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PCR-SSCP检测耐多药结核菌基因与细菌培养结果对比分析

刘良安;李秋梅;张志军

关键词:结核分枝杆菌, 抗药性, 聚合酶链反应, 单链构象多态性
摘要:目的应用PCR-SSCP检测常规及BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌临床分离株KatG、rpoB、rpsL基因突变,分析其敏感性和特异性,评价其在检测结核分枝杆菌耐药性方面的价值和临床实用性.方法22株常规培养和8株BACTEC培养检出的高浓度及低浓度耐INH、RFP、SM耐多药结核分枝杆菌分离株,分别用PCR-SSCP检测KatG、rpoB、rpsL基因,观察其电泳条带,并与结核菌标准株H37Rv对比.结果22株常规培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中,KatG、rpoB、rpsLPCR扩增产物,用SSCP分别检出KatG基因16株(72.7%)、rpoB基因19株(86.4%)和rpsL基因14株(63.6%).8株BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中分别检出KatG基因5株(62.5%),rpoB基因6株(75%)、rpsL基因5株(62.5%).综合两者KatG、rpoB和rpsL基因检出率分别为70.0%(21/30)、83.3%(25/30)和63.3%(19/30).高浓度耐药与低浓度耐药分离株中的检出率有显著差异(P<0.05),常规培养与BACTEC培养分离株中的检出率无显著差异(P>0.05),与结核菌标准株H37Rv电泳条带对比,特异性为100%,敏感性97%.结论PCR-SSCP敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌的KatG、rpoB和rpsL基因,可用于耐多药结核分枝杆菌的临床检测.
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  • 梅州市艾滋病流行状况与控制对策分析

    目的分析梅州市艾滋病流行和防治现状,探讨对策.方法对1992~2005年梅州市艾滋病监测结果和防治情况进行分析.结果自1992年发现首例HIV感染者,至2005年底累计报告HIV感染者29例,死亡17例.感染者主要以男性(79.31%)、20~49年青壮年(75.86%)为主;以性传播为主,占62.07%;血液传播占13.79%,母婴传播占3.45%.结论梅州市艾滋病预防控制进入关键时期.今后应继续加强艾滋病监测和预防控制网络建设,实施以宣传教育为主的艾滋病综合性预防措施.

    作者:林立新;杨翼龙 刊期: 2006年第07期

  • 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测和耐药性分析

    目的了解临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)产肠毒素(SE)的情况及耐药现状.方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,用K-B法对260株SA进行药物敏感性试验,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测分别用检测头孢西丁及乳胶凝集检测PBP2a方法进行.结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA 134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB和SEC为主,分别为19.4%、16.4%和13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%.用头孢西丁及检测PBP2a的方法检测MRSA,检出率无显著意义(P>0.05);SA对临床常用的抗菌素除万古霉素及替考拉宁较敏感(100.0%敏感),其它的抗菌素存在多重耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强.结论临床分离的SA株大部分都携带肠毒素,MRSA的带毒率及耐药性均高于MSSA;临床应重视SA肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素.

    作者:李红玉;龙军;徐霞 刊期: 2006年第07期

  • 开平市三次人体重要寄生虫感染状况调查分析

    目的分析开平市人体重要寄生虫病的流行情况,评估防治效果,为制定防治策略提供依据.方法收集开平市1989、1997、2002年三次寄生虫病调查所得数据进行分析,了解当地人体重要寄生虫病的流行态势.结果1989、1997、2002年三次调查,开平市检查人数依次为2 029人、1 030人、1 516人;总感染率依次为50.02%、26.99%和11.21%;蛔虫感染率依次为34.84%、7.09%、4.68%;鞭虫感染率依次为13.26%、2.82%、0.59%;钩虫感染率依次为13.80%、0.68%、0.59%;12岁以下儿童蛲虫感染率依次为42.56%、37.90%、25.49%;华支睾吸虫感染率依次为1.68%、0.19%、4.42%.结论开平市蛔虫、鞭虫、钩虫感染率呈显著下降趋势,感染人数显著减少;蛲虫感染率稳步下降,但仍处于较高水平;华支睾吸虫感染率呈上升趋势.应加强蛲虫病和华支睾吸虫病的防治工作.

