学术投稿

结核分枝杆菌潜伏感染早期两种检测方法的比较分析

陈献雄;杨倩婷;陈心春

关键词:结核分枝杆菌, 潜伏感染, 干扰素释放反应, 结核菌素皮试, 酶联免疫斑点法
摘要:目的 比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)特异性IFN-γ酶联免疫斑点法(Elispot)和结核菌素皮试(TB-PPD皮试)在MTB潜伏感染早期诊断的优异.方法 采用自主研制的Elispot试剂盒(简称Elispot)对100例健康志愿者进行检测,并和TB-PPD皮试进行平行比较.结果 100例健康志愿者中有50例TB-PPD皮试阳性(占50%),Elispot检测阳性20例(占20%).两种方法检测结果差异有统计学意义(χ2=20.45,P<0.005).结论 MTB特异性IFN-γ Elispot试剂盒在健康人群中检测阳性率比传统的TB-PPD皮试要低,Elispot检测体外IFN-γ应答反应在诊断MTB潜伏感染的价值优于TB-PPD皮试,在MTB潜伏感染早期诊断有较好的发展前景.
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  • 抗人双特异性蛋白磷酸化酶Dusp23单克隆抗体的制备及鉴定

    目的 制备高亲和力、高特异性的抗人双特异性磷酸化酶23(Dnsp23)单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定,为Dusp23功能的研究奠定基础.方法 以纯化的原核表达Dusp23为免疫原,免疫BALB/c小鼠,待免疫小鼠血清效价满足融合需要,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化建立可稳定分泌抗Dusp23单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将细胞株打人BALB/c小鼠腹腔制备腹水,用ProteinG亲合层析柱纯化所得腹水获得纯化抗体,ELISA及Western-blot检测抗体的效价和亲和力,并用亚型鉴定试纸条鉴定单克隆抗体的亚型.利用纯化后的两株单克隆抗体对临床收集的肝癌组织标本进行免疫组化分析.结果 筛选到2株(N012和N013)可以稳定分泌人双特异性磷酸化酶23(Dusp23)单克隆抗体的细胞株,并对其进行纯化和鉴定,两株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1:5 120和1:2 560,腹水效价分别为1:25 600和1:12 800,以肝癌细胞Hepc2和重组Dusp23蛋白为抗原,利用纯化后的两株抗体Western-blot鉴定结果均在预期位置出现阳性条带.两株杂交瘤细胞分泌抗体的亚型鉴定N012和N013均为IgG1型,轻链均为κ型.两株抗体分别与临床肝癌组织标本免疫组化结果均为阳性.结论 成功制备两株能特异性识别Dusp23的单克隆抗体.为进一步研究Dusp23的生物学功能,揭示其与肿瘤发生发展之间的关系奠定了基础.

    作者:杜红延;杨学习;姚小艳;李明 刊期: 2009年第07期

  • 系统性红斑狼疮患者血清IL-18、sVCAM-1和VEGF水平及其意义

    目的 探讨白细胞介素18(IL-18)、可溶性血管黏附分子-1(sVCAM-1)和血管内皮生长因子(VEGF)水平变化与系统性红斑狼疮(SEE)发病机制的关系.方法 采用酶联免疫ELISA法检测SLE患者35例,正常对照组25例血清IL-18、sVCAM-1和VEGF的水平.结果 SLE组IL-18(521.23±134.29)pg/mL、sVCAM-1(1179.25±225.57)ng/mL、VEGF(198.85±41.96)pg/mL,较正常对照组IL-18(256.39±59.52)pg/mL、sVCAM-1(538.16±91.21)ng/mL、VEGF(125.62±32.15)pg/mL明显升高,差异有统计学意义(P均<0.01).活动期SLE患者IL-18(687.44±158.60)pg/mL、sVCAM-1(1478.14±322.72)ng/mL、VEGF(236.25±48.62)pg/mL与非活动期组SLE IL-18(355.02±109.98)pg/mL、sVCAM-1(881.37±128.30)ng/mL、VEGF(160.47±35.79)pg/ml之间比较,差异有统计学意义(P均<0.01).结论 SLE患者IL-18、sVCAM-1和VEGF水平增高,且与疾病的活动性相关.

