徐小红；阮骆阳；田小华；潘凤娟；杨彩兰；柳国胜
目的：探讨p21活化激酶4（ PAK4）在人非小细胞肺癌细胞系及人非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用Western blot及实时荧光定量PCR检测人支气管上皮（ HBE ）细胞、非小细胞肺癌细胞（ A549、NCI－H520、NCI－H460和NCI－H596细胞）、20例新鲜非小细胞肺癌组织及相应的癌旁组织中PAK4的表达情况；采用免疫组化检测210例非小细胞肺癌组织PAK4的表达情况；采用Kaplan－Meier法评估非小细胞肺癌患者术后5年生存率；用Cox比例风险模型分析PAK4对患者预后的影响。结果：非小细胞肺癌细胞（ A549、NCI－H520、NCI－H460和NCI－H596细胞） PAK4蛋白及mRNA表达均显著高于HBE细胞（ P＜0．05）；20例非小细胞肺癌组织中PAK4蛋白及mRNA表达高于癌旁组织PAK4蛋白及mRNA表达（ P＜0．05）；10例转移性非小细胞肺癌组织PAK4 mRNA表达显著高于10例原发性非小细胞肺癌组织（ P＜0．05）；免疫组化染色结果示210例非小细胞肺癌PAK4评分显著高于对应的癌旁组织。临床资料分析显示PAK4蛋白表达与非小细胞肺癌的分化程度、淋巴结转移、远处转移及临床分期有关（P＜0．05）；PAK4高表达组患者5年生存率显著低于PAK4蛋白低表达组患者（log－rank检验，P＜0．05），PAK4蛋白表达是非小细胞肺癌患者的独立预后因素。结论： PAK4蛋白高表达是非小细胞肺癌患者死亡的独立危险因素。
作者：李冬霞；张慧；蔡松旺 刊期： 2015年第11期
作者： 刊期： 2015年第11期
目的：探讨骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9，BMP9）对人肺鳞状细胞癌细胞NCI－H520迁移和侵袭的影响及其机制。方法：采用RT－PCR和Western blot法分别检测NCI－H520细胞和正常人支气管上皮（ HBE）细胞中BMP9的mRNA和蛋白表达水平；用AdBMP9感染NCI－H520细胞，RT－PCR和Western blot法验证BMP9的变化；应用划痕愈合实验检测各组细胞的迁移能力， Transwell小室检测迁移和侵袭能力，并用RT－PCR和Western blot法检测迁移相关因子基质金属蛋白酶2（ MMP2）的mRNA和蛋白水平。 Western blot法检测BMP－Smad经典通路中Smad1／5的磷酸化水平（ p－Smad1／5）。用BMP特异性拮抗剂AdNoggin与AdBMP9共处理NCI－H520细胞，检测p－Smad1／5及细胞迁移能力的变化。结果：BMP9在NCI－H520细胞中的mRNA和蛋白水平均比在HBE细胞中低；AdBMP9感染的NCI－H520细胞中BMP9的mRNA和蛋白水平均明显升高，细胞迁移和侵袭能力均明显下降，MMP2的mRNA和蛋白水平下降，且p－Smad1／5的表达水平明显上调。在NCI－H520细胞中，Noggin能有效逆转BMP9导致的p－Smad1／5升高和细胞迁移抑制能力。结论：外源性BMP9转入肺鳞癌细胞NCI－H520可明显抑制其迁移侵袭的能力，该抑制作用可能与BMP－Smad信号通路的激活有关。
作者：王静；邓芳；李亚；范梦恬；郭杨柳；施琼 刊期： 2015年第11期
目的：观察缝隙连接蛋白43（ Cx43）是否通过与L型钙通道共定位，调控L型钙电流，参与房颤（ AF）的发病机制。方法：使用蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测AF和窦性心律患者心房组织中Cx43的蛋白和mRNA表达差异；用RNA干扰技术沉默心房肌细胞的Cx43表达，实时荧光定量PCR和全细胞膜片钳实验观察对L型钙通道mRNA表达和L型钙电流的影响；免疫共沉淀和激光共聚焦显微成像观察心房肌细胞中Cx43与L型钙通道是否存在共定位。结果：AF患者心房组织中的Cx43表达明显低于窦性心律患者；干扰Cx43表达可明显抑制L型钙电流和L型钙通道α1c亚基的mRNA表达；且心房肌细胞中Cx43与L型钙通道存在共定位。结论：心房肌细胞中的Cx43可通过与L型钙通道形成分子复合物，调控L型钙电流，参与心房肌细胞的电重塑。