    作者:张贤昌;方悦怡;张启明 刊期: 2006年第07期

  • 缺氧对乳腺癌细胞MMP-2、u-PAR、FN表达的影响

    目的研究体外缺氧对乳腺癌细胞系MCF7浸润能力及其细胞表面金属蛋白酶MMP-2、丝氨酸蛋白酶u-PA受体u-PAR和细胞基质蛋白FN的表达的影响.方法本实验模拟体外缺氧环境,观察缺氧对乳腺癌细胞MCF7浸润穿透Metrigel的能力;以及采用半定量RT-PCR检测细胞表面MMP-2、u-PAR和FN表达情况.结果缺氧状态下MCF7细胞的浸润能力明显增强;其表面的MMP-2、u-PAR、FN基因表达升高.结论缺氧可以上调与乳腺癌浸润转移有关的基因的表达,缺氧条件促进乳腺癌细胞的浸润转移.

    作者:郭煜;方荸荠;潘学谊;石菁华 刊期: 2006年第07期

  • 带状疱疹后遗神经痛伴发内脏反应25例临床分析

    目的探讨带状疱疹后遗神经痛(PHN)伴发内脏反应的临床特点.方法分析25例带状疱疹后遗神经痛伴发内脏反应的临床表现、病程特征及诊疗经过,并追踪随访.结果25例的PHN均为脊神经损害,呈节段性分布,伴有感觉过敏带,8例(32%)有轻微脊髓横贯性损害;内脏反应为反复发作的功能性激惹症状,其中消化系18例占72%,泌尿系7例占28%,与PHN同时或随后发生,早期漏诊误诊21例(84%);以抗病毒为主的综合治疗有效,复发率低.结论PHN临床特征为胸段脊神经痛,呈节段性分布;伴发内脏反应常见为消化、泌尿系统激惹性症状,病程呈反复发作性经过;临床误诊漏诊率较高;本病预后良好.

    作者:黄宗青;李爱东;刘洪涛;陈锦辉 刊期: 2006年第07期

  • 患者医院感染相关因素分析及控制措施探讨

    目的了解医院感染的发病率、漏报率、科别感染率和部位感染率,加强医院感染的预防和控制.方法对我院1998~2004年的129 103位住院患者及5 512例医院感染患者进行回顾性调查,采用回归分析和率的检验进行分析研究.结果医院感染率4.3%、漏报率9.6%,科别感染率内科6.2%、外科3.2%、妇产科6.1%、儿科4.9%、五官科0.4%、肿瘤科3.2%、传染科4.5%;部位医院感染率下呼吸道1.31%、上呼吸道0.81%、胃肠道0.51%、手术伤口0.45%、皮肤0.35%、泌尿道0.31%、其他部位0.53%.结论全面加强医院感染的预防与控制、健全制度、规范管理、全员教育、全院参与、全面监测、科学防控,是降低医院感染发生率、提高医疗质量、减轻病人负担、确保医疗安全的有效措施.

    作者:吴敏;周霓;郑仰纯 刊期: 2006年第07期

  • 不同感染状态下人巨细胞病毒基因活性的实验研究

    目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)潜伏和活动性感染状态下病毒基因复制特点.方法选择两种不同滴度HCMV感染传代培养的人胚肺成纤维细胞,建立持续稳定感染和活动感染细胞模型.在感染不同时段,分别采用FQ-PCR和RT-PCR法监测HCMV DNA复制及其主要衣壳蛋白(MCP)mRNA转录情况,光镜观察致细胞病变作用(CPE)、电镜检查细胞超微结构改变.结果两组细胞内均检测到HCMV DNA复制,但活动性感染的B组细胞内HCMV DNA负荷量显著高于A组(P<0.05),其复制速度也较快,并且检测到了水平逐渐升高的MCP mRNA转录,细胞出现进行性加重的CPE和超微结构改变;而潜伏感染的A组未检到MCP mRNA,亦未发现细胞病变.结论高负荷量HCMV DNA复制和晚期蛋白MCP mRNA转录是HCMV活动性感染的重要特点.

