李雪燕；徐霞
目的：观察糖尿病（ DM）溃疡中Wnt／β－catenin信号通路表达的变化，探讨该信号通路在糖尿病难愈性溃疡中的作用。方法：雌性Wistar大鼠采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素液腹腔注射法制备糖尿病模型。分别取正常对照组与DM组制作溃疡模型。观察创面造模后第3天、第7天和第14天对照组及DM组创面愈合情况的变化，并采用HE染色法检测创面组织形态结构的变化，采用ELISA法和RT－PCR法检测创面组织中β－catenin、GSK－3β和Rspo－3蛋白及mRNA的变化。结果： DM组大鼠的创面愈合率明显低于对照组（ P＜0．05），且与对照组相比，其创面组织中含有较少的炎性细胞、纤维母细胞及新生毛细血管。 DM组大鼠创面组织中β－catenin和Rspo－3蛋白及mRNA的表达水平均低于对照组，GSK－3β蛋白及mRNA的表达水平均高于对照组（ P＜0．05）。结论：Wnt／β－catenin通路的下调有可能导致了糖尿病溃疡的难愈，而该通路的下调可能源自于Rspo－3蛋白表达的下降。
作者：赵亚男；刘明；张玥；王彬；张玉冬；苏海文；任晓兰；郝清智 刊期： 2015年第11期
目的：探讨胰高血糖素样肽1（GLP－1）受体激动剂艾塞那肽（exendin－4）对肥胖小鼠脂肪组织的作用及机制。方法：8周龄C57 BL／6 J小鼠高脂喂养12周后随机分为艾塞那肽组和生理盐水对照组，另设正常饮食组。取附睾旁脂肪检测sirtuin 1（SIRT1）、脂肪甘油三酯脂酶（ATGL）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）及脂联素mRNA的表达。 Exendin－4或联合SIRT1激动剂／抑制剂处理3T3－L1脂肪细胞24 h；小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）诱导成脂肪细胞后exendin－4干预24 h；检测SIRT1、ATGL和激素敏感性脂酶（ HSL）的蛋白表达水平。结果：与生理盐水对照组相比，艾塞那肽组小鼠附睾旁脂肪量、空腹血糖及血甘油三酯水平降低（均P＜0．05），体重减轻，血TNF－α水平降低。艾塞那肽干预后，肥胖小鼠脂肪组织SIRT1、ATGL和脂联素 mRNA表达明显上调，TNF－αmRNA表达明显下调（P＜0．05）。 Exendin－4剂量依赖性促进3T3－L1脂肪细胞SIRT1、ATGL和HSL脂解相关蛋白的表达。联合SIRT1激动剂后，脂滴数量减少，上述脂解相关蛋白的表达上调。联合SIRT1抑制剂后上述作用减弱。敲除SIRT1后MEF脂肪细胞内脂滴增大，数量增多，exendin－4促进脂解的作用消失。结论：艾塞那肽通过激活SIRT1促进肥胖小鼠脂肪组织脂解作用。
作者：林倍思；许海霞；梁华；曾可静；艾鹤英；翁建平；徐芬 刊期： 2015年第11期
目的：探讨Mcl－1信号通路阻断剂在结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型中对Mcl－1表达、巨噬细胞凋亡情况及结核分枝杆菌的影响。方法：小鼠腹腔注射H37 Rv菌悬液，建立感染小鼠模型，针对Mcl－1的信号通路选用JAK／STAT信号通路阻断剂AG490、MAPK信号通路阻断剂PD98059和PI3K信号通路阻断剂LY294002用腹腔注射方式作用于各组感染小鼠模型，分为H37Rv感染组、AG490处理组、PD98059处理组、LY294002处理组和对照组。通过细胞抗酸染色观察结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠腹腔巨噬细胞的动物模型是否建立成功；通过免疫细胞化学检测结核分枝杆菌H37Rv感染巨噬细胞的Mcl－1表达情况，使用流式细胞技术检测各组巨噬细胞的凋亡率，采用结核分枝杆菌菌落计数来判断巨噬细胞凋亡对结核分枝杆菌的清除效果。结果：细胞抗酸染色结果可见感染的巨噬细胞内散在排列的红色短小抗酸结核分枝杆菌。免疫细胞化学结果显示H37Rv感染组、AG490处理组和LY294002处理组中的Mcl－1蛋白为强阳性表达，PD98059处理组中Mcl－1蛋白为弱阳性表达，对照组Mcl－1蛋白为阴性表达。流式细胞术检测发现H37Rv感染组巨噬细胞凋亡率较对照组高，PD98059处理组的凋亡率显著高于各组，差异显著（P＜0．05）。结核分枝杆菌菌落计数结果显示PD98059处理组对H37Rv菌株抑菌作用明显。结论：Mcl－1信号通路阻断剂通过抑制JAK／STAT、MAPK和PI3K信号通路增加结核分枝杆菌H37Rv感染巨噬细胞的凋亡率，抑制结核分枝杆菌生长；其中，MAPK信号通路干扰Mcl－1的作用明显，感染的巨噬细胞凋亡率高，抑菌作用强。
