刘翠玲；黄可儿；陈柏书；来慧丽
目的 观察红背叶根4种不同提取物对HepG 2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响,探讨红背叶根不同提取物体外抗HBV作用.方法 通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察红背叶根水提取物(WE)、石油醚提取取物(EE)及正丁醇提取物(BE)对HepG 2.2.15细胞的影响,采用ELISA法检测分析红背叶根4种提取物对HepG 2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制作用.结果 红背叶根正丁醇提取物在无毒浓度下对HepG2.2.15分泌的HBsAg、HBeAg的抑制率分别达65.2％、94.4％,治疗指数分别为＞9.8和＞67.1;红背叶根乙酸乙酯提取物对HBeAg抑制率达53.4％,治疗指数＞2,而对HBsAg的无抑制作用;其他两种提取物对HBsAg、HBeAg则无抑制效果.结论 红背叶根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物均有抗HBV作用,正丁醇提取物效果比乙酸乙酯效果更好,具有潜在的抗HBV开发前景.
作者：沈海容；刘妮；张奉学；杨静雯；陈淳；朱晓霞；刘强；黄少慧；吕志平 刊期： 2014年第01期
目的 探讨石菖蒲活性部位β-细辛醚和丁香酚对APPswe/PS1 dE9双转基因小鼠脑内β淀粉样前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)表达及神经突触超微结构的影响.方法 3月龄SPF级雄性APPswe/PS1 dE9双转基因小鼠12只,随机分为4组:模型组、安理申(以安理申为阳性对照药)组、β-细辛醚组及丁香酚组,每组3只,用同龄同背景APPswe/PS1 dE9转基因阴性小鼠3只作为正常对照组.用药4个月后,免疫组织化学染色方法检测大脑内海马及皮层APP表达水平,并采用透射电子显微镜观察海马CA1区神经元及神经突触的超微结构的变化.结果 模型组在海马CA1区和皮质的APP阳性面积百分比较正常对照组显著增加(P＜0.01).与模型组比较,安理申组和β-细辛醚组在海马CA1区和皮质的APP阳性面积百分比显著减少(P＜0.01);丁香酚组皮质的APP阳性面积百分比显著减少(P＜0.01).透射电子显微镜观察,与正常对照组比较,模型组小鼠海马CA1区神经元神经毡内突触结构表现为大片的轴浆空泡化,突触数量减少,突触界面变短或融合消失,突触小泡数量明显减少,突触前膜、后膜及突触间隙大多模糊不清,突触后成分致密区厚度变薄,典型的突触结构已遭破坏,部分线粒体有轻微破损.安理申组、β-细辛醚组及丁香酚组小鼠海马CA1区神经突触结构与正常对照组比较无明显差异,与模型组比较在细胞器结构、轴浆空泡化、突触数量、突触界面、突触小泡数量及突触结构上均有不同程度的改善.结论 β-细辛醚及丁香酚可以抑制APP的过量表达,对与学习记忆密切相关的突触有一定的保护和修复作用.
作者：张春霞；郭俊和；陈云波；闫蓉；王奇；于旭华；魏刚；刘四军；程淑意 刊期： 2014年第01期
目的 探讨建立乙醇诱导人胃上皮细胞株(GES-1)凋亡模型的方法和可行性.方法 采用罗氏细胞实时动态分析仪、MTT比色法、Hoechst染色法、Annexin V-FITC/PI凋亡流式检测研究不同浓度的乙醇对人胃上皮细胞株(GES-1)凋亡作用.结果 (1)当乙醇浓度大于0.5 mol· L-1时,对GES-1细胞株有明显的诱导凋亡作用,而考察的TNF-α(100,50 ng·mL-1)则没有明显的细胞凋亡诱导作用;(2)通过形态学观察,发现乙醇模型组GES-1细胞株出现明显的凋亡细胞形态学改变;(3)Annexin V-FITC/PI凋亡流式分析结果发现乙醇浓度大于0.2 mol· L-1对细胞具有明显的诱导凋亡作用,乙醇主要诱导GES-1细胞株进入早期凋亡,且具有浓度依赖性,但该诱导作用具有时效性,在作用持续60 min后,其诱导作用会逐渐减弱.结论 乙醇对GES-1细胞株具有明显的诱导细胞凋亡作用,且具有浓度依赖性及时效性;本凋亡模型具有较好的重现性.
