学术投稿

5-Aza-CdR调控胃癌细胞系RASSF1A基因表达及对细胞生长的抑制作用

沈文静;戴冬秋;滕玥;刘红波

关键词:胃肿瘤, 5-aza-CdR, 基因, RASSF1A, DNA甲基化
摘要:目的 观察去甲基化制剂5-Aza-CdR对体外培养的胃癌细胞 SGC7901 RASSF1A基因的去甲基化和表达调控及生长抑制作用.方法 5-Aza-CdR处理SGC7901细胞后,应用MTT法、流式细胞术、Annexin V-FITC染色法检测细胞增殖活性、细胞周期分布及细胞凋亡率;应用MSP、RT-PCR及Western印迹法检测RASSF1A基因的甲基化状态、mRNA及蛋白表达.结果 5-Aza-CdR处理后.胃癌细胞SCC7901生长受到抑制(P<0.05),细胞周期呈现G1期阻滞,细胞凋亡率显著增加(P<0.05).RASSF1A基因在SGC7901中呈异常甲基化状态,在mRNA及蛋白水平表达阴性:5-Aza-CdR处理后RASSF1A基因呈去甲基化状态,在mRNA及蛋白水平重新表达.结论 去甲基化制剂5-Aza-CdR调控胃癌细胞SGC7901 RASSF1A基因去甲基化及重新表达,对SGC7901细胞具有生长抑制作用.
中华胃肠外科杂志相关文献
  • 胃间质瘤63 例临床分析

    目的 总结胃间质瘤(胃GIST)的临床病理及免疫组织化学(免疫组化)特征,探讨胃GISTs诊断与治疗的方法及影响其预后的因素.方法 总结1997年1月至2007年5月北京大学第一医院普通外科收治的63 例经手术治疗的胃GISTs患者的临床资料,并进行Flecther侵袭危险性分级和预后分析.结果 B超、CT及内镜超声(EUS)对本组患者的术前诊断准确率分别为72.2%、81.0%和94.3%,χ3=6.065,P<0.05;差异有统计学意义.CD117阳性率88.9%,CD34阳性率95.1%.开腹或腹腔镜行胃部分切除38 例,近端胃大部切除4 例,远端胃大部切除8 例;全胃切除13 例.其中联合胆囊切除3 例,联合胰体尾及脾切除7 例;联合左肝外侧叶切除1例,行D:淋巴结清扫12 例(均无淋巴结转移).全组病例1、3、5年生存率分别为96.4%、84.7%和71.7%.单因素分析显示,侵袭危险性分级和肿瘤大小是影响患者生存的因素(P<0.05);而性别、年龄、核分裂像、免疫组化表达情况、是否联合脏器切除以及是否行淋巴结清扫与预后无关(P0.05).多因素分析显示,侵袭危险性分级是胃GIST的独立预后因素(P=0.041).结论 术前EUS诊断准确率高.建议用Fletcher侵袭危险性分级方法来判断胃GISTs的生物学行为及其预后.

    作者:戎龙;万远廉;年卫东;柳萍;梁进雨 刊期: 2009年第01期

  • 碘油造影在小肠梗阻诊断和治疗中的价值

    目的 研究碘油造影在小肠梗阻诊断和治疗中的运用价值.方法 回顾性分析225 例小肠梗阻患者的临床资料.结果 163 例行碘油造影者(碘油组)和62 例泛影葡胺造影者(泛影葡胺组)预测终是否行手术治疗.两组的灵敏度分别为98.3%和87.5%(P<0.05),特异度分别为97.1%和95.7%(P0.05);24 h的显影率分别为94.5%和85.5%(P<0.05),36 h的显影率分别为80.3%和33.9%(P=0.00).结论 碘油造影对小肠梗阻的诊疗及手术时机选择有指导意义.