作者：张宇晴；王新敏；王婵；王飞雨；王小芳；赵瑾；吴芳；吴江东；季榕；张万江；章乐 刊期： 2015年第11期
目的：观察失血性休克后肠淋巴液（ PHSML）引流对失血性休克小鼠肾组织血管紧张素转换酶（ ACE）／ACE2平衡的作用。方法：复制小鼠失血性休克模型，随机分为休克组与休克＋引流组，行液体复苏；休克＋引流组液体复苏后，引流肠淋巴液。在液体复苏后6 h，检测肾组织ACE、ACE2、血管紧张素II（Ang II）1型受体（AT1R）、Mas相关G蛋白偶联受体（MasR）的mRNA表达以及Ang II、Ang （1－7）含量。结果：失血性休克提高了肾组织ACE mRNA、AT1R mRNA和Ang II水平，降低了ACE2 mRNA、MasR mRNA 和Ang（1－7）水平，PHSML引流抑制了失血性休克对ACE2和AT1R mRNA表达的影响；同时PHSML引流也降低了失血性休克增加ACE／ACE2、Ang II／Ang（1－7）和AT1R／MasR比值的作用。结论：PHSML引流恢复了失血性休克后肾组织的ACE／ACE2平衡，有利于减轻失血性休克所致的肾损伤。
作者：刘俊芬；蒋丽娜；张立民；刘桂青；赵自刚；刘圣君；牛春雨 刊期： 2015年第11期
目的：利用细胞实验探讨不同高糖浓度培养H9c2细胞是否引起心肌细胞肥大，探讨Ca2＋－CaN－NFAT3信号通路是否参与高糖引起H9c2心肌细胞肥厚过程。方法：体外培养H9c2大鼠心肌细胞48 h，分为5 mmol／L糖对照组、25mmol／L糖培养组、50 mmol／L糖培养组、25mmol／L糖培养加L型钙通道阻滞剂苯磺酸氨氯地平[商品名络活喜（Norvasc）]组和50 mmol／L糖培养加Norvasc组5组。观察H9c2细胞形态并测量细胞表面积大小；荧光分光光度法检测心肌细胞内钙离子浓度[ Ca2＋] i；ELISA测细胞内CaN浓度；real－time PCR法及Western blot检测 CaNAβ、NFAT3和β－MHC的mRNA及蛋白表达。结果：细胞大小、单细胞平均[ Ca2＋] i 测定荧光值及细胞内CaN浓度在随糖浓度升高呈阶梯上升，50 mmol／L时达到高点。加入Norvasc后细胞大小较相同条件不加Norvasc者降低。 CaNAβ、NFAT3和β－MHC的mRNA及蛋白表达随糖浓度升高逐步升高，50 mmol／L时达高。加入Norvasc后CaNAβ、NFAT3和β－MHC的mRNA及蛋白表达均较未加Narvasc组明显降低。结论：高糖通过激活Ca2＋－CaN－NFAT3信号通路引起H9c2心肌细胞肥大。
作者：徐小红；阮骆阳；田小华；潘凤娟；杨彩兰；柳国胜 刊期： 2015年第11期
目的：探讨米诺环素后处理能否通过抑制多腺苷二磷酸核糖聚合酶1（ PARP－1）过度活化减轻大鼠心肌缺血／再灌注（ I／R）损伤。方法：结扎大鼠冠状动脉左前降支45 min，再灌注2 h，建立心肌I／R模型。将90只雄性Wistar大鼠随机分为假手术（ sham）组， I／R组，低、高剂量米诺环素组及PARP抑制剂3－氨基苯甲酰胺（3－AB）组。氯化三苯基四氮唑（TTC）和伊文思蓝双染法检测心肌梗死范围，HE 染色观察心肌组织形态学改变， TUNEL法评估心肌细胞凋亡程度，酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子α（ TNF－α）和白细胞介素1β（ IL－1β）含量，Western blot法检测再灌注心肌及外周血白细胞内PARP－1活化产物多腺苷二磷酸核糖（ PAR）的表达。结果：与sham组比较，心肌、外周血白细胞内PAR表达及血清TNF－α、IL－1β含量明显升高。与I／R组比较，米诺环素低、高剂量及3－AB后处理组均能显著减少梗死范围及心肌细胞凋亡程度，同时明显降低心肌、外周血白细胞内PAR表达及血清TNF－α、IL－1β含量。米诺环素高剂量组与3－AB组比较无显著差异。结论：米诺环素后处理可能通过抑制心肌及外周血白细胞PARP过度活化减轻大鼠心肌I／R损伤。
