赵丽庆；刘士俊
目的 克隆和表达金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,制备金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的多克隆抗体,应用于金黄色葡萄球菌引起的食物中毒的诊断.方法 用核酸扩增技术从金黄色葡萄球菌菌株中分离产生肠毒素B的标准菌株,采用高保真PCR技术从金黄色葡萄球菌野生株中扩增全长SEB,目的片段经TA克隆后DNA序列测定,重组质粒pGEM-SEB经酶切获得的SEB基因片段与真核表达载体pGEX-4T-3连接,将重组真核载体pGEX-4T-3-SEB转化人E.coli BL21(DE3)株,在0.1 mmol/L IPTG诱导下,诱导SEB基因在E.coli BL21(DE3)株中表达,用谷光苷肽Sepharose 4B柱分离纯化GST融合蛋白,用SDS-PAGE检测重组SEB(rSEB)的表达,重组蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗血清,并用抗血清与天然的SEB和rSEB进行Western bolt分析.结果 成功克隆了822 bp SEB基因,编码272个氨基酸,在E.coli BL21(DE3)株中表达了rSEB,分离纯化的rSEB能够诱导小鼠产生IgG抗体,此抗体不仅能够与rSEB反应,而且能够与天然的SEB特异性的反应.结论 重组SEB具有抗原特性,制备的特异性抗体可应用于金黄色葡萄球菌引起的食物中毒的快速诊断,将能够建立特异性强、敏感性高的金黄色葡萄球菌的诊断体系,同时也有助于对SEB在抗肿瘤机制、炎症过程中的作用等方面研究.
作者：季永峰；张仁利；耿艺介；高世同；黄达娜；胡章立 刊期： 2007年第05期
目的 探求脑型血吸虫病的发生情况、CT及MRI的诊断价值、治疗的选择和观察其预后.方法 67例患者常规作免疫、病原学检查及头颅CT或MRI,并给予吡喹酮抗病原治疗,治疗后3个月～5年复查和回访.结果 67例免疫或病原学检查呈阳性.头颅CT平扫显示单个或多发病灶,增强扫描病灶呈结节状、斑片状或脑回状强化.MRI显示病灶呈片状或结节状长T1长T2信号灶,增强扫描其内可见斑片状、点状强化灶.9例同时作CT与.MRI的患者,显示病灶部位及数目基本相同.治疗后30例复查,头颅病灶消失19例,缩小11例.52例复诊或回访,症状消失45例,减轻7例.结论 脑型血吸虫病主要发生在青壮年,头颅CT或MRI对脑型血吸虫病定位和定性诊断有很大价值,用吡喹酮治疗,及早治疗预后良好.
作者：荆群山；罗立新；陈哲；王洪波；郑娜 刊期： 2007年第05期
目的 探讨并发心血管疾病的80岁以上高龄患者行全髋关节围术期处理的特殊性.方法 总结行这类手术患者60例,术前行各项检查,评估心血管系统功能异常程度,并作相应的准备,选择合适的麻醉方法、药物、监测及调控措施,预防术中心肌氧供需失衡和心血管事件发生.结果 术前心血管疾病以心肌供血不足的发生率(76.7%)居首位,其次是高血压(61.7%),列居第三位的是各种类型心律不齐(48.3%).接受扩冠脉血管治疗3例,营养心肌治疗48例,抗高血压治疗31例,抗心律失常治疗19例.手术选用椎管内麻醉或气管内插管麻醉.术中心肌供血不足、高血压和心律不齐的发生率分别较术前下降35.0%、43.4%和11.6%.手术后72 h内心肌供血不足、高血压和心律不齐的发生率分别较术前下降25.1%、35.0%、3.3%,低血压和心动过速分别较术前升高18.3%、56.6%.结论 高龄患者并发心血管疾病以心肌供血不足常见,术前充分准备、麻醉选择适当、术中调控合理是安全渡过围术期的重要措施,手术后的低血压和心动过速应予以关注.