作者：饶芳；薛玉梅；邓春玉；余细勇；肖定璋；陈少贤；林秋雄；杨慧；邝素娟；刘晓颖；朱杰宁；吴书林 刊期： 2015年第11期
目的：观察人羊膜上皮细胞（ hAECs）对阿尔茨海默病（ AD）样病变大鼠模型的治疗效应。方法：采用胰蛋白酶消化法分离hAECs，流式细胞术分析表型。48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、培养基组和hAECs移植组，每组12只。采用双侧脑室注入脂多糖（ LPS）复制AD样病变大鼠模型。 AD样病变大鼠海马区移植5×105个hAECs。细胞移植后2周，Morris水迷宫试验观察行为学变化，HE和硫磺素S染色观察海马病理变化，免疫组化染色检测β－淀粉样蛋白42（Aβ42）、Tau蛋白和乙酰胆碱（ACh）的变化，流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的变化，流式微球阵列捕获技术（ cytometric bead array，CBA）检测血清细胞因子含量，免疫荧光染色检测海马区人细胞核抗原阳性细胞及其神经元特异性核蛋白（ NeuN ）的表达。结果：与模型组和培养基组比较， hAECs移植组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P＜0．01），跨域平台次数明显增加（P＜0．05）；海马神经元病损减轻，Aβ沉积减轻（P＜0．05），磷酸化Tau蛋白水平下降（P＜0．05），ACh增加（P＜0．05）；外周血Th1和Th17细胞百分比下降（P＜0．05），而Th2和Treg细胞升高（P＜0．05）；IL－2和IFN－γ水平下调（P＜0．05），而IL－4上调（P＜0．05）；移植区可见hAECs，并表达NeuN。结论：hAECs可明显改善AD样病变模型大鼠空间辨别性学习记忆能力，减轻海马病理损伤，其免疫调节效应可能发挥重要作用。
作者：董世桃；方宁；胡龙淼；陈代雄；赵春华 刊期： 2015年第11期
目的：构建重组人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（ tumor necrosis factor－related apoptosis－indu－cing ligand，TRAIL）原核表达质粒pET－28a （＋）－TRAIL114－281，优化蛋白表达和纯化条件，制备重组人可溶性TRAIL并鉴定其活性。方法：使用CCK－8初步验证TRAIL是否具有抑制肿瘤细胞生长的生物活性；将制备的TRAIL单独或联合50 nmol／L硼替佐米应用于H460细胞（对TRAIL敏感）和K562细胞（对TRAIL抵抗）24 h，流式细胞术检测细胞凋亡率，比色法检测caspase－8、－9、－3的活化程度，Western blot分析细胞中Bax、Bcl－2和cFLIP蛋白的表达。流式细胞术检测硼替佐米处理H460细胞和K562细胞24 h后DR4和DR5的表达量变化。结果：制备了具有生物学活性且性质稳定的重组人可溶性TRAIL，且成功诱导H460和K562细胞凋亡。不同浓度TRAIL处理H460细胞后其凋亡率随着TRAIL浓度升高而显著升高（P＜0．05），但K562细胞凋亡率并未随着TRAIL浓度明显升高。联合用药组的H460和K562细胞凋亡率均显著高于单独用药组（P＜0．05），凋亡过程中caspase－8、－9、－3均被活化，药物处理组的Bcl－2和cFLIP表达量均比对照组下降，尤其联合用药组表达量下降为显著（ P＜0．05），而Bax表达量无明显变化。硼替佐米处理H460和K562细胞后DR4和DR5表达量均上调（ P＜0．05）。结论：硼替佐米能协同TRAIL启动内源性凋亡途径诱导H460和K562细胞凋亡，其可能机制是通过上调死亡受体DR4和DR5的表达量、下调抗凋亡蛋白Bcl－2和cFLIP的表达量来实现的。
