黄小媛;廖军;汤勇才
目的 制备肠出血型大肠埃希菌(EHEC) O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体并初步纯化.方法 生物信息学方法分析EHEC O157:H7 EspF蛋白的柔韧性、亲水性、表面可能性及抗原表位,选取1条由15个氨基酸残基组成的多肽为半抗原,在其C端偶联钥孔血蓝蛋白(KLH),免疫新西兰大白兔制备抗血清.ELISA测定抗血清效价,免疫印迹法鉴定其特异性,辛酸-硫酸铵法初步纯化抗血清,SDS-PAGE检测抗体纯度.结果 选择EspF蛋白抗原指数高的肽段72-TPSRPAPPPPTSGQA- 86 (0.506)为半抗原,合成抗原多肽经高效液相色谱鉴定,纯度为95.78%,经质谱分析其分子量为1 563.76 Mr,与目的多肽分子量一致;加强免疫3次后,EHEC O157:H7 EspF蛋白的抗血清效价达1∶2048 000;该血清对EHEC O157:H7野生株和espF突变株(△espF)的EspF蛋白均有特异性,并经辛酸-硫酸铵法获得一定纯度的抗体.结论 成功地制备了效价高、特异性强的EHEC O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体.
作者:周莹;赵素慧;韦耀;王春晖;张其威;万成松 刊期: 2012年第03期
目的 总结部、省室间质量评价结果,提高实验室微生物鉴定水平.方法 2001-2009年参加卫生部和湖北省临检中心的微生物学室间质评活动,菌株鉴定采用法国梅里埃VITEK32细菌鉴定系统进行鉴定,药敏试验采用K-B法,药敏试验结果判定以CLSI/NCCLs标准进行.结果 部、省质评菌株共239株,其中革兰阳性球菌50株,肠杆科菌细菌67株,非发酵菌46株,奈瑟菌属细菌8株;肠杆科菌和肠球菌属细菌鉴定正确率较高为100.0%,菌株鉴定总正确率为92.1%;药敏试验共测试63株菌,总正确率为90.5%.结论 参加微生物室间质评活动对提高细菌鉴定水平、促进抗生素的合理使用有积极的推动作用.
作者:邹义春;柯俊 刊期: 2012年第03期
计算机三维重建技术配合光学显微镜、共聚焦扫描显微镜,在寄生虫细微结构的研究中发挥着重要的作用,为研究寄生虫的生理生化及致病机理提供了基础.本文分别从原虫、蠕虫和节肢动物三个方面介绍了三维重建技术在寄生虫研究中的应用,同时对其今后的发展前景作了一定的阐述.
作者:赵安东;连国云;刘志刚 刊期: 2012年第03期
目的 探讨稽留流产刮宫术后宫腔粘连的防治方法.方法 选择稽留流产患者共300例,随机分为两组:研究组160例,刮宫术前使用米非司酮配伍米索前列醇,术后服用妈富隆片1片;对照组140例,手术前后无服药.观察两组手术时间、出血量以及术后月经变化.结果 研究组患者手术时间和出血量为(4.1±1.8)min、( 16.1±9.4)ml,分别较对照组的(7.9±2.3) min、(37.3±13.6)ml短或少,差异有统计学意义(P<0.05);术后阴道流血时间和流血量为(4.68±1.21)d、(43.5±12.6)ml,分别较对照组的(7.65±1.23)d、(57.3±13.4)ml短或少,差异有统计学意义(P<0.05);月经复潮时间较对照组早,轻、中度宫腔粘连发生较对照组少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 稽留流产患者刮宫术前使用米非司酮配伍米索前列醇,术后服用妈富隆,可有效预防宫腔粘连的发生.