作者：李雅兰；张晓南；莫世湟；彭雪梅；王小平；周长忍；蔡明雪 刊期： 2007年第05期
目的 探讨转换疗法治疗小儿肺炎支原体肺炎的佳方案.方法 将102例患儿分为两组.治疗组5%葡萄糖+红霉素静滴3 d,改用阿奇霉素口服3 d,停4 d,再服3 d;对照组5%葡萄糖+红霉素静滴10～14 d.观察疗效及成本分析.结果 治疗组与对照组疗效与成本差异显著.结论 治疗组疗效及成本明显优于对照组,且有效、安全、方便、经济.
作者：张雅林 刊期： 2007年第05期
目的 研究含人连接蛋白Connexin26 (Cx26) 基因的真核表达载体构建及其在非洲猴肾细胞(COS-7)中获得稳定、高效表达的方法.方法 提取人外周血淋巴细胞 RNA,经逆转录制备成 cDNA,设计特异性引物,用PCR方法从cDNA中扩增Cx26基因,将其定向插入真核表达载体pCI-neo中获得pCI-Cx26重组子,采用酶切法和测序法鉴定.用脂质体将pCI-Cx26转染COS-7细胞,经G418筛选,获得阳性克隆.用RT-PCR和SDS-PAGE检测对表达产物进行检测.结果 从人外周血RNA制备而成的cDNA中可扩增出预期大小的Cx26基因片段,pCI-Cx26经双酶切测序证实构建成功.RT-PCR和SDS-PAGE检测到pCI-Cx26在COS-7细胞中获得稳定、高效表达.结论 本研究成功构建了人连接蛋白Cx26基因重组真核表达载体pCI-Cx26;pCI-Cx26脂质体转染COS-7细胞,可见Cx26基因在COS-7细胞中获得稳定、高效的表达.该结果为今后进行pCI-Cx26基因治疗Cx26基因突变引起的遗传性耳聋的研究奠定了实验基础.
作者：徐聪；李国伟；刘泽玉；廖嘉伟；薛攀攀；谭炳炎；陆家海 刊期： 2007年第05期
目的 研究小鼠脑组织同源盒基因(homeobox gene,Hox)的表达状态及人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对小鼠脑组织Hox基因表达的影响,以探讨HCMV致畸的分子机制.方法 昆明系小鼠48只,随机分为实验对照组(16只)和病毒感染组(32只),病毒感染为脑内注射.在感染后7、15、30、60 d分别以病理学方法观察病理损伤,以免疫组化方法检查HCMV-LA(late antigen),PCR检测小鼠脑组织中HCMVDNA.在建立HCMV脑部感染的小鼠模型基础上,用RT-PCR测定Hox基因在病毒感染组和实验对照组小鼠脑组织中的表达,并用同位素标记的cDNA探针进行Northem-blot检测相应的表达状况.结果 (1)接种HCMVAD169株的小鼠脑组织发生了病理改变,免疫组化和PCR方法在神经细胞内查到了HCMV-LA和DNA;(2)RT-PCR和Northern-blot发现:对照组的小鼠脑组织表达Hox-A9、Hox-A11、Hox-A12和Hox-A13,但不表达Hox-B13;HCMV感染后,小鼠脑组织被诱导表达Hox-B13,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),且于感染后的30 d达到高峰,而Hox-A9、Hox-A11的表达下调(P＜0.05);Hox-A10和Hox-A13的表达增强.结论 HCMVAD169株可感染小鼠神经系统.HCMV感染可诱导小鼠神经系统发育基因Hox表达改变,这对研究HCMV感染致畸的分子机制提供了有价值的理论依据.
作者：谢妮；陈利玉；罗敏华 刊期： 2007年第05期
目的 探讨护理干预对艾滋病(AIDS)患者生存质量的影响,改善艾滋病患者的不良心境,提高AIDS/HIV感染者的自我护理能力,从而提高其生存质量.方法 将50例艾滋病患者随机分成两组,观察组(A组)26例,对照组(B组)24例,观察组在常规治疗护理的基础上进行心理干预及系统的健康教育,而对照组仅做常规的治疗护理.同时设50名正常人作为正常组(C组).采用健康状况调查问卷(SF-36)和一些自选条目,于护理干预前测评A、B、C组,并于护理干预3个月后再次对A、B组进行测评分析.结果 干预前A、B组的各方面比分均低于C组,干预3个月后观察组的生存质量明显提高(P＜0.01).结论 艾滋病患者总体生存质量较差,全面系统的护理干预,可明显改善其生存质量.