    作者:黄镜招;刘瑞玉;钟伟强;巫远忠;张丽科;黄铁峰 刊期: 2009年第07期

  • 三聚氰胺毒性作用及其对食品安全的影响

    三聚氰胺是一种有机化工原料,含氮量高,多用于生产塑料和肥料,也可用于制造药用胶囊.在动物饲料和食品中添加三聚氰胺,可提高饲料的氮含量,造成受检样品蛋白质含量高的伪象.但动物实验证明:大鼠和小鼠长期摄人三聚氰胺后可出现中枢神经系统及肾功能紊乱,严重的可能引起肾功能衰竭.2008年,我国发生了奶粉因掺杂了三聚氰胺而导致婴儿患肾结石甚至死亡的事件,三聚氰胺对食品安全的严重影响已引起了社会的广泛关注.为此,本文就有关三聚氰胺毒性作用及对食品安全影响的研究资料进行了综述.

    作者:吴晓瑛 刊期: 2009年第07期

  • 卡培他滨联合紫杉醇治疗晚期转移性宫颈癌的临床研究

    目的 探讨观察紫杉醇联合希罗达对比紫杉醇联合顺铂治疗晚期转移性宫颈癌的疗效及不良反应.方法 对2003年7月至2006年12月本院确诊晚期转移性宫颈鳞癌患者52人双盲随机分为两组,试验组(n=26)口服希罗达每日1 650 mg/m2,连服1~14 d,紫杉醇80 mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2~4周期;对照组(n=26)顺铂20 mg/m2静脉注射,第1~5天,紫杉醇80 mg/m2静脉滴注,第1天应用,每3周为1周期,连用2~4周期,治疗结束2周后评价疗效.结果 试验组可评价26例,有效率46.15%(12/26),中位生存时间11.6月,1年生存率43.33%(13/26);安全性方面Ⅲ反应占38.4%(9/26),Ⅳ反应占15.4%(4/26),主要为手足综合征、骨髓抑制和消化道毒性.对照组疗效可评价26例,有效率42.31%(11/26),中位生存时间11.9月,1年生存率43.33%(13/26);安全性方面Ⅲ反应占34.4%(10/26),Ⅳ反应占17.2%(5/26),主要为脱发、消化道毒性、骨髓抑制.结论 希罗达联合紫杉醇对晚期转移性宫颈癌的疗效与紫杉醇联合顺铂疗效相当,但是不良反应较轻.

    作者:詹雪梅;李明毅;梁颖 刊期: 2009年第07期

  • 大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养

    目的 分离、培养原代脑微血管内皮细胞,建立体外血脑屏障模型.同时探索高纯度、活性好的脑微血管内皮细胞的分离培养方法.方法 取3周大鼠大脑,分离皮质,经过匀浆、葡聚糖离心以及消化后,取纯度较高的脑微血管段种植于胶原蛋白包被过的塑料培养瓶中进行培养.显微镜观察及检测Ⅷ因子相关抗原.结果 镜下细胞呈长梭形,7 d左右细胞可融合,Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测为阳性,且阳性细胞占绝大部分.结论 本实验成功分离大鼠脑微血管内皮细胞,并进行原代培养.为脑微血管内皮细胞的进一步研究提供了模型,也为构建更高级的大鼠体外血脑屏障奠定基础.

    作者:李珺;彭亮;黄胜和;吴春华;曹虹 刊期: 2009年第07期

  • 新生儿病房呼吸机相关性肺炎病原菌变迁及药物敏感性分析

    目的 探讨近年新生儿层流病房应用后新生儿呼吸机相关性肺炎(VAP)的病原菌变迁及药物敏感性情况.方法 系统回顾我院新生儿重症监护病房(NICU)近4年接受机械通气>48 h的287例患儿的临床资料,以发生时间先后分成两组,分析其VAP发病情况、痰培养病原学、药敏结果及治疗转归等.结果 近4年NICU的VAP发生率为15.68%,培养出致病菌株共32株,依次为缓症链球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、溶血葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等.前两年病原菌以革兰阳性菌为主,主要是缓症链球菌和葡萄球菌属,近两年以革兰阴性杆菌为主,尤以嗜麦芽窄食单胞菌居多.以万古霉素、环丙沙星、氧氟沙星为主要敏感药物,对青霉素类抗生素及第二、三代头孢菌素普遍耐药.结论 近年VAP致病菌谱发生显著改变.以耐药性条件致病菌为主,强调综合治疗,预防为主.尽早使用敏感药物.

