刘煜凡；黄沙；姚斌；李曌；李想；付小兵；吴旭
目的 观察中晚孕期法洛氏四联症胎儿(ToF)大脑沟回发育的超声表现和脑血流灌注情况,评价ToF胎儿大脑沟回发育.方法 分析2015年12月~2016年10月在南方医科大学附属深圳市妇幼保健院超声医学科诊断为ToF的40名中晚孕期(23周~33周6天)胎儿的大脑沟回资料,评估大脑沟回指标:顶枕沟深度、角度及顶枕沟切面半球深度、距状沟深度及距状沟切面半球深度、外侧裂宽度及深度、脑岛未覆盖宽度、外侧裂切面半球深度、脑岛未覆盖率、头围、双顶径;评估血流动力学指标:脐动脉阻力指数、脐动脉搏动指数、大脑中动脉阻力指数、大脑中动脉搏动指数、脑胎盘血流阻力指数比、脑胎盘血流比,对上述参数测值进行统计分析.结果 中晚孕期ToF胎儿的顶枕沟深度、外侧裂深度、距状沟深度、顶枕沟切面半球深度、距状沟切面半球深度、双顶径和头围较对照组小(P<0.05);ToF胎儿大脑中动脉搏动指数、大脑中动脉阻力指数、脑胎盘血流阻力指数比和脑胎盘血流比比对照组小(P<0.05).结论 中晚孕期ToF胎儿的大脑沟回发育较正常儿延迟,表现为顶枕沟、外侧裂和距状沟浅,顶枕沟和脑岛闭合延迟,心脏结构异常导致血流动力学改变可能是ToF胎儿大脑沟回发育迟缓的一个原因.
作者：何嘉敏；李胜利；陈曦；文华轩；袁鹰；罗丹丹 刊期： 2017年第06期
目的 探讨结直肠癌组织中cAMP依赖型蛋白激酶抑制剂β(PKIB)的表达水平及其与结直肠癌患者临床病理因素之间的关系.方法 利用实时荧光定量PCR法检测34对结直肠癌组织和配对癌旁正常组织中PKIB的表达水平,应用免疫组织化学法对72例结直肠癌组织中PKIB的表达水平进行检测,并分析PKIB表达的临床意义.结果 在结直肠癌组织中PKIB mRNA及蛋白的表达水平均明显高于配对癌旁正常组织(P<0.0001).PKIB蛋白的表达水平与结直肠癌患者T分期正相关(P=0.038),而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、发病部位以及淋巴结转移(N分期)、远隔器官转移(M分期)无明显相关性(P>0.05).高表达PKIB的结直肠癌患者生存时间明显短于低表达的患者(70.532±6.190 vs 93.500±5.847,P=0.023).结论 PKIB在结直肠癌组织中高表达,其高表达与结直肠癌患者T分期及预后不良呈正相关,提示PKIB可能在结直肠癌演进中发挥了重要作用并有望成为一种新的结直肠癌预后判断标志物.
作者：王好为；段志娇；胡莎莎；王爽 刊期： 2017年第06期
目的 探索认知灵活性相关脑网络的动态演化.方法 采用交替切换任务范式,23名被试完成数字大小和奇偶判断任务,每3个试次数字颜色改变,提示任务规则切换,3个试次分别对应切换、基线和准备条件.分析3种条件下的行为绩效和19通道事件相关电位统计参数映像的时空模式.结果 切换代价(切换-基线)显著:反应时123.61±83.84 ms;正确率(1.24±3.30)%.事件相关电位统计参数映像(t)显示:切换效应先后出现在额顶网络的右侧和左侧部分,准备效应主要表现为反应前右侧额极和反应后左侧额极的激活.结论 认知灵活性主要依赖于额顶网络的动态激活,而前额极参与任务切换前的跨试次准备过程;背侧额区参与试次内的即时任务切换,且左右两侧额区功能不同.
作者：曹园；周曙；王优 刊期： 2017年第06期
目的 检测F10基因及其编码蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨F10基因与宫颈癌病理发生发展的关系.方法 收集宫颈癌临床组织标本共30例,运用RT-PCR的方法检测30对宫颈癌组织及相应的癌旁组织中的F10基因的表达,运用免疫组织化学方法检测并比较30对宫颈癌组织与癌旁组织及正常组织中F10基因蛋白的表达情况.结果 RT-PCR的检测结果显示,宫颈癌组织中F10基因的表达明显高于相应癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),免疫组织化学检测F10蛋白的结果与RT-PCR结果基本一致.对不同分化程度的病例进行分析,结果显示低分化组宫颈癌组织中F10的表达显著高于中低分化或中分化病例.术前化疗的宫颈癌组织中F10的表达量降低,显著低于未行术前化疗的病例(P<0.01).结论 宫颈癌组织中F10基因的表达量与其分化程度呈负相关,分化程度越低的宫颈癌组织中F10表达越强,可能与癌症的产生与发展有关.另外,化疗显著下调宫颈癌组织中F10的表达.
