学术投稿

乙型肝炎病毒核壳蛋白对HepG2细胞凋亡的影响

李发武;卢放根;王文琦;吴福全

关键词:乙型肝炎病毒, 核壳蛋白, HepG2细胞, 凋亡, 机制
摘要:目的 初步探讨乙型肝炎病毒野生型核壳蛋白和L60V、I97L变异核壳蛋白影响HepG2细胞凋亡的分子机制.方法 将构建的野生型核壳蛋白融合表达载体(pEGFP-WT),L60V变异核壳蛋白(pEGFP-V60)和I97L变异核壳蛋白(pEGFP-L97)表达载体HepG2阳性细胞株复苏培养;Western blot检测各核壳蛋白表达;TNF-α、Act-D诱导各种HepG2细胞株凋亡,48 h采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测NF-κB信号传导通路中IKK-α、IκB-α、NF-κB P65蛋白表达与caspase-8、caspage-3蛋白表达情况.结果 Western blot检测pEGFP-WT组、pEGFP-V60组和pEGFP-L97组核壳蛋白表达基本相同;流式细胞术检测显示,与pEGFP-C1细胞株相比,48 h时pEGFP-WT、pEGFP-V60和pEGFP-L97表达细胞株的细胞凋亡率均明显偏低(P<0.01);4组细胞株IKK-α、IκB-α、NF-κB P65蛋白表达水平无明显差异,而pEGFP-WT组caspase-8、cagpage-3蛋白表达水平明显低于pEGFP-V60和pEGFP-L97组,且三组表达均明显低于pEGFP-C1组.结论 乙型肝炎病毒野生型和L60V、I97L变异核壳蛋白影响HepG2细胞凋亡可能与核壳蛋白影响细胞内caspase-3,8表达有关.
热带医学杂志相关文献
  • 儿童真菌感染的病原学研究

    目的 探讨广州地区儿童真菌感染的病原分布特点及其耐药状况,为防治儿童真菌感染提供实验室依据.方法 对患儿感染部位的真菌进行分离培养和鉴定:以ATBTM FUNGUS 3酵母样真菌药敏试验条进行常用抗真菌药物的敏感性分析.结果 从患儿标本中分离出558株真菌,主要来自呼吸道有299株,占53.58%;其次是消化道、伤口(创口)、泌尿系统和血液等,分别占28.14%、6.27%、4.66%、3.76%.其中白色假丝酵母菌367株,占65.77%;其次为热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、季也蒙假丝酵母菌等,分别占15.28%、5.02%、4.48%、3.41%、2.69%.从骨髓中检出5株马尔尼菲青霉,从脑脊液中检出3株新型隐球菌.真菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑等总耐药率分别为8.78%、4.84%、10.54%、1.36%、0.85%.结论 引起儿童真菌感染的主要病原菌是白色假丝酵母菌,对真菌感染应该有针对性地使用高效的抗真菌药物进行早期治疗.

    作者:谢永强;周珍文;虢艳;邓秋连;黄勇 刊期: 2009年第07期

  • 不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用

    目的 比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果.方法 将5~6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20 μg可溶性速殖子抗原(STAg)、20 μg STAg+40 μg蜂胶、20 μg STAg+1 000 U IFN-γ或20 μg STAg+40 μg蜂胶+1 000 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔14 d.末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况.攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子.结果 STAg+IFN-γ组、STAg+蜂胶+IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组(P<0.05);组织内速殖子虫荷显著降低(P<0.01),STAg+IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57.00%和79.06%;STAg+蜂胶+IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68.30%和79.06%.STAg+蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义.结论 在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ辅助STAg显著提高小鼠胸腺、脾比重,增强机体免疫能力,有效抵抗弓形虫的感染攻击,脑、肝组织速殖子虫荷显著减少.

    作者:刘成芳;殷国荣;赵云鹤;张卫国;刘红丽 刊期: 2009年第07期

  • 嗜肺军团菌分子生物学检测及流行病学分型方法

    军团菌病主要由嗜肺军团菌引起.与传统的军团菌检测方法相比,分子生物学检测技术灵敏度高、特异性强、快速有效.分子分型对军团菌流行病学调查及监控具有非常重要的意义.本文对嗜肺军团菌分子生物学检测及流行病学分型方法作一综述.