    作者:左约维;赵杨;陈敦金;闻良珍 刊期: 2006年第07期

  • 室内装修对人体及小鼠外周淋巴细胞DNA损伤的影响

    目的研究新装修客房中挥发性有机毒物对人体及小鼠外周淋巴细胞DNA损伤的影响.方法通过动物实验和人群流行病学调查相结合的方法,应用单细胞凝胶电泳法,分别检测在新装修场所和未装修场所工作半年以上女服务员外周血淋巴细胞DNA的损伤和实验动物外周血淋巴细胞DNA的损伤.结果在新装修场所工作半年以上女服务员的外周血淋巴细胞DNA断裂比对照组高,差别具显著性意义(P<0.01).动物实验组外周血淋巴细胞DNA的损伤高于对照组,两组比较具有显著性差异(P<0.01).结论新装修住房中挥发性有机毒物对人体外周血淋巴细胞存在DNA损伤作用.高浓度有机挥发物可引起小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤.

    作者:王秀英;余淑苑;牛恩宏;康莉 刊期: 2006年第07期

  • PCR-SSCP检测耐多药结核菌基因与细菌培养结果对比分析

    目的应用PCR-SSCP检测常规及BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌临床分离株KatG、rpoB、rpsL基因突变,分析其敏感性和特异性,评价其在检测结核分枝杆菌耐药性方面的价值和临床实用性.方法22株常规培养和8株BACTEC培养检出的高浓度及低浓度耐INH、RFP、SM耐多药结核分枝杆菌分离株,分别用PCR-SSCP检测KatG、rpoB、rpsL基因,观察其电泳条带,并与结核菌标准株H37Rv对比.结果22株常规培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中,KatG、rpoB、rpsLPCR扩增产物,用SSCP分别检出KatG基因16株(72.7%)、rpoB基因19株(86.4%)和rpsL基因14株(63.6%).8株BACTEC培养耐INH、RFP、SM的耐多药结核分枝杆菌分离株中分别检出KatG基因5株(62.5%),rpoB基因6株(75%)、rpsL基因5株(62.5%).综合两者KatG、rpoB和rpsL基因检出率分别为70.0%(21/30)、83.3%(25/30)和63.3%(19/30).高浓度耐药与低浓度耐药分离株中的检出率有显著差异(P<0.05),常规培养与BACTEC培养分离株中的检出率无显著差异(P>0.05),与结核菌标准株H37Rv电泳条带对比,特异性为100%,敏感性97%.结论PCR-SSCP敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌的KatG、rpoB和rpsL基因,可用于耐多药结核分枝杆菌的临床检测.

