牛静;刘楠;刘国炳
目的:寻找一种Fluoro-Jade B(FJB)染色结合目的蛋白免疫荧光多标的合适方法。方法通过电凝法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),诱导皮层缺血半暗带神经元变性。实验分为FJB染色结合蛋白免疫荧光组以及目的蛋白免疫荧光结合FJB染色组。大鼠MCAO后5 d断头取脑,脑组织冰冻切片后,按上述两种染色顺序染色,观察两组实验双标的效果。结果 FJB染色结合目的蛋白免疫荧光组中,FJB和蛋白免疫荧光阳性细胞形态清楚,免疫双标效果良好;而蛋白免疫荧光结合FJB染色组,虽然FJB阳性细胞较为清晰,但与之免疫双标的蛋白免疫荧光阳性细胞不清楚,背景模糊,效果不佳。结论在两种免疫双标的方法中,先行FJB染色后再做目的蛋白免疫荧光染色,不会影响蛋白免疫荧光的染色效果,有利于后续实验的进行和观察。
作者:左夏林;金吉子;刘丹丹;孙卫文;徐恩 刊期: 2016年第05期
目的:探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)过表达对HL-60细胞生物学功能及对caspase-3表达的影响。方法采用RT-PCR技术检测白血病细胞株DAPK基因mRNA的表达。运用真核表达载体pReceiver-M29-DAPK,用脂质体LipofectamineTM 2000介导转染HL-60细胞,研究其过表达对白血病细胞凋亡、细胞周期及分化的影响,并对caspase-3表达的影响。结果 DAPK基因在K562、Molt4、U937细胞表达阳性,而HL-60细胞则表达阴性。转染pReceiver-M29-DAPK后,应用流式细胞术和Hoechst33342染色可观察到转染后HL-60细胞出现凋亡,凋亡细胞百分率显著增高。PI单染和瑞氏染色法分析观察转染前后的HL-60细胞,各细胞周期及形态均无改变。转染后caspase-3的表达水平显著增高。结论 DAPK基因过表达的HL-60细胞凋亡增强,但对HL-60细胞周期和细胞分化无影响。Caspase-3可能参与了凋亡调控。
作者:赵卫华;孟凡义;赖永榕;彭志刚;马劼 刊期: 2016年第05期
目的:建立西藏小型猪缺氧缺血性脑病(HIE)模型,观察HIE模型MR表现并与病理结果对照。方法1~3 d龄西藏小型猪6只(模型组4只,对照组2只)。模型组夹闭双侧颈总动脉放入缺氧箱内(氧浓度为8%),60 min后,复氧及再灌注。对照组仅进行双侧颈总动脉分离。模型组于模型建立后2 h、24 h、3 d、5 d进行脑部ESWAN检查。对照组于手术后2 h进行脑部增强T2*加权的血管成像(enhanced T2 star weighted angiography, ESWAN)检查。常规MR检查采用SE序列T2FLAIR、T2WI及DWI,于模型建立后24 h进行。后进行病理学检查。结果新纹状体区T2*值于模型建立后3 d达峰值,不同时间点与对照组T2*值差异有统计学意义(P<0.05)。皮层下白质区T2*值于模型建立后24 h达峰值(P<0.05)。新纹状体区R2*值