    作者:林云万;陈守义 刊期: 2009年第07期

  • 结核分枝杆菌潜伏感染早期两种检测方法的比较分析

    目的 比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)特异性IFN-γ酶联免疫斑点法(Elispot)和结核菌素皮试(TB-PPD皮试)在MTB潜伏感染早期诊断的优异.方法 采用自主研制的Elispot试剂盒(简称Elispot)对100例健康志愿者进行检测,并和TB-PPD皮试进行平行比较.结果 100例健康志愿者中有50例TB-PPD皮试阳性(占50%),Elispot检测阳性20例(占20%).两种方法检测结果差异有统计学意义(χ2=20.45,P<0.005).结论 MTB特异性IFN-γ Elispot试剂盒在健康人群中检测阳性率比传统的TB-PPD皮试要低,Elispot检测体外IFN-γ应答反应在诊断MTB潜伏感染的价值优于TB-PPD皮试,在MTB潜伏感染早期诊断有较好的发展前景.

    作者:陈献雄;杨倩婷;陈心春 刊期: 2009年第07期

  • 广州地区不同人群女性性传播感染状况调查与分析

    目的 调查广州地区不同人群女性性传播感染(STI)的流行现状.方法 由调查员进行现场问卷调查,采集血液进行HIV、RPR/TPPA、HSV.2抗体检测,采集白带涂片检测白念珠菌、阴道加特纳菌、阴道毛滴虫;宫颈拭子培养萘瑟氏淋病双球菌(GC)、沙眼衣原体(CT)、脲原体(UU).结果 共调查788例不同人群组的女性.流动女工STI总体感染率为41.6%,位居前3位的病原体感染分别为UU(25.1%)、HSV-2(14.9%)、CT(6.2%);妇科门诊人群总体STI感染率为71.1%,位居前3位分别为UU(41.5%)、HSV-2(18.7%)、CT(11.1%);暗娼STI总体感染率为90.1%,前3位感染分别为UU(74.6%)、HSV-2(47.5%)、阴道白念珠菌(17.8%),其它依次为加特纳菌(14.9%)、TP(14.9%)、CT(14.4%).除了门诊组及暗娼组分别发现1例HIV感染,差异无统计学意义外,不同组间STI感染差异均有统计学意义.结论 广州地区3组女性人群中,位居前2位的STI感染率分别为UU(25.1%~74.6%)、HSV-2(14.9%~47.5%),CT感染率为6.2%~14.4%.因此,除了加强妇科门诊STI防治外,加强对流动女工STI感染防治宣传很有必要.

    作者:戴向农;汤少开;黄雪梅;曹文苓;邓蕙妍;黎小东;李平;何婉苹;叶兴东 刊期: 2009年第07期

  • 曼氏血吸虫Sm28GST疫苗研究进展

    曼氏血吸虫病(Schistosomiasis mansoni)是由曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni,sm)引起的一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,主要流行于非洲、拉丁美洲和亚洲的53个国家和地区.本文综述了Sm28GST蛋白分子、DNA疫苗、rSt疫苗以及rBCG疫苗等方面的研究进展.

    作者:李文桂;陈雅棠 刊期: 2009年第07期

  • 实时荧光PCR方法快速检测空肠弯曲菌方法的建立

    目的 建立实时荧光PCR快速检测空肠弯曲菌的方法.方法 以空肠弯曲杆菌HipO基因的保守序列为模板设计特异性引物探针,建立一种能快速检测样本中空肠弯曲杆菌的实时荧光PCR方法:对方法的特异性和敏感性进行评价,并以正常人粪便为空白样本,添加一定量空肠弯曲菌标准株菌液进行检测,以对方法的检测效果进行初步评价.结果 该实时荧光PCR方法只对空肠弯曲杆菌进行特异扩增,同种属的结肠弯曲菌及其他常见食源性病原菌均不能扩增;整个检测过程只需要80 min,对空肠弯曲菌菌悬液可检测至5个细菌,对加标粪便样本可检测至10~100个细菌.结论 本研究建立的实时荧光PCR检测空肠弯曲菌方法不仅能实现对空弯菌的快速检测,而且还为空弯菌的快速诊断及其引起的食源性疾病的监控溯源提供有意义的参考.

    作者:刘俊华;张欣强;陈守义;高秀洁;李杰 刊期: 2009年第07期

  • 135株嗜麦芽寡养单胞菌的临床分布及耐药性分析

    目的 了解嗜麦芽寡养单胞菌的临床分布及耐药特征,为临床合理用药提供依据.方法 用常规方法对2005-2008年本院临床标本进行细菌的培养、分离,用MieWalK 40进行细菌的鉴定,以美国临床实验室标准化研究所推荐的纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感性试验,Whonet 5.0进行数据统计.结果 135株嗜麦芽寡养单胞菌主要来自痰占76.3%(103/135),分布以重症监护室(ICU)为主占80.0%(108/135);对6种抗菌药物的敏感率分别为替卡西林/棒酸36.3%、氯霉素57.8%、头孢他啶64.4%、左氧氟沙星75.6%、复方新诺明77.0%及米诺环素100.0%.结论 临床分离的嗜麦芽寡养单胞菌主要来自痰标本,分布以ICU为主,米诺环素、复方新诺明、左氧氟沙星、头孢他啶对嗜麦芽寡养单胞菌具有较好的体外抗菌活性.