作者：张利群；陈冬；齐国先 刊期： 2015年第11期
目的：探讨过表达／沉默微小RNA－25（ microRNA－25，miRNA－25）对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖能力的影响及其作用机制。方法：RT－PCR检测各临床样品组织中miRNA－25的表达水平。建立miRNA－25过表达／沉默的TE1细胞株，采用CCK－8法、BrdU实验和流式细胞术检测TE1细胞增殖能力的变化及细胞周期状态；Western blot法和RT－PCR法检测细胞周期调控因子细胞周期蛋白E1（ cyclin E1）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）的蛋白与mRNA表达水平。结果：miRNA－25在食管黏膜组织中具有特异性表达并在TE1细胞中呈高表达。 CCK－8法和BrdU实验结果显示过表达miRNA－25的TE1细胞的增殖能力显著增加（ P＜0．05），而沉默miR－NA－25抑制TE1细胞的增殖；流式细胞术检测结果显示过表达miRNA－25可明显促进TE1细胞从G0／G1期向S期转换，沉默miRNA－25则抑制其转换。同时Western blot和RT－PCR实验结果显示过表达miRNA－25后，cyclin E1和CDK2的蛋白和mRNA表达水平均显著增加（P＜0．05），沉默miRNA－25后则显著减少（P＜0．05）。结论： miRNA－25能够促进人食管鳞状细胞癌细胞株TE1的增殖，其作用机制可能与促进细胞周期转换及上调cyclin E1和CDK2的表达水平有关，提示miRNA－25可作为治疗食管鳞状细胞癌的一个潜在靶点。
作者：张伟；周勇慧；庞一强 刊期： 2015年第11期
目的：观察缝隙连接蛋白43（ Cx43）是否通过与L型钙通道共定位，调控L型钙电流，参与房颤（ AF）的发病机制。方法：使用蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测AF和窦性心律患者心房组织中Cx43的蛋白和mRNA表达差异；用RNA干扰技术沉默心房肌细胞的Cx43表达，实时荧光定量PCR和全细胞膜片钳实验观察对L型钙通道mRNA表达和L型钙电流的影响；免疫共沉淀和激光共聚焦显微成像观察心房肌细胞中Cx43与L型钙通道是否存在共定位。结果：AF患者心房组织中的Cx43表达明显低于窦性心律患者；干扰Cx43表达可明显抑制L型钙电流和L型钙通道α1c亚基的mRNA表达；且心房肌细胞中Cx43与L型钙通道存在共定位。结论：心房肌细胞中的Cx43可通过与L型钙通道形成分子复合物，调控L型钙电流，参与心房肌细胞的电重塑。
作者：饶芳；薛玉梅；邓春玉；余细勇；肖定璋；陈少贤；林秋雄；杨慧；邝素娟；刘晓颖；朱杰宁；吴书林 刊期： 2015年第11期
作者： 刊期： 2015年第11期
目的：探讨脂联素是否通过影响脂肪组织主要组织相容性复合物Ⅱ类（ MHCⅡ）的表达调节糖脂代谢。方法：脂联素基因敲除小鼠（ KO）和C57BL／6小鼠（ WT）分别给予高脂饲料或普通饲料，24周后，测量小鼠体重、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、稳态胰岛素评价指数（HOMA－IR）、血清甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（ TC）、血清低密度脂蛋白胆固醇（ LDL－C）和血清高密度脂蛋白胆固醇（ HDL－C）；行肝脏组织病理形态学评价；检测脂肪组织MHCⅡ反式激活因子（CIITA）、小鼠MHCⅡ抗原Eβ（H2－Eb1）、MHCⅡ恒定链（CD74） mRNA及MHCⅡ相关蛋白质表达水平。用siRNA沉默3T3－L1脂肪细胞中MHCⅡ的表达及用过表达载体升高3T3－L1脂肪细胞中的脂联素和（或） MHCⅡ的表达，检测脂联素对MHC Ⅱ蛋白水平的影响。结果：高脂饲料或普通饲料喂养的KO小鼠体重、FBG、FINS、HOMA－IR、TC、TG、LDL－C、肝脂肪变性、脂肪组织中CIITA、H2－Eb1、CD74 mRNA和MHCⅡ蛋白表达水平均高于WT小鼠。在脂肪细胞中，抑制脂联素能够在一定程度上逆转siRNA干扰所引起的MHCⅡ表达降低，过表达脂联素后脂肪细胞中MHCⅡ的表达降低。结论：脂联素可以通过抑制脂肪组织中MHCⅡ的表达改善糖脂代谢。
