学术投稿

脑死亡供体肝脏病理改变及临床移植应用评估的探讨

农江;孙煦勇;董建辉;秦科;蓝柳根;赖彦华;聂峰;文海涛;李壮江;杨建均;何昌桓

关键词:脑死亡, 肝移植, 肝细胞
摘要:目的 探讨脑死亡供体肝脏病理改变及对临床移植应用的指导意义.方法 对23例脑死亡供体肝脏进行活检,做HE染色、PASM染色、网染(快速超声波处理)及电镜检察.结果 光镜下发现23例肝细胞均有不同程度的浊肿变性,但病变区域均<50%;3例见灶性肝脂肪变性,22例肝小叶结构、界板、汇管区多无著变,1例炎症细胞浸润明显.电镜下主要改变为线粒体肿胀及内质网扩张.选择22个肝脏对6例肝硬化、16例肝癌患者施行了移植,手术均获成功.21例受者的国际标准化比值术后快速下降,7d左右恢复正常,于术后20~30 d顺利出院.随访5-24个月,其中1例术后9个月因肝内胆管结石肝功能衰竭再次行肝移植术,2例肝癌患者分别于术后13、15个月复发,失访,余肝功能正常.1例乙肝肝硬化爆发肝功能衰竭患者术后8d死于重症肺部感染及消化道出血术.结论 脑死亡供肝若肝细胞无明显坏死、浊肿<50%、脂肪化<30%、无纤维化、汇管区无明显改变可以作为移植供体.
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  • 深圳市宝安区海洛因依赖者患肺结核的流行病学调查

    目的 对深圳市宝安区海洛因依赖者进行肺结核的流行病学调查,调查其患病率及分布特征.方法 参照2010年第5次全国结核病流行病学调查方案和实施细则,对深圳市宝安区药物滥用监测点发现的海洛因成瘾者进行结核病筛查.结果 调查海洛因依赖者1 383人,肺结核的患病率为2.96%(41/1 383),高于全省常住人口患病率229.97/10万(x2=359.898,P=0.000).30岁以下、30~39岁、40岁以上年龄组的患病率分别为0.97%、3.00%、5.90%(x2=13.567,P<0.001).男性肺结核患者高于女性,但差异无统计学意义(x2=0.143,P>0.05).结论 深圳市宝安区海洛因依赖者肺结核患病率较高,多集中于30~49岁年龄组,而且随着年龄增长患病率有增加的趋势.

    作者:夏莉;张泉水;曾令延;钟鸿剑;蔡翠兰;高纯良;任小龙 刊期: 2012年第12期

  • 申克孢子丝菌的扫描电镜观察

    目的 观察耐伊曲康唑申克孢子丝菌的超微结构特征,为申克孢子丝菌的临床鉴定提供基础资料.方法 使用玻片法培养申克孢子丝菌,处理后在电镜下观察、拍照及测量.结果 孢子丝菌标本图像清晰立体,可见假轴状分生孢子梗,分生孢子通常为孤立、直立生长,圆锥顶端相对,沿着菌丝轴增殖扩散,形成群集的细齿状的分生孢子链,分生孢子链较长,可弯曲.分生孢子为卵形,细长,约2.0 μm×3.5 μm大小,透明,表面不光滑,有不规则凹陷.结论 该方法准确、可靠,可为申克孢子丝菌临床鉴定提供理论依据.

    作者:黄怀球;袁立燕;张静;钟毅;赵静;张晓辉;薛汝增;李美荣;陈荣章;李文娟 刊期: 2012年第12期

  • 脑死亡供体肝脏病理改变及临床移植应用评估的探讨

    目的 探讨脑死亡供体肝脏病理改变及对临床移植应用的指导意义.方法 对23例脑死亡供体肝脏进行活检,做HE染色、PASM染色、网染(快速超声波处理)及电镜检察.结果 光镜下发现23例肝细胞均有不同程度的浊肿变性,但病变区域均<50%;3例见灶性肝脂肪变性,22例肝小叶结构、界板、汇管区多无著变,1例炎症细胞浸润明显.电镜下主要改变为线粒体肿胀及内质网扩张.选择22个肝脏对6例肝硬化、16例肝癌患者施行了移植,手术均获成功.21例受者的国际标准化比值术后快速下降,7d左右恢复正常,于术后20~30 d顺利出院.随访5-24个月,其中1例术后9个月因肝内胆管结石肝功能衰竭再次行肝移植术,2例肝癌患者分别于术后13、15个月复发,失访,余肝功能正常.1例乙肝肝硬化爆发肝功能衰竭患者术后8d死于重症肺部感染及消化道出血术.结论 脑死亡供肝若肝细胞无明显坏死、浊肿<50%、脂肪化<30%、无纤维化、汇管区无明显改变可以作为移植供体.