作者：林奕；李劲；徐岩；桂库娜；曾海连；刘艳；钟菊珍 刊期： 2007年第05期
目的 构建α干扰素基因家族定向文库.方法 利用DNA shuffling技术对人、鸡和猪α干扰素基因进行人工改造,结合噬菌体展示技术构建噬菌体基因改组文库,并对文库进行验证.结果 构建了α干扰素基因家族定向文库,其容量为3.5×107 pfu;测序得到了3条与猪、人α干扰素基因高度同源的序列.结论 得到了1个高质量的α干扰素基因家族定向文库,为今后筛选高效的α干扰素奠定了基础.
作者：吴明福；蒋忠军；马玉海；唐博恒；王君伟 刊期： 2007年第05期
目的 了解外周血单核细胞SOCS-1表达与多器官功能障碍综合征(MODS)患者预后的关系及临床意义.方法 收集24例MODS患者,并采集其外周静脉血,采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单核细胞(PBMCs),分别以RT-PCR法及Western-blot法检测PBMCs中SOCS-1的基因及蛋白表达,分析其与预后及MODS评分的关系.结果 MODS组中死亡患者PBMCs中的SOCS-1 mRNA表达量(0.4938±0.0273)显著低于存活患者(0.5475±0.0289)(P＜0.05),SOCS-1蛋白表达量(0.7924±0.0284)显著低于存活患者(0.8406±0.0407)(P＜0.05).MODS患者的PBMCs中的SOCS-1 mRNA表达量与MODS评分呈显著的负相关关系(r=-0.723,P＜0.01).SOCS-1蛋白表达量与MODS评分呈显著的负相关关系(r=-0.534,P＜0.01).结论 在MODS中,SOCS-1的表达可能起到保护组织避免损伤的作用,SOCS-1表达的减少可能提示患者的预后不良.
作者：许衍硕；梁艳冰；唐皓；陈志斌；马中富 刊期： 2007年第05期
目的 探讨含补肾中药骨灵片大鼠血清对人成骨细胞功能和对p38活化原蛋白激酶通路的影响.方法 取人髂骨松质骨,采用改良胰酶-胶原酶消化法分离培养人成骨细胞;根据血清药理学的方法制备不同浓度(低、中、高剂量)的骨灵片血清,并以生理盐水处理的大鼠血清为阴性对照,将制备好的血清加入第二代的人成骨细胞培养液中培养.采用Westem-blot及Real time RT-PCR的方法观察各组成骨细胞护骨素和护骨素配体基因表达和磷酸化p38含量,用MTr法测定各组成骨细胞增殖率,利用茜素红染色法测定矿化结节形成的数量.结果 含骨灵片(低、中、高剂量)药液血清处理的大鼠血清均能上调成骨细胞护骨素基因表达,下调护骨素配体基因表达,刺激成骨细胞的增殖,增加矿化结节形成的数量,刺激p38磷酸化.结论 补肾中药骨灵片可能通过p38活化原蛋白激酶通路调控护骨素以及护骨素配体的表达,促进成骨细胞增殖以及矿化结节形成,抑制骨破坏,维持骨平衡.
作者：黄少慧；李娟；赵毅；张娟 刊期： 2007年第05期
目的 应用流式细胞仪和免疫组织化学技术检测自然流产绒毛及蜕膜细胞凋亡及bax、bcl-2基因调控,探讨自然流产发病机制和基因调控机制,为进一步自然流产基因治疗研究提供理论依据.方法 对20例自然流产病例和正常早孕吸宫流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究.常规光镜观察细胞形态学变化;DNA倍体分析检测细胞凋亡及其周期变化;免疫组化S-P法检测bcl-2/bax基因蛋白表达率比值.结果 自然流产绒毛、蜕膜组织形态学结构均出现不同程度的退形性改变,自然流产中绒毛及蜕膜细胞凋亡率均较正常妊娠明显增高(P＜0.05),蜕膜凋亡率尤其明显.自然流产的绒毛和蜕膜中抑凋亡基因bcl-2表达也较正常早孕时下降(P＜0.001).而促凋亡基因bax表达自然流产中显著增高(P＜0.001),结果与细胞凋亡的发生一致.结论 细胞凋亡在胚胎的发育过程中起着重要作用,自然流产绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的重要原因,并进而阻碍了胚胎的发育.
