学术投稿

食品过敏原指纹图谱快速检测研究(一)--鲫鱼、鲢鱼总蛋白2-DE指纹图谱分析

吴海强;余晓;刘志刚

关键词:食品过敏原, 指纹图谱, 2-DE, 快速检测
摘要:目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析鲫鱼和鲢鱼总蛋白2-DE(2-dimension electrophoresis)指纹图谱,确定食品过敏原指纹图谱快速检测的可行性.方法取新鲜鲫鱼和鲢鱼,去内脏和鱼鳞,在预冷的丙酮中搅碎,用丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,PBS透析,冻干得初提样品.用Clean-up Kit试剂盒对两种鱼的总蛋白初提样品进行精提.双向电泳第一向IEF选择13 cm非线性胶条(pH=3-10),采用溶胀方法上样,达到平衡后转移胶条进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),银染,脱色后扫描图像进行计算机分析处理.结果2-DE图像显示鲫鱼和鲢鱼总蛋白主要是中等分子量蛋白,呈弱酸性和弱碱性,其蛋白点既有相同点也有差异点.结论通过2-DE指纹图谱分析完全可以区分这两种不同的鱼类,对于差异性蛋白点可以给出明确的判定.
热带医学杂志相关文献
  • 热带医学概念

    编者按俞守义教授是我国著名的热带医学专家、国务院学科评议组成员、广东省热带医学与寄生虫学学会理事长.热带医学研究在我国20世纪40年代至60年代初学术界非常活跃,南有陈心陶教授,北有钟惠澜教授,他们是分别担任南北著名的省市级热带医学研究所所长,为我国热带医学的发展作出了卓越贡献.借<热带医学杂志>2006年改为月刊之机,特向老一辈热带医学专家致以崇高的敬意.热带医学是一门发展了100多年的边缘学科,它的概念和涵盖的内容随学科的发展而有所不同,至今难以用简单的定义概括热带医学.近年,俞守义教授组织编写了大型专著<现代热带医学>,本刊特请他就热带医学的概念作一个专论,相信读者对热带医学的定义有个较全面的了解.

    作者:俞守义 刊期: 2006年第01期

  • 三种乙型肝炎血清标志物检测方法的成本-效果分析

    目的对三种乙型肝炎血清标志物(HBVMs)的测定方法进行成本-效果分析,找出低成本高效率的检测方法.方法分别用ELISA、胶体金免疫层析法(金标)、化学发光法检测血清HBVMs,同时按照各类成本的特征做实际测算.结果三法方法检测结果的符合性良好,其灵敏性依次为化学发光法,ELISA和金标法;单位成本以化学发光法高,依次为ELISA、金标法,分别为744.17元、317.23和42.22元.批量成本则以ELISA为低.结论ELISA灵敏性高,成本低,适用于普通病人筛查;金标法简便易行,可用于急诊病人快速检测;化学发光法因其价格昂贵,可用于HBVMs为临界值的病人的确证及某些特殊病人等.

    作者:吴晓蔓;梁德志 刊期: 2006年第01期

  • 青南地区1997~2001年包虫病资料分析

    目的掌握青海省包虫病的地区分布,流行程度,流行特点及为预防打基础.方法采用回顾性调查方法,收集、整理,分析1997~2001年青海南部包虫病资料.结果包虫病流行区人群血清学调查结果显示阳性率达14.05%(Dot-ELISA),患病率达7.64%(影像学),呈重度流行;绵羊的包虫病感染率为54.38%.结论青南地区是青海省人体包虫病的重要流行区,今后要加强包虫病的防治工作.

    作者:马淑梅;王虎;李卫敏 刊期: 2006年第01期

  • 肝动脉栓塞治疗肝脏巨大血管瘤疗效探讨

    目的探讨肝脏巨大海绵状血管瘤(HCHL)的介入治疗方法与疗效.方法20例肝脏巨大海绵状血管瘤的肝动脉内注入平阳霉素碘油乳剂(PLE),观察其栓塞前后肿瘤直径变化、临床症状的缓解和并发症发生情况.结果PLE栓塞后3~6个月复查CT,肿瘤直径明显缩小,临床症状大部分缓解,无严重并发症发生.结论PLE肝动脉栓塞HCHL疗效良好,微创、安全、副作用少,可作为首选的治疗方法.