作者：李雪燕；徐霞 刊期： 2015年第11期
目的：探讨心理应激对大鼠实验性牙周炎的影响，观察高压氧（ hyperbaric oxygen， HBO）治疗对心理应激相关牙周炎的疗效。方法：清洁级4周龄雄性Wistar大鼠80只，随机分为4组：（1）正常对照组；（2）牙周炎组：用浸有牙龈卟啉单胞菌株的丝线结扎左侧上颌第2磨牙牙颈部，复制实验性牙周炎模型；（3）单纯应激组；（4）牙周炎＋应激组。于实验后第9周停止应激刺激，对除正常对照组外其它各组大鼠每组选取4只进行HBO治疗。于实验后2、4和8周末分批处死动物，每组处死4只，于实验后10周末处死动物，每组处死8只。采血检测血糖浓度、血浆促肾上腺皮质激素（ ACTH）、皮质类固醇和肾上腺素含量。测量术区的牙周附着情况，制作牙体牙周联合切片，观察牙周的组织学改变。结果：检测应激标记物的变化可见单纯应激组的血糖及血浆ACTH、皮质类固醇和肾上腺素含量在实验后第2、4周明显高于正常对照组和牙周炎组（ P＜0．01），第8周时血糖降至正常水平，但血浆ACTH、皮质类固醇和肾上腺素含量仍高于正常对照组和牙周炎组（ P＜0．05）；牙周炎＋应激组在实验后第2、4和8周血糖及血浆ACTH、皮质类固醇和肾上腺素含量均高于正常对照组和牙周炎组（ P＜0．05）；HBO治疗组牙周炎＋应激组血糖明显低于非治疗组（ P＜0．01），单纯应激组和牙周炎＋应激组血浆ACTH、皮质类固醇和肾上腺素水平显著下降（P＜0．01）。大体观察可见正常对照组及单纯应激组牙周附着位置正常；牙周炎组出现牙龈萎缩，附着丧失明显；牙周炎＋应激组附着丧失明显，根分叉暴露，HBO治疗后，牙龈水肿减轻，牙周袋变浅。单纯应激组与正常对照组在各时点的牙周附着水平的差异不显著（P＞0．05）；牙周炎＋应激组附着丧失程度在各时点均明显高于牙周炎组（P＜0．01）；HBO治疗结束后牙周炎组及牙周炎＋应激组牙周附着丧失程度减轻（P＜0．01）。组织学观察可见牙周炎＋应激组牙周组织破坏程度在各时点均重于牙周炎组；经HBO治疗后，牙周组织炎症程度减轻，炎症细胞浸润减少。结论：心理应激可加重牙周炎进程。 HBO对大鼠实验性牙周炎及心理应激相关牙周炎均有治疗效果。
作者：王瑢；桃子玺；何梁伟；黄世光 刊期： 2015年第11期
长链非编码RNA （ long noncoding RNA or large noncoding RNA， lncRNAs ）是一类转录本长度超过200 nt的功能性RNA，存在于细胞核或胞质中。 ln－cRNAs能调节生命过程中关键基因的表达，从而影响机体正常生理发育、功能维持和异常病理过程，如神经干细胞分化发育、心脏疾病发生、肿瘤形成等［1］。 lncRNAs是继miRNAs之后的又一重要调节性非编码RNA。已有研究表明， lncRNAs能够与染色质修饰蛋白、DNA或miRNAs等核酸形成复合物，在表观遗传、转录和转录后多个层次调控心脏发育基因的表达，其中表观遗传学调控是近几年的研究热点。本文从心脏发育和心脏疾病两方面综述ln－cRNAs在心脏发育稳态中的新研究进展及其表观遗传学调控机制。
作者：杨翔宇；余细勇 刊期： 2015年第11期
目的：应用RNA干扰技术抑制小鼠巨噬细胞RAW264．7细胞P2X7受体（ P2X7 R）基因的表达，建立稳定干扰细胞株，并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法：用脂质体法将P2X7 R shRNA重组质粒转染至RAW264．7细胞，经 G418筛选后获得稳定干扰细胞株。细胞分为野生型（ WT ）组、阴性对照（ NC ）组和干扰（shP2X7R）组。 