学术投稿

橘核角鲨烯合成酶基因(ss)的克隆、分析及表达

吴沂芸;罗静;王黎;王倩;裴瑾

关键词:大红袍, 橘核, 角鲨烯合成酶, 克隆, 生物信息学分析, 基因表达
摘要:目的:从大红袍Citrus reticulata‘ Dahongpao’种子的总RNA中克隆角鲨烯合成酶基因(ss),并对其进行生物信息学及表达分析.方法:采用RT-PCR技术克隆基因并对其在橘核不同生长时期的表达进行分析,利用在线分析工具对基因进行生物信息学分析.结果:克隆所得ss总长度为1 205 bp,编码397个氨基酸,与芸香科柑橘属Citrus L甜橙Citrus sinensis、克莱檬蒂娜橘Citrus clementina角鲨烯合成酶(SS)蛋白质序列具有99%的相似性.将橘核生长发育过程分为形态建成末期、成熟期和脱水期3个阶段,其中,种子成熟期的ss表达量高.结论:首次从大红袍中成功克隆ss,可为橘核中柠檬苦素类化合物生物合成及调控机制的研究提供参考.
中药材杂志相关文献
  • 水氮耦合对滁菊水分利用效率的影响

    目的:探讨人工栽培滁菊适宜的水氮管理模式.方法:采用盆栽试验,水、氮二因素二次回归旋转组合设计,研究水氮耦合对滁菊耗水量及水分利用效率的影响.结果:滁菊不同生育时期耗水量有较大差异,以现蕾期滁菊耗水强度较大.水氮耦合对滁菊苗期、分枝期、现蕾期、采摘期耗水量和生育期总耗水量以及水分利用效率有显著影响,水分因子对滁菊各生育时期耗水量及总耗水量的影响大于氮肥因子,氮肥因子对滁菊水分利用效率的影响大于水分因子,水肥间存在显著交互作用;当水分为田间持水量的71.35%,施氮量0.268 N/kg,滁菊水分利用效率高,达3.435g/kg·株.结论:从滁菊水分利用效率角度考虑,滁菊水氮管理以中低水平水分管理和中高水平氮肥用量较为适宜.

    作者:李孝良;谢晓露;张健;汪建飞;谢越 刊期: 2016年第02期

  • 基于二维码的中药质量可追溯系统

    目的:探索基于二维码的中药质量可追溯系统.方法:通过对当前中药质量追溯技术与现状的回顾分析,提出了中药质量二维码的概念,构想了基于中药质量二维码的质量追溯系统,提出了在线中药质量追溯云平台概念模型,同时对该追溯系统进行了优劣分析.结果:该系统期望突破原有大部分追溯系统的局限,即具有对原产地、加工炮制过程及流通过程等外在信息进行追溯的能力,同时还能够对中药内在质量变化进行跟踪;不仅支持对中药材进行追溯,而且还能够适用于饮片、汤剂、中成药等.结论:本研究为中药质量可追溯体系的建立提供了理论基础.

    作者:蔡勇;李西文;倪静云;程努华;陈海;王一涛;胡豪 刊期: 2016年第02期

  • 乙肝抗纤汤辅助治疗乙肝后肝纤维化的疗效研究

    目的:观察乙肝抗纤汤辅助治疗乙肝后肝纤维化的疗效.方法:选取2013年2月至2015年4月在青海省第四人民医院治疗的乙肝后肝纤维化患者136例,随机分为观察组(n=73)和对照组(n=63),对照组给予常规保肝、抗病毒药物治疗,观察组在对照组治疗的基础上给予乙肝抗纤汤治疗,观察两组患者治疗前后血清透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层粘蛋白(LN)水平及肝功能变化和肝脏组织病理.结果:治疗后观察组血清AST、ALT、HA、LN、Ⅳ-C水平及纤维化和炎症计分显著低于对照组(P<0.05),两组患者治疗期间未发现严重不良反应.结论:乙肝抗纤汤辅助治疗乙肝后肝纤维化具有良好疗效,能有效促进肝功能恢复和抗肝纤维化.

    作者:黄群;辛小恩;于国英 刊期: 2016年第02期

  • 黄花油点草活血作用物质基础的初步研究

    目的:初步探明黄花油点草活血作用药效的物质基础.方法:采用小鼠耳廓微循环及大鼠出、凝血时间和血栓形成实验考察黄花油点草不同提取物的活血作用.结果:给药剂量为2.5 g/kg时,水提取物具有显著增加血瘀小鼠动、静脉管径及血流速度变化值,延长血瘀小鼠凝血时间及抗血瘀大鼠血栓形成作用,甲醇提取物具有显著增加血瘀小鼠动脉管径及动、静脉血流速度变化值和延长血瘀小鼠凝血时间的作用;70%乙醇提取物具有显著改善血瘀小鼠动、静脉血流速度作用.结论:黄花油点草活血作用主要药效部位为水提取物,其发挥作用的机制为改善微循环及抗血栓形成.