    作者:杨文斌;张建文;赵玉国;邹晗;罗一民 刊期: 2009年第01期

  • alphastatin抑制胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成的实验研究

    目的 探讨alphastatin对裸鼠体内新生血管形成和人胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用及机制.方法 裸鼠皮下注射基质胶溶液形成基质胶体,测定alphastatin对基质胶体内新生血管的抑制作用.人胃癌BGC823细胞接种于裸鼠皮下形成移植瘤,分别于裸鼠腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)和不同剂量的alphastatin(100 nmol/L,0.25 mg·kg-1·d-1;1000 nmol/L,2.5 mg·kg-1·d-1),测定各组瘤体大小、体质量并进行病理学分析,测定微血管密度(MVD)计数.分离瘤体内血管内皮细胞,经alphastatin处理后,提取细胞内蛋白,进行细胞鞘氨醇激酶(SPK)活性测定.结果 裸鼠移植瘤实验中,与PBS对照组相比.两个不同剂量alphastatin实验组裸鼠移植瘤的体积和体质量均得到了不同程度的抑制[体积:(1145.96±29.89)μm3,、(612.65±23.45)μm3,比(1771±31.05)μm,P<0.05;瘤体质量:(0.31±0.03)g、(0.12±0.02)g比(0.67±0.02)g,P<0.05].体外实验病理学证实,alphastatin减少了瘤体内MVD的数目,降低了移植瘤体内血管内皮细胞SPK活性.上述作用均呈现一定的量-效关系.结论 alphastatin具有明显抑制人胃癌细胞裸鼠移植瘤血管生成的作用,这种效应与降低血管内皮细胞SPK活性、减少1-磷酸鞘氨醇(S1P)的生成有密切关系.

    作者:李涛;陈凛 刊期: 2009年第01期

  • 飞行质谱技术分析家族性腺瘤性息肉病血清蛋白质谱变化

    目的 研究家族性腺瘤性息肉病(FAP)患者血清蛋白质的变化.建立灵敏度和特异度高的.FAP诊断模型.方法 利用SEIDI-TOF MS技术对9 例FAP术前患者和18 例FAP术后患者血清蛋白质分别进行检测.构建诊断模型.并用同样方法对9 例FAP恶变术前组和12 例FAP恶变术后组进行检测并构建诊断模型.结果 M8514.89蛋白质组成的模型可将2组准确分组.灵敏度和特异度分别为88.89%(8/9)和100%(18/18):同时对9 例家族性腺瘤性息肉病恶变术前组患者和12 例恶变术后组患者血清进行分析.M6332.21蛋白质组成的模型可将2组准确分组,灵敏度和特异度分别为100%(9/9)和91.67%(11/12).结论 SEIDI-TOF MS技术可将家族性腺瘤性息肉病术前、术后及恶变前后正确分组.可应用于家族性腺瘤性息肉病的诊断、鉴别和手术时机的选择.

    作者:魏东;蔡丰波;王秀丽 刊期: 2009年第01期

  • 华东地区胃肠道间质瘤专家讨论会议纪要

    2008年10月25日,华东地区胃肠道间质瘤(GIST)专家讨论会在青岛市举行.本次会议由复旦大学肿瘤医院师英强教授主持,主要探讨GIST临床诊断和治疗的共识以及新进展.

    作者:师英强;严桥;钟捷;于吉人;燕敏;熊建萍 刊期: 2009年第01期

  • 胃癌患者术后化疗前后检测外周血细胞角蛋白20 mRNA的临床意义

    目的 探讨将外周血细胞角蛋白20(CK20 mRNA)动态变化作为临床评估胃癌化疗敏感性分子学指标的可行性.方法 对31例胃癌术后行辅助化疗(FOLFOX4)患者,运用荧光定量RT-PCR检测化疗前后各时点外周血中CK20 mRNA的表达,选取15位健康志愿者为阴性对照组.结果 化疗前1周时检测,有25 例(80.6%)胃癌患者表达CK20 mRNA,6 例(19.4%)始终不表达;其中16 例(51.6%)升高,9例降低(29.0%);CK20 mRNA表达量为2.22±2.12.化疗开始时检测,CK20mRNA表达量已升高至2.96±2.27,两个时间点检测结果比较,t=2.10,P<0.05,差异有统计学意义.化疗1 周期后检测,有24 例(77.4%)胃癌患者表达CK20 mRNA.7 例(22.6%)升高,17 例(54.8%)降低,7 例(22.6%)不表达;表达量为2.05±1.86,与化疗开始时的检测结果比较t=2.50,P<0.05,差异有统计学意义.化疗前后CK20 mRNA表达率比较,差异有统计学意义(x2=6.06,P<0.05).结论 化疗可使外周血中CK20 mRNA表达水平明显降低,动态定量检测化疗前后外周血中CK20 mRNA可能成为评估胃癌术后化疗敏感性的重要指标.

