效作用明显,抑制率升高,并呈现剂量依赖的抗增殖效应,差异有统计学意义(P＜0.05)；两药联用细胞凋亡率为(68.70±7.13)％,与正常对照组的(3.12±0.75)％、Genistein组的(35.95±2.32)％、Gefitinib组的(42.03±4.38)％比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；与单药组比较,两药联用组PARP和caspase-3的断裂片段水平增加.结论 Genistein可以增强Gefitinib对H1975细胞的增殖抑制作用并促进肿瘤细胞的凋亡.
作者：张哲；郭进强；朱航；崔俊英；熊日波；万为人；罗炳德 刊期： 2013年第04期
目的 建立快速的检测方法对腹泻患者中的小肠结肠炎耶尔森菌进行快速检测.方法 利用析因设计试验方法建立并优化检测小肠结肠炎耶尔森菌的环介导等温扩增技术(LAMP),并与普通PCR法对临床腹泻标本进行检测比较.结果 析因设计试验确定LAMP佳反应体系:Mg2++为2.0 mmol,内引物FIP/BIP为1.6 μmol,dNTPs为1.6 mmol,时间为60 min,反应温度为63℃.对12种细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌获得阳性扩增结果,小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别为38.05 fg和15 CFU/ml.对腹泻样本进行直接检测,检测限为150 CFU/g.539例腹泻患者粪便标本中,LAMP成功检出13例样本中含有小肠结肠炎耶尔森菌,普通PCR检出11例,灵敏度为100％,特异度为99.62％.结论 本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高,且操作简单、快速、检测成本低,适合基层单位及现场应用.
作者：罗敏红；胡婷婷；冀新凤；李美青；黄燕惠；陈慧芳；姚月娴；陈清；俞守义 刊期： 2013年第04期
目的 观察聚氧化乙烯(PEO)对急性后肢缺血大鼠运动耐力的影响,同时探讨其可能的作用机制.方法 Wistar大鼠进行适应性跑步训练后建立大鼠双侧股动脉结扎模型,并经颈静脉留置输液导管；术后继续跑步训练并剔除静脉导管堵塞及不能学会跑步的大鼠,后进入实验大鼠64只,随机分成2组,实验组(n=32)经颈静脉以7 ml/h的速度持续泵入PEO溶液10 min,对照组(n=32)以相同速度及时间持续泵入生理盐水,大鼠跑步至力竭,观察大鼠力竭运动时间,测全血乳酸(LD)、血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及腓肠肌的肌肉乳酸(LD)含量.结果 实验组力竭运动时间为(774.72±171.49)s,较对照组的(687.56±166.08)s明显延长,差异有统计学意义(P=0.043);实验组大鼠NO和SOD含量为(4.25±1.75) μmol/L、(62.97±8.70) U/ml,分别较对照组的(3.51±1.06) μmol/L、(58.79±6.75) U/ml升高或者增强,差异均有统计学意义(P=0.047、P=0.036);与对照组比较,实验组大鼠肌肉LD含量明显降低[(2.79±0.10)1g mmol/g vs (2.95±0.11)lgmmol/g,P＜0.01]；两组血清CK、LDH活力、全血LD含量则差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PEO可延长急性后肢缺血大鼠的力竭运动时间从而改善运动耐力,发挥抗疲劳作用.
作者：邓远燕；张泉；张烨；查道刚 刊期： 2013年第04期
目的 了解广东省居民的吸烟现状及与吸烟有关的知识、态度、行为等,为进一步开展控烟工作和推动省级控烟立法提供依据.方法 使用2007年广东省慢性病及其危险因素监测调查数据,采用多阶段分层随机抽样的方法,随机选取6 647名15～69岁的调查对象进行调查.结果 人群现在吸烟率为27.59％,男、女分别为56.10％、1.61％,男性明显高于女性(x2=2462.156,P＜0.01)；戒烟率为12.42％;开始吸第1支烟年龄中位数为16.0岁,开始每天吸烟年龄中位数为18.0岁.39.51％的不吸烟者受到被动吸烟的危害,家里是被动吸烟的主要场所.结论 广东省居民的吸烟率仍维持在较高水平,需进一步加强吸烟有害健康的宣传教育,提高居民对吸烟有害健康的认识,禁止在公共场所吸烟,降低人群吸烟率.