作者：高洁；孙月玲；余志英；孙波 刊期： 2007年第05期
目的 了解来东莞工作的外来工的乙肝感染状况,分析其乙型肝炎的表达模式,为乙肝防治提供参考.方法 收集了到某院体检的962份外来工的血清,检测乙肝五项:表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb),并对结果进行分析.结果 在检测的962人中,HBsAg阳性335人,阳性率34.82%.其中男性受检者527人,HBsAg阳性204人,阳性率38.71%;女性受检者435人,HBsAg阳性131人,阳性率30.11%.乙肝五项标志物全阴者217人,占总受检人数的22.56%.结论 必须加强对来莞工作的外来工的乙肝监测,及时为乙肝五项全阴者注射乙肝疫苗,同时加强外来工的健康教育,提高他们的卫生知识水平.
作者：郑少敏；刘宇莹 刊期： 2007年第05期
目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者血清白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12)和可溶性Fas(sFas)水平及其在MDS免疫发病机制中的作用.方法 采用酶联免疫夹心法(ELISA)检测25例MDS患者和20例正常人血清IL-10、IL-12、和sFas水平.结果 与正常组比较,MDS患者IL-10和sFas水平明显升高(P＜0.01);IL-12水平有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MDS的免疫发病机制与造血细胞因子分泌紊乱有密切关系,检测血清IL-10、IL-12和sFas三种细胞因子水平,为MDS患者监测病情,评价疗效及免疫治疗提供较为客观的指标.
作者：刘瑞玉；张舜玲；许先吟；巫远忠；余相；曹海燕；陈江涛；胡俊 刊期： 2007年第05期
目的 探讨146例传染病患者医院真菌感染的特点及药敏情况.方法 对2003-2005年传染病住院患者中的真菌感染病例进行回顾性调查分析.结果 医院真菌感染率从2003的1.16%上升到2005年的1.62%.感染的部位以消化道、口腔为主,分别占39.04%、32.88%.被检出真菌有19种,以白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌为主,分别占37.67%、26.71%,对抗真菌药物伊曲康唑、两性霉素B、氟康唑敏感,但敏感率在下降,对咪康唑、益康唑、酮康唑耐药率较高.感染的发生与病情危重、免疫功能紊乱、老龄化、使用广谱抗菌药物,以及各种侵入性诊疗技术等因素相关.结论 真菌感染率呈逐年上升趋势,真菌的耐药性也逐渐增多.对各种危险因素采取综合措施,合理使用抗菌药物,是减少医院感染发生的关键.
作者：黄丽芬；张顺玲；王琦；尹炽标；杨湛 刊期： 2007年第05期
目的 观察微创颅内血肿清除术治疗脑出血的疗效.方法 91例脑出血患者随机分为治疗组和对照组,分别采用微创颅内血肿清除术和内科保守治疗.结果 治疗组的治愈率为58.7%,显著高于对照组15.6%(P＜0.001),而致残率(15.2%)和死亡率(26.1%)则显著低于对照组的35.6%和48.9%(P均＜0.01).治疗组发生肺部感染、消化道出血、急性肾功能衰竭及再出血等并发症的比率与对照组相似,两组比较差异无统计学意义(P均＞0.05)).结论 微创颅内血肿清除术是治疗脑出血的有效措施,值得在临床推广应用.
作者：尹夕龙；仪立志；赖连枪；周路球；缪亮；石小峰 刊期： 2007年第05期
目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对小鼠胃粘膜上皮细胞表达环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的影响.方法 32只Balb/c小鼠随机分为4组.第1组为对照组,口服液体培养基;第2、3、4组为实验组,分别等量口服Hp菌悬液.于末次灌胃后第10、10、24、32天将第1、2、3、4组小鼠处死.用快速尿素酶试验、Warthin-Starry银染和Hp培养作Hp感染诊断;用免疫组化比较各组COX-2表达量;用流式细胞仪检测小鼠胃粘膜上皮细胞增殖指数(PI).结果 对照组均无Hp感染,实验组均检测到Hp.第1组与第2、3、4组COX-2表达量差异有统计意义(P＜0.01),第2组与第3、4组表达量差异也有统计学意义(P＜0.01),但第3、4组间差异无统计学意义(P＞0.05).第1、2组间PI差异无统计学意义(P＞0.05),其他各组间差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 在Hp感染初期小鼠胃粘膜上皮细胞就可能启动了由COX-2介导的细胞增殖机制,并参与了Hp相关胃癌发生、发展的过程.