Real－time PCR法检测细胞中P2X7R mRNA的表达，Western blot检测细胞中P2X7R蛋白的表达；CCK－8方法检测细胞生长活性，5－乙炔基－2’－脱氧尿苷（5－ethynyl－2’－deoxyuridine，EdU）掺入实验检测细胞增殖活性；流式细胞术分析细胞周期的分布和吞噬情况。结果：P2X7 R shRNA能明显抑制RAW264．7细胞的P2X7 R mR－NA和蛋白的表达，抑制率在80％以上。48 h后，shP2X7R组细胞的生长速度明显高于NC组和WT组（P＜0．05），增殖期细胞比例明显升高（P＜0．05），说明下调P2X7R基因能明显促进细胞增殖。 shP2X7R组的细胞周期出现改变，S期和G2／M期的比例明显上升，增殖指数增高（P＜0．05）。 shP2X7R组的细胞吞噬活性明显高于NC组（P＜0．05）。结论：本研究成功构建了稳定干扰P2X7 R基因表达的小鼠巨噬细胞株RAW264．7，shP2X7 R能够明显促进RAW264．7细胞的增殖，改变了细胞的吞噬活性。
作者：苏程程；张译丹；马永强；陈雪芬；向国安；周欣；彭守春；林志春；魏路清；姬文婕 刊期： 2015年第11期
目的：观察失血性休克后肠淋巴液（ PHSML）引流对失血性休克小鼠肾组织血管紧张素转换酶（ ACE）／ACE2平衡的作用。方法：复制小鼠失血性休克模型，随机分为休克组与休克＋引流组，行液体复苏；休克＋引流组液体复苏后，引流肠淋巴液。在液体复苏后6 h，检测肾组织ACE、ACE2、血管紧张素II（Ang II）1型受体（AT1R）、Mas相关G蛋白偶联受体（MasR）的mRNA表达以及Ang II、Ang （1－7）含量。结果：失血性休克提高了肾组织ACE mRNA、AT1R mRNA和Ang II水平，降低了ACE2 mRNA、MasR mRNA 和Ang（1－7）水平，PHSML引流抑制了失血性休克对ACE2和AT1R mRNA表达的影响；同时PHSML引流也降低了失血性休克增加ACE／ACE2、Ang II／Ang（1－7）和AT1R／MasR比值的作用。结论：PHSML引流恢复了失血性休克后肾组织的ACE／ACE2平衡，有利于减轻失血性休克所致的肾损伤。
作者：刘俊芬；蒋丽娜；张立民；刘桂青；赵自刚；刘圣君；牛春雨 刊期： 2015年第11期
目的：探讨抑制白血病K562细胞叉头框蛋白M1（FoxM1）是否增强细胞对高三尖杉酯碱（HHT）的敏感性。方法：HHT以不同浓度（0、0．015、0．030和0．045μmol／L）和低起效浓度不同时间（0．015μmol／L，0、24、48和72 h）作用于K562细胞，real－time PCR和Western blot检测FoxM1 mRNA和蛋白表达；以0．015μmol／L HHT作用K562细胞后转染FoxM1 siRNA，观察沉默K562细胞FoxM1后细胞对HHT的敏感性、细胞增殖和凋亡效应以及FoxM1相关靶分子c－Myc和Sp1表达状况。结果：随着HHT浓度增加和时间延长FoxM1表达逐渐降低，说明HHT抑制K562细胞FoxM1表达；HHT处理K562细胞后转染FoxM1 siRNA，细胞生长和克隆形成显著下降，细胞凋亡增加，因此抑制FoxM1可增加K562细胞对HHT的敏感性；FoxM1 siRNA组c－Myc和Sp1表达显著降低，表明FoxM1可正性调控c－Myc和Sp1表达。结论：HHT可以抑制白血病K562细胞FoxM1表达，干扰FoxM1可增强细胞对HHT的敏感性。
作者：陈谨；周敏然；孙婷；秦雪梅；陈忠敏；陈春燕；于媛 刊期： 2015年第11期