    作者:乔建梁;孟兴凯;张俊晶;齐力;梁越;孙娟 刊期: 2009年第01期

  • 食管癌术前放化疗后临床再分期的评价

    目的 探讨食管癌患者术前放化疗(pre-CRT)后采用影像学和内镜检查进行临床再分期的临床价值.方法 对27例局部晚期食管鳞癌患者,在接受CRT治疗前采用颈部和胸部及腹部CT、食管超声内镜(EUS)、电子气管镜及PET-CT等检查进行临床分期:完成pre-CRT后再次进行分期.临床疗效评价采用RECIST标准,放化疗后3~6周施行手术,将术后病理结果与术前分期进行对照研究.对常规病理学检测为pT0和pN0病例的组织切片,采用免疫组织化学(免疫组化)染色检测原发灶及淋巴结中的微小肿瘤残留灶.结果 全组pre-CRT后,CT对T及N分期的准确率分别为40.9%(9/22)和68.2%(15/22),总的分期准确率为40.9%(9/22);EUS对T及N分期的准确率分别为38.5%(5/13)和69.2%(9/13),总的分期准确率为38.5%(5/13).联合CT和EUS总的分期准确率为46.2%(6/13).CRT结束后临床评价完全缓解(CR)5 例,部分缓解(PR)14 例,无缓解(SD)8 例.5 例临床评价CR者术后病理证实3例CR,1例pT3N1,1例虽经苏木精.伊红染色为pT0N0,但经免疫组化检测发现淋巴结存在微小肿瘤病灶残留.而术后病理结果 pCR的5 例患者中,除3 例术前评价为CR外,另2 例术前临床评价为PR.在15 例N0的病例中.免疫组化检测有2 例3个淋巴结仍可见食管癌细胞分布于其周边.结论 目前常用的临床检查分期手段(食管吞钡、CT、EUS、内镜下病理活检等)和临床疗效评价手段(RECIST标准)对食管癌放化疗后的肿瘤组织反应评价准确率不高.建议CRT后临床评价食管癌CR的患者,仍应接受手术治疗.

    作者:傅剑华;王耿;杨弘;胡祎;文静 刊期: 2009年第01期

  • 胸外科医师在食管疾病诊治中的决策地位

    当今,胸外科医师在食管疾病的诊治中处在一个非常重要的时期,其原因为:(1)食管癌仍是我国发病率较高的恶性肿瘤之一,基于我国的人口基数.仍有数量庞大的食管癌患者.(2)食管疾病涵盖面广,从良性的食管反流性疾病、运动失调到恶性的食管癌[1,2].胃食管反流患者寻求更好治疗的数量亦逐渐升高,因此,需要治疗干预的食管疾病患者总数明显增加[3].

    作者:陈克能 刊期: 2009年第01期

  • 胃癌基因表达谱和蛋白质表达谱的分析研究

    目的 从转录组水平和蛋白质组水平寻找胃癌组织与正常胃组织间的差异表达基因和蛋白.方法 应用含有14592个已知基因及表达序列标签的cDNA表达谱芯片获取基因表达谱信息,50%以上样本中Cy3/Cy5荧光强度比大于或等于2和小于或等于0.5的基因分别为在胃癌中表达上调或下调的基因.采用双向凝胶电泳(2-DE)分离32例经手术切除的胃癌患者的胃癌组织和正常胃组织总蛋白.对差异表达蛋白质点利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行分析.获取肽质量指纹图谱(PMF).同时搜索SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质.结果 与正常组织相比.胃癌组织巾差异表达基因共有387个.其中表达上调的有149个基因,上调超过3倍的有29个基因;表达下调的有238个基因,其中下调超过5倍的有21个基因.在蛋白质水平鉴定了15个差异表达蛋白.在肿瘤组织中高表达的有10个.其余5个在肿瘤组织中低表达.胃癌中过表达的基因与蛋白产物主要与细胞骨架运动、细胞增殖及信号传导有关.表达下调的则主要与细胞免疫防御、毒理代谢有关.结论 从转录组水平和蛋白质组水平对胃癌基因表达谱进行分析.不仅有助于从分子水平全方位理解胃癌的发病机制及生物学特性.同时也有助于进一步发现新的胃癌相关标志物和基因治疗的靶点.