    作者:刘良安;李秋梅;张志军 刊期: 2006年第07期

  • 广东省鼠疫疫源地性质的研究

    目的了解疫源地的现状、空间结构、性质、主要宿主和媒介与病原体的关系,确正IHA检出阳性血清的特异性和鼠疫菌突变的生物学特性.方法流行病学抽样调查和监测,宿主对鼠疫菌的敏感性和感受性试验,鼠疫菌突变试验,血清学IHA、RIP的特异性试验,蚤传播能力试验.结果雷州半岛1950~1951年检鼠疫患者314份,分离到鼠疫菌91株,检蚤118只分离至4株,检鼠和臭鼩鼱1 830份分离108株、镜检鼠和臭鼩鼱3 668份,阳性53份;1952年镜检鼠和臭鼩鼱12 063份,阳性58份;1953~2005年镜检和培养鼠和臭鼩鼱575 768份,蚤5 300只,均未检到菌;1973~1988年用IHA检鼠和臭鼩鼱血清89 092份,阳性40份,BIP检5 247份,阳性2份,RIHA检鼠脏器2 050份阳性3份;1989~2005年IHA检98 906份,RIP检5 686份均为阴性.非疫区1957~2005年检鼠和臭鼩鼱27 227份和蚤3 809只均未检到菌,IHA检鼠类血清9 241份和RIP检6 727份全为阴性.结论雷州半岛是黄胸鼠鼠疫疫源地,黄胸鼠是主要宿主,褐家鼠和臭鼩鼱、小家鼠是间接宿主,黄毛鼠对鼠疫菌极敏感,印鼠客蚤是主要媒介,伍氏病蚤传播能力与印鼠客蚤相当、穗缘端蚤较弱,50年代初是流行末期、70年代至80年代是迁延期、90年代至2005年是静息期.用四个实验结果证实血清学检出的F1抗体和F1抗原,皆有很好特异性.

    作者:杨华源;冯志勇;卢瑞明;张涛;刘铭泉;张世炎;麦海;梁秋光;梁练 刊期: 2006年第07期

  • 乙肝免疫球蛋白预防肝移植后乙肝复发

    目的探讨肝移植术后乙肝复发的预防方法,提高乙肝相关疾病患者肝移植的疗效.方法对120例成人乙肝患者肝移植的临床资料进行回顾性研究,比较小剂量HBIG+Lamivudine与单纯应用Lamivudine预防肝移植术后乙肝复发的区别.结果Lamivudine组75例患者,12例患者发现有肝炎复发,复发率为16.7%(12/75),其中4例检测到YMDD变异株.联合用药组45例患者有3例乙肝复发,复发率为6.7%(3/45),未检测到YMDD变异株.结论小剂量HBIG+Lamivudine比单纯使用Lamivudine能更有效预防肝移植术后乙肝复发,且术后发生YMDD变异的危险性降低.

    作者:巫林伟;何晓顺;朱晓峰;马毅;王东平;钱世鹍;鞠卫强;黄洁夫 刊期: 2006年第07期

  • 不孕症患者宫颈分泌物中CT、UU检测分析

    目的通过检测不孕症患者宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)感染情况,探讨不孕与CT、UU感染的关系.方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测50例原发或继发不孕妇女(不孕组)及50例早孕妇女(对照组)宫颈分泌物中CT、UU感染情况.结果不孕组CT、UU感染率分别为28%、42%,显著高于对照组8%、12%(P<0.05).结论CT、UU感染是导致不孕的重要因素.

    作者:何群双;杨云 刊期: 2006年第07期

  • 卡维地洛对老年不稳定型心绞痛患者的疗效观察

    目的观察第三代β-受体阻滞剂卡维地洛治疗不稳定型心绞痛(UAP)的临床疗效.方法选择UAP患者68例,随机分为卡维地洛组(n=34)和对照组(n=34),观察用药8周后的临床治疗有效率、心电图变化、心率、血压及不良反应等.结果卡维地洛组临床显效率及总有效率明显高于对照组(P<0.05);卡维地洛治疗后收缩压、舒张压及心率均明显降低(P<0.05),血脂、血糖无明显改变;卡维地洛组肝、肾功能未发现异常,未见不良反应.结论卡维地洛治疗不稳定型心绞痛患者是有效而且安全的.