    作者:农江;孙煦勇;董建辉;秦科;蓝柳根;赖彦华;聂峰;文海涛;李壮江;杨建均;何昌桓 刊期: 2012年第12期

  • 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7菌株的细胞毒性比较

    目的 比较肠出血性大肠埃希菌流行菌株的细胞毒性,筛选强毒株,为进一步研究细菌的致病机理提供理论依据.方法 采用PCR技术鉴定菌株的毒力基因E-hlyA、stx2、stxl,Giemsa染色观察细菌的黏附情况,通过测定感染后Vero细胞的乳酸脱氢酶释放情况了解细菌的Vero细胞毒性强弱.结果 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7菌株含有的毒力基因不同,均具有较强的黏附能力和Vero细胞毒性,其中国际菌株933W/O,中国流行菌株882364、01H112和日本菌株Cua9的Vero细胞毒性较强.结论 筛选出的流行菌株强毒株,可用于进一步的细菌感染模型构建和毒力基因致病机制研究.

    作者:王春晖;赵素慧;万成松 刊期: 2012年第12期

  • 斑节对虾抗菌肽Penaeidin基因的克隆及其序列分析

    目的 克隆斑节对虾Penaeidin抗菌肽基因,构建克隆载体,测序后进行序列分析.方法 从斑节对虾采集血淋巴后提取总RNA,经反转录得到eDNA,用特异性引物进行PCR扩增得到具有双酶切位点的重组Penaeidin目的基因片段.将其连接至PMD18-T载体,转化至Top10克隆菌进行克隆并测序,用生物信息学软件进行序列分析.结果 测序结果表明斑节对虾Penaeidin抗菌肽基因全长225 bp,编码74个氨基酸.将克隆所得的斑节对虾Penaeidin基因序列与NCBI数据库中的斑节对虾Penaeidin基因(FJ686016,AF475082)同源性为100%,与其它物种虾的Penaeidin基因同源性为48%~92%.分子进化树显示斑节对虾Penaeidin抗菌肽和印度对虾Penaeidin抗菌肽聚为一大枝,而圣保罗对虾、小褐美对虾、巴西美对虾、白滨对虾Penaeidin聚为一大枝,南方滨对虾Penaeidin则自成一枝.二级结构预测表明本次克隆得到的斑节对虾Penaeidin信号肽区为β折叠片,成熟肽主要为β折叠片和转角结构.成熟肽的N端和C端亲水性较强,N端为柔性区域.其中氨基酸序列30-40和60-70表现为潜在的T细胞抗原表位.结论 成功克隆出斑节对虾Penaeidin基因,对其序列的分析结果将为后续的蛋白表达、工业化生产和理论研究奠定前期基础.

    作者:高安健;赵若聪;叶松;曾硕果;邬玉兰;刘志刚;王亚龙 刊期: 2012年第12期

  • 携带EGFP与rtTA双基因的逆转录病毒载体的构建及其在PA317细胞中的表达

    目的 构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、rtTA双基因的重组逆转录病毒载体pLXSN-EGFP-rtTA,并在PA317细胞中表达.方法 以质粒pEGFP-C1为模板进行PCR反应获得EGFP基因片段,定向插入逆转录病毒载体pLXSN,筛选出正确的重组逆转录病毒载体pLXSN-EGFP.PCR方法从pTet-on质粒中扩增出rtTA基因,酶切纯化后克隆于逆转 录病毒载体pLXSN-EGFP中,限制性内切酶酶切分析及PCR鉴定筛选出正确的重组载体pLXSN-EGFP-rtTA,脂质体介导转染PA317细胞,PCR方法检测PA317细胞内EGFP、rtTA基因,RT-PCR方法检测PA317细胞内rtTA基因的mRNA表达,荧光显微镜观察EGFP基因的表达情况.以NIH3T3细胞为靶细胞测定重组逆转录病毒滴度.结果 成功构建了表达EGFP、rtTA双基因的重组逆转录病毒载体,转染PA317细胞后,RT-PCR方法可检测到rtTA基因的mRNA表达,荧光显微镜下可观察到EGFP基因表达所产生的绿色荧光,说明连接有EGFP和rtTA双基因的逆转录病毒载体在PA317细胞中可正常表达,转染pLXSN-EGFP-rtTA载体的PA317细胞可产生4.8x 104 CFU/ml病毒滴度的重组病毒.结论 成功构建表达EGFP、rtTA双基因的重组逆转录病毒载体,该载体可在PA317细胞内正常表达,获得较高滴度的病毒上清.