目的：探讨抑癌基因ARHI在急性髓细胞白血病中的表达情况，同时探索其对U937细胞生长的影响。方法：RT－PCR方法检测急性髓细胞白血病细胞株、人胚肾细胞293FT、白血病原代细胞以及健康志愿者血细胞中ARHI mRNA的表达情况。构建高表达ARHI的MSCV－IRES－GFP－ARHI 质粒转染U937细胞，MTT法连续8 d检测细胞活性绘制生长曲线。新鲜培养基重悬U937细胞24 h后，采用流式细胞术检测细胞周期以及细胞凋亡。结果：293 FT细胞、健康志愿者血细胞中均检测到ARHI mRNA表达，而白血病细胞株以及白血病患者原代细胞中未检测到该基因的表达。生长曲线显示高表达ARHI基因的U937（ U937－ARHI）细胞在第6～8天细胞活力低于对照（U937－GFP）组。高表达ARHI的U937细胞G2／M期细胞比例及细胞凋亡率均高于对照组（P＜0．05）。结论：ARHI在急性髓系白血病细胞中的表达减低；高表达ARHI基因能抑制U937细胞生长、阻滞其细胞周期在G2／M期并促进细胞凋亡。
作者：陆英；刘相富；刘玲玲；李芳；覃雪玲；林东军 刊期： 2015年第11期
目的：探讨过表达／沉默微小RNA－25（ microRNA－25，miRNA－25）对人食管鳞状细胞癌细胞株TE1增殖能力的影响及其作用机制。方法：RT－PCR检测各临床样品组织中miRNA－25的表达水平。建立miRNA－25过表达／沉默的TE1细胞株，采用CCK－8法、BrdU实验和流式细胞术检测TE1细胞增殖能力的变化及细胞周期状态；Western blot法和RT－PCR法检测细胞周期调控因子细胞周期蛋白E1（ cyclin E1）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）的蛋白与mRNA表达水平。结果：miRNA－25在食管黏膜组织中具有特异性表达并在TE1细胞中呈高表达。 CCK－8法和BrdU实验结果显示过表达miRNA－25的TE1细胞的增殖能力显著增加（ P＜0．05），而沉默miR－NA－25抑制TE1细胞的增殖；流式细胞术检测结果显示过表达miRNA－25可明显促进TE1细胞从G0／G1期向S期转换，沉默miRNA－25则抑制其转换。同时Western blot和RT－PCR实验结果显示过表达miRNA－25后，cyclin E1和CDK2的蛋白和mRNA表达水平均显著增加（P＜0．05），沉默miRNA－25后则显著减少（P＜0．05）。结论： miRNA－25能够促进人食管鳞状细胞癌细胞株TE1的增殖，其作用机制可能与促进细胞周期转换及上调cyclin E1和CDK2的表达水平有关，提示miRNA－25可作为治疗食管鳞状细胞癌的一个潜在靶点。
作者：张伟；周勇慧；庞一强 刊期： 2015年第11期
目的：研究蛇床子素对转染APP595／596基因的SH－SY5Y细胞的作用，以探讨其可能的作用机制。方法：体外培养SH－SY5Y细胞，并转染APP595／596基因，体外构建研究Aβ致病作用的细胞模型。采用CCK－8法检测细胞存活率；检测LDH评价细胞的损伤程度；流式细胞术检测细胞凋亡；用RT－PCR和Western blot法检测β－分泌酶（又称β位点APP裂解酶1，β－site APP cleaving enzyme 1，BACE 1）的mRNA及蛋白的表达；采用免疫荧光细胞化学和Western blot法检测Aβ的表达。结果：蛇床子素对转染APP595／596基因的SH－SY5Y神经细胞有保护作用，可增加细胞的存活率，降低LDH的释放，抑制细胞的凋亡，减少BACE1的mRNA与蛋白的表达，抑制Aβ的生成。结论：蛇床子素可保护转染APP595／596基因的SH－SY5Y神经细胞，其保护机制可能与减少BACE l的mR－NA与蛋白表达有关。
作者：教亚男；姚璎珈；孔亮；李少恒；陶震宇；闫宇辉；杨静娴 刊期： 2015年第11期
目的：探讨昆明山海棠（Tripterygium hypoglaucum Hutch，THH）对胶原性关节炎（collagen－induced arthritis，CIA）大鼠的干预作用及可能的机制。方法：SD大鼠50只，随机分为正常组和胶原性关节炎模型制作组，用鸡Ⅱ型胶原诱导制作CIA大鼠模型。将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、地塞米松治疗组与THH 200 mg／kg、400 mg／kg干预组。 