作者:刘珮瑜;何肖莲;贺纯 刊期: 2012年第03期
目的 探讨敏感型心肌钙蛋白T( hs-cTnT)对早期诊断急性心肌梗死(AMI)的临床应用价值.方法 应用发光免疫法分别测定67例AMI患者和58例非AMI患者,同一份血清标本作标准型心肌钙蛋白I(cTnI)和hs-cTnT检测.结果 标准型cTnI检测AMI患者的敏感度和特异性分别为68.7%和53.4%,hs-cTnT为74.6%和51.7%.hs-cTnT检测的接受者操作特征(ROC)曲线下面积(AUC)和诊断灵敏度分别为0.659和70.2%,均高于标准型cTnI检测的0.639和59.7%;标准型cTnI检测的佳cutoff值为0.035μg/L,hs-cTnT检测为0.0125 μg/L.结论 应用hs-cTnT早期诊断AMI的准确性和灵敏度优于标准型cTnI的检测.
作者:黄小媛;廖军;汤勇才 刊期: 2012年第03期
目的 观察加巴喷丁复合吗啡预防性镇痛对大鼠慢性压迫坐骨神经(CCI)后导致的机械缩足阈变化以及脊髓背角肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 随机选择重量(180±20)g的成年雄性SD大鼠24只,分为假手术组(S组)、模型组(M组)、预防性镇痛组(P组)和常规镇痛组(N组).观察不同方式给药的模型组和对照组大鼠的行为学变化.术后10 d分离脊髓通过免疫组化检测TNF-α水平的变化.结果 术前各组大鼠机械痛阈差异无统计学意义,与M组相比,手术后各时段S、P、N组都存在不同程度的改变,差异均有统计学意义(P<0.05);P、N组TNF-α的积分光密度均值(IOD)水平分别为(0.2185±0.01980)、(0.2301±0.01386),与M组的(0.2902±0.01325)比较明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 加巴喷丁复合吗啡对大鼠采用预防性镇痛有较好的效果,可显著降低CCI后导致的机械痛阈,降低TNF-α在脊髓背角的表达.
作者:张晓晨;刘红;万朝权;朱燕燕;杨幸怡;阳桂香;成建定;李朝晖 刊期: 2012年第03期
目的 建立一种检测肠出血型大肠埃希菌(EHEC)产毒基因stx1和stx2的TaqMan双重实时荧光PCR法.方法 根据GenBank公布的EHEC stx1和stx2基因序列进行比对后设计相应的PCR引物和TaqMan探针,探针报告基团分别使用FAM和HEX标记,淬灭基团使用BHQ1标记.建立双重实时荧光PCR反应体系并对反应条件进行优化,对方法的灵敏度、特异性及其重复性进行分析.结果 建立了EHEC双重实时荧光PCR检测方法.菌液浓度为102~108 cuf/ml时,均可观察到扩增曲线,且扩增曲线平滑;检测30份模拟临床样品,均检测到stx1和stx2基因,且均培养出EHEC,该方法灵敏度为100%;3次重复测定108、105、102 cfu/ml 3个高、中、低浓度的菌液DNA模板,得到其扩增曲线,计算各浓度的Ct值标准差及变异系数,均小于5%,在误差允许范围内.结论 建立的双重实时荧光PCR法可快速、灵敏、特异、有效地检出EHEC.
作者:陈应坚;刘渠;甘莉萍;金玉娟;杨慧 刊期: 2012年第03期
目的 探讨能量限制对环磷酰胺处理大鼠卵巢的保护作用.方法 将48只10周龄大鼠随机分为对照组、能量限制组、环磷酰胺组、能量限制加环磷酰胺组.观察各组动物的动情周期,实验结束时称取卵巢重量,并进行卵巢组织形态学观察及卵泡计数,测定血清雌二醇、促黄体生成素、促卵泡生成激素评估卵巢储备功能.结果 经环磷酰胺处理的大鼠出现精神萎靡、体重下降、动情周期逐渐消失,卵巢体积缩小,颗粒细胞变性、坏死,各期卵泡数均明显减少,闭锁卵泡数增加(P<0.01).能量限制组大鼠卵巢的原始卵泡数比对照组明显增多(P<0.01),窦状卵泡数减少(P<0.01).能量限制加环磷酰胺组的原始卵泡和初级卵泡数比环磷酰胺组明显增多(P<0.01),且卵巢组织受损程度较单用环磷酰胺轻.环磷酰胺处理组大鼠血清雌二醇显著低于对照组和能量限制组,促黄体生成素和促卵泡生成素水平则显著高于对照组和能量限制组(P<0.01).结论 能量限制模型可以抑制原始卵泡的的转化使其数量明显增多,并可以适度减轻化疗造成的结构与功能损伤,使卵巢保留有一定储备功能.