作者：张梦竹；庞战军 刊期： 2017年第06期
目的 探讨血清限制对人滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达及细胞侵袭力的影响.方法 分别以1%、5%及10%胎牛血清(FBS)处理HTR-8/SVneo细胞48 h后,荧光定量PCR检测细胞的IGF-1及MMP-2 mRNA水平,细胞免疫荧光检测细胞IGF-1、MMP-2蛋白表达,MTT检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭力;进一步添加人重组IGF-1处理后,观察HTR-8/SVneo细胞MMP-2表达、细胞增殖及侵袭能力的改变.结果 随着血清浓度降低,细胞增殖能力明显下降(P<0.05);血清限制抑制细胞IGF-1、MMP-2的mRNA及蛋白表达(P<0.05),导致细胞侵袭力下降(P<0.05);补充人重组IGF-1能显著上调HTR-8/SVneo细胞MMP-2表达水平(P<0.05),促进HTR-8/SVneo细胞侵袭(P<0.05).结论 血清限制下调人滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞IGF-1表达,可能通过引起其MMP-2表达降低来介导细胞侵袭力下降;补充人重组IGF-1有助于促进HTR-8/SVneo细胞增殖及侵袭.
作者：周尚谦；沈朗；李雪媛；谢晓珍；芮塬；陈年坤；王志坚 刊期： 2017年第06期
目的 回顾性分析肾移植术后原发性肺癌的临床特点及预后.方法 自1988年1月~2015年4月期间,2793例患者在我院接受肾移植手术.14例(0.5%)患者随后发展为肺癌,其中10例(71.4%)接受了手术治疗.结果 肾移植时患者的平均年龄为50.2±8.3岁.14例肺癌患者中,10例(71.4%)有吸烟史.9例(64.3%)为偶然发现,而有症状者仅为5例.从移植手术到肺癌诊断的平均时间间隔为65.7±20.1个月.统计结果显示,不同肿瘤分期病人的生存率具有统计学差异(P=0.001).随访期间有11例死于肿瘤转移或器官衰竭,3例存活.肺癌诊断后的总体5年生存率为17.9%.结论 肾移植术后原发性肺癌的危险性可能高于一般人群.肾移植术后常规胸部检查可早期发现原发性肺癌,对于及早施行手术、改善预后很有必要.
作者：张书新；刘阳 刊期： 2017年第06期
目的 检测线栓法大脑中动脉阻塞(MCAO)后小鼠不同部位脑组织HDCA9的表达及胞内分布变化,探讨HDAC9与缺血性脑卒中的关系.方法 21只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(9只)与手术组(12只),将手术组术后Longa评分2~3分的小鼠纳入MCAO组(9只),术后3 d断头取脑,采用免疫荧光染色观察HDAC9脑组织内分布位置与胞内分布变化,采用Western免疫印迹法与实时荧光定量PCR法检测各组不同部位(梗死侧/对侧皮层/MCAO组小脑/假手术组皮层/假手术组小脑)HDAC9的表达变化.结果 (1)免疫荧光染色:脑梗死后,梗死灶周围脑组织HDAC9的荧光强度较其他部位明显增强.高倍镜下与假手术组对比,梗死灶周围HDAC9胞浆内表达增多,核内表达减少;(2)蛋白与mRNA表达检测:与各组对比,梗死侧脑组织HDAC9表达显著升高,具有统计学差异(均P<0.05),蛋白与mRNA表达情况相一致.结论 HDAC9与缺血性脑卒中密切相关,可能参与其病理生理过程.