作者：汤爱莲；李灿；邹楠；张霞 刊期： 2015年第11期
目的：探讨周围神经损伤时，微小RNA－21（microRNA－21，miR－21）与雪旺细胞（SC）凋亡的关系及相关分子机制。方法：采用实时荧光定量PCR（ real－time PCR）检测动物模型中miR－21以及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10，PTEN）的表达情况；通过将miR－21类似物（miR－21－mimic）、miR－21抑制物（miR－21－inhibitor）和阴性对照miRNA（negative control miRNA， NC－miRNA）转染入RSC96细胞中，构建出过表达miR－21的雪旺细胞株（ MI－SC）、抑制miR－21表达的雪旺细胞株（ IN－SC）及表达对照miRNA的雪旺细胞株（ NC－SC）；采用流式细胞仪检测3组细胞的凋亡情况； real－time PCR检测3组细胞中miR－21以及PTEN的表达情况；Western blot检测3组细胞中PTEN及凋亡相关蛋白激活型caspase－3（ cleaved caspase－3）的表达情况。结果：神经损伤组miR－21的表达量与对照组相比明显升高，神经损伤组PTEN mRNA的表达水平与对照组相比明显降低；与NC－SC相比，上调miR－21组细胞的凋亡比例减少，PTEN mRNA及蛋白的表达水平降低，cleaved caspase－3的表达水平降低，下调miR－21组细胞的凋亡比例增加，PTEN mRNA及蛋白的表达水平升高，cleaved caspase－3的表达水平升高（P＜0．05）。结论： miR－21可能通过下调PTEN的表达抑制雪旺细胞的凋亡，从而可能在周围神经的损伤修复中发挥作用。
作者：陆新华；王辉；宁昕杰；罗骏成；梁家骥 刊期： 2015年第11期
作者： 刊期： 2015年第11期
作者： 刊期： 2015年第11期
目的：探讨抑制白血病K562细胞叉头框蛋白M1（FoxM1）是否增强细胞对高三尖杉酯碱（HHT）的敏感性。方法：HHT以不同浓度（0、0．015、0．030和0．045μmol／L）和低起效浓度不同时间（0．015μmol／L，0、24、48和72 h）作用于K562细胞，real－time PCR和Western blot检测FoxM1 mRNA和蛋白表达；以0．015μmol／L HHT作用K562细胞后转染FoxM1 siRNA，观察沉默K562细胞FoxM1后细胞对HHT的敏感性、细胞增殖和凋亡效应以及FoxM1相关靶分子c－Myc和Sp1表达状况。结果：随着HHT浓度增加和时间延长FoxM1表达逐渐降低，说明HHT抑制K562细胞FoxM1表达；HHT处理K562细胞后转染FoxM1 siRNA，细胞生长和克隆形成显著下降，细胞凋亡增加，因此抑制FoxM1可增加K562细胞对HHT的敏感性；FoxM1 siRNA组c－Myc和Sp1表达显著降低，表明FoxM1可正性调控c－Myc和Sp1表达。结论：HHT可以抑制白血病K562细胞FoxM1表达，干扰FoxM1可增强细胞对HHT的敏感性。
作者：陈谨；周敏然；孙婷；秦雪梅；陈忠敏；陈春燕；于媛 刊期： 2015年第11期