作者:向延芳;傅玉才;许锦阶;栗丽;林旋豪;陈晓纯;罗丽莉 刊期: 2012年第03期
目的 探讨深圳市体检人群不同性别、年龄组代谢综合症(MS)诊断及其相关危险因素流行病学分布特点.方法 按照2004年中华医学会推荐诊断标准,对收集到的8 884名体检人员的体重、身高、血压、空腹血糖及血脂进行不同性别、年龄组MS诊断及其相关危险因素流行病学分布特点分析.结果 MS患病人数1 412,总患病率为15.89%,其中男性患病率为19.98%,女性患病率为11.52%,患病率在50岁之前,男性明显高于女性,61岁以后女性高于男性,差异均有统计学意义(P<0.05).高血压患病率男女分别为21.90%、15.17%,高空腹血糖患病率男女分别为7.10%、4.73%,高甘油三酯(TG)患病率男女分别为44.32%、22.10%,高BMI患病率男女分别为39.07%、18.32%,均为男性高于女性,差异有统计学意义(P<0.05).高甘油三酯血症、肥胖患病率高;各代谢危险因素间有相关性(P<0.001).结论 深圳市体检人群MS患病率高,特别是青年男性、老年女性,主要危险因素为高甘油三酯血症、肥胖.
作者:王红卫;蔡永江;刘颜;黄志平;朱青云;曹菊秀;朱翠凤 刊期: 2012年第03期
目的 研究人用狂犬病纯化疫苗(RV)对妊娠期Th 1/Th2类细胞因子谱的影响.方法 对所有可疑狂犬病毒暴露者进行RV的全程接种,在接种RV的第0、14、45天时采血并分离外周血单个核细胞与RV进行培养,采用ELISA法检测抗狂犬病病毒抗体,体外培养检测淋巴细胞增殖能力,CBA法检测细胞培养上清液中Th1类细胞因子:干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-2(IL-2)以及Th2类细胞因子:IL-4、IL-5、IL-10的水平.结果 17例暴露者于RV全程注射后17 d(第45天)抗体检测阳性;RV刺激后,暴露者第45天淋巴细胞增殖能力明显高于第0天(P<0.05);当RV刺激后,暴露组第14天、第45天产生IL-2、IL-4、IL-5的含量显著高于未刺激组及暴露组第0天水平(P<0.05).结论 妊娠期注射RV在刺激机体产生体液免疫的同时,可以有效地诱导Th1/Th2类细胞因子的产生.
作者:孟瑞琳;谭小华;黄琼;刘芳兰;王凤岩 刊期: 2012年第03期
目的 探讨孤儿核受体Nur77激动剂CsnB对人HepG2肝癌细胞胆固醇代谢调控基因的影响.方法 利用CsnB诱导Nur77在人HepG2肝癌细胞中的高表达.通过与CsnB相同剂量的DMSO对照组的比较,观察CsnB作用不同时间后肝细胞胆固醇代谢相关重要基因的变化,如低密度脂蛋白受体(LDLR)、HMGCoA还原酶(HMGCR)和肝X受体α(LXRα).结果 10 μg/ml终浓度CsnB刺激HepG2细胞可以达到Nur77的高表达,并在作用1.5 h后表达量达到高峰.相同浓度CsnB刺激HepG2细胞后,LDLR与HMGCR随时间的延长逐渐下降,并且两种基因在CsnB处理24 h后的表达量与0h比较,差异有统计学意义(P<0.05);而LXRα的表达量变化不大.结论 CsnB可以有效诱导Nur77在HepG2细胞中的高表达,其对于肝癌细胞胆固醇代谢调控基因的影响主要表现为LDLR与HMGCR的下调.