作者：刘翠玲；黄可儿；陈柏书；来慧丽 刊期： 2014年第01期
目的 建立LC-MS/MS方法测定芫花素在大鼠体内的血药浓度,并研究其药物动力学.方法 大鼠灌胃芫花提取物,眼眶采血,离心,以蛋白沉淀法处理血浆样品,芒柄花素为内标,电喷雾离子化,多反应检测方式进行负离子检测,检测离子质荷比(m/z)分别为283.2/267.9,267.0/251.9.使用Phenomenex Gemini 110 C18色谱柱(50 mm×2.0 mm,5μL);以甲醇-0.1％甲酸水(85∶15)为流动相,等度洗脱;柱温:40℃;流速:0.3mL· min-1.结果 大鼠灌胃芫花提取物后的药-时曲线符合二房室模型,芫花素血药浓度在5～ 1000 ng·mL-1范围内线性关系良好(r2=0.998),低检测限(LOQ)为0.5 ng·mL-1,日内及日间精密度(RSD)为2.42％～10.71％,日内及日间准确度为95.67％～112.15％,血浆中无内源性基质干扰,稳定性良好.结论 本研究所建立的方法简便、灵敏、重复性好、分析速度快,可用于血浆样品中芫花素的血药浓度测定和大鼠体内药物动力学研究.
作者：徐美丽；刘昌辉；吕渭升；宓穗卿；王宁生 刊期： 2014年第01期
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)晚期微血管并发症之一,是DM患者的重要死亡原因.而DN的发病机理如同其他DM微血管并发症一样尚未完全阐明.建立合适的DN动物模型是研究DN的发病机理和干预手段的基础.本文综述DN动物模型的研究进展,分析诱发性、自发性及转基因3类动物模型的优缺点,并对各模型致病机理、疾病表现、肾脏病理改变以及应用现状进行了详细的阐述,为研究DN的发病机理、防治及相关药物开发提供参考.
作者：赖洁梅；周玖瑶 刊期： 2014年第01期
目的 优选北沙参茎叶中黄酮类化合物的提取条件.方法 采用超声波提取北沙参茎叶中的黄酮类化合物,以得率为指标,在单因素试验基础上采用正交试验优选提取条件.结果 提取条件为乙醇浓度:70％,温度:70℃,时间:40 min,料液比为1:30时,北沙参茎叶总黄酮得率高,达3.31％.结论 所用方法为北沙参茎叶中黄酮类化合物的提取条件提供了科学依据.
作者：杨同章；叶国华；许一平；吕方军 刊期： 2014年第01期
目的 建立同步测定克痒敏醑中薄荷脑、冰片(龙脑和异龙脑)和水杨酸甲酯含量的气相色谱(GC)方法.方法 采用GC法.色谱柱为DB-WAX毛细管柱(30.0 m×0.25 mm,0.25μm);FID检测器;采用程序升温:初始温度为70℃,以7℃·min-1升至180℃,保留8 min.结果 薄荷脑的加样回收率为99.9％,RSD为0.98 ％(n=6);、冰片(龙脑和异龙脑)加样回收率为100.8％,RSD为1.05％(n=6);水杨酸甲酯加样回收率为100.9％,RSD为1.39％(n=6).结论 本方法简便准确、重现性好、专属性强,可用于克痒敏醑的质量控制.
作者：曾小平；陈新国；黄俊忠 刊期： 2014年第01期
目的 建立通脑溶栓胶囊的质量控制方法.方法 采用薄层色谱法对制剂中的粉葛、黄芪、鸡血藤和赤芍进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对制剂中的粉葛所合成分葛根素进行含量测定.色谱柱:C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:甲醇-水(25∶75);检测波长:250 nm.结果 在薄层色谱中均能检出粉葛、黄芪、鸡血藤和赤芍;葛根素进样量在0.06784～0.40704 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为98.9％(n=6),RSD为1.1％.结论 本研究所建立的方法简便,准确,重复性好,可用于通脑溶栓胶囊的质量控制.