    作者:方润婷;陈志凤;李锐钦;卢燕玲 刊期: 2009年第07期

  • 慢性心力衰竭患者窦性心率震荡的临床意义

    目的 探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者窦性心率震荡(HRT)与心功能程度的关系.方法 慢性心衰患者(CHF组)85例,全部病例按纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级,分为轻度CHF组(心功能Ⅱ级)45例和重度CHF组(心功能Ⅲ~Ⅳ级)40例.另选同期心功能正常的42例作为对照组.所有入选者均接受24h动态心电图检查,分别计算窦性心率震荡的初始值(T0)、震荡斜率(TS),并进行统计学分析.结果 3组的T0均值比较,重度CHF组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);轻度CHF组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);3组间的TS均值组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 伴随CHF患者程度加重,HRT现象明显变钝减弱,其变化可能与自主神经的变化有关.

    作者:黄璐璐;吴子平;吴磊 刊期: 2009年第07期

  • 疑难病例报告并文献析评

    目的 探讨不明原因发热伴淋巴结肿大患者的诊断思路与方法及治疗方案.方法 对不明原因发热的患者进行相关检查,明确诊断,制定治疗方案,并查阅国内外有关文献进行分析.结果 该患者经淋巴结活检确诊为组织细胞性坏死性淋巴结炎,用激素治疗后好转.结论 临床上对不明原因发热伴淋巴结肿大患者应及时行淋巴结活检并排除其他疾病,以明确诊断.

    作者:唐皓;梁艳冰;徐嘉;陈志斌;李振宇;马中富 刊期: 2009年第07期

  • 吡柔比星膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效观察

    目的 探讨吡柔比星(THP)膀胱内灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的效果.方法 患者随机分成两组,一组患者膀胱灌注卡介苗(BCG)(40例),另一组膀胱灌注THP(40例),随访6~24个月,观察两组复发情况及不良反应.结果 BCG组和THP组2年复发率分别为12.5%(5/40)、14.0%(6/43);两组间比较差异无统计学意义(χ2=0.038,P>0.05),而THP组不良反应发生率明显低于BCG组(χ2=9.565,P<0.01).结论 膀胱灌注THP预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效确切,不良反应小,安全性好.

    作者:李锦秀;李家兵;张盼;林世庆;孙懿 刊期: 2009年第07期

  • 儿童真菌感染的病原学研究

    目的 探讨广州地区儿童真菌感染的病原分布特点及其耐药状况,为防治儿童真菌感染提供实验室依据.方法 对患儿感染部位的真菌进行分离培养和鉴定:以ATBTM FUNGUS 3酵母样真菌药敏试验条进行常用抗真菌药物的敏感性分析.结果 从患儿标本中分离出558株真菌,主要来自呼吸道有299株,占53.58%;其次是消化道、伤口(创口)、泌尿系统和血液等,分别占28.14%、6.27%、4.66%、3.76%.其中白色假丝酵母菌367株,占65.77%;其次为热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、季也蒙假丝酵母菌等,分别占15.28%、5.02%、4.48%、3.41%、2.69%.从骨髓中检出5株马尔尼菲青霉,从脑脊液中检出3株新型隐球菌.真菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑等总耐药率分别为8.78%、4.84%、10.54%、1.36%、0.85%.结论 引起儿童真菌感染的主要病原菌是白色假丝酵母菌,对真菌感染应该有针对性地使用高效的抗真菌药物进行早期治疗.