作者：麦汉滔；姜涛；张爱武；吕田明；杨灿洪；覃偲偲 刊期： 2017年第06期
目的 探讨发生于鼻腔鼻窦晚期腺样囊性癌的临床特征、治疗方法、预后及影响因素.方法 分析2007年2月~2016年5月入住我院的21例晚期鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者的临床资料,包括临床表现、临床分期、病理、治疗方法、局部复发、远处转移及预后等,并结合文献进行诊疗特征分析.采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验进行单因素生存分析,COX模型对影响预后的临床因素进行多因素分析.结果 21例患者中,实体型占比小于30%的有10例(47.6%),1、3、5年总生存率分别为100%、100%、71%,实体型占比大于等于30%的有11例(52.4%),1、3、5年总生存率分别为70%、40%、10%,两者差异有统计学意义(P=0.02),且实体型占比大于等于30%的患者预后较差.Log-rank检验及全变量模型下协变量的生存曲线表明病理分型对预后具有显著影响,T3期预后略优于T4期,源发于上颌窦略优于蝶窦,手术及放化疗综合治疗优于单纯手术及单纯放化疗.多因素Cox回归模型分析结果显示,病理分型、病程与预后关系密切(P=0.045、0.028).结论 鼻腔鼻窦腺样囊性癌发病率较低,症状表现无特异性,部分患者病程较长,多发鼻窦内,尤其是上颌窦,早期诊断较困难,等到就诊时多为晚期.晚期患者以手术结合术后放化疗的综合治疗方式为主.病理分型、病程、发病部位、分期、治疗方式、周围神经侵袭,手术切缘阳性,术后放疗剂量不足60 Gy可能是影响晚期腺样囊性癌患者预后的因素.
作者：王会刚；申聪香；陈芳；李冠雪；王晓琪；文忠 刊期： 2017年第06期
目的 探讨强脉冲光420 nm滤光片在体外对红色毛癣菌的抑制作用及其机制.方法 实验所用红色毛癣菌落及菌悬液各分为处理组(强脉冲光照射)和对照组(未照射),在照射前、照射后第2天、第3天,拍摄各组菌落,使用Photoshop cx7软件以像素计算菌落的面积观察菌落生长曲线变化,以及在照射6 h后,通过噻唑蓝检测真菌菌悬液的活力;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针检测各组真菌内活性氧变化,硫代巴比妥酸法检测各组真菌丙二醛含量改变.结果 IPL420 nm对红色毛癣菌具有损伤作用,其适有效治疗参数为12 J/cm212脉冲,处理后6 h后菌株活力下降约30%(P<0.05),而处理后平板菌落停止生长,生长曲线趋于直线;同时IPL处理后真菌内活性氧水平升高(P<0.05),伴随丙二醛含量上升(P<0.05).结论 IPL420 nm可在体外通过诱导红色毛癣菌内产生氧化应激,导致真菌损伤和死亡.
作者：黄昊；汤红峰；陈颖；郑秀芬；胡勇；王瑞华；黄美玲 刊期： 2017年第06期
目的 探讨甲基化转移酶抑制剂BIX01294(BIX)对小鼠子宫内膜基质细胞迁移和蜕膜化过程的作用和影响.方法 取妊娠第3.5天小鼠子宫分离培养得小鼠子宫内膜基质细胞,采用细胞划痕运动分析、体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化模型及Real-time PCR方法分别从形态学和分子生物学角度观察BIX对小鼠子宫内膜基质细胞迁移及蜕膜化的影响.结果 在一定浓度范围内(BIX≤15μmol/L),小鼠子宫内膜基质细胞的迁移距离随着BIX浓度的升高而增加,与对照组相比,BIX 15μmol/L处理组基质细胞的迁移距离增加明显,差异具有统计学意义,当BIX浓度提高到20μmol/L时,细胞迁移距离增加不明显,且此时开始出现细胞的死亡;与对照组相比,BIX处理24 h组小鼠子宫内膜基质细胞Ehmt2 mRNA表达显著下调(P<0.01);并且15μmol/L BIX能够抑制小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化反应.结论 一定浓度范围的BIX通过抑制Ehmt2 mRNA在基质细胞中的表达促进小鼠子宫内膜基质细胞的迁移,并且对小鼠子宫基质细胞的蜕膜化过程有抑制作用.
作者：廖晖淇；田鎏；杨慧；马妮；张昌军；刁红录 刊期： 2017年第06期
目的 探索不同构架的3D微结构对表皮干细胞增殖能力和细胞活性的影响并建立佳3D生物打印模型.方法 通过采用不同尺寸:210、340、420μm的打印喷头结合3D生物打印技术构建3种不同的含细胞3D微结构;利用荧光显微镜观察3D微结构中细胞形态及增殖现象;活/死细胞染色技术检测细胞活性;采用方差分析和样本t检验等方法进行统计学分析.结果 3种不同构架的3D微结构均可促进表皮干细胞增殖;打印后0、3、7 d之间,3组3D微结构在细胞活性水平上均逐步降低且差异有统计学意义(P<0.01);与7 d时的细胞活性相比,3组3D微结构在14 d时的细胞活性均升高且差异有统计学意义(P<0.01);与210μm组和340μm组相比,420μm组3D微结构在长期培养中细胞活性水平高(P<0.01).结论 420μm组3D微结构能够稳定促进皮肤替代物中表皮干细胞的增殖能力并维持高细胞活性,为构建3D生物打印组织工程表皮以及全层皮肤模型奠定了基础.