    作者:虞准;田小园;彭晓玲;王涓;吴扬慧;夏志崎;廖志勇 刊期: 2006年第07期

  • 结核性脑膜炎及活动性肺结核T淋巴细胞亚群测定及分析

    目的探讨结核性脑膜炎(TBM)与活动性肺结核(PTB)病人T淋巴细胞亚群特点.方法利用流式细胞仪分别测定TBM组(45例)、肺结核(PTB)组(40例)及对照组(40例)人群CD3+、CD4+、CD8+百分比及CD4+/CD8+比值.结果TBM组与PTB组CD3+、CD4+计数百分比均显著低于对照组(P<0.05).TBM组CD4+计数百分比亦显著低于PTB组(P<0.05).对于CD8+细胞计数百分比,TBM组与PTB组之间,PTB组与对照组之间均无显著性差异(P>0.05),而TBM组显著小于对照组(P<0.05).对于CD4+/CD8+比值,TBM组、PTB组与对照组两两比较均有显著性差异(P值均<0.05),以TBM组比值小,PTB组次之,对照组大.结论TBM与PTB病人其细胞免疫功能均低于正常人群.TBM比单纯PTB病人细胞免疫功能低下,提示病情严重,预后不良.

    作者:陈永浩 刊期: 2006年第07期

  • 人乳头瘤病毒感染者宫颈组织病理学研究

    目的观察人乳头瘤病毒(HPV)感染者的宫颈组织学变化,探讨HPV及其各基因型对宫颈上皮病理变化影响.方法采用导流杂交法对门诊844例宫颈癌筛查者行6、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304等21种HPV亚型的分型检测,与宫颈组织病理学进行分组对照观察.研究HPV各种基因型感染的宫颈上皮病理变化.结果HPV总感染率为49.2%(416/844),各亚型感染率依次为:16(10.7%)、52(10.0%)、58(7.6%)、CP8304(6.9%)、11(6.4%)、51(6.3%)、33(5.3%)、6(3.8%)、68(3.7%)、18(3.6%)、53(3.4%)、31(3.3%)、66(2.1%)、39(1.9%)、59(1.4%)、45(0.7%)、56(0.6%)、44(0.5%)、43(0.2%)、42(0)、35(0).混合感染率为41.3%(172/416),其中感染2种亚型为29.8%(124/416);3种亚型为7.9%(33/416);4种亚型为2.6%(11/416);5种以上亚型为1.0%(4/416).HPV阳性者191例行宫颈组织活检,其中慢性炎症30.4%(58/191);尖锐湿疣13.6%(26/191);CIN Ⅰ 41.4%(79/191);CINⅡ9.4%(18/191);CINⅢ3.1%(6/191);宫颈癌2.1%(4/191).HPV混合性感染者宫颈CIN病变(CIN Ⅰ~CINⅢ)的发病率为66.7%(54/81),单一型感染者宫颈CIN病变为44.5%(49/110),两者之间有显著性差异(P<0.05).结论高危型HPV感染与宫颈癌及癌前病变有密切联系,各病毒亚型的混合性感染可能对宫颈CIN的发生与发展有累加作用,对HPV进行分型检测可以指导临床的诊断与治疗.

    作者:郜红艺;张佳立;张江宇;吴坤河;梁驹卿;潘小英;张畅斌 刊期: 2006年第07期

  • 残胃癌的外科治疗与预防(附36例病例分析)

    目的探讨残胃癌早期诊断、外科治疗与预防.方法回顾分析1995年1月~2005年1月收治的36例残胃癌发病率、临床表现及治疗情况.首次手术方式均为毕Ⅱ式吻合;间隔时间10~35年.结果23例行残胃癌根治术病人的1年、3年、5年累积生存率分别为78.26%、34.80%和26.10%.4例未手术和9例行姑息性手术者均于一年内死亡.若将这23例分为残胃全切除(n=15)和残胃次全切除(n=8)两组,前者的1年、3年、5年生存率分别为80.00%、66.70%和62.50%,而后者1年、3年的生存率为75.00%和33.33%,无一例生存逾5年.两者比较有显著性差异(P<0.01).结论早期发现、早期诊断对提高残胃癌的手术切除率有重要意义,是提高生存率的关键.手术以根治术为主,无论是早期还是进展期残胃癌均提倡全胃切除.清扫一般包括癌肿周围第1站和第7、8、9、10、11、12、13组淋巴结,同时清除空肠系膜根部第14组淋巴结.重视残胃癌预防,应采取积极有效的预防措施,避免残胃癌的发生.