    作者:李炜;刘炳亚;张晓青;杨燕青;李建芳;唐凯玲;张庆华;陈雪华;朱正纲 刊期: 2009年第01期

  • 中华医学会系列杂志从2009年开始标注数字对象惟一标识符

    作者: 刊期: 2009年第01期

  • 应用基因芯片技术筛选结直肠癌及癌旁组织基因的差异表达

    目的 用基因芯片技术筛选结直肠癌及癌旁组织基因差异表达,寻找结直肠癌相关基因并了解其在肿瘤发生及转移过程中的作用.方法 选用有8000条人类基因的cDNA表达谱芯片.以6 例临床手术切除的结直肠癌组织、癌旁3 cm和5 cm肠黏膜组织及正常肠黏膜组织为研究对象.筛杳相关基因的差异表达.结果 与正常对照组相比,在癌组织样品中存在显著性表达差异的基因有769个.其中发生上调表达的有363个,下调表达的有406个;在癌旁3 cm样品中存在显著性表达筹异的基闪有155个,其中发生上调表达的有52个,下调表达的有103个:在癌旁5 cm样品中存在显著性表达差异的基因有230个,其中发生上调表达的有46个,下调表达的有184个.在癌组织与正常对照组间,具有差异表达的基因较多(19.5%,769/3944),而在癌旁3 cm、5 cm两组直肠黏膜组织与正常对照组间,差异表达的基因则较少,占总体基因数量的3.9%~5.8%.差异表达的基因中具有明显功能类型的基因主要包括肿瘤相关基因、细胞增殖与凋亡调控基因、基因转录调控基因及细胞外基质成份及其降解相父的基因.结论 不同来源组织间在生物学性质上具有各自的特性.多种基因参与了结直肠癌的发生与发展.癌旁组织也存在着基因的差异表达.显示其也有恶变倾向.

    作者:韩晓燕;卫洪波;郑宗珩;黄江龙;魏波;胡宝光 刊期: 2009年第01期

  • 保留前锯肌-三切口治疗胸段食管癌

    目前,对于食管癌的手术治疗,国内一些专家提倡采用三切口[1].我院于2006年3月至2008年3月间,对27例胸段食管癌采用右侧开胸,保留前锯肌-三切口,食管胃部分切除,食管胃左劲部吻合术(保留前锯肌-三切口),经临床实践,效果满意.

    作者:侯建彬 刊期: 2009年第01期

  • 组织工程食管

    我国是食管癌的高发地区,全世界一半的食管癌患者在中国.目前食管癌的治疗主要依靠手术切除加食管重建.重建所需的替代组织主要有两大类:一类是用自体其他组织或器官.另一类是人工食管的替代.自体组织如胃、空肠、结肠等是临床应用多的重建方式,然而其手术创伤大,并发症多.死亡率高,从而使学者们积极寻找人工食管的替代材料.这些替代材料多为不可降解高分子材料,其本身组织相容性差,腔内无法完全内皮化,使得其临床应用受限.随着组织工程技术的迅速发展,使体外构建有活性的生物替代材料修复食管缺损成为可能,将为食管缺损的修复提供一条崭新的道路.

    作者:魏人前;杨志明;解慧琪 刊期: 2009年第01期

  • 5-Aza-CdR调控胃癌细胞系RASSF1A基因表达及对细胞生长的抑制作用

    目的 观察去甲基化制剂5-Aza-CdR对体外培养的胃癌细胞 SGC7901 RASSF1A基因的去甲基化和表达调控及生长抑制作用.方法 5-Aza-CdR处理SGC7901细胞后,应用MTT法、流式细胞术、Annexin V-FITC染色法检测细胞增殖活性、细胞周期分布及细胞凋亡率;应用MSP、RT-PCR及Western印迹法检测RASSF1A基因的甲基化状态、mRNA及蛋白表达.结果 5-Aza-CdR处理后.胃癌细胞SCC7901生长受到抑制(P<0.05),细胞周期呈现G1期阻滞,细胞凋亡率显著增加(P<0.05).RASSF1A基因在SGC7901中呈异常甲基化状态,在mRNA及蛋白水平表达阴性:5-Aza-CdR处理后RASSF1A基因呈去甲基化状态,在mRNA及蛋白水平重新表达.结论 去甲基化制剂5-Aza-CdR调控胃癌细胞SGC7901 RASSF1A基因去甲基化及重新表达,对SGC7901细胞具有生长抑制作用.