作者：刘煜凡；黄沙；姚斌；李曌；李想；付小兵；吴旭 刊期： 2017年第06期
目的 观察不同剂量右美托咪定(Dex)复合罗哌卡因腋路臂丛阻滞用于小儿多指手术的比较的效果及安全性.方法 小儿多指手术患者80例,随机均分为:不同剂量Dex组(D1-3组)和对照组(C组).D1-3组腋路臂丛用药分别为Dex 0.25、0.5、0.75μg/kg+0.25%罗哌卡因0.20 mL/kg,C组为0.25%罗哌卡因0.20 mL/kg.记录阻滞完成、起效、维持及术后苏醒时间及并发症情况.结果 D2组及D3组在起效时间及术后苏醒时间上均比C组短,而维持时间长,D3组比D1组在起效时间及术后苏醒时间上均缩短,而维持时间长.D1-3组的阻滞成功率高于C组,差异有统计学意义(P<0.05),D1-3组间无统计学差异.并发症方面,4组未出现血肿病例,各有1例患儿出现喉返神经阻滞,各有1例呼吸抑制,2或3例霍纳综合征,D3组出现1例患儿心率<70 min,经处理均安全恢复.结论 单纯罗哌卡因或复合Dex臂丛神经阻滞,均可以用于小儿多指手术,中剂量Dex(0.5μg/kg)+0.25%罗哌卡因0.20 mL/kg的配伍较佳.
作者：杨世辉；孙维国；李永乐；陈祥楠；漆冬梅；孙艺娟 刊期： 2017年第06期
目的 构建变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)SMU.2055基因缺陷菌株,确定SMU.2055基因对S.mutans形态及与致龋性相关的生物学特性的影响.方法 利用同源重组的方法,构建SMU.2055基因缺陷菌株.在扫描电子显微镜及透射电子显微镜下观察野生菌株及基因缺陷菌株的形态结构.连续监测野生菌株及基因缺陷菌株的菌液A600值及pH值,比较其生长能力及产酸能力.对两种菌株进行酸适应后,分别进行酸冲击,评价其耐酸能力.结果 经过聚合酶链反应及测序鉴定,变异链球菌SMU.2055基因缺陷菌株构建成功.扫描电子显微镜结果显示,与野生菌株相比,基因缺陷菌株菌体形态发生改变,菌体间不规则物质较少.透射电子显微镜下观察,基因缺陷菌株细胞膜较模糊,细胞膜完整性被破坏.基因缺陷菌株的生长能力及耐酸能力较野生菌株均有所下降,而基因缺陷菌株与野生菌株间的产酸能力未见明显差异.结论 SMU.2055基因与变异链球菌的形态、生长及耐酸能力密切相关,而对其产酸能力不造成明显影响.
作者：陈璇；许晓虎；吴昕彧；李转玲；赵望泓 刊期： 2017年第06期
目的 利用生物信息学方法对小鼠烧伤早期免疫细胞差异基因表达谱进行分析并检测,筛选相关差异基因,以期找到潜在的诊断及治疗靶标.方法 从GEO数据库中下载GSE7404数据集,通过配对样本t检验、倍比法及GO功能富集分析筛选差异表达基因,应用STRING数据库及Cytoscape软件构建蛋白互作网络筛选相关基因靶标,运用实时荧光定量PCR及Western blotting进行试验验证.结果 在烧伤后第1天,有1825个基因被选出,其中上调基因658个,下调基因1167个.运用STRING数据库及Cytoscape软件构建蛋白互作网络分析,发现Stat1、Cdk1、Cd19、Lck及Jun基因在烧伤后免疫系统功能变化过程中可能起到重要作用.实时荧光定量PCR及Western blotting检测显示Stat1、Cdk1和Jun基因表达情况与分析结果相一致.结论 通过对小鼠烧伤后早期全血游离白细胞基因芯片分析我们发现Stat1、Cdk1和Jun基因在烧伤早期免疫细胞功能变化的过程中发挥重要的作用,可能是烧伤早期诊断及治疗的潜在的生物学靶标.