作者：何志辉；蔡秋茂；许晓君；许燕君；马文军 刊期： 2013年第04期
目的 为了解肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)在深圳市幼儿园健康儿童中的隐性感染情况,进一步探讨儿童手足口病(HFMD)隐性感染的危险因素.方法 采用酶联免疫(ELISA)法检测某幼儿园所有健康儿童血清中抗EV71和CoxA16的IgM抗体水平,同时采用病例对照研究分析EV71和CoxA 16病毒隐性感染的危险因素.结果 调查的350名健康儿童中,32名儿童感染了EV71或CoxA16病毒,隐性感染率为9.1％,其中CoxA16病毒感染率为7.4％,EV71病毒感染率为3.1％,同时感染CoxA16和EV71两种病毒的感染率为1.4％;暴发班级的感染率为17.0％,非暴发班级的感染率为6.5％.每天洗手3次及以上(OR=0.40,95％CI:0.19～0.85)、洗手使用清洁剂(OR=0.33,95％CI:0.16～0.68)为EV71、CoxA16病毒隐性感染保护因素；所在班级出现HFMD的聚集性病例(OR-3.80,95％CI:1.81～7.99)和儿童有咬玩具、咬手指习惯(OR=2.29,95％CI:1.06～4.92)为EV71、CoxA 16病毒隐性感染危险因素.结论 隐性感染在一定程度上影响着HFMD的流行,加强病人的密切接触者管理和宣传教育,尽可能降低隐性感染者的比例,对控制HFMD的暴发及流行有着重要的意义.
作者：陈兵；余光清；饶东平；陈亿雄；朱奕；吴泰顺 刊期： 2013年第04期
目的 掌握本地区腹泻病的菌群分布和变化,为食源性疾病主动监测体系提供必要的监测数据.方法 分析2010-2011年龙岗区2个腹泻病监测哨点患者的粪便标本,检测沙门菌(SM)、志贺菌(SH)、霍乱弧菌(VC)、副溶血弧菌(VP)和致泻性大肠埃希菌(DEC)等病原菌结果.结果 3 271份粪便标本中,检出病原菌共797株,阳性率为24.37％,腹泻病原菌占前3位的分别为DEC、VP和SM.O25、O1和O164是DEC主要流行血清型,VP优势血清型为O3:K6和O4:K8,SM的优势血清型为肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌.VP和SM有明显季节性分布特点,主要在6-9月份阳性检出;沙门菌10岁以下儿童感染率高,VP和SM不同年龄组间差异有统计学意义(P=0.000；P=0.007).结论 本地区腹泻病原菌以DEC、VP和SM为主,肠炎沙门菌为SM主要流行血清型,初步揭示了深圳市龙岗区细菌性腹泻的病原谱及流行病学分布特征.
作者：叶晓涛；李迎惠；陈日炳；张旭；马焕丽；何国坚 刊期： 2013年第04期
目的 了解乙肝疫苗免疫失败者的HBV S基因的变异情况.方法 采用流行病学、ELISA与分子生物学方法,筛选乙肝疫苗免疫失败者.采用聚合酶链反应(PCR)、基因克隆和测序的方法,对乙肝疫苗免疫失败者的HBVS基因进行分析,并与HBV参考序列S基因进行比较,分析其变异情况.结果 从2 564份受检者中,筛选出2例(0.78‰)HBsAg(-)/HBeAg (+)/HBcAb(+)乙肝疫苗免疫失败者(HBs1、HBs2),经HBV DNA荧光定量PCR检测和HBV S基因PCR扩增,结果均为阳性,为B基因型.其S基因序列与参考序列(JX429908.1)相比,同源性为98.57％,且乙肝疫苗免疫失败者S基因在第363位和第467位分别南野生型的C变为A、G变为A,HBsAg 121位和156位氨基酸C和W缺失.结论 乙肝疫苗免疫失败者HBV S基因上第363位和第467位碱基存在错义突变(C→A和G→A),改变了HBsAg的结构和抗原性.