    作者:刘宏杰;曾山崎;唐伟镖 刊期: 2006年第07期

  • 微囊藻毒素LR诱导无DNA片断化的细胞凋亡

    目的研究微囊藻毒素(microcystin,MC)损伤肝细胞的毒性机制.方法以不同浓度的微囊藻毒素LR(MCLR)处理L-02肝细胞,通过光镜和电镜下的形态观察、DNA片断化分析、线粒体膜电位变化等了解MCLR对肝细胞的毒性效应.结果光镜下观察表明,50μg/ml MCLR处理可使细胞变圆、萎缩、不贴壁生长,电镜下L-02细胞呈现皱缩、膜发泡及染色质凝聚并边缘化等变化,这是典型的细胞凋亡形态特征,但电镜下没有观察到凋亡小体的形成;DNA电泳表明凋亡细胞没有出现明显的DNA ladder,与电镜观察的结果一致.流式细胞仪检测发现以50μg/ml MCLR处理60h后,细胞的线粒体膜电位显著下降.结论微囊藻毒素损伤线粒体可能是其损伤细胞的途径之一,这种微囊藻毒素诱导的无DNA片段断裂的凋亡现象属首次报道,具体机制有待进一步阐明.

    作者:雷腊梅;宋立荣;韩博平 刊期: 2006年第07期

  • 43例流行性腮腺炎临床特征及并发症分析

    目的分析流行性腮腺炎的临床特点和多器官并发症的特点,总结防治经验.方法回顾分析我院1991年4月~2005年5月间流行性腮腺炎病例,对其临床特点和并发症进行分析.结果共收集病例43例,其中出现并发症27例,分别为脑膜炎2例,面神经炎3例,睾丸炎13例,胰腺炎2例,颌下腺炎7例,颌下淋巴结炎5例,肝炎1例;其中发生两种及以上并发症5例.经抗病毒、抗感染、对症等综合治疗均临床痊愈.结论流行性腮腺炎容易导致多系统多器官并发症,但早期积极治疗一般预后良好.

    作者:杨萍;徐金汉;卫勇彪;宋坦南;陈南萍 刊期: 2006年第07期

  • TORCH感染检测技术在异常妊娠中的临床应用

    目的研究肇庆市端州区孕妇TORCH感染与异常妊娠的相关性.方法采用抗体捕获ELISA法对产前检查及近期自然流产诊治的妇女共778例,进行TORCH-IgM抗体检测.结果480例无异常妊娠史者阳性病例54例,IgM总阳性率为11.24%;285例有异常妊娠史者阳性病例126例,IgM总阳性率为44.21%(P<0.05);13例近期自然流产者阳性病例9例,IgM总阳性率为69.22%(P<0.05).结论在孕早期自觉进行TORCH感染检测,是做好优生优育工作的首要环节.

    作者:陈金强 刊期: 2006年第07期

  • 云浮市2004~2005年流行性感冒监测结果分析

    目的探讨云浮市流感的流行特征及掌握病毒毒株变异情况,为制定流感防控策略提供有力的科学依据.方法通过云浮市流感监测网络系统,对流感作流行病学、病原学监测,并严密监控云浮市各地流感暴发情况.结果2004~2005年监测医院上报流感样病例14 655例,占监测医院内科门诊(或儿科门诊、发热门诊)病例的3.60%,病例以少年儿童为主,占86.48%,全年均有病例发生,冬春季病例较多;两年共分离到106株流感病毒毒株,有甲3(H3N2)、甲1(H1N1)亚型和B型,病毒毒株以甲3(H3N2)为优势株;暴发疫情五起,均发生在中、小学校,四起由甲3(H3N2)亚型病毒毒株引起,一起由B型毒株引起.结论云浮市2004年和2005年的流感发病相对平静,未发生较大规模的暴发流行,病毒毒株未发现有明显的变异,建议继续加强流感监测网络建设,建立流感早期预警系统.

    作者:陈伟文;岑玫喜 刊期: 2006年第07期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会