    作者:李玉珍 刊期: 2009年第07期

  • 362例乙肝患者HBV-DNA含量与免疫学标志物、肝功能关系分析

    目的 探讨乙型肝炎患者HBV-DNA含量与血清免疫学标志物、肝功能的关系.方法 将362例乙肝患者按血清免疫学标志物不同模式分成两组:HBeAg阳性组,82例;HBeAg阴性组,280例.HBV-DNA、免疫学标志物和肝功能检测分别采用荧光定量PCR法、酶联免疫吸附法和生化分析法,数据分析采用SPSS11.0统计学软件.结果 HBeAg阳性组HBV-DNA含量≥103 IU/mL者为97.56%,高于HBeAg阴性组的43.57%,二者间差异有统计学意义(χ2=74.96,P<0.01).HBV-DNA含量103~104 IU/mL者,HBeAg阳性组为2.44%,低于HBeAg阴性组的35.00%.二者间差异有统计学意义(χ2=33.63,P<0.01).HBV-DNA含量为105~106 IU/mL者,肝功能异常者的比例为64.70%.结论 HBeAg阳性者乙肝病毒复制水平较高,HBeAg阴性者病毒复制水平相对较低,但病毒并非停止复制.HBeAg阴性者也存在高水平病毒复制.判断乙型肝炎患者是否存在病毒复制,是否具有传染性,直接、可靠的指标是HBV-DNA定量检测.

    作者:徐秋英;刘亚敏;沈强 刊期: 2009年第07期

  • 恶性疟疾所致脓毒症的临床特征分析

    目的 分析恶性疟疾并发脓毒症的临床特征.方法 对我院近8年来收治的32例确诊为恶性疟疾的患者进行病例资料分析.结果 出现脓毒症者26例(81.25%),其中严重脓毒症19例(59.38%),脓毒症休克2例(6.25%).26例脓毒症常见表现为发热26例(100%)、心率大于90次/min 25例(96.15%)以及白细胞数改变23例(88.46%),其他依次为气促、高血糖、C反应蛋白增高.严重脓毒症合并器官功能障碍依次为血液系统损害、肾功能损害、高胆红素血症、意识状态改变、低氧血症、腹胀以及低血压.31例(96.88%)患者治愈或好转出院,1例死亡(3.13%),死亡病例为脓毒症休克患者.结论 恶性疟疾原虫感染较易发生脓毒症,并极易发展为严重脓毒症,疟疾所致的严重脓毒症以血液系统损害、肾脏损害、高胆红素血症以及意识状态改变多见,如果发展为脓毒症休克则预后差.该病对青蒿琥酯的治疗效果好,及时使用青蒿琥酯清除疟原虫是预防脓毒症发生的关键.

    作者:刘远煌;李剑萍;洪文昕 刊期: 2009年第07期

  • 卡培他滨联合紫杉醇治疗晚期转移性宫颈癌的临床研究

    目的 探讨观察紫杉醇联合希罗达对比紫杉醇联合顺铂治疗晚期转移性宫颈癌的疗效及不良反应.方法 对2003年7月至2006年12月本院确诊晚期转移性宫颈鳞癌患者52人双盲随机分为两组,试验组(n=26)口服希罗达每日1 650 mg/m2,连服1~14 d,紫杉醇80 mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2~4周期;对照组(n=26)顺铂20 mg/m2静脉注射,第1~5天,紫杉醇80 mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2~4周期,治疗结束2周后评价疗效.结果 试验组可评价26例,有效率46.15%(12/26),中位生存时间11.6月,1年生存率43.33%(13/26);安全性方面Ⅲ反应占38.4%(9/26),Ⅳ反应占15.4%(4/26),主要为手足综合征、骨髓抑制和消化道毒性.对照组疗效可评价26例,有效率42.31%(11/26),中位生存时间11.9月,1年生存率43.33%(13/26);安全性方面Ⅲ反应占34.4%(10/26),Ⅳ反应占17.2%(5/26),主要为脱发、消化道毒性、骨髓抑制.结论 希罗达联合紫杉醇对晚期转移性宫颈癌的疗效与紫杉醇联合顺铂疗效相当,但是不良反应较轻.