作者：蒋海青；朱平安；谢锦尧；金娴；肖娜；樊春卉；赵毅 刊期： 2013年第04期
目的 研制一种无血清培养基,并与其他三种常用无血清培养基进行比较,探讨自主研发无血清培养基在肝细胞培养上的可行性.方法 以肝C3A细胞株为目标细胞,四组无血清培养基组均采取逐渐降低血清浓度方法(10％、5％、2.5％、0％),以达到完全无血清培养,与完全培养基组(阳性对照)及基础培养基组(阴性对照)在细胞活力、生长曲线、功能及相关功能基因上进行比较.结果 细胞培养24 h后开始生长,并保持与阳性组相似的生长率.从第2天起,自主研发无血清培养基组尿素合成率就明显高于阳性及阴性对照组(P＜0.001),在白蛋白合成上,实验组与阳性组比较差异无统计学意义.Real-time qPCR结果提示,在UGT、GST、AFP和ALB表达上,实验组与阳性组比较差异无统计学意义(P=0.640、0.075、0.504、1.000),但在CK18、CK19和HNF4α表达上,却明显低于阳性组(P＜0.001).结论 新研发的无血清培养基在肝细胞培养中与完全培养基基本相同,能维持细胞形态、活力及主要功能,使肝细胞能更好地应用于生物人工肝治疗中.
作者：蔡理全；赵逸超；汪艳；高毅 刊期： 2013年第04期
目的 了解女性生殖道病原体感染状况及季节性分布特征.方法 收集2011年1-12月唐山市妇幼保健院妇科门诊32 069名患者的就医资料,统计并比较生殖道病原体感染患者的季节分布及感染状况.结果 共14 071例生殖道感染患者,感染阳性率为43.88％；感染病原体以假丝酵母菌感染所占比例高为44.06％,其次是单纯细菌感染占40.77％,滴虫感染占6.95％,支原体感染占6.79％,线索细胞所占比例少为1.43％.夏、秋季感染患者阳性率为46.51％ 、47.78％,明显高于其他2个季节,差异有统计学意义(t=169.6,P＜0.05).结论 生殖道病原体感染以夏秋两季为主,临床以霉菌性阴道炎为多,应加强生殖道感染的临床观察.
作者：刘娜；王振荣；郑建霞 刊期： 2013年第04期
目的 掌握肇庆市15岁以上居民高血压的流行及知晓情况,为开展高血压病人管理以及制定相关预防控制措施提供科学依据.方法 采用多阶段分层整群随机抽样方法,抽取1 212名15岁以上的常住居民开展调查.调查内容包括调查问卷、体格检查以及实验室检查.结果 调查共发现高血压患者235人,患病率为19.39％,标化患病率为16.21％;高血压与年龄的增长、肥胖和超重、高血脂症、吸烟和饮酒等因素有关(P＜0.01)；高血压危险因素和预防知识知晓率偏低.结论 通过多种方式和途径,进一步加强高血压防治知识的宣传及干预,倡导健康生活方式.
作者：钟伟强；林绍良；陆素颖 刊期： 2013年第04期
目的 研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系.方法 收集鲍曼不动杆菌8株,E-test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)鉴定菌株同源性；PCR法检验CarO基因,并进行序列分析;Real time PCR法检验CarO mRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达.结果 本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高；所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87％,敏感菌株与耐药菌株均有CarO mRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义；SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同.结论 CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关.
作者：范敏；梁家隐；冼盈；李志涛；孙希；吴忠道；张扣兴 刊期： 2013年第04期
目的 建立产后抑郁症动物模型,观察抑郁母鼠产后异常的母性行为,建立产后抑郁症动物模型的评估方案.方法 将32只受孕大鼠随机分为3组:地塞米松组(n=10),自受孕第1天起皮下注射生理盐水1 ml/(Kg·d),第15天起,注射地塞米松0·2 mg/(kg·d)至分娩；生理盐水对照组(n=8),孕全程给予生理盐水1 ml/(Kg·d)；空白对照组(n=5),自然饲养.母鼠分娩后,观察其对幼崽的关爱行为及自身积极和消极行为,行强迫游泳实验,记录幼崽第1周内的体重增量.结果 地塞米松组母鼠与空白对照组和盐水对照组比较,产后对幼崽关爱行为减少(P＜0.05),崽鼠生后1周内体重增长低(P＜0.01),自身积极活动较少(P＜0.05,P＜0.01),消极活动较多(P＜0.01)；在强迫游泳实验中,地塞米松组母鼠挣扎自救行为持续时间短(P＜0.01),较早进入不动绝望状态(P＜0.01),持续较长时间(P＜0.01).结论 孕晚期短期低剂量的地塞米松注射可诱导母鼠出现产后抑郁症状；观察母鼠在强迫游泳实验中的表现及其对幼崽的关爱行为能够对母鼠抑郁行为进行评估.