    作者:谢永强;周珍文;虢艳;邓秋连;黄勇 刊期: 2009年第07期

  • 经阴道注水腹腔镜在输卵管妊娠诊治中的应用

    目的 探讨经阴道注水腹腔镜(transvaginal hydrolaparoscopy,THL)在输卵管妊娠诊治中的临床效果和安全性.方法 选择输卵管妊娠患者22例(研究组)进行THL检查和治疗,选择同期输卵管妊娠30例(对照组)行单纯药物保守治疗.记录研究组手术时间、后穹隆穿刺成功率、手术成功率、诊断符合情况、手术并发症、对侧输卵管的通畅程度等:记录两组治愈率、治愈时间、化疗药物毒副作用发生率、住院时间、住院费用等.结果 THL平均手术时间(25.4±3.5)min;后穹隆穿刺成功率95.6%,20例与术前诊断符合,18例手术成功,无手术并发症发生;术中发现对侧输卵管阻塞3例;两组治愈率比较差异无统计学意义(P>0.05),但研究组治愈率有增加趋势.治愈时间、药物毒副作用发生率、住院时间对照组均大于研究组,差异有统计学意义(P<0.05),住院费用两组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 THL在应用于输卵管妊娠的早期诊断和治疗中既具备了单纯药物保守治疗的优势,又达到了经腹腹腔镜保守手术的效果,术中可以同时检查对侧输卵管的通畅度,为输卵管妊娠早期诊断和输卵管保守治疗开辟了新途径,有较好的应用前景.

    作者:邹敏;吕晓亮;胡小良;叶萍;张秀果;潘红平 刊期: 2009年第07期

  • 多项指标联合检测在原发性肝癌诊断中的应用

    目的 探讨甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖链蛋白199(CA199)、α.L-岩藻苷酶(AFU)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)等多项指标联合检测对原发性肝癌早期诊断的临床应用价值.方法 采用化学发光法检测AFP、CEA和CA199;采用速率法检测AFU;用酶法检测γ-GT.结果 单项AFP、CEA、CA199、AFU、γ-GT的血清水平原发性肝癌组与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);单项AFP、CEA、CA199、AFU、γ-GT的血清水平原发性肝癌组与肝炎肝硬化组比较差异有统计学意义(P<0.01).AFP、CEA、CA199、AFU、γ-GT等多项指标联合检测对原发性肝癌诊断阳性率达94.12%,显著高于单项AFP阳性率68.62%(P<0.01).结论 AFP、CEA、CA199、AFU、γ-GT等多项指标联合检测可提高原发性肝癌早期诊断阳性检出率,特别是单项AFP检测阴性的肝癌患者的诊断具有重要临床实用价值和临床推广价值.

    作者:冯春颜;魏建伟;罗裕旋;胡纪文;汪宇婴;朱彩云 刊期: 2009年第07期

  • 不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用

    目的 比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果.方法 将5~6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20 μg可溶性速殖子抗原(STAg)、20 μg STAg+40 μg蜂胶、20 μg STAg+1 000 U IFN-γ或20 μg STAg+40 μg蜂胶+1 000 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔14 d.末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况.攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子.结果 STAg+IFN-γ组、STAg+蜂胶+IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组(P<0.05);组织内速殖子虫荷显著降低(P<0.01),STAg+IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57.00%和79.06%;STAg+蜂胶+IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68.30%和79.06%.STAg+蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义.结论 在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ辅助STAg显著提高小鼠胸腺、脾比重,增强机体免疫能力,有效抵抗弓形虫的感染攻击,脑、肝组织速殖子虫荷显著减少.