    作者:李凯滨;叶金辉;黄肇云;罗剑云;陈亚炎 刊期: 2006年第01期

  • 福建省人体肠道线虫感染现状调查

    目的了解福建省人体肠道线虫的流行现状.方法采用分层整群随机抽样的方法,对13个中签县市39个村(点)进行调查.应用Kato-Katz涂片法,检查粪便中肠道线虫卵;胶带纸肛拭法,检查12岁以下儿童的蛲虫感染.结果粪检20 195人,感染者7 272人,总感染率为36.01%.其中,男性感染率34.39%,女性感染率37.53%;蛔虫、钩虫、鞭虫感染率分别为9.55%、19.73%与11.48%,蛲虫为22.06%(817/3703).年龄组以60~65岁组感染率高占48.98%,职业分布以农民高占41.56%,地区分布以闽北片区的凹头村高占79.09%.结论各地区、各种寄生虫感染率、感染度呈总体下降趋势,但各地起伏较大,部分县市钩虫感染率居高不下,肠道线虫感染仍然是当前农村地区普遍存在的公共卫生问题之一.

    作者:陈宝建;程由注;李友松;张榕燕;李燕榕;李莉莎;林陈鑫;方彦炎;林开铅;林金祥 刊期: 2006年第01期

  • 两种HBV-DNA定量测定方法的比较

    目的考察实时荧光PCR定量法(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒DNA的准确性.方法通过对56份血清进行HBV-DNA检测,其中包括一个10倍倍比稀释系列6份、阴性血清12份和阳性血清38份.比较两种方法的准确性及临床标本符合情况.结果微板核酸杂交定量法和实时荧光定量法的线性回归系统分别为0.977和0.999.实时荧光定量法所检测的不同含量的样本批内变异系数均低于微板核酸杂交定量法.结论实时荧光定量法具有较好的灵敏度、特异性、重复性和线性,与微板核酸杂交定量法有良好的相关性.

    作者:李成德;陈享;梁莉红 刊期: 2006年第01期

  • 金标渗滤法测定囊虫特异性抗体试剂盒的研制

    目的研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒,并对其诊断价值进行考核评价.方法以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原,以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为探针,采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法(DIGFA)检测试剂盒.检测不同病人血清中囊虫特异性IgG抗体,并以囊虫IgG抗体ELISA检测试剂盒考核其敏感性和特异性.结果用金标试剂盒检测58人份囊虫病患者血清和100人份健康者血清,其敏感性为98.3%(57/58);特异性为100%(100/100).用该试剂盒检测25人份包虫病患者血清,6份呈弱阳性,交叉反应率为24%;检测30人份血吸虫病人血清,10人份肺吸虫病人血清,10人份肠道线虫病人血清,均无交叉反应.与ELISA试剂盒检测结果比较,符合率为98.7%,无显著性差异(χ2=0.0545,P>0.05).结论金标渗滤法快速检测囊虫特异性抗体试剂盒敏感性高、特异性强,可与ELISA法相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,特别适合临床检测和现场查病.

    作者:干小仙;王越;郭建勋;朱建奎;施晓华 刊期: 2006年第01期

  • 兔抗人心肌肌钙蛋白I抗体的制备与鉴定

    目的制备兔抗人心肌肌钙蛋白I抗体并进行鉴定.方法用人工合成的cTnI蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA及Westem blot方法检测制备的抗血清效价和特异性.结果此次获得的抗血清ELISA方法检测抗体滴度达到了1:16 000,检测cTnI的灵敏度低为10μg/L.Western blot检测表明该抗体可有效识别原核细胞表达及大鼠心脏组织提取物中存在的cTnI蛋白.结论应用该方法成功制备了人cTnI的多克隆抗体,为进一步研究cTnI的结构与功能打下基础,并为有效制备高特异性的单克隆抗体提供借鉴.