目的：研究缺氧对钠氢交换体1（NHE1）表达、细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）和钙蛋白酶（calpain）活性的影响，探讨NHE1抑制剂阿米洛利（ amiloride ）对 ABCA1降解的影响以及与calpain 相关的机制。方法：RAW264．7细胞缺氧0、12、24和48 h。 MTT法检测细胞活力，real－time PCR及Western blot检测NHE1的表达。流式细胞术检测[ Ca2＋] i ，荧光素法检测细胞内calpain活性。进而，经缺氧24 h处理的细胞，cycloheximide干预条件下，NHE1抑制剂amiloride处理6 h及12 h，检测ABCA1蛋白含量。后，给予calpain抑制剂ALLN及细胞内钙螯合剂BAPTA共孵育12 h，检测ABCA1含量及calpain活性。结果：缺氧呈时间依赖方式抑制细胞增殖。缺氧促进NHE1表达上调，增加[ Ca2＋] i 及calpain活性。缺氧加速ABCA1蛋白降解，而amiloride减缓ABCA1蛋白降解。ALLN及BAPTA升高ABCA1蛋白含量，降低calpain活性。结论：Amiloride延缓calpain介导的ABCA1降解，提示缺氧诱导NHE1表达可能至少部分参与ABCA1蛋白降解。
作者：莫显刚；张莉；张洛超；王龙；向凝；杨涓；宋翔 刊期： 2015年第11期
目的：探讨Notch1对人胶质瘤U251细胞干性和药物敏感性的影响。方法：用高表达Notch1胞内段（Notch1 intracellular domain， NICD1）和Notch1－shRNA慢病毒表达载体感染体外培养的人胶质瘤U251细胞， Western blot和免疫荧光染色法鉴定高表达NICD和Notch1沉默细胞。通过流式细胞术检测分析CD133＋细胞的比例、免疫荧光染色法检测nestin和GFAP的表达情况、检测肿瘤细胞球的形成率和SCID小鼠体内种植致瘤情况，分析Notch1对细胞干性的调节。并采用MTT法检测各组细胞对化疗药物替尼泊苷（VM－26）和卡莫司汀（BCNU）的敏感性。结果：NICD表达增加的瘤细胞干性表型增强，如CD133＋细胞的比例增加、nestin表达增强而GFAP表达减弱、肿瘤细胞球的形成率和SCID小鼠种植致瘤率增加，并伴有对VM－26和BCNU的敏感性降低。而Notch1基因表达下调的瘤细胞干性表型受到明显抑制，而对VM－26和BCNU的敏感性增高。结论：Notch1高表达可增加人胶质瘤U251细胞的干性，减弱U251细胞对化疗药物的敏感性。
作者：张丽柯；咸娜；林玲；龚雨晴；叶志强；郑志竑 刊期： 2015年第11期
目的：探讨激活Nodal信号通路在小鼠胚胎干细胞（ embryonic stem cells，ESC）向定型内胚层（ de－finitive endoderm，DE）分化中的作用，寻找小鼠ESC向DE分化的佳培养体系。方法：根据培养基的不同，实验分为3组：胚胎干细胞组（基础培养＋LIF）、自然分化组（基础培养基）和activin A组（基础培养基＋50μg／L activin A）。细胞培养1～7 d，收集不同作用时点（1、3、5、7 d）的细胞及细胞爬片。用流式细胞术检测CXCR4阳性细胞的比例；免疫细胞化学法检测CXCR4蛋白的表达；Western blot检测OCT4及CXCR4蛋白的表达。结果：流式细胞术检测结果提示，随着培养时间的延长，CXCR4阳性细胞的比例，胚胎干细胞组在1～7 d无明显变化，自然分化组和activin A组逐渐增高，第5天达高峰（P＜0．05），其中activin A组高（P＜0．05）。细胞免疫组化结果显示CX－CR4阳性细胞呈棕褐色或棕黄色。 Western blot的结果提示，随着培养时间的延长，胚胎干细胞组OCT4和CXCR4蛋白表达无明显变化；自然分化组和activin A组的CXCR4蛋白的表达逐步增高，OCT4蛋白的表达逐步下降，第5天达高峰（P＜0．05），其中activin A组的表达明显（P＜0．05）。结论：在小鼠ESC分化过程中，在诱导培养的第5天， DE的比例高。激活Nodal信号通路可以促进小鼠ESC向具有CXCR4分子标志的DE分化，有利于获取更多的DE细胞。
作者：钟娃；夏忠胜；欧阳慧；袁宇红；于涛；单体栋；陈其奎 刊期： 2015年第11期