    作者:孙静;贾田芊 刊期: 2016年第02期

  • 毛蕊花糖苷在血虚模型大鼠体内的药动学研究

    目的:研究熟地黄醇提物毛蕊花糖苷在正常大鼠和血虚模型大鼠体内药动学差异.方法:皮下注射乙酰苯肼联合环磷酰胺复制大鼠血虚模型,熟地黄醇提物灌胃给药,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中蕊花糖苷的血药浓度,采用3p87软件计算药动学参数.结果:毛蕊花糖苷在该测定方法下线性范围为0.2~80μg/mL,低检测限和低定量限分别为0.03、0.12 μg/mL;与正常对照组比较,模型组大鼠相应剂量组A4UC0-t和A UC0-∞显著增加,平均驻留时间和消除半衰期显著延长.结论:该方法专属性强、灵敏度高,操作简便,可用于检测血虚模型下毛蕊花糖苷的药动学过程.

    作者:邓志军;刘若轩;齐耀群;王佳佳;刘夏雯;郭洁文 刊期: 2016年第02期

  • 小姬苗化学成分的研究

    目的:研究小姬苗的化学成分.方法:采用硅胶柱层析等方法进行分离纯化,通过波谱技术并结合文献数据鉴定化合物结构.结果:从小姬苗全草90%乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为:小麦黄素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、massonianoid A(2)、山柰酚(3)、桂皮酸(4)、槲皮素(5)、椴苷(6)、小麦黄素(7)、β-谷甾醇(8)、腺苷(9)、α-toeopherolquinone(10) 、β-胡萝卜苷(11).结论:所有化合物均为首次从该属植物中分离得到.

    作者:黄艳萍;刘洪新;宋家玲;吴继平;袁萍;邱声祥 刊期: 2016年第02期

  • 山核桃叶总黄酮对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

    目的:研究山核桃叶总黄酮对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用.方法:体外培养大鼠H9C2心肌细胞,用不同浓度氯化钴并优化不同缺氧及复氧时间建立缺氧复氧损伤模型.缺氧复氧前加入终浓度为2.5、5、10 μg/mL的山核桃叶总黄酮预处理,通过检测细胞上清液中LDH释放量,细胞内MDA含量和SOD活性;并采用MTS检测缺氧复氧损伤后细胞的成活率以及Hoechst-PI双染和流式细胞术观察细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹检测细胞内HIF-1α蛋白表达,来考察山核桃叶总黄酮保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用.结果:利用1 200 μmol/L氯化钴缺氧18h,复氧2h可建立缺氧损伤心肌细胞模型.与模型组比较,山核桃叶总黄酮能降低H9C2细胞缺氧复氧损伤后LDH释放量及细胞内MDA含量,提高SOD活性,减少细胞凋亡,并使细胞HIF-1α蛋白表达恢复正常水平.结论:山核桃叶总黄酮对心肌细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化、增强细胞清除自由基能力、减少脂质过氧化物产生及抑制细胞凋亡有关.

    作者:蒋瑞彬;朱学鑫;邢丽婉;丁志山;吕圭源;金波 刊期: 2016年第02期

  • 藏紫菀醇提物的抗氧化与抗缺氧作用研究

    目的:对藏紫菀乙醇提取物(EEAS)的体外抗氧化及抗缺氧作用进行研究.方法:采用DPPH·、羟自由基、超氧阴离子清除和还原力检测方法考察EEAS的抗氧化作用,并对其总黄酮和总多酚含量进行测定;利用缺氧PC12细胞模型对其抗缺氧作用进行评价.结果:EEAS富含黄酮和多酚化合物,对3种自由基均表现出一定的清除活性,其中对超氧阴离子的清除活性优于VC,同时表现出一定的Fe3+还原能力.EEAS能显著增加缺氧PC12细胞的活力,降低缺氧PC12细胞LDH活性和MDA含量,提高SOD、CAT、GSH-Px及T-AOC活性.结论:EEAS是一种活性优异的天然抗氧化剂,同时对缺氧导致的PC12细胞氧化损伤具有明显的保护作用.