    作者:杨能;徐霞;谢闺娥 刊期: 2006年第01期

  • 河源市食品行业从业人员乙型肝炎病毒感染情况分析

    目的了解河源市食品行业从业人员乙型肝炎病毒感染情况,为能有效地控制乙肝病毒的传播,进一步做好食品行业的卫生监督、监测工作提供依据.方法对2004年河源市食品行业从业人员7 089人采用酶标法(ELLSA)进行HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc测定,并与非食品从业人员3 543人进行比较分析.结果HBsAg总阳性率为11.1%,食品从业人员、非食品从业人员分别为9.38%、14.5%,差异有显著性(P<0.01);食品从业人员、非食品从业人员HBeAg阳性率分别为3.10%、9.43%,差异有显著性(P<0.01).结论由于食品从业人员与人群接触密切,所以,对未感染乙肝病毒的食品从业人员在及时预防接种乙肝疫苗的同时,加强对食品行业的卫生管理,做好食品行业的卫生监督、监测工作,是预防控制工作的一个重点.

    作者:张惠云;杨芬;曾娜 刊期: 2006年第01期

  • 人类端粒酶RNA组分的研究进展

    人类端粒酶RNA(hTR)是端粒酶的必需组分之一.它除了作为端粒酶重复序列合成的模板外,还有许多其它功能,如介导端粒酶组装、与其它相关蛋白相互作用等.对hTR的研究将有助于揭示端粒酶的详细作用机制,从而为以端粒酶为靶点的肿瘤治疗提供科学依据.本文对近年来有关hTR结构、功能的研究作一综述,并探讨其与一种称为先天性角化不良的遗传疾病的关系,同时提出hTR在端粒酶组装过程中的可能作用机制.

    作者:杜贻鹏;周俊宜 刊期: 2006年第01期

  • 噬菌体随机肽库筛选抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶单抗2A5的识别表位

    目的利用噬菌体随机肽库技术筛选恶性疟原虫乳酸脱氢酶(pfLDH)抗体2A5的识别表位.方法以抗pfL,DH的单抗2A5筛选噬菌体随机12肽库,挑取阳性克隆测定DNA序列,推导其氨基酸序列并进行同源性分析.通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与单抗2A5之间的结合特性.结果从噬菌体随机12肽库中筛选出21株可与2A5单抗特异结合的噬菌体克隆,其中多数克隆呈现核心序列SQK(R)L,该序列与pfLDH的一级序列具有一定同源性.竞争抑制实验显示,带有核心序列的噬菌体克隆可与pfLDH竞争结合单抗2A5.结论SQK(R)L是pfLDH单抗2A5特异识别的表位.

    作者:郝文波;董文其;吴英松;李明 刊期: 2006年第01期

  • 大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒重组体构建

    目的构建大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒介导的表达载体.方法提取大鼠脑组织总RNA,用逆转录PCR扩增DNA多聚酶β(POLB)的编码区,与T载体连接,作DNA测序后,酶切POLB基因并连入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183.酶切鉴定,重组腺病毒质粒(pAd-polb)和Lipofectamine2000转染293细胞,用293细胞扩增重组腺病毒.结果8个TA克隆中有2个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLB cDNA序列完全一致.DNA序列正确的POLB重组腺病毒质粒Ad-polb转染293细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光.结论用TA克隆和AdEasy系统,成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体.

    作者:钟建辉;邱鹏新;颜光美 刊期: 2006年第01期

  • 湖北省2004年4起急性血吸虫病暴发疫情分析

    目的探讨急性血吸虫感染(下称急感)暴发流行的原因及防治对策.方法对湖北省2004年4起急感暴发疫情进行现场调查分析.结果共55例(确诊病例48例,临床病例7例),其中,男性31例,女性24例;年龄大57岁,小5岁;职业分类以农民(27例)和学生(25例)为主;接触疫水方式以戏水游泳(26例)和生产、生活(21例)为主.结论控制急感暴发流行,应以提高春查春灭质量和加强中小学生及农民健康教育水平为主.