作者：窦建卫；袁倩倩；宋海林；陈茹茹；朱少英；杨学礼 刊期： 2014年第01期
目的 观察丁桂儿脐贴联合用药对功能性消化不良(FD)动物模型胃肠道分泌及运动功能的影响.方法 采用不规则饮食加稀盐酸喂养的方法制备大鼠FD模型,观察丁桂儿脐贴联合用药及丁桂儿口服对FD大鼠胃酸、胃蛋白酶、胃肠激素及胃肠动力的影响.结果 (1)丁桂儿各组对FD大鼠模型胃酸、胃蛋白酶分泌无显著影响(P＞0.05);(2)丁桂儿脐贴小、中、大剂量联合健胃消食片可显著降低FD模型大鼠血浆CCK-8含量(P＜0.05),丁桂儿口服组,丁桂儿小、中、大剂量联合健胃消食片组,丁桂儿小、中、大联合莫沙必利组均可显著升高模型大鼠血浆MTL含量(P＜0.01);(3)丁桂儿脐贴小剂量+莫沙必利组、丁桂儿口服组可显著增强肾上腺素负荷小鼠模型的小肠推进率(P＜0.05);(4)丁桂儿脐贴小剂量+阿托品组可显著抑制新斯的明负荷小鼠模型的小肠推进率(P＜0.05),而丁桂儿口服药明显增强新斯的明负荷小鼠模型的小肠推进率(P＜0.05).结论 丁桂儿脐贴联合用药及单纯口服用药均可通过调节胃肠动力及胃肠激素的分泌缓解FD相关症状.
作者：禹玉洪；张国伟；杨晓宁；巫燕莉；王汝俊；杜群；李燕舞 刊期： 2014年第01期
目的 建立测定菟丝子中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、山奈酚的含量方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法.色谱柱为Zorbax SB C18;流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;绿原酸的检测波长为327 nm,金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、山奈酚的检测波长为360 nm;流速为1.0 mL· min-1;柱温为30℃.结果 5种活性成分均达到基线分离,线性关系良好(r≥0.9998);平均加样回收率为96.8％～101.0％,RSD＜ 3.0％(n=6).结论 该方法灵敏,可靠,可用于菟丝子药材的质量评价.
作者：李怀国；叶家宏；李子鸿；刘东文；徐海燕 刊期： 2014年第01期
目的 研究黄芩清热除痹胶囊对佐剂性关节炎(AA)的治疗作用,并探讨其作用机制.方法 建立AA大鼠模型,于模型复制第12天开始给予不同剂量的黄芩清热除痹胶囊(51.2,25.6,12.8 g·kg-1),连续12 d,观察黄芩清热除痹胶囊对AA大鼠的继发性足肿胀和血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量的影响.结果 与正常对照组比较,模型组足跖肿胀度及血清IL-1β、IL-6的含量明显增加(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,黄芩清热除痹胶囊各组足跖肿胀度明显减小,IL-1β、IL-6含量明显降低(P＜0.05,P＜0.01),其中以高、中剂量组效果较好(P＜0.01),与雷公藤多苷片组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 黄芩清热除痹胶囊能抑制AA大鼠继发性足肿胀,其作用与降低AA大鼠血清IL-1β、IL-6含量有关.
作者：葛平；张贺；孙肖琛；刘健；王晓玉；姜辉；孟楣 刊期： 2014年第01期
目的 研究沉香挥发油对H2O2所致鼠肾上腺嗜铬细胞瘤单克隆细胞系(PC12细胞)氧化损伤的保护作用.方法 体外培养PC12细胞,采用H2O2制备细胞损伤模型,运用乳酸脱氢酶(LDH)和四唑盐(MTT)法检测细胞活力;应用荧光分光光度法测定细胞膜电位(MMP)和细胞内活性氧含量;应用试剂盒-酶标仪法测定细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)的活力.结果 不同浓度H2O2对PC12细胞生长均有明显的抑制作用,当浓度达到200 μmol· L-1后,对细胞的抑制作用明显减缓;与正常对照组对比较,模型组的细胞存活率较低,ROS、MDA含量较高(P＜0.01),但SOD和GSH-Px含量明显降低(P＜0.01);与模型组比较,沉香挥发油各剂量组的ROS、MDA含量明显降低(P＜ 0.01),而细胞存活率、SOD和GSH-Px酶活力则显著增强(P＜0.01).结论 沉香挥发油在一定剂量范围内,对H202致PC12细胞氧化损伤具有保护作用.
作者：熊礼燕；李丽月；林励；陈地灵；吴俊生；郑敏；廖丰蕴 刊期： 2014年第01期
巨噬细胞是具有异质性的一类免疫细胞,近年来巨噬细胞极化受到关注.巨噬细胞在体内外不同环境影响下可极化为不同表型.目前认为巨噬细胞极化是单核细胞活化后一系列功能状态的两个极端.由于巨噬细胞极化涉及到不同信号通路及多种转录因子的调控,且极化后与多种疾病发生发展相关,故本文介绍巨噬细胞极化相关情况、极化信号通路及调控因子、可塑性及其与相关疾病的关系.中药对巨噬细胞极化的影响可能是其发挥免疫调节作用的重要机制.