    作者:景临林;马慧萍;蒙萍;樊鹏程;贾正平 刊期: 2016年第02期

  • 不同等级整株肉苁蓉的药材品质和产地加工蒸制时间研究

    目的:研究肉苁蓉等级与内在成分含量的相关性,明确不同等级整株肉苁蓉的加工蒸制时间.方法:测定肉苁蓉的鲜重和长度等外观指标,利用主成分分析和K聚类分析确定肉苁蓉分级标准,利用高效液相色谱和紫外分光光度计测定肉苁蓉的苯乙醇苷和多糖等含量,比较不同等级和蒸制时间内在成分含量差异.结果:肉苁蓉可分为3个等级,不同等级肉苁蓉的内在成分含量没有显著性差异.对肉苁蓉质量影响为蒸制时间大于等级.Ⅰ级肉苁蓉适宜蒸制30 min晒干,Ⅱ级和Ⅲ级适宜蒸制20 min晒干.结论:肉苁蓉整株产地加工采取分等级蒸制晒干的方式可有效保证肉苁蓉药材内在品质.

    作者:彭芳;徐荣;王夏;刘同宁;高晓霞;刘源;陈君 刊期: 2016年第02期

  • 天然咖啡酰基奎宁酸类化合物抗RSV活性及其构效关系研究

    目的:研究天然来源的咖啡酰基奎宁酸类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)的活性及其构效关系.方法:采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)法对咖啡酰基奎宁酸类化合物抗RSV体外活性进行筛选,MTT法检测化合物对HEp-2细胞的细胞毒性,通过3D-QSAR(three-dimensional quantitative structureactivity relationship)模型分析其构效关系.结果:CPE结果显示咖啡酰基奎宁酸类化合物均表现出较好的抗RSV作用,其中活性好的4,5-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(CQA-4)的IC50=2.5 μmol/L,选择性指数SI> 153.8,远远优于阳性对照药物利巴韦林(IC50=8.3 μmol/L,SI> 20);3D-QSAR分析结果显示,咖啡酰基为咖啡酰基奎宁酸衍生物抗RSV的活性基团.结论:天然来源的咖啡酰基奎宁酸类衍生物均具有抗RSV活性,其中双咖啡酰基奎宁酸类化合物活性好.构效关系研究表明,该类化合物抗RSV活性受其构型和取代基的影响很大.

    作者:夏超;李满妹;李药兰;吴霞 刊期: 2016年第02期

  • UPLC法测定野菊花中5种抗氧化活性成分的含量

    目的:评价野菊花中绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷和芹菜素5种成分的抗氧化能力,同时建立其UPLC含量测定方法.方法:采用ABTS+法评价5种成分的抗氧化能力;采用UPLC法进行5种成分的含量测定,以ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm ×2.1 mm,1.7 μm)为色谱柱,以乙腈-0.02%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,检测波长360 nm,柱温30℃.结果:5种成分均具有一定清除ABTS+自由基能力,以绿原酸、木犀草苷、木犀草素的清除能力强.绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷和芹菜素的进样量分别在0.0012 ~0.0960 μg、0.00226 ~0.1808 μg、0.00113 ~0.0904 μg、0.00393 ~0.3144 μg和0.00132 ~0.1056μg范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为99.37%、99.25%、99.46%、100.18%和99.70%,RSD均小于2.0%.结论:该方法可以同时测定野菊花中5种抗氧化活性成分的含量,结果准确、快速、重现性好,可以作为野菊花药材的质量控制方法之一.

    作者:夏伯候;周亚敏;谢家驰;李亚梅;许招懂;林丽美;廖端芳 刊期: 2016年第02期

  • 黑龙骨的化学成分

    目的:研究黑龙骨的化学成分.方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱色谱及RP-18柱色谱进行分离纯化,并运用波谱学方法对化合物进行结构鉴定.结果:从黑龙骨根茎中分得了7个化合物,经波谱解析分别鉴定为:汉黄芩素(1)、黄芩素-7-甲醚(2)、香草醛(3)、异香草醛(4)、杠柳苷L(5) 、β-谷甾醇(6)、β-胡萝卜苷(7).结论:其中,化合物1、2为首次从该属植物中分离得到,化合物3~5为首次从该植物中分离得到.