作者：王海滨；郝素珍；刘蕾；田锋 刊期： 2007年第05期
目的 观察中药珍珠散协同爱宝疗浓缩液治疗重度宫颈糜烂临床疗效和药物经济学效益.方法 将有生育要求的Ⅲ度宫颈糜烂患者111例随机分为治疗组和对照组,治疗组用中药珍珠散联合爱宝疗浓缩液治疗,对照组则单用爱宝疗浓缩液治疗,均每3 d治疗一次.45 d后,比较两组疗效、疗程及治疗费用.结果 治疗组治愈率明显高于对照组(67.9% vs 36.4%),差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组费用明显低于对照组[(371.6±138.4) vs (483.6±36.6)]元(P＜0.01).治疗组治疗时间比对照组显著缩短[(32.4±12.1) vs (44.0±3.3)]d(P＜0.01).治疗组中提前结束治疗患者多于对照组(35/56 vs 6/55,P＜0.05).治疗组与对照组均未见副作用发生.结论 珍珠散协同爱宝疗浓缩液治疗重度宫颈糜烂疗效好,药物经济学效益高,值得临床推广.
作者：康佳丽；刘筱群 刊期： 2007年第05期
目的 评价脂血标本的核酸定量检测实时扩增曲线,以探讨此类标本进行HBV DNA定量检测的可接受性.方法 建立扩增曲线观察法、扩增效率Grubbs离散值分析法及扩增效率置信区间估计法,评价接收脂血标本进行荧光定量PCR法HBV DNA定量检测的有效性.结果 该2批次扩增的各样品扩增效率数值未发现离散值,3例脂血标本的扩增效率在同批样品扩增效率的90%置信区间内,与扩增曲线观察法结果一致.结论 3种评价方法均对修正标准操作程序以接收该类标本提供了支持性的依据.
作者：余南；陈小坚；甘明；詹希美 刊期： 2007年第05期
目的 应用聚砜膜空心纤维透析器浸提液配制的细胞培养液培养小鼠成纤维细胞L929(4×104/ml),观察其对L929细胞生长的影响.方法 细胞计数法和WST-1法.结果 和对照组相比,两种试验方法实验组的细胞均生长良好,细胞增殖度均大于75%,为1级反应.结论 根据国家标准进行评价,该聚砜膜空心纤维透析器对L929细胞形态、生长和增殖没有影响,无细胞毒性作用,具有良好的生物相容性,符合生物材料应用要求.
作者：麦惠霞；周颖；张全新；朱伟 刊期： 2007年第05期
目的 了解男男性接触人群(MSM)高危行为情况及其HIV感染状况,为制定针对MSM的干预策略提供科学依据.方法 通过滚雪球的方式招募男男性接触者进行面对面的问卷调查,采其静脉血5 ml检测HIV抗体和梅毒抗体.资料经SPSS 12.0进行统计分析.结果 共计调查了1 000名MSM,平均年龄(27.8±9.1)岁.调查结果显示,MSM发生首次性行为的平均年龄是(18.8±3.4),发生首次性行为的性伴56.8%是男性.近6个月有78.6%的MSM与男性有过肛交性行为,男性性伴数平均是3.7人,近6个月与男性发生肛交时,只有31.8%的MSM每次都使用了安全套.HIV感染率为10.4%,梅毒感染率为9.3%.结论 MSM HIV和梅毒感染率高,多性伴和发生肛交时安全套使用率低,将可能促进艾滋病在MSM中的快速蔓延;针对MSM的监测,干预工作亟待加强.
作者：冯连贵；丁贤彬；卢戎戎；张维；潘传波；易辉容；何长华；欧阳琳；王志勇 刊期： 2007年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