作者：邹琼；高艳彬；金辉；卢志阳；史鹏伟；杨磊 刊期： 2017年第06期
目的 研究半枝莲总黄酮(HF)对延缓秀丽隐杆线虫和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响,并探讨可能的作用机制.方法 将不同浓度的HF(30、50 mg/L)分别放于NGM和DMEM培养基中,研究对线虫的寿命、生殖能力、氧化应激、抗氧化酶活力、相关基因表达以及对HUVECs的抗氧化酶活力和相关基因表达的影响.结果 HF能显著延长线虫的平均寿命和大寿命,对其生殖能力没有损害,子代数目无统计学差异,35℃急性热应激下的平均生存时间显著延长;同时,HF均能提高秀丽线虫和人HUVECs中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性,并上调两种细胞中抗衰老基因daf-16、sir-2.1的表达.结论 HF可能通过提高抗氧化酶活力和抗氧化基因的表达水平,能够延缓线虫衰老及急性热应激下的应激能力同时不损害生殖能力,并保护内皮细胞免受损伤.
作者：周溦；林敬明；王素丽；林海桢 刊期： 2017年第06期
目的 探讨牙周非手术治疗对肥胖大鼠血清炎症因子及代谢水平的影响.方法 选取16只已成功建立肥胖复合牙周炎模型的大鼠,随机分为治疗组及未治疗组(对照组),治疗组大鼠接受牙周非手术治疗,对照组未做任何处理,所有大鼠于牙周治疗后2周处死.牙周治疗前及治疗后2周两组大鼠均行口服糖耐量试验,眼眶静脉取血、检测空腹血糖及空腹胰岛素,运用酶联免疫吸附法检测血清C-反应蛋白(CRP).结果 牙周治疗后2周,治疗组的空腹血糖(t=2.445,P=0.034)及β细胞功能指数显著低于对照组(t=-2.543,P=0.027);经牙周治疗后,治疗组CRP水平显著降低,并低于对照组(t=2.388,P=0.028);口服糖耐量试验中,曲线下面积显著下降,并低于对照组(t=12.053,P=0.000).结论 牙周非手术治疗可以下调肥胖复合牙周炎大鼠的CRP水平,改善肥胖大鼠的糖代谢状况.
作者：钟素兰；倪佳；柴巧学；陈蕾；章锦才 刊期： 2017年第06期
目的 探讨化香树果序乙醇提取物(PSZ)诱导鼻咽癌细胞CNE1、CNE2发生methuosis死亡的机制.方法 用1.0 mg/mL PSZ处理CNE1、CNE2细胞,观察细胞形态学变化,RT-qPCR、Western blotting检测PSZ干预后Rac1基因和蛋白表达水平.EHT 1864抑制两组细胞Rac1表达,观察化香树果序醇提物对CNE1、CNE2细胞的作用.结果 CNE1、CNE2细胞经PSZ处理后,细胞质出现大量空泡,空泡相互融合,不断增大,后细胞膜破裂,细胞核没有发生明显的变化,这种形态学改变符合methuosis细胞死亡方式,Rac1在基因和蛋白水平表达均增加.EHT 1864抑制细胞Rac1表达后,PSZ引起的methuosis死亡现象消失.结论 Rac1是PSZ诱导人鼻咽癌细胞CNE1、CNE2发生methuosis死亡的关键靶点.
作者：朱俊谕；涂维；曾超；毛珩旭；杜庆锋；蔡红兵 刊期： 2017年第06期
目的 探讨屋尘螨(HDM)对肌动蛋白应力纤维(F-actin)重新排布的影响及表皮生长因子受体(EGFR)相关信号通路在其中的作用.方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE细胞为研究对象,以HDM刺激细胞,予EGFR抑制剂AG-1478进行预处理,实验分为4组:Control组,AG-1478组,HDM组,AG-1478+HDM组,应用Western blotting检测HDM对磷酸化(p-)EGFR、F-actin及粘附连接蛋白E-cadherin和β-catenin表达的影响,应用免疫荧光技术观察F-actin、E-cadherin及β-catenin的分布变化,并测量16HBE细胞层的跨上皮电阻(TER)值和右旋糖苷(FITC-DX)的透过率.结果 HDM刺激细胞10 min时,p-EGFR表达明显增多(P<0.05),E-cadherin(P>0.05)及β-catenin(P>0.05)蛋白表达无明显改变,免疫荧光示HDM刺激后E-cadherin及β-catenin均发生分布异常,由胞膜向胞浆弥散.HDM组TER值(70.00±4.33)%显著下降,FITC-DX透过率(115.98±4.34)%明显增加,加入EGFR抑制剂后E-cadherin和β-catenin的分布异常及TER值(90.00±3.75)%、FITC-DX(101.10±2.10)%透过率均明显改善.HDM刺激后促进F-actin表达增多并出现重新排布,而EGFR抑制剂可明显抑制这一过程(P<0.05).结论 表皮生长因子受体相关信号通路参与了屋尘螨介导肌动蛋白应力纤维的重新排布,并导致气道上皮屏障破坏.