    作者:张映皓;戴裕海;朱惠国;涂祖武 刊期: 2006年第01期

  • 深圳市淡水鱼华支睾吸虫感染调查及实验研究

    目的了解深圳市淡水鱼华支睾吸虫(肝吸虫)囊蚴感染情况,阻断和控制肝吸虫病在深圳市的传播和流行.方法用鱼体消化法筛查肝吸虫囊蚴;以肝吸虫过氧化物酶(SOD)基因保守序列作为摸板,RT-PGR鉴别肝吸虫囊蚴.结果对深圳市淡水鱼肝吸虫感染情况进行调查,共抽检16种鱼257份样品,其中检出肝吸虫囊蚴45份,检出率为17.50%.检出率高的鱼种依次为鲩鱼40.74%、鲮鱼26%、鲤鱼22.5%、大头鱼22.85%、生鱼16.6%、非洲鲫鱼14.5%;RT-PCR检测结果与镜检结果完全一致.结论检测结果显示深圳市淡水鱼中肝吸虫的感染情况严重,尤其是鲩鱼的感染率较高,为了控制和阻断肝吸虫的传播必须改变吃淡水鱼生的生活习惯.

    作者:黄达娜;高世同;耿艺介;黄薇;李慧;吴少庭;张仁利 刊期: 2006年第01期

  • 重庆市慢性丝虫病现状调查

    目的了解重庆市慢性丝虫病患病现状,为治疗和照料慢性丝虫病患者提供依据.方法以乡为单位,历史资料记载的微丝蚴率分为≥10%、≥5%和<5%三层,每层随机抽取3个乡,每个乡抽样调查9个村.逐户走访,询问和/或查体,记录各型慢性丝虫病调查结果.用此方法调查的各型慢性丝虫病人数,估算全县现有各型慢性丝虫病患者人数.微丝蚴率低,慢性丝虫病患者少,分布范围小的区县,以村为单位,对曾经有丝虫病流行的村进行逐户走访调查,记录调查结果.结果抽样调查+估算+普查,尚有慢性丝虫病患者23 426例,患病率为0.94%,其中象皮肿占3.99%、鞘膜积液占55.78%、乳糜尿占33.63%、混合型占6.60%.与20世纪90年代摸底数的56 008例比较,减少35 282例,下降了58.17%.微丝蚴率越高的地区,慢性丝虫病患者亦多,经相关分析(r=0.95,P<0.0005).结论通过本次调查,掌握了重庆市慢性丝虫病现状,为今后开展对慢性丝虫病患者的治疗与照料提供了依据.

    作者:李继艮;吴成果;张富南;雷杨;李怡;蒋诗国 刊期: 2006年第01期

  • 广东疟疾联防区2004年监测结果与流行特点

    目的探讨疟疾联合管理在疟疾防治和流动人口疟疾管理中的作用.方法主动侦查与被动侦查相结合,对临床诊断和实验室诊断病例进行个案调查.结果疟疾联防的五个地级市2004年共发现疟疾病例136例(占全省病例的60.71%),年发病率0.057/万;五市当地居民血检阳性率为0.31%,流动人口血检阳性率为0.14%,经统计学检验,两者血检阳性率无显著性差异;流动人口中的回归人员血检阳性率为1.25%,外来人员血检阳性率为0.14%,经统计学检验,两者血检阳性率有显著性差异;在回归人员中,从海南省回归的人员血检阳性率高,与从其它省回归的人员血检阳性率比较有显著性差异;各种职业的流动人口血检阳性率无显著性差异;参与疟疾联防的五个地级市全年各月都有疟疾病例发生,其中六、七月达到高峰.病例的季节分布与广东省传疟媒介的季节消长相吻合.结论通过联防,2004年广东省联防区内疟疾发病率继续维持在较低水平,输入病例和输入继发病例明显减少,流动人口疟疾得到有效控制.