    作者:张嫩玲;刘香;沈祥春;蔡佳仲;胡英杰;邱声祥 刊期: 2016年第02期

  • 抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌AngⅡ含量和TGF-β/Smads信号通路的影响

    目的:观察抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌AngⅡ含量和TGF-β/Smads信号通路的影响.方法:SD雄性大鼠复制糖尿病模型,成模大鼠分为模型组、抵当汤组、水蛭虻虫组、桃仁大黄组、缬沙坦组,另设正常对照组,灌胃生理盐水.给药8周末,放射免疫法测定心肌AngⅡ含量;实时荧光定量PCR法检测心肌TGF~1mRNA表达;Western blot法检测心肌TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达.结果:与模型组比较,抵当汤能显著降低心肌AngⅡ含量,下调心肌组织TGF-β1mRNA及TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达,水蛭虻虫、桃仁大黄的作用均不如全方显著.结论:抵当汤可缓解实验性糖尿病大鼠心肌纤维化病变,其机制可能与降低心肌组织AngⅡ的含量,抑制TGF-β/Smads信号通路有关.

    作者:储全根;张凯;刘新萍;毕华剑;董妍妍;刘德胜 刊期: 2016年第02期

  • 真武汤加减治疗2型糖尿病非增殖期视网膜病变的临床观察

    目的:观察真武汤加减治疗2型糖尿病非增殖期视网膜病变的临床疗效.方法:将98例2型糖尿病非增殖期视网膜病变患者随机分为观察组和对照组各49例,两组均采用常规西药治疗,观察组在此基础上加用真武汤加减治疗.两组均治疗3个月,观察两组患者视力及眼底病变的改善情况及治疗前后血浆内皮素水平.结果:治疗后观察组视力改善显著优于对照组(P<0.05);两组患者治疗后眼底病变均显著改善,且观察组眼底病变改善优于对照组(P<0.05);两组患者治疗后血浆内皮素含量均显著降低,且观察组血浆内皮素水平显著低于对照组(P<0.05);观察组总有效率为94.32%,对照组总有效率为82.76%,观察组疗效显著高于对照组(P<0.05).结论:真武汤加减联合西药治疗2型糖尿病非增殖期视网膜病变疗效优于单纯西药治疗,并能进一步降低血浆内皮素水平,对延缓病变向增殖期发展有重要意义.

    作者:刘瑄;李霞 刊期: 2016年第02期

  • 蓝翠雀花的化学成分研究

    目的:研究蓝翠雀花的化学成分.方法:运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱等色谱方法进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据分析等手段鉴定化合物的结构.结果:从蓝翠雀花95%乙醇提取物中分离纯化得到12个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、山柰酚(2)、槲皮素(3)、异香兰酸(4)、芹菜素(5)、木犀草素(6)、8-甲氧基-5,7,3',4'-四羟基黄酮(7) 、β-胡萝卜苷(8)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(9)、3,5-dihydroxy-4'-methoxyflavone-7-ylO-β-D-glucopyranosyl-(1 →4)-α-L-rhamnopyranoside (10)、芦丁(11)、蔗糖(12).结论:化合物1~12均为首次从该植物中分离得到.

    作者:刘世军;廖志新;唐志书;崔春利;刘红波;梁艳妮;张娱 刊期: 2016年第02期

  • 金仙胶囊的生血作用及其机制研究

    目的:探讨金仙胶囊对环磷酰胺致骨髓抑制小鼠的生血作用及其机制.方法:将小鼠分为金仙胶囊10、20、30 g/kg组及G-CSF阳性对照组、正常对照组、模型组,各组分别给予相应药物,正常对照组与模型组给予等体积溶媒.在给药第8天,除正常对照组外,各组均腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg.末次给药后24h,检测其外周血细胞数量及IL-1α、IL石水平;处死小鼠,取双侧股骨,用流式细胞仪检测骨髓CD34-LSK细胞数,并计算各组CD34-LSK细胞占骨髓细胞的百分率.结果:与正常对照组比较,模型组小鼠外周血WBC、PLT及血清IL-1α显著降低,而IL-6和骨髓造血干细胞CD34-LSK比例显著升高(P<0.01).金仙胶囊20、30 g/kg能显著升高模型小鼠外周血WBC、PLT及血清IL-1α水平,降低IL-6水平和骨髓造血干细胞CD34-LSK比例(P<0.01).结论:金仙胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制具有较好的保护作用,其作用机理可能与调节血液IL-1α及IL-6水平,促进骨髓造血功能有关.