作者：乐艳青；董航明；王燕红；赵海金；蔡绍曦 刊期： 2017年第06期
目的 研究在不同pH培养条件下,变异链球菌菌株的sRNA SpR19及其潜在靶向的GroEL蛋白在不同致龋力菌株中的表达变化,探讨其作为高致龋变异链球菌的分子鉴别标志物的可能性.方法 提取高致龋性变异链球菌的临床分离株(菌株17)和低致龋性变异链球菌的临床分离株(菌株5)的总RNA,建库后进行高通量测序获得差异表达的sRNA;结合生物信息学与文献,挑选关键sRNA与蛋白进行不同致龋菌株表达水平的研究:qRT-PCR验证目的sRNA SpR19在pH5.5和pH7培养条件下不同致龋能力菌株中的表达水平;合成变异链球菌GroEL蛋白抗原多肽并制备多克隆抗体,Western blotting鉴定不同pH培养条件下高、低致龋菌中GroEL的表达水平;qRT-PCR验证不同pH培养条件下不同致龋能力菌株GroEL的mRNA的表达水平.结果 生物信息学提示SpR19可能靶向GroEL的mRNA及上下游基因间区;不同pH条件下,相较于低致龋菌,高致龋菌中sRNA SpR19表达下降(P<0.05),而GroEL蛋白与mRNA高表达(P<0.05),二者表达趋势相反.结论 不同pH条件培养的高致龋性变异链球菌中,sRNA SpR19均低表达,GroEL的蛋白水平与RNA水平均存在高表达,结合生物信息学分析提示sRNA SpR19可能通过靶向GroEL负调控变异链球菌的致龋能力.
作者：胡桐楠；郑伟；李少华；董洁；王心玲；王成龙；邵宁生；储冰峰 刊期： 2017年第06期
目的 构建表达蝎毒素AaIT或苏云金杆菌毒素Cyt2Ba的大肠埃希菌,检测重组菌对致倦库蚊和白纹伊蚊II龄幼虫的毒力,并测试不同剂型的增效作用.方法 分别将AaIT和Cyt2Ba编码基因克隆于pET28a(+)质粒上,并将重组质粒分别转化BL21 E.coli获得分别表达AaIT和Cyt2Ba的工程菌株,经IPTG诱导后,用SDS-PAGE和Western-blot检测重组蛋白的表达;测试不同浓度工程菌菌液对于蚊幼虫的杀灭效果;并将有效的工程菌制成干粉剂,检测其干粉末及其配剂对蚊幼虫的杀灭效果.结果 AaIT和Cyt2Ba重组蛋白在大肠埃希菌中成功表达,但AaIT重组蛋白对蚊幼虫不具有毒性.表达Cyt2Ba重组蛋白的工程菌菌液对白纹伊蚊和致倦库蚊幼虫均具有明显的杀灭作用,48 h的LC50分别为3.00×106和1.25×107 cells/mL,其中对白纹伊蚊幼虫的杀灭效果要显著优于对致倦库蚊幼虫的杀灭效果(P<0.001),并且表达Cyt2Ba重组蛋白的工程菌干粉末及其配剂均具有较好的杀蚊幼虫效果.当该工程菌干粉末与干酵母粉、小麦粉和白胡椒粉分别按4:1、1:1和1:4比例制成配剂处理蚊幼虫48 h后,结果显示当质量比为1:1时,配剂杀蚊幼效果显著提高(P=0.044),并且白胡椒粉末配剂效果要显著好于干酵母粉和小麦粉配剂(P=0.002).结论 表达Cyt2Ba的重组大肠埃希菌对蚊幼虫具有较好的杀灭作用,合适配剂的使用可以增强其在蚊虫防制中的效果.
作者：邓胜群；邓茗芝；陈嘉婷；郑丽兰；彭鸿娟 刊期： 2017年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