作者：谢冰冰；董燕；吴阳阳；王培训 刊期： 2014年第01期
目的 研究凉血通瘀方对实验性瘀热证脑缺血大鼠的治疗作用.方法 大鼠注射大肠杆菌内毒素后,采用插线阻断大鼠中动脉法制备瘀热证脑缺血模型,观察凉血通瘀方对模型大鼠的行为学评分,脑梗死率,血液流变学指标,血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6),脑组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等指标的影响.结果 凉血通瘀方能减轻脑缺血损伤,改善血液流变学指标,降低模型大鼠血清中IL-1β、IL-6含量,抑制脑组织中NOS活性,降低NO含量.结论 凉血通瘀方能减轻瘀热证脑缺血模型大鼠的脑缺血损伤,同时能改善“瘀”、“热”症状.
作者：蒋宝平；田磊；李申；许立；方泰惠；程海波 刊期： 2014年第01期
目的 比较泽泻不同提取物对细胞线粒体能量代谢的影响.方法 分别制备泽泻水提取物(WRE)、乙醇提取物(ERE)、超临界CO2萃取物(SFE),以SGC-7901胃癌细胞为研究对象,阳离子荧光羰花青染料JC-1染色,采用倒置荧光显微镜观察结合流式细胞仪检测3种提取物对细胞线粒体膜电位的影响;应用酶标仪检测3种提取物对琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响.结果 红色荧光减弱(或绿色荧光增强)的程度:ERE＜SFE＜WRE.流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、WRE组、ERE组、SFE组的单阳细胞比例分别为3.5％、14.8％、9.8％和17.3％,与正常对照组比较,3组提取物单阳细胞比例均有增加,差异有统计学意义(P＜0.01),与ERE组比较,WRE组单阳细胞比例更高(P＜0.01)、SFE组单阳细胞比例高(P＜ 0.01); SDH检测结果显示,SFE组对细胞SDH活性有抑制作用,而ERE组和WRE组均有不同程度的促进作用,且ERE组对SDH的促进作用大于WRE组;与正常对照组比较,ERE组和WRE组的SDH活性差异有统计学意义(P＜ 0.01,P＜ 0.05);与ERE组比较,WRE组、SFE组的SDH活性差异有统计学意义(P＜0.05).结论 泽泻醇提物对线粒体膜电位的损害较小,对SDH活性促进作用较显著,提示泽泻醇提取物具有较明显改善线粒体能量代谢的作用.
作者：林文津；徐榕青；张亚敏；李主泉；张园秀；郭娜 刊期： 2014年第01期
目的 采用蛋白质组学方法,在下丘脑中探索琼玉膏对衰老大鼠产生调节作用的相关蛋白质,从而在分子水平上解释抗衰老方剂琼玉膏的作用机理.方法 将2～3月龄42只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、琼玉膏组,每组14只.给药结束后,抽提下丘脑全蛋白.利用荧光双向差异凝胶电泳、图像分析、胶内酶切、质谱鉴定等蛋白质组学技术,分离、分析、鉴定大鼠下丘脑差异蛋白质;通过数据库检索和生物信息学方法,分析差异蛋白的功能及属性.结果 1.成功复制亚急性衰老大鼠动物模型;2.获得了正常对照组、模型组和琼玉膏组下丘脑组织的全蛋白表达荧光双向差异凝胶电泳图谱;3.运用蛋白质组学技术,比较正常对照组、模型组及琼玉膏组的下丘脑组织,确认了15种表达量发生了变化的蛋白质.结论 鉴定出差异蛋白主要涉及有突触形成相关蛋白、线粒体相关蛋白、能量代谢相关蛋白、抗氧化、细胞骨架蛋白、细胞分化、增殖和凋亡蛋白等,为进一步筛选特异相关蛋白和药物靶位治疗奠定基础.