ELISA法检测CIA大鼠血清和足爪组织中促炎因子IL－12、IL－23和抑炎因子IL－37的含量；HE染色观察各组大鼠足爪组织病理学变化；Western blot法检测足爪组织MMP－13蛋白的表达；荧光标记法检测大鼠足爪组织中MMP－13的活性。结果：较模型组比较， THH 400 mg／kg治疗组大鼠体重下降明显减轻（ P ＜0．01），血清中IL－12和IL－23的水平分别降低了28．31％和41．57％（P＜0．01），足爪组织中IL－12和IL－23的含量分别下降了30．78％和39．46％，而血清和足爪组织中IL－37的水平显著升高了79．43％和75．78％（P＜0．01），足爪皮下组织病理变化明显减轻，足爪组织中MMP－13蛋白表达降低了49．22％（ P＜0．01），且MMP－13活性明显下降。而THH 200 mg／kg治疗组大鼠上述指标无明显改善。结论： THH对CIA大鼠炎症的明显抑制作用可能与其降低促炎因子IL－12和IL－23、增高抑炎因子IL－37含量，抑制炎性细胞浸润及血管增生、下调MMP－13蛋白表达、降低MMP－13活性有关。
作者：母传贤；刘国玲 刊期： 2015年第11期
目的：观察糖尿病（ DM）溃疡中Wnt／β－catenin信号通路表达的变化，探讨该信号通路在糖尿病难愈性溃疡中的作用。方法：雌性Wistar大鼠采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素液腹腔注射法制备糖尿病模型。分别取正常对照组与DM组制作溃疡模型。观察创面造模后第3天、第7天和第14天对照组及DM组创面愈合情况的变化，并采用HE染色法检测创面组织形态结构的变化，采用ELISA法和RT－PCR法检测创面组织中β－catenin、GSK－3β和Rspo－3蛋白及mRNA的变化。结果： DM组大鼠的创面愈合率明显低于对照组（ P＜0．05），且与对照组相比，其创面组织中含有较少的炎性细胞、纤维母细胞及新生毛细血管。 DM组大鼠创面组织中β－catenin和Rspo－3蛋白及mRNA的表达水平均低于对照组，GSK－3β蛋白及mRNA的表达水平均高于对照组（ P＜0．05）。结论：Wnt／β－catenin通路的下调有可能导致了糖尿病溃疡的难愈，而该通路的下调可能源自于Rspo－3蛋白表达的下降。
作者：赵亚男；刘明；张玥；王彬；张玉冬；苏海文；任晓兰；郝清智 刊期： 2015年第11期
目的：探讨Notch1对人胶质瘤U251细胞干性和药物敏感性的影响。方法：用高表达Notch1胞内段（Notch1 intracellular domain， NICD1）和Notch1－shRNA慢病毒表达载体感染体外培养的人胶质瘤U251细胞， Western blot和免疫荧光染色法鉴定高表达NICD和Notch1沉默细胞。通过流式细胞术检测分析CD133＋细胞的比例、免疫荧光染色法检测nestin和GFAP的表达情况、检测肿瘤细胞球的形成率和SCID小鼠体内种植致瘤情况，分析Notch1对细胞干性的调节。并采用MTT法检测各组细胞对化疗药物替尼泊苷（VM－26）和卡莫司汀（BCNU）的敏感性。结果：NICD表达增加的瘤细胞干性表型增强，如CD133＋细胞的比例增加、nestin表达增强而GFAP表达减弱、肿瘤细胞球的形成率和SCID小鼠种植致瘤率增加，并伴有对VM－26和BCNU的敏感性降低。而Notch1基因表达下调的瘤细胞干性表型受到明显抑制，而对VM－26和BCNU的敏感性增高。结论：Notch1高表达可增加人胶质瘤U251细胞的干性，减弱U251细胞对化疗药物的敏感性。
作者：张丽柯；咸娜；林玲；龚雨晴；叶志强；郑志竑 刊期： 2015年第11期