    作者:赵宁;邓新燕;单于;郭中敏 刊期: 2012年第12期

  • DEPDC7基因在肝细胞及肿瘤细胞中的差异性表达

    目的 研究DEPDC7基因在正常肝细胞、肝癌细胞及其他肿瘤细胞中的表达情况.方法 常规培养正常肝细胞HL-7702,肝癌细胞SMMC7721、HepG2、Huh-7,其他肿瘤细胞ZR-7530、MDA-MB-231、SGC7901、SW480.用MTT检测肝癌细胞转染前后的增殖情况,用RT-PCR方法在转录水平检测DEPDC7基因的表达,用Western blot方法从蛋白质水平检测DEPDC7蛋白的表达.结果 3株肝癌细胞生长增殖速度差异有统计学意义(P<0.05).肝癌细胞DEPDC7基因在mRNA和蛋白质表达水平比正常肝细胞降低(P<0.05),而其他肿瘤细胞DEPDC7基因表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 DEPDC7基因在正常肝细胞中选择性高表达,而在肝癌细胞株中呈低表达.

    作者:廖之君;王晓江;王心睿;林德馨 刊期: 2012年第12期

  • 肇庆市2010-2011年手足口病疫情和病原学分析

    目的 了解肇庆市2010-2011年手足口病的流行特征.方法 应用描述流行病学的方法对肇庆市2010-2011年手足口病疫情资料进行分析.结果 肇庆市2010年报告手足口病10 112例,报告发病率为263.70/10万,死亡病例8例,病死率为0.21/10万;2011年报告手足口病15 030例,报告发病率为383.61/10万,无死亡病例报告.手足口病以4-7月发病较多,城区或城乡结合地区和经济发达地区为手足口病的高发区域.手足口病发病以散居和幼托儿童为主,1~3岁年龄段发病率高.2010年以EV71为主要流行毒株,2011年EV71、其他肠道病毒和CoxA16相继成为优势毒株.2010年重症病例比例与EV71构成比成正相关关系(r=0.573,P<0.01).结论 肇庆市手足口发病存在明显的季节、地区、性别及年龄的差异,重症病例发生与EV71构成有关.

    作者:朱碧柳;冼国佳;钟伟强;麦炜;程丽涓 刊期: 2012年第12期

  • 353例主动脉夹层中以腹泻为首发表现的临床病例分析

    目的 探讨以腹泻为首发表现的主动脉夹层患者的临床特点.方法 收集主动脉夹层患者353例,寻找以腹泻症状为首发表现的临床病例,分析其发病特点及临床转归.结果 仅发现3例主动脉夹层以腹泻为首发表现,该3例患者以腹泻求治急诊科,均发生不同程度、不同时间的误诊,均在住院期间死亡.3例患者的死亡原因得到确诊,其中1例因主动脉造影确诊,1例因床边超声心动图确诊,1例因尸检确诊.结论 以腹泻为首发表现的主动脉夹层主诉不典型,具有较高的误诊率及院内死亡风险,临床医师应具备较高的警惕性.

    作者:肖平喜;戴振林;胡作英;张航;陈绍良;柳剑 刊期: 2012年第12期

  • 喹诺酮耐药大肠埃希菌尿道感染现状及危险因素分析

    目的 分析喹诺酮耐药大肠埃希菌尿道感染现状及危险因素,为临床合理选用抗生素提供依据.方法 回顾性分析348例大肠埃希菌尿道感染临床现状,以喹诺酮敏感大肠埃希菌为对照菌株,对喹诺酮耐药大肠埃希菌感染危险因素进行分析.结果 348株大肠埃希菌尿道感染中检出喹诺酮耐药菌203株,占58.3%.Logistic回归分析显示三代头孢菌素及喹诺酮类药物使用、尿路引流和细菌产超广谱β-内酰胺酶是喹诺酮耐药大肠埃希菌感染的独立危险因素.结论 尿道感染大肠埃希菌中喹诺酮耐药株的检出率高、耐药性强,其感染患者平均住院时间长、医疗费用高.喹诺酮耐药菌株感染具有多个危险因素,加强对这些危险因素的控制有助于预防耐药菌株感染的扩散.