作者:张鹏;裘宇容;王前 刊期: 2012年第03期
目的 了解重庆市碘营养状况,科学制定碘缺乏病防治对策.方法 调查重庆市40个区县,每县随机抽取1所中心小学100名学生,采集尿液,采用砷铈催化分光光度法测定尿碘,计算中位数.结果 检查8~10岁儿童尿碘4 050人,尿碘中位数为246.00μg/L,碘含量≥100 μg/L的尿样占88.07%.40个区县儿童尿碘中位数均大于100μg/L,中位数在100~300 μg/L间33个,占82.5%;300 μg/L以上7个,占17.5%.男女性别间及年龄间尿碘差异无统计学意义(P>0.05).渝西、渝东、渝东南3类地区儿童尿碘中位数分别为223.9、270.0和256.6μg/L,差异有统计学意义(P<0.05).经济欠发达和经济较好的2类地区以及榨菜生产和非榨菜生产2类地区儿童尿碘差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 重庆市儿童碘营养状况良好,但部分地区和儿童可能存在碘营养过剩.
作者:陈亚林;罗兴建;吴成果;李珊珊;肖邦忠 刊期: 2012年第03期
目的 比较不同鼻咽癌细胞株在鸡胚尿囊膜模型上促进血管生成能力的差异.方法 选用6日龄鸡胚,开窗后分别种植5-8F、6-10B及CNE-2三种鼻咽癌细胞株,三种细胞株细胞数为2×106/鸡胚者各一组,细胞数为5×105/鸡胚者各一组,另一组为对照组(PBS),每组10个鸡胚.孵育6日后,统计分析新生血管数及血管面积/鸡胚面积比.结果 种植细胞数为5×105/鸡胚时,5-8F、6-10B细胞部分鸡胚有移植瘤形成,CNE-2细胞鸡胚均未见成瘤.种植细胞数为2× 106/鸡胚时,三种鼻咽癌细胞株均可100%成瘤,其新生血管数依次递减,分别为(38.7±2.50)、(33.5±4.43)、(29.7±2.71),差异有统计学意义(P<0.05);血管面积/鸡胚面积比分别为(22.2±2.18)%、(18.7±2.45)%、(16.9±2.62)%,均高于对照组的(9.5±1.86)%,差异有统计学意义(P<0.05),且5-8F面积比高于其他两种细胞株(P<0.05).结论 鼻咽癌5-8F、6-10B及CNE-2三种细胞株在鸡胚尿囊膜模型上血管生成能力依次减弱,实验研究可根据实际情况选用.
作者:林少雄;李湘平;鲁娟;梁碧君;刘雄 刊期: 2012年第03期
目的 通过对贫困山区肺结核患者实施交通补助后的患者治疗依从性的研究,探讨提高贫困山区肺结核患者治愈率的有效途径.方法 选取重庆市国家级贫困县WX县作为实施区县,连续选择200例新确诊初治涂阳肺结核患者,对患者实施适当的交通补助,以评价实施交通补助的效果.结果 在课题干预前后,患者治疗2月末随访查痰率由63.1%提高到96.0%,痰菌阴转率由59.0%提高到88.5%,治疗5月末随访查痰率由95.9%提高到98.5%,患者随访按时取药率由65.4%提高到99.5%,差异均有统计学意义(P<0.05).患者治疗5月末痰菌阴转率由95.9%提高到96.0%,治疗6月末随访查痰率由97.7%提高到99.0%,6月末痰菌阴转率由96.8%降低到96.0%,患者治愈率由96.8%降低到96.0%,以上数据比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 为肺结核患者提供交通补助有助于提高患者按时取药和查痰的比例,但要真正确保患者规则服药,达到治愈目的,需要结合其他措施综合实施.