    作者:林荣幸;潘波 刊期: 2006年第01期

  • TBA治疗月经过多的长期疗效及其对生活质量的影响

    目的采用热球凝切(thermal balloon ablation,TBA)子宫内膜对月经过多的病人进行研究,观察长期疗效及生活质量的改变.方法采用TB型子宫内膜治疗仪对70例月经过多病人进行TBA治疗,术后连续随访24个月,以电话或面见的方式,随访临床症状及生活质量状况,并作相应的统计学处理.结果术后6、12、18、24个月治疗有效率分别为95.71%、94.28%、87.14%、84.29%.,再次手术有5例,占7.14%.术前与术后24个月时相比,月经期从(8.8±2.2)d/周期缩减至(4.1±1.3)d/周期,P<0.0001;月经量从(11.4±2.6)片/d减至(4.8±1.5)片/d,P<0.001.血红蛋白从(82.75±12.40)g/L,上升为(110.30±1.00)g/L,P<0.0001;生活质量(SRHMS)量表健康评定总分从(166.50±10.11)分上升到(357.33±32.16)分,P<0.0001.结论TBA治疗月经过多,可改善患者临床症状,同时提升生活质量.

    作者:何慧仪;卢丽娜;康佳丽;邓玲红;陈淑贤 刊期: 2006年第01期

  • 树突状细胞和哮喘

    哮喘已成为影响人们日常生活的重要疾病,其发病率有上升的趋势.哮喘为气道的慢性炎症,表现为气道高反应性和气道阻塞.树突状细胞是主要的抗原呈递细胞,可调节获得性免疫反应,指导原始T细胞分化为Th1和Th2效应细胞.Th2细胞通过分泌炎性因子在炎症反应中发挥关键的作用.另外,树突细胞还介导抗原特异性耐受或无反应.它在哮喘发病中的作用日益受到人们的重视.探讨哮喘可能的治疗方法而对树突细胞进行研究是很有必要的.本文将就树突细胞在哮喘发病中的机理作一阐述.

    作者:喻海琼;刘志刚 刊期: 2006年第01期

  • 做好见习学生儿科门诊带教的教学实践探讨

    目的探索具有良好效果的儿科门诊见习的带教方法.方法通过帮助学生树立正确的门诊见习观念、在门诊及时复习常见的临床操作技能、将门诊见习作为病房见习带教的良好补充等多种的综合手段以提高儿科门诊见习带教效果.结果合理的儿科门诊见习工作安排及积极的教学实践探索能使学生的见习工作紧凑、有序地进行;可以培养学生良好的医德医风及在门诊临床实践中融会贯通加强理论知识学习的能力和效果,使门诊见习带教真正成为提高学生临床能力、技能和思维的重要补充.结论针对存在的具体问题而进行有益的儿科门诊教学实践探索可以取得良好的教学效果.

    作者:黎阳;郭海霞;陈伟雄;王梅;吴葆菁 刊期: 2006年第01期

  • 班氏丝虫病不同防治阶段媒介传播作用的研究

    目的了解广东省班氏丝虫病主要传播媒介在丝虫病不同防治时期传播作用的变化.方法在班氏丝虫病流行区对致倦库蚊自然感染情况调查,并对其相关参数进行观察.结果1956~1969年,全省进行了广泛调查,致倦库蚊是优势品种,占97.76%(731505/748239),在发现幼丝虫感染的蚊种中,致倦库蚊自然感染率高,为9.94%,且仅在其体内发现L3(感染期幼虫),L3率为0.22%,是班氏丝虫病的主要传播媒介.在防治前、防治阶段、基本消灭阶段和消灭阶段,致倦库蚊的自然感染率分别为9.94%、6.02%、0.04%、和0,随着防治工作的深入,呈下降趋势,1993年未发现感染期幼虫.各阶段传播媒介年传播潜势分别为10486.21、5131.89、124.30和0.结论防治后期班氏丝虫病的传播已被阻断.

    作者:黄少玉;骆雄才;欧作炎;崔惠儿;霍丽婵;张启明 刊期: 2006年第01期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会