    作者:张安兵 刊期: 2012年第12期

  • 腹水型晚期血吸虫病治疗方法研究进展

    腹水型晚期血吸虫病患者基本丧失劳动力,一般不能彻底治愈,可达到临床治愈,但不少病人仍反复发作,需长期治疗.腹水型晚期血吸虫病患者是我国晚期血吸虫病医疗救治工作的重点对象,为了更好地提高医疗救治效果,本文就近几年来腹水型晚期血吸虫病治疗方法作一综述.

    作者:来如意;何永康;邓维成;刘爱忠;荆群山 刊期: 2012年第12期

  • 西尼罗病毒前膜蛋白在果蝇细胞S2中的表达与鉴定

    目的 克隆西尼罗病毒(WNV)前膜蛋白(prM)基因,将其在果蝇细胞(S2)中表达,为制备研制诊断试剂所需的单克隆抗体奠定基础.方法 以质粒WNV-CME为模板,PCR扩增获得prM基因,与T载体连接,测序正确后酶切,酶切产物与果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisC重组,重组质粒与pCoBlas共转染果蝇S2细胞,25 μg/ml Blasticidin筛选获得抗性细胞,500μmol/L CuSO4溶液诱导表达,72 h后收集细胞与细胞上清进行Western blot鉴定.结果 酶切与测序结果表明成功构建重组表达载体WNV-prM-pMT,Western blot显示目的蛋白在果蝇细胞S2内稳定表达.结论 在果蝇S2细胞内成功地稳定表达WNV prM蛋白,为下一步WNV单克隆抗体的制备奠定了实验基础.

    作者:李林海;杜鹏;陈丽丹;王文敬;石玉玲;黎诚耀 刊期: 2012年第12期

  • 与食道鳞状上皮细胞癌发生相关的细胞骨架及相关蛋白的筛选鉴定

    目的 比较永生化食道上皮细胞系和食道鳞状上皮细胞癌(ESCC)细胞系的差异表达细胞骨架相关蛋白图谱,筛选并探讨与ESCC发生发展相关的细胞骨架及相关蛋白.方法 采用组分蛋白分离方法提取细胞骨架相关蛋白,利用双向凝胶电泳(2DE)联合MALDI-TOF/TOF串联质谱技术,分析并鉴定永生化食道上皮细胞系NE1及ESCC细胞系HKESC-2中差异表达的细胞骨架及相关蛋白,并用Westem blot验证其中感兴趣的差异蛋白在一组食道上皮来源细胞系和ESCC患者肿瘤组织中的表达情况.结果 三次独立实验结果表明永生化食道上皮细胞系NE1和ESCC细胞系HKESC-2有52个蛋白点表达差异超过2倍,31个蛋白点经质谱分析鉴定为28种蛋白质,其中16种蛋白质在HKESC-2细胞中表达上调,12种表达下调.Vimentin在所有ESCC细胞系和大部分ESCC肿瘤组织中均呈现高表达,而Annexin Ⅱ则呈现低表达甚至缺失.结论 多种细胞骨架及相关蛋白在ESCC发生发展过程中表达发生变化,某些细胞骨架及相关蛋白的特异性表达模式可能可以作为ESCC诊断的分子标志.

    作者:蔡贞;周园;熊石龙;温淑娟;裘宇容 刊期: 2012年第12期

  • 86例复治涂阳肺结核患者的耐药分析

    目的 探讨复治涂阳肺结核患者对抗结核药物的耐药特点.方法 回顾性分析86例复治涂阳肺结核患者的单耐药、多耐药及耐多药的情况及治疗转阴率和不良反应.结果 所有患者中,任何形式耐药占100%,多耐药占91.9%,耐多药占65.1%,一线药物耐药顺位为H>R>S>E,二线药物以对左氧氟沙星耐药的比例高,占37.21%;3个月后痰菌转阴率仅为60.46%,复治病例中耐药比例高的人群为40~60岁的中老年人,占68.96%;不良反应主要为过敏反应(54.65%)和肝功能异常(8.14%).结论 复治涂阳的肺结核耐药率高,且以中老年人为主,应当重视结核患者耐药性的检测及用药的规律性、足量性.

    作者:周家杰;曾伟凤 刊期: 2012年第12期

  • 超抗原的新研究进展

    超抗原是瑞典科学家怀特于1989年在国际上首次提出的免疫学概念.超抗原通过MHCⅡ阳性细胞介导能与特定的T细胞vβ领域架桥结合而不需要提示细胞参与呈递就能使T细胞活化与增殖.本文就其分类、性质和结构,以及相关疾病和临床进展作一综述.