    作者:沈文静;戴冬秋;滕玥;刘红波 刊期: 2009年第01期

  • 表皮生长因子联合氟尿嘧啶对结直肠癌裸鼠皮下移植瘤的作用

    目的 观察联合应用表皮生长因子(EGF)和氟尿嘧啶(5-Fu)治疗结卣肠癌裸鼠皮下移植瘤的疗效,并分析可能的机制.方法 建立结直肠癌(Caco-2细胞系)裸鼠移植瘤模型.观察应用EGF和5-Fu治疗后的肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.同时观察肿瘤细胞生长情况及EGF对其他器官正常细胞的影响.结果 单用5-Fu组裸鼠的抑瘤率为40.97%:EGF和5-Fu联合治疗组(联合治疗组)明显高于前者达57.05%.苏木精-伊红染色见联合治疗组肿瘤细胞形态模糊.细胞数明显减少.其他脏器组织切片未见异常.EGF组和联合治疗组PCNA指数分别达到(51.60±10.97)%和(48.00±11.66)%.与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合治疗组处于增殖周期的肿瘤细胞增多.结论 联合应用EGF可以提高结直肠癌对5-Fu的敏感性.同时对其他器官无不良反应.其机制町能与EGF诱导静止期细胞增殖有关.

    作者:叶霖;王国斌;陶凯雄 刊期: 2009年第01期

  • 低位直肠癌局部切除术后复发因素分析

    目的 探讨低位直肠癌局部切除术后复发的相关因素.方法 回顾分析1975年4月至2005年4月间收治的97 例早期低位直肠癌行局部切除治疗患者的临床资料.结果 全组Tis、T1和T2期病变者分别为28 例、48 例和21 例;有17 例(17.5%)患者出现复发,其中局部复发13 例,局部复发伴远处转移2 例,局部复发率15.5%;Tis、T1和T2期病变者局部复发率分别为7.1%、12.5%和33.3%;另有2 例远处转移.局部切除术后复发时间为4~173(中位时间27)个月.肿瘤大体类型和T分期为局部切除术后局部复发的相关因素(P<0.05).T2,期病变者局部切除术后行和未行辅助治疗的局部复发率分别为21.4%和57.1%(P=0.127).带蒂肿瘤、无蒂肿瘤和溃疡型肿瘤的局部复发率分别为10.5%、13.7%和3/5.15 例局部复发者经治疗后的5年生存率为59.6%.结论 低位直肠癌局部切除术后T分期和肿瘤的大体类型是局部复发的主要因素.T2期病变局部切除后需行辅助治疗或行根治性切除术.

    作者:梁建伟;王征;周志祥;毕建军;刘骞;赵平 刊期: 2009年第01期

  • 食管癌术前的新辅助治疗

    我国属于食管癌高发国家.提高我国食管癌的治疗水平,探索出有中国特色的治疗模式当务之急.虽然手术切除仍是实现食管癌局部控制的佳治疗手段,但中晚期食管癌单纯手术的不良预后促使医生们探索加入辅助放疗或化疗的治疗方案.目前的研究结果显示,术后化疗或放疗均未能改善食管癌患者的预后,术前放疗亦无足够的证据证明其有效[1,2].近年的研究焦点集中于新辅助治疗,包括术前放化疗(chemoradiotherapy,CRT)和术前化疗.

    作者:傅剑华 刊期: 2009年第01期

  • 复杂性肛瘘并瘘管内结石一例

    患者,女,52岁,因反复肛周流脓10余年于2008年2月22日入院.既有习惯性便秘史.

    作者:汪立鑫;赵刚;徐维华;毕全锋;王传明 刊期: 2009年第01期

  • 食管胃交界腺癌值得分析的几个问题

    自20世纪70年代中期以来,以美国和欧洲为代表的流行病学调查发现,食管腺癌在所有肿瘤中的发病率增长是快的[1].由此引起了国际上广泛的关注.2000年世界卫生组织(WHO)出版的<消化道肿瘤病理与遗传>一书将贲门腺癌称为食管胃交界腺癌(adenocarcinoma of the osophagastric junction,AOJ).本文从国际同行对AOJ的认识结合我国的食管癌高发现场和临床研究谈谈个人认识.

    作者:陈志峰 刊期: 2009年第01期

  • 回盲部炎性肌纤维母细胞瘤一例

    患者,女,36岁,因右下腹隐痛5d,加重3d于2008年2月6日入外院就诊,剖腹探查发现回盲部肿物后关腹,病理检查提示回盲部肿物符合肠纤维母-肌纤维母细细胞瘤.

    作者:吴泽宇;黄静;万进 刊期: 2009年第01期

中华胃肠外科杂志

中华胃肠外科杂志

主管:中国科学技术协会

主办:中华医学会,中山大学