骨髓间充质干细胞（ bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs）具有年龄依赖性的向成骨细胞分化能力减弱同时向脂肪细胞分化能力增强的特性。这个特性在提高脂肪细胞数量的同时降低了成骨细胞数量，有助于解释与年龄相关的骨质流失。Li等的研究发现，与年幼的小鼠及人类相比，随着年龄的增长，BMSCs中微小RNA－188（ microRNA－188， miR－188）的水平显着升高。与对照组小鼠相比，缺乏miR－188的小鼠明显减少了年龄相关性骨质流失及骨髓脂肪堆积。相反，相对于野生型小鼠，过表达miR－188的转基因小鼠则大幅增加了年龄相关性骨质流失和骨髓脂肪堆积。此外，使用适体递送系统在小鼠BMSCs中特异性过表达miR－188能降低骨形成和增加骨髓脂肪堆积。他们还发现组蛋白脱乙酰酶9（histone deacetylase 9， HDAC9）和雷帕霉素不敏感的mTOR伴侣（ rapamycin－insensitive companion of mTOR， RICTOR）是miR－188的直接作用靶点。值得注意的是，通过骨髓内注射miR－188拮抗剂（aptamer－antagomiR－188）而特异性抑制BMSCs的miR－188，可增加老年小鼠骨形成，减少骨髓脂肪堆积。
作者：黄翠芹 刊期： 2015年第11期
目的：探讨PI3K／Akt和JAK2／STAT3信号转导通路在二氧化硫（SO2）抗肢体缺血再灌注（I／R）致急性肺损伤中的作用。方法：应用双大腿根部绑扎止血带复制大鼠双后肢缺血再灌注肺损伤模型。在再灌注前20 min腹腔注射Na2 SO3／NaHSO3；在再灌注前1 h静脉注射Stattic或LY294002。应用TUNEL、ELISA、Western blot等方法检测细胞凋亡、细胞因子表达及相关信号通路蛋白表达的情况。结果：与对照组相比， I／R组的MDA及MPO含量、肺系数、细胞凋亡指数、细胞因子表达以及p－STAT3、p－Akt蛋白的水平均显著增高；当应用Na2 SO3／NaHSO3后，上述反映肺损伤的各项指标均下降。 Western blot检测结果显示I／R后，肺组织中p－STAT3和p－Akt蛋白的水平均明显增加。而应用Na2 SO3／NaHSO3后， p－Akt蛋白的水平继续增加，但 p－STAT3蛋白的水平却减少（P＜0．05）。结论： JAK2／STAT3和PI3K／Akt 信号通路都参与了SO2抗肢体缺血再灌注致急性肺损伤的作用。JAK2／STAT3通路的活化，能够使I／R损伤加重；相反，PI3K／Akt信号通路的活化，可以使I／R损伤减弱。此外， JAK2／STAT3和PI3K／Akt信号通路之间存在交互作用。
作者：赵彦瑞；刘洋；王东；单磊；周君琳 刊期： 2015年第11期
目的：探讨骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9，BMP9）对人肺鳞状细胞癌细胞NCI－H520迁移和侵袭的影响及其机制。方法：采用RT－PCR和Western blot法分别检测NCI－H520细胞和正常人支气管上皮（ HBE）细胞中BMP9的mRNA和蛋白表达水平；用AdBMP9感染NCI－H520细胞，RT－PCR和Western blot法验证BMP9的变化；应用划痕愈合实验检测各组细胞的迁移能力， Transwell小室检测迁移和侵袭能力，并用RT－PCR和Western blot法检测迁移相关因子基质金属蛋白酶2（ MMP2）的mRNA和蛋白水平。 Western blot法检测BMP－Smad经典通路中Smad1／5的磷酸化水平（ p－Smad1／5）。用BMP特异性拮抗剂AdNoggin与AdBMP9共处理NCI－H520细胞，检测p－Smad1／5及细胞迁移能力的变化。结果：BMP9在NCI－H520细胞中的mRNA和蛋白水平均比在HBE细胞中低；AdBMP9感染的NCI－H520细胞中BMP9的mRNA和蛋白水平均明显升高，细胞迁移和侵袭能力均明显下降，MMP2的mRNA和蛋白水平下降，且p－Smad1／5的表达水平明显上调。在NCI－H520细胞中，Noggin能有效逆转BMP9导致的p－Smad1／5升高和细胞迁移抑制能力。结论：外源性BMP9转入肺鳞癌细胞NCI－H520可明显抑制其迁移侵袭的能力，该抑制作用可能与BMP－Smad信号通路的激活有关。
作者：王静；邓芳；李亚；范梦恬；郭杨柳；施琼 刊期： 2015年第11期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