作者:汪清雅;熊鸿燕;刘英 刊期: 2012年第03期
目的 探讨中药复方镇眩汤治疗梅尼埃病的机制.方法 采用阻塞前庭导水管的传统方法造模,分为镇眩汤高、中、低剂量组,西药组、模型组和假手术组,观察大鼠用药前后听觉诱发电位听觉阈值的变化及大鼠内耳水通道蛋白1表达的影响.结果 模型组与假手术组用药前听阈值分别为(54.21±7.91)和(40.03 ±6.75) dBL,差异有统计学意义(P<0.05);用药后镇眩汤高剂量组听阈值为(41.27±6.58) dBL,模型组为(56.31±7.64)dBL,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,西药组、镇眩汤高剂量组、中剂量组、假手术组水通道蛋白1表达差异均有统计学意义(P<0.05);与假手术组比较,低、中剂量组水通道蛋白1差异有统计学意义(P<0.05),而高剂量组与西药组差异无统计学意义(P>0.05).结论 镇眩汤对大鼠内耳水通道蛋白1的调节作用可能是治疗梅尼埃病的机制之一.
作者:陈晓明;陈宝田;葛鑫宇 刊期: 2012年第03期
目的 了解深圳市宝安区学校、幼儿园传染病防制工作及卫生保健人员的基本情况,为规范学校传染病防制工作提供依据.方法 采用分层抽样的方法,选取宝安区各类中小学、托幼机构共计80所进行问卷调查.结果 所调查的学校均设有医务室及专职的卫生保健人员,传染病防制的各项制度方面比较健全,各项防控工作均有开展.卫生保健人员中位年龄33.7岁;男女性别比为1∶7.33;学历构成以大专(44%)和中专/高中(44%)为主;职称多为无职称(42.7%)和初级职称(40%);从事卫生防病工作平均年限为2.36年;50.7%的人员认为目前的工作超负荷;仅24%的人员对目前的收入水平满意.结论 深圳市宝安区学校传染病防治工作管理水平有待提高,卫生保健人员性另 、职称、学历等结构不合理,政府部门应加强人员的技能培训,切实提高人员的收入,以优化和稳定卫生保健队伍.
作者:陈兵;赵萍;吴泰顺;马智超;陈亿雄;周小涛;任海燕 刊期: 2012年第03期
目的 观察替比夫定对乙肝携带者抗结核治疗中肝损害的预防治疗疗效.方法 收集我院乙肝携带并有肺结核患者(A组)30例,及未进行抗病毒治疗的乙肝携带并有肺结核患者(B组)25例,两组开始抗结核时均采用2HRES/7HR化疗方案.A组给予水飞蓟宾护肝治疗和替比夫定抗病毒治疗;B组仅给予水飞蓟宾护肝治疗.观察两组治疗前后肝功能及HBV DNA变化情况.结果 A组治疗中不良事件发生率明显低于B组(P<0.05).治疗前A、B两组肝功能与HBV DNA水平差异无统计学意义(P<0.05).A组治疗后HBV DNA(log)水平为(3.68±1.04),与治疗前的(6.74±2.27)及治疗后B组的(6.57±2.54)比较差异有统计学意义(P<0.05).B组治疗后肝功能ALT、AST增高,与治疗前及治疗后A组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 乙肝携带合并肺结核患者使用替比夫定抗病毒治疗可以有效抑制患者体内HBV的复制,预防肝功能损害,可以支持化疗顺利进行.