作者：刘焕兰；武夏林；曲卫玲 刊期： 2014年第01期
目的 观察aP2-SREBP-1c转基因小鼠糖脂代谢生物特征,探讨其在糖脂代谢紊乱性疾病研究中的应用.方法 动物分为aP2-SREBP-1c转基因小鼠及其同窝野生型小鼠2组,均为雌性,观察两组小鼠体质量、进食量、进水量,不禁食及禁食12h血中TG、TC、LDL-C、Glu水平,肝脏、肌肉脂质含量,口服糖耐量、胰岛素及瘦素,稳态胰岛素(HOMA-IR),脂肪、肝脏病理组织学变化.结果 与野生型比较,aP2-SREBP-1c转基因小鼠肾周、性腺周围、皮下脂肪均明显减少(P＜0.01),褐色脂肪明显增加(P＜0.01),肝脏切片显示明显脂肪肝病理变化,肝脏质量明显增加(P＜0.01),血中胰岛素、葡萄糖水平及HOMA-IR明显增加(P分别＜0.01、0.05、0.001),瘦素明显下降(P＜0.01),禁食状态血中TC、LDL-C水平均显著升高(P＜ 0.05,P＜0.01),显示存在明显的脂肪分化障碍、胰岛素抵抗、高胆固醇血症和脂肪肝.结论 aP2-SREBP-1c转基因小鼠可用于糖尿病、脂肪肝、高胆固醇血症等糖脂代谢紊乱疾病的研究.
作者：李凤霞；李金磊；荣向路；王春怡；雷燕；郭姣 刊期： 2014年第01期
目的 观察毛冬青对心衰大鼠心功能及微小RNA133a(miR133a)表达的影响.方法 腹主动脉缩窄术复制大鼠心衰模型,随机分为毛冬青高、低剂量组,卡托普利组,心衰模型组和假手术组,干预2周后抽血查B型尿钠肽(BNP)和行心脏彩超检查心功能,并对大鼠心脏组织miR133a进行荧光PCR检测.结果 心衰模型组的心功能指标明显低于假手术组,3个药物干预组心功能指标均有较好的提高作用,组间作用无显著性差异;与假手术组比较,心衰模型组miR133a的表达下调,各药物干预组与心衰模型组比较,miR133a的表达均显著上升,其中以毛冬青低剂量组为显著.结论 腹主动脉缩窄可成功复制大鼠慢性心力衰竭模型,心力衰竭大鼠模型较假手术组大鼠miR133a的表达下调.不同剂量的毛冬青均能改善慢性心力衰竭大鼠模型的心功能,并且能上调miR133a的表达,但上调幅度与心功能改善情况未呈明显量效关系.
作者：黄习文；游志德；陈洁；冼绍祥 刊期： 2014年第01期
目的 建立双丹胶囊的质量标准.方法 用薄层色谱(TLC)法对双丹胶囊中的牡丹皮、丹参进行鉴别,用高效液相色谱法(HPLC)测定双丹胶囊中丹皮酚、丹参素和丹酚酸B的含量.结果 TLC法可对牡丹皮、丹参进行鉴别,且斑点清晰,分离度好,易于识别;HPLC测定结果显示,丹皮酚、丹参素和丹酚酸B浓度分别在3.63 ～ 36.30μg·mL-1(r=0.9998)、29.45 ～ 294.5 μg· mL-1(r=0.9999)和24.32 ～ 243.2 μg· mL-1(r=0.9998)范围内与其峰面积线性关系良好,平均回收率分别为100.2％、100.5％、100.45％,RSD分别为2.2％(n=6)、0.9％(n=6)、2.88％(n=6).结论 本实验的定性、定量方法准确、简便,可为双丹胶囊质量标准的提高提供科学依据.
作者：吕渭升；徐美丽；刘昌辉；黄小桃；宓穗卿；王宁生 刊期： 2014年第01期
目的 探讨香鳞毛蕨有效部位对申克孢子丝菌的体外抑菌作用,进一步明确香鳞毛蕨有效部位的抗菌谱.方法 取4株申克孢子丝菌为受试菌株,培养至酵母相,分别采用琼脂扩散法测定抑菌圈直径和微量稀释法测定低抑菌浓度(MIC)与低杀菌浓度(MFC).结果 香鳞毛蕨有效部位对4株申克孢子菌酵母相的抑菌圈平均直径为25.5 mm,对4株申克孢子丝菌酵母相的MIC几何均数为生药0.18 mg·mL-1,但MFC＞生药20mg·mL-1.结论 香鳞毛蕨有效部位对申克孢子丝菌酵母相有较强抑菌作用,但无杀菌作用.
作者：万江帆；沈志滨；江涛；唐春萍；王洁 刊期： 2014年第01期
中药新药与临床药理杂志
主管:国家食品药品监督管理局
主办：广州中医药大学