作者：万小妍；张婷珍；黄凯凯；黄增鸿；王雪萍；姜傥 刊期： 2013年第04期
目的 探讨华支睾吸虫病的临床流行病学特征变化,为制定进一步的防治策略提供理论基础.方法 于2010年收集哈尔滨医科大学人体寄生虫病研究所就诊的疑似患者875人,采用Kato-Katz方法和酶联免疫方法分别对受检者的1 950份粪便样本和875份血清样本进行检测,同时收集患者的基本信息.结果 受检者中华支睾吸虫感染患者317例,感染率为36.23％,该病的流行多为散发病例.男性感染率为39.94％,明显高于女性的26.36％,差异有统计学意义(P＜0.001).感染率随年龄增长而上升,20～69岁人群感染率较高,其中40～49岁人群感染率高(42.71％).农村患者感染率(42.27％)高于城市(20.33％),反复感染患者常见,吃生鱼(虾)习惯具有高的感染风险(OR=28.507).结论 华支睾吸虫感染率较高,揭示该病流行病学特征和风险因素,将为加速控制和消灭华支睾吸虫病提供依据.
作者：韩甦；张晓丽；文景山；李懿宏；舒晶；董云霞；凌虹；张凤民 刊期： 2013年第04期
目的 探讨大剂量沐舒坦在老年患者腹部手术术后的应用价值.方法 将60例行腹部手术的老年患者随机分为大剂量沐舒坦组(观察组)和常规剂量沐舒坦组(对照组),每组30例.比较两组患者给药后血气分析、咳嗽、咳痰及肺部并发症情况.结果 观察组与对照组术后第1天PaO2、PaCO2比较差异无统计学意义,第3、5天的PaO2、PaCO2比较,观察组高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),两组患者术后咳嗽程度和咳痰难易程度,观察组优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)；肺部并发症观察组少于对照组(P＜0.05),但肺不张两组比较则差异无统计学意义.结论 老年患者腹部手术术后使用大剂量沐舒坦能降低肺部并发症,促进术后康复.
作者：张勇洪；黄江龙 刊期： 2013年第04期
目的 研究2006年深圳市急性肠胃炎发病的主要病因.方法 收集深圳急性肠胃炎粪便样本200份(包含122份散发样本和78份暴发样本),采用RT-PCR的方法进行急性肠胃炎相关病毒检测.结果 44％ (88/200)的样本为诺如病毒阳性,9％(18/200)为轮状病毒A阳性,2％(4/200)为星状病毒阳性,2％ (4/200)为肠道腺病毒阳性,还有8％ (16/200)的样本为混合感染.其中散发样本中检出腺病毒、轮状病毒、星状病毒和诺如病毒GⅠ、诺如病毒GⅡ 5种病毒,而诺如病毒GⅡ是3次暴发样本中的唯一病原.对22例NoⅤ GⅡ阳性样本测序后的系统发育分析表明NoⅤ GⅡ.4 variants 2006b cluster是造成2006年深圳市肠胃炎暴发的主要诱因,其次为NoⅤ GⅡ.12和GⅡ.4 Hunter簇.结论 NoⅤ GⅡ.4是2006年流行于深圳的主要病毒株.
作者：谢飞飞；何雅青；程锦泉；姜君；杨洪；赵金银；张海龙；姚相杰；周俊宜 刊期： 2013年第04期
目的 以鸡卵黄免疫球蛋白IgY代替哺乳动物来源的IgG抗体,建立ELISA双抗体夹心法,探索用于诺如病毒检测的可行性.方法 以387型菌株(GⅡ.4型)诺如病毒P颗粒为抗原免疫健康产蛋来航鸡,制备、纯化特异性抗诺如病毒鸡卵黄免疫球蛋白IgY.采用过碘酸钠法对IgY进行酶标.以特异性抗体为捕获抗体,酶标抗体为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测体系.评价其灵敏度、特异度及重复性.并将其与金标准进行比较.结果 本实验建立的双抗体夹心ELISA检测体系低检测限达20 ng/ml,批内变异系数为1.021％,批间变异系数为1.150％.临床应用评价显示真阳性率为82.5％,真阴性率为81.82％.与金标准比较,检出率差异无统计学意义(P=0.629).结论 建立了基于特异性抗诺如病毒卵黄抗体Igy的双抗体夹心ELISA检测体系,用于腹泻患者粪便标本诺如病毒的检测具有较好的敏感性和特异性.
作者：王云芸；戴迎春；聂军；蔡渊钧；胡婷婷；李建栋 刊期： 2013年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