目的：研究甘氨酸受体α1亚基（GlyRα1）在乳鼠心肌细胞中的表达以及脂多糖（LPS）、缺氧／复氧（ H／R）、异丙肾上腺素（ ISO）和高糖（ HG）对其表达的影响。方法：体外培养乳鼠心肌细胞，Western blotting方法检测心肌细胞上GlyRα1的表达；心肌细胞分别用LPS、H／R、ISO以及HG处理24 h，采用CCK－8试剂检测细胞活力， Western blotting方法检测心肌细胞上GlyRα1的表达。结果： Western blotting 方法检测到乳鼠心肌细胞上GlyRα1的表达；LPS（20 mg／L）、ISO（100μmol／L）以及HG（25mmol／L）处理心肌细胞24 h与心肌细胞H／R 3 h对心肌细胞存活率无明显影响；LPS组、H／R 3 h组以及ISO组心肌细胞上GlyRα1表达均高于对照组（ P＜0．01），而HG组心肌细胞上GlyRα1表达低于对照组（P＜0．01）。结论：乳鼠心肌细胞上存在GlyRα1，并且一定浓度的LPS、ISO与一定时间的H／R均可上调乳鼠心肌细胞GlyRα1的表达，而HG可下调乳鼠心肌细胞GlyRα1的表达。
作者：陈楚天；陆大祥；戚仁斌；王华东 刊期： 2015年第11期
目的：观察巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白（ adipophilin）对炎症因子表达的影响，阐明adipophilin促进巨噬细胞炎症因子表达的机制。方法：将已构建成功的adipophilin稳定高、低表达逆转录病毒载体转染入PA317包装细胞，制备adipophilin高和低表达的RAW264．7细胞；收集已转染成功的各组细胞上清液，用ELISA方法检测IL－6、TNF－α、MCP－1等炎症因子在细胞培养液中的浓度。 Western blot检测各组细胞AP－1、p－AP－1、ERK1／2及p－ERK1／2的蛋白水平；用ERK1／2抑制剂PD98059或AP－1抑制剂curcumin孵育细胞，检测各组细胞中以上指标的变化情况。结果：高表达adipophilin的细胞上清液中炎症因子IL－6、MCP－1和TNF－α浓度明显增高，adipophil－in siRNA组细胞中的炎症因子降低；高表达adipophilin的细胞中p－ERK1／2和p－AP－1的蛋白水平增高，adipophilin siRNA组则减少；ERK1／2抑制剂PD98059使AP－1蛋白活性明显下调；给予AP－1抑制剂curcumin后，细胞培养液中的IL－6、MCP－1和TNF－α浓度明显下降。结论：Adipophilin在RAW264．7巨噬细胞中能够促进炎症因子的表达。
作者：袁中华；谭艳美；陶媛；汪江波；郭东铭；王佐；唐朝克；田国平 刊期： 2015年第11期
目的：利用细胞实验探讨不同高糖浓度培养H9c2细胞是否引起心肌细胞肥大，探讨Ca2＋－CaN－NFAT3信号通路是否参与高糖引起H9c2心肌细胞肥厚过程。方法：体外培养H9c2大鼠心肌细胞48 h，分为5 mmol／L糖对照组、25mmol／L糖培养组、50 mmol／L糖培养组、25mmol／L糖培养加L型钙通道阻滞剂苯磺酸氨氯地平[商品名络活喜（Norvasc）]组和50 mmol／L糖培养加Norvasc组5组。观察H9c2细胞形态并测量细胞表面积大小；荧光分光光度法检测心肌细胞内钙离子浓度[ Ca2＋] i；ELISA测细胞内CaN浓度；real－time PCR法及Western blot检测 CaNAβ、NFAT3和β－MHC的mRNA及蛋白表达。结果：细胞大小、单细胞平均[ Ca2＋] i 测定荧光值及细胞内CaN浓度在随糖浓度升高呈阶梯上升，50 mmol／L时达到高点。加入Norvasc后细胞大小较相同条件不加Norvasc者降低。 CaNAβ、NFAT3和β－MHC的mRNA及蛋白表达随糖浓度升高逐步升高，50 mmol／L时达高。加入Norvasc后CaNAβ、NFAT3和β－MHC的mRNA及蛋白表达均较未加Narvasc组明显降低。结论：高糖通过激活Ca2＋－CaN－NFAT3信号通路引起H9c2心肌细胞肥大。
作者：徐小红；阮骆阳；田小华；潘凤娟；杨彩兰；柳国胜 刊期： 2015年第11期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