作者:何纲;丁佩佩;甄沛林;吴兴柳;胡长征 刊期: 2012年第03期
目的 研究轻度认知功能障碍(MCI)与阿尔茨海默病(AD)患者血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、同型半胱氨酸( Hcy)的变化,探讨炎症及血管因素在AD临床诊断和治疗中所起的作用.方法 依据美国DSM-IV诊断标准,将研究对象分为健康对照组、MCI组和AD组;hs-CRP检测采用免疫透射比浊法,Hcy检测采用酶循环法.结果 AD组hs-CRP水平为(0.92±0.88) mg/L,与健康对照组的(2.24±1.34)mg/L及MCI组的(11.25±3.73) mg/L相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),MCI组与健康对照组相比则明显升高(P<0.05);AD组Hcy水平为(18.53±7.06)μmol/L,与健康对照组的(14.36±4.86) μmol/L及MCI组的(15.22±5.90) μmol/L相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),MCI组与健康对照组相比无明显变化(P>0.05).结论 炎症以及血管因素在AD的临床诊断和治疗中具有重要意义.
作者:刘云云;刘中霖;王丽敏;何蒙娜;杨幸怡;温小军;彭英 刊期: 2012年第03期
目的 构建携带人甲状旁腺相关激素(PTHLH)基因的慢病毒表达载体pGC-FU/PTHLH.方法 酶切载体pGC -FU,根据人PTHLH基因合成特定引物,扩增目的基因片段,将其克隆到pGC-FU质粒(含EGFP基因)上,菌落PCR鉴定及测序分析重组载体,使用Lipofectamine 2000诱导转染pGC-FU、pHelper 1.0和pHelper 2.0载体三质粒进入293T细胞包装慢病毒,并用带PTHLH的慢病毒感染293T细胞和鼻咽癌CEN1细胞确认慢病毒包装是否成功.结果 菌液PCR产物琼脂糖凝胶电泳鉴定显示,与理论预计值阳性转化子735 bp,阴性转化子198 bp基本相吻合;PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析,结果完全匹配,进一步鉴定载体构建成功.分别将质粒包装系统共转染293T细胞,包装产生空白对照慢病毒( pGC- FU)和过表达PTHLH的慢病毒(pGC-FU /PTHLH);或用携带PTHLH和EGFP基因的病毒上清感染CNE1细胞,48 h后,倒置荧光显微镜下观察293T和CNE1细胞,均可见绿色荧光,转染成功.结论 成功构建携人PTHLH基因慢病毒表达载体,为进一步研究PTHLH基因在鼻咽癌转移中的作用及鼻咽癌发病分子机制奠定了基础.
作者:樊英;李佳;陈靖;黄仲曦;姚开泰 刊期: 2012年第03期
目的 比较冠心病患者和健康人血清中胎盘生长因子(PIGF)水平,探讨其与冠心病、冠脉病变程度、心肌损伤的相关性.方法 采用ELISA法测定87例冠心病患者(冠心病组)及61例健康人(对照组)血清的PIGF水平,分析血清PIGF水平与冠心病的相关性;将冠状动脉造影结果与血清PIGF水平进行比较,分析血清PIGF水平与冠心病患者冠脉病变支数及Gensini冠脉病变积分之间的相关性;以cTnI 0.03 ng/ml和0.1 ng/ml为分界值,将冠心病组分成冠心病Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,比较各组之间血清PIGF水平.结果 冠心病组血清PIGF水平为(11.55±3.10)ng/ml,高于对照组的(5.81±2.21)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05).血清PIGF水平与冠脉病变支数和Gensini冠脉病变积分均无相关性(P>0.05).冠心病Ⅱ组和冠心病Ⅲ组血清PIGF水平分别为(13.12±2.45)、(14.62±3.25)ng/ml,与冠心病Ⅰ组的(9.10±2.31) ng/ml比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 血清PIGF水平与冠心病、心肌受损之间存在相关性,PIGF水平与冠脉梗塞的严重程度的相关性需进一步研究.
作者:林勇平;曾翠云;孟艳辉;刘忠民 刊期: 2012年第03期