    作者:刘成芳;殷国荣;赵云鹤;张卫国;刘红丽 刊期: 2009年第07期

  • 凝胶直接抗球蛋白试验在自身免疫性溶血性贫血实验诊断中的应用

    目的 探讨凝胶直接抗球蛋白试验的特点及其在自身免疫性溶血性贫血(AIHA)实验诊断中的应用价值.提高致敏红细胞检出率.方法 检测临床诊断疑似AIHA标本135例.用Coomb's凝胶试剂卡对受检标本进行直接抗球蛋白试验.以试管法直接抗球蛋白试验作对照.凝胶法阳性者用单特异性IgG和C3d凝胶试剂卡进行分型.结果 试管法直接抗球蛋白试验阳性19例,Coomb's凝胶直接抗球蛋白试验(GDAT)阳性24例,两种检测方法间差异有统计学意义(P<0.05).对24份凝胶直接抗球蛋白试验阳性标本进行IgG和C3d分型,其中IgG+C3d型7例(29%),IgG型13例(54%),C3d型4例(17%).结论 凝胶直接抗球蛋白试验不需洗涤红细胞,操作简便,重复性好;检测致敏红细胞灵敏度优于试管法,在AIHA实验诊断中值得临床推广应用.

    作者:罗广平;骆宏;汪传喜;叶欣;夏文杰;戎霞;陈扬凯;邓晶;赵阳;丁浩强 刊期: 2009年第07期

  • 实时荧光PCR方法快速检测空肠弯曲菌方法的建立

    目的 建立实时荧光PCR快速检测空肠弯曲菌的方法.方法 以空肠弯曲杆菌HipO基因的保守序列为模板设计特异性引物探针,建立一种能快速检测样本中空肠弯曲杆菌的实时荧光PCR方法:对方法的特异性和敏感性进行评价,并以正常人粪便为空白样本,添加一定量空肠弯曲菌标准株菌液进行检测,以对方法的检测效果进行初步评价.结果 该实时荧光PCR方法只对空肠弯曲杆菌进行特异扩增,同种属的结肠弯曲菌及其他常见食源性病原菌均不能扩增;整个检测过程只需要80 min,对空肠弯曲菌菌悬液可检测至5个细菌,对加标粪便样本可检测至10~100个细菌.结论 本研究建立的实时荧光PCR检测空肠弯曲菌方法不仅能实现对空弯菌的快速检测,而且还为空弯菌的快速诊断及其引起的食源性疾病的监控溯源提供有意义的参考.

    作者:刘俊华;张欣强;陈守义;高秀洁;李杰 刊期: 2009年第07期

  • 结核分枝杆菌潜伏感染早期两种检测方法的比较分析

    目的 比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)特异性IFN-γ酶联免疫斑点法(Elispot)和结核菌素皮试(TB-PPD皮试)在MTB潜伏感染早期诊断的优异.方法 采用自主研制的Elispot试剂盒(简称Elispot)对100例健康志愿者进行检测,并和TB-PPD皮试进行平行比较.结果 100例健康志愿者中有50例TB-PPD皮试阳性(占50%),Elispot检测阳性20例(占20%).两种方法检测结果差异有统计学意义(χ2=20.45,P<0.005).结论 MTB特异性IFN-γ Elispot试剂盒在健康人群中检测阳性率比传统的TB-PPD皮试要低,Elispot检测体外IFN-γ应答反应在诊断MTB潜伏感染的价值优于TB-PPD皮试,在MTB潜伏感染早期诊断有较好的发展前景.

    作者:陈献雄;杨倩婷;陈心春 刊期: 2009年第07期

  • 惠州市青年学生艾滋病知识知晓状况及相关行为调查分析

    目的 了解惠州市预防艾滋病宣传教育工作的成效及存在问题,为今后对青年学生开展宣教活动.完善宣教策略提供依据.方法 使用统一的调查表采用调查对象不记名自填问卷方式.调查的内容包括:人口学基本情况、艾滋病知识、性行为经历、是否有吸毒及注射吸毒行为、接受有关预防艾滋病服务情况等.结果 对外表健康的人可以是感染者的知晓率为89.8%,每次性行为都正确使用安全套可降低艾滋病的传播危险的知晓率为75.4%,输入带有艾滋病病毒的血液或血制品可感染艾滋病的知晓率为97.0%,共用注射器可传播艾滋病的知晓率为93.9%,蚊虫叮咬是否会传播艾滋病病毒的知晓率为40.3%,感染的母亲可传给胎儿的知晓率为91.1%.有性行为经历的占6.8%.获得艾滋病知识信息途径较单一,主要来源于电视广播及报刊杂志.结论 惠州市青年学生对感染艾滋病的各种危险因素的知晓不全面,部分非传播途径知晓率也较低.开展艾滋病相关知识宣传教育仍十分必要,学校应加强艾滋病健康教育的力度以提高青年学生对艾滋病的认识水平.