    作者:李仲娟;杨朝令;李茉;胡芳 刊期: 2012年第12期

  • 53株临床分离肠球菌的耐药性及相关耐药基因分析

    目的 了解临床分离的53株肠球菌的耐药性与耐药基因的存在状况.方法 采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测肠球菌对9种抗生素的药敏结果,对该细菌进行总DNA的提取,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因,结合药物敏感试验分析菌株的耐药特征.结果 53株肠球菌检出含红霉素耐药基因ermB 26株,占49.0%;含毒力因子mefA9株,占17.0%;含Tn1546/Tn916转座子19株,占35.8%;含Tn917转座子11株,占20.8%.53株肠球菌对红霉素耐药高达94.3%,对高水平庆大霉素、高水平链霉素、环丙沙星、四环素和氨苄西林的耐药分别为75.5%、73.6%、75.5%、66.0%、62.3%;对万古霉素和利奈唑胺敏感均高达98.1%.结论 耐药基因与肠球菌耐药性密切相关,随着医学环境的改变,肠球菌对抗生素耐药性正逐步上升.

    作者:梁权辉;徐韫健;刘长连;曾丽微 刊期: 2012年第12期

  • 双水平无创正压通气技术治疗急性大面积脑梗死合并呼吸衰竭的临床体会

    目的 观察双水平无创正压通气技术(BiPAP)治疗急性大面积脑梗死合并呼吸衰竭的疗效及其影响因素.方法 选取大面积脑梗死合并呼吸衰竭患者64例,按照预后分为生存组和死亡组,并检测各组的氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、pH值、氧合指数(OI)、前白蛋白(PA)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响.结果 64例大面积脑梗死合并呼吸衰竭患者的生存率为60.94%(39/64).通气后两组的pH值、PCO2、PO2、OI和PA均较通气前明显提高(P<0.01),且生存组的PCO2、PO2、OI和PA水平较死亡组升高更为明显(P<0.01),而pH值两组无明显变化(P>0.05);两组的hs-CRP水平均较治疗前明显降低(P<0.01),且生存组的hs-CRP水平较死亡组降低更为明显(P<0.01).结论 BiPAP呼吸机在治疗急性大面积脑梗死合并呼吸衰竭的疗效显著,通气前动脉血气、OI、PA和hs-CRP水平对患者的预后有明显的影响.

    作者:刘裕英;黄澄;吕艳;陈永烨;李胜玲 刊期: 2012年第12期

  • 干预前后清洁切口手术围手术期抗菌药物使用情况调查分析

    目的 比较干预前后深圳市光明新区人民医院清洁切口手术围手术期抗菌药物使用情况,评价积极干预对规范清洁切口手术围手术期抗菌药物使用的作用.方法 采用回顾性调查的方法,选取干预措施实施前后3个月的清洁切口手术病例共521份,调查干预前后清洁切口手术抗菌药物的使用率、疗程合理率、选药时机合理率、选药品种合理率及联合用药情况.结果 清洁切口手术围手术期抗菌药物使用率由干预前的83.9%降至干预后的19.0%(x2=219.9,P<0.01),抗菌药物选药合理率由干预前的71.6%上升至干预后的87.2%(x2=4.980,P=0.026),疗程合理率由干预前的26.6%上升至干预后的48.9%(x2=9.158,P=0.020),差异均有统计学意义(P<0.05).干预后杜绝了联合用药现象,但用药时机合理率有所降低,仍有待改善.结论 加强对医生规范用药的宣传与培训、加强监督检查等措施,对控制清洁切口手术围手术期抗菌药物不合理使用现象具有积极的作用.

    作者:钟晓;肖丽华;汪东篱 刊期: 2012年第12期

  • 玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用

    目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8%和82.9%,复苏胚胎完整率分别为96.8%和63.1%,胚胎种植率分别为32.0%和18.1%,临床妊娠率分别为53.9%和33.1%,两组数据比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.

    作者:李宜学;田喜凤;王晓波;郭全;樊桂玲;刘娜 刊期: 2012年第12期

  • 刚地弓形虫感染与肝脏疾病

    刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的专性细胞内寄生原虫,可感染几乎所有的温血动物,寄生在除红细胞以外的所有有核细胞中,引起人兽共患的弓形虫病.据统计,全世界大约有1/3的人感染弓形虫.弓形虫感染可影响宿主的淋巴结、眼、中枢神经系统、肝和心等脏器的功能.本文对弓形虫感染所引起的肝脏病变作一综述,以期为进一步研究弓形虫所致消化系统疾病提供有价值的参考.

    作者:闫俊平 刊期: 2012年第12期

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