    作者:詹雪梅;李明毅;梁颖 刊期: 2009年第07期

  • 溶血标本对生化检验结果的影响分析

    目的 研究溶血标本对生化检验结果的影响,为检验人员和临床医生对溶血标本的生化检验结果进行正确的分析提供依据.方法 取未溶血标本的血清进行相关的生化项目检验,然后通过搅拌使标本发生轻度溶血、重度溶血,并分离出溶血标本的血清进行相同的生化项目检验,对未溶血、轻度溶血及重度溶血标本的检验结果进行统计分析.结果 轻度溶血标本对ALT、AST、TP、AMY、ALP、LDH、CK、CK-MB、HBDH、UREA、GLU、CRE、UA、LDHC、IP、Fe、Mg、Zn、K、Na、Cl的检验结果产生显著性的影响;标本重度溶血时,除对轻度溶血产生显著性影响的项目外,还对ALB、HDLC、APOA1、Ca、IgG的检验结果也产生显著性影响.结论 标本溶血对大部分生化检验项目的 检验结果可产生显著性的影响,但在分析溶血标本的生化检验结果时,无论是检验人员还是临床医生均应将该项目的 统计学结果、实验允许误差、医学决定水平结合起来分析.同时以本单位实验室公布的受影响的实验项目为参考背景,才能大限度地利用溶血标本的检测结果,为临床医生的诊疗提供正确的分析.

    作者:贾璋林;谢煜楠;杨发达 刊期: 2009年第07期

  • 彩色多普勒超声在子宫颈癌诊断中的价值

    目的 探讨彩色多普勒超声对子宫颈癌的临床诊疗价值.方法 回顾性分析60例宫颈癌的超声检查结果及血流动力学改变.结果 早期宫颈癌超声多无阳性发现,随着癌肿的进展,宫颈癌的超声表现有:宫颈体积增大、回声不均匀,宫颈肿块、宫腔积液;宫体、阴道受侵,宫旁浸润,盆腔脏器侵犯,彩色多普勒血流显示宫颈癌病灶可见丰富血流信号.结论 彩色多普勒超声诊断宫颈癌的主要价值是观察肿瘤的浸润和转移情况.协助临床分期,指导治疗和观察疗效.

    作者:陈茹;李活霞;林剑英;李涛 刊期: 2009年第07期

  • 2005-2008年广东省CDC艾滋病自愿咨询检测人群特征分析

    目的 分析广东省疾病预防控制中心(CDC)艾滋病自愿咨询检测(VCT)人群特征,为预防HIV传播提供科学依据.方法 对2005年1月至2008年12月来广东省CDC门诊寻求VCT服务的人群进行检测前咨询并填写个案登记表,用描述性方法分析其特征及艾滋病病毒

    作者:刘芳兰;曾常红;孟瑞琳;谢雪妹;沈少君;曾利君 刊期: 2009年第07期

  • 奉节县91例麻风病联合化疗疗效分析

    目的 观察麻风病联合化疗(MDT)的治疗效果.方法 对麻风病患者按照麻风病联合化疗方案进行治疗,并进行定期监测和长期随访.结果 91例患者完成化疗并治愈,MDT规则治疗率为100%,治愈率100%,平均临床治愈时间3年,全程细菌密度指数(B1)BT型年均下降0.6,BL、LL分别为0.58和0.63,疗程中发生麻风反应12例,新发畸残4例.治愈后监测未发现复发病例.结论 通过对91例麻风患者联合化疗疗效观察,MDT疗效确切,疗程短,复发低,是治疗麻风病的有效方法.应加强麻风病的联合化疗,提高规则治疗率.及时处理麻风反应,减少畸残,治愈患者.

    作者:雷兵;刘学刚;廖和平 刊期: 2009年第07期

  • 某企业退休职工生活方式对自评健康状况影响的相关分析

    目的 调查某钢铁企业退休职工不同生活方式与自评健康状态,探讨其相关性.方法 结合厂企退休职工的预防性健康体检进行横断面调查.结果 本次共调查421名退休职工,平均年龄(61.2±6.5)岁,自评健康为差者105人,占24.9%;随着每天体力活动时间的增加,自评健康为好或较好的比率随之增加(P<0.05);不常吃水果/蔬菜者自评健康为差的可能性是常吃水果/蔬菜者的2.58倍:是否常饮茶、饮牛奶/豆奶和是否吸烟或饮酒等对自评健康状况的影响差异无统计学意义(均P>0.05).结论 常吃水果/蔬菜和经常进行体力活动对提高老年人健康水平有帮助.