    作者:刘雪梅;梁立环;李钰;肖和龙;徐志华;丘文清;薛妙钦 刊期: 2009年第07期

  • 2005-2007年广州地区腹泻儿童感染轮状病毒情况分析

    目的 了解近3年来广州地区儿童肠道轮状病毒感染情况.方法 收集2005年1月至2007年12月收治的包括门诊和住院的急性腹泻患儿的大便标本,采用免疫胶体金技术对标本进行轮状病毒抗原检测.结果 轮状病毒2005、2006和2007年平均感染率分别为44.70%、38.22%和39.99%;与2006、2007年相比,2005年轮状病毒感染高峰和波谷均向后推延1个月.抗原检测阳性例数在6~24个月婴幼儿高,全年感染率在性别上差异无统计学意义.结论 轮状病毒是引起婴幼儿病毒感染性腹泻的主要病原体,气候可能对广州地区轮状病毒感染有较大影响.

    作者:尹应先;肖密丝;欧志英;朱冰 刊期: 2009年第07期

  • HBx基因缺失型突变体HBx-d382与HBx-d431原核表达载体的构建和鉴定

    目的 为探讨HBx基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431在临床上应用的价值,构建HBx基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431原核表达载体.方法 以pGM-T/HBx-d382和pGM-T/HBx-d431质粒为模板,PCR扩增含EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点的HBx基因片段.HBx基因PCR扩增产物与载体pET-28a(+)经双酶切、连接,形成重组DNA后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经卡那霉素筛选、酶切鉴定和DNA序列测定,筛选出重组HBx基因缺失型突变体原核表达载体.结果 成功构建了重组pET-28a(+)/Hax-d382和pET-28a(+)HBx-d431原核表达载体,重组前后HBx基因片段序列一致.结论 pET-28a(+)/HBx-d382和pET-28a(+)/HBx-d431原核表达载体构建成功,为HBx基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431蛋白的免疫原性和临床应用的研究奠定了基础.

    作者:朱平安;祝玲玲;黄巧梅;侯周华;谭萍;赖秀花 刊期: 2009年第07期

  • 乙型肝炎病毒核壳蛋白对HepG2细胞凋亡的影响

    目的 初步探讨乙型肝炎病毒野生型核壳蛋白和L60V、I97L变异核壳蛋白影响HepG2细胞凋亡的分子机制.方法 将构建的野生型核壳蛋白融合表达载体(pEGFP-WT),L60V变异核壳蛋白(pEGFP-V60)和I97L变异核壳蛋白(pEGFP-L97)表达载体HepG2阳性细胞株复苏培养;Western blot检测各核壳蛋白表达;TNF-α、Act-D诱导各种HepG2细胞株凋亡,48 h采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测NF-κB信号传导通路中IKK-α、IκB-α、NF-κB P65蛋白表达与caspase-8、caspage-3蛋白表达情况.结果 Western blot检测pEGFP-WT组、pEGFP-V60组和pEGFP-L97组核壳蛋白表达基本相同;流式细胞术检测显示,与pEGFP-C1细胞株相比,48 h时pEGFP-WT、pEGFP-V60和pEGFP-L97表达细胞株的细胞凋亡率均明显偏低(P<0.01);4组细胞株IKK-α、IκB-α、NF-κB P65蛋白表达水平无明显差异,而pEGFP-WT组caspase-8、cagpage-3蛋白表达水平明显低于pEGFP-V60和pEGFP-L97组,且三组表达均明显低于pEGFP-C1组.结论 乙型肝炎病毒野生型和L60V、I97L变异核壳蛋白影响HepG2细胞凋亡可能与核壳蛋白影响细胞内caspase-3,8表达有关.

    作者:李发武;卢放根;王文琦;吴福全 刊期: 2009年第07期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会