    作者:张莉;程国强;肖英;唐大轩;熊静悦;谭正怀 刊期: 2016年第02期

  • 药用植物杂交育种技术研究进展

    优良品种培育是进一步发展药用植物栽培的重要前提.在分析比较药用植物与普通植物(粮食/经济植物)之间差异的基础上,该文综述了近年来我国药用植物杂交育种技术的研究进展,侧重分析了在亲本选择方法、去雄与套袋技术、花粉活力检测与花粉贮存技术和佳授粉时期确定与人工授粉方法等技术环节的研究现状.与普通植物相比,药用植物的杂交育种研究工作相对滞后,该文总结了药用植物杂交育种中各技术环节出现的主要问题,如亲本资源收集不足、去雄技术单一、花粉贮存条件大多未知和佳授粉时期不确定等.在此基础上,该文还讨论了下一步药用植物杂交育种研究的工作方向和重点.

    作者:孙莹莹;罗睿;杜禹珊;朱燕燕 刊期: 2016年第02期

  • 基于MaxEnt和GIS的陕西省山茱萸气候适宜性种植区划研究

    目的:预测陕西省山茱萸适宜种植区,实现山茱萸的种植区划.方法:利用28份山茱萸实地调查及标本点的地理信息,应用大熵模型(MaxEnt)加载分别在世界气象数据库、土壤数据库下载的27个气候变量和6个环境变量,采用GIS预测陕西省境内山茱萸气候适宜性分布概况.结果:MaxEnt运行AUC值高达0.98,表明模型具有很高的可信度.结果发现,山茱萸适宜分布于3月低气温在-3.0~9.8℃,年平均气温在6.7 ~17.6o℃,3月平均降水量在7~185 mm,年平均降水量在558~1 817 mm,海拔为98~1 620 m左右的地区.依据上述适宜分布结果和气候类型,可将陕西省山茱萸适宜分布区(总适宜面积4.5万km2)划分为4个种植亚区,分别为Ⅰ-1秦岭北坡山地湿润气候种植区(0.59万km2),Ⅰ-2商洛丹江河谷盆地半湿润气候种植区(1.17万km2),Ⅱ-1汉中-安康汉江河谷盆地湿润气候区(1.51万km2),Ⅱ-2米仓山-大巴山地湿润气候种植区(0.84万km2).建议在Ⅱ-1、Ⅰ-2和Ⅰ-1中原有山茱萸种植集中区,通过合理规划和建立山茱萸规范化种植基地,推广高产、优质和抗病性强的优良品种,并研发机械采摘工具降低人工成本等,从而推进实施中药现代化的进程.

    作者:白成科;吴永梅;曹博;徐军 刊期: 2016年第02期

  • 五苓方汤、散剂低极性化学成分差异研究

    目的:研究五苓方汤剂和散剂低极性成分的差异,为五苓方临床用药的剂型选择提供科学依据.方法:采用HPLC法,Venusil MP-C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;检测波长203 nm;柱温25℃;流速1.0 mL/min;进样量5μL.结果:分别建立了五苓方散剂、汤剂、药渣和5种活性成分的HPLC图谱,共标记了17个色谱峰,其中,2、4、5、8、9、10、12、14、16、17号峰为汤剂完全缺失成分峰,并结合对照品对其中2个峰进行归属,分别为桂皮醛和白术内酯Ⅰ;另外,1、3、6、7、11、13、15号峰为汤剂的部分缺失成分,并结合对照品对其中3个峰进行归属,分别为白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、23-乙酰泽泻醇B.结论:五苓方汤剂和散剂中的低极性化学成分差异显著,汤剂中低极性成分缺失严重.

    作者:孙彩霞;王建农;韩林 刊期: 2016年第02期

  • 川芎内生放线菌的分离及根腐病拮抗菌株的筛选

    目的:了解川芎内生放线菌群结构,筛选拮抗川芎根腐病原菌的放线菌资源.方法:采用组织块法、匀浆法、划线平板法等对川芎根茎中的放线菌进行分离和纯化,平板对峙法及抑菌圈法评价各菌株抑菌活性,显微观察法结合DNA测序进行菌种物种鉴别.结果:共获得83株川芎内生放线菌,分属13个类群;其中链霉菌属灰红紫类群中的深海链霉菌Streptomyces scopuliridis(KF600747.1)、灰锈赤链霉菌Streptomyces griseorubiginosus (AB706352.1)、团孢链霉菌Streptomyces agglomeratus(LC055413.1)能同时抑制4种川芎根腐病原菌.结论:内生放线菌群中的链霉菌属灰红紫类群是抑制川芎根腐病原菌的重要生防菌,在川芎药材生产中有着重要的应用前景.

    作者:何冬梅;林婵春;严铸云;李佳穗;王海;刘薇;马云桐 刊期: 2016年第02期

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