    作者:李鹏宾;林锡谦 刊期: 2009年第07期

  • HBx基因缺失型突变体HBx-d382与HBx-d431原核表达载体的构建和鉴定

    目的 为探讨HBx基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431在临床上应用的价值,构建HBx基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431原核表达载体.方法 以pGM-T/HBx-d382和pGM-T/HBx-d431质粒为模板,PCR扩增含EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点的HBx基因片段.HBx基因PCR扩增产物与载体pET-28a(+)经双酶切、连接,形成重组DNA后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经卡那霉素筛选、酶切鉴定和DNA序列测定,筛选出重组HBx基因缺失型突变体原核表达载体.结果 成功构建了重组pET-28a(+)/Hax-d382和pET-28a(+)HBx-d431原核表达载体,重组前后HBx基因片段序列一致.结论 pET-28a(+)/HBx-d382和pET-28a(+)/HBx-d431原核表达载体构建成功,为HBx基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431蛋白的免疫原性和临床应用的研究奠定了基础.

    作者:朱平安;祝玲玲;黄巧梅;侯周华;谭萍;赖秀花 刊期: 2009年第07期

  • 凝胶直接抗球蛋白试验在自身免疫性溶血性贫血实验诊断中的应用

    目的 探讨凝胶直接抗球蛋白试验的特点及其在自身免疫性溶血性贫血(AIHA)实验诊断中的应用价值.提高致敏红细胞检出率.方法 检测临床诊断疑似AIHA标本135例.用Coomb's凝胶试剂卡对受检标本进行直接抗球蛋白试验.以试管法直接抗球蛋白试验作对照.凝胶法阳性者用单特异性IgG和C3d凝胶试剂卡进行分型.结果 试管法直接抗球蛋白试验阳性19例,Coomb's凝胶直接抗球蛋白试验(GDAT)阳性24例,两种检测方法间差异有统计学意义(P<0.05).对24份凝胶直接抗球蛋白试验阳性标本进行IgG和C3d分型,其中IgG+C3d型7例(29%),IgG型13例(54%),C3d型4例(17%).结论 凝胶直接抗球蛋白试验不需洗涤红细胞,操作简便,重复性好;检测致敏红细胞灵敏度优于试管法,在AIHA实验诊断中值得临床推广应用.

    作者:罗广平;骆宏;汪传喜;叶欣;夏文杰;戎霞;陈扬凯;邓晶;赵阳;丁浩强 刊期: 2009年第07期

  • 疑难病例报告并文献析评

    目的 探讨不明原因发热伴淋巴结肿大患者的诊断思路与方法及治疗方案.方法 对不明原因发热的患者进行相关检查,明确诊断,制定治疗方案,并查阅国内外有关文献进行分析.结果 该患者经淋巴结活检确诊为组织细胞性坏死性淋巴结炎,用激素治疗后好转.结论 临床上对不明原因发热伴淋巴结肿大患者应及时行淋巴结活检并排除其他疾病,以明确诊断.

    作者:唐皓;梁艳冰;徐嘉;陈志斌;李振宇;马中富 刊期: 2009年第07期

  • 犬空肠动脉栓塞安全性的实验研究

    目的 通过超选择性插管入犬空肠动脉分支后用聚乙烯醇(polybvinyi alcohol particles,PVA)颗粒栓塞,观察肠壁缺血坏死程度和范围,探讨其安全性.方法 44只犬随机分为A、B两组.A组(22只):空肠动脉二级分支水平远端栓塞;B组(22只):空肠末级动脉弓前一级分支水平栓塞.分别注入大小为150~250 μm(A1组6只,B1组6只)、355~500 μm(A2组8只,B2组8只)和710~1 000 μm(A3组8只,B3组8只)PVA颗粒.少量、缓慢、间断推注PVA,血流停滞时即停止.术后3、7、14 d,处死犬取出空肠行大体及病理学观察.结果 栓塞技术成功率为95.5%.PVA颗粒量为5~10 mg.注入150~250 μm、355~500 μm、710~1 000 μm PVA颗粒肠坏死的发生率分别为:81.8%(9/11)、40.0%(6/15)、25.0%(4/16),组间差异具有统计学意义(P<0.05).A、B两组发生肠坏死的发生率分别为61.9%(13/21)、28.6%(6/21),组间差异有统计学意义(P<0.001).结论 在同一栓塞水平下,PVA颗粒越小则越易发生肠坏死.佳的栓塞水平在末级动脉弓前一级分支水平,PVA颗粒大小应选择710~1 000 μm.

    作者:唐郁宽;史瑞雪;陈勇;曾庆乐;陈广源;黄小英;李晶;邓炜;胡佩玲;曹筱莹;刘海英;陈汉威 刊期: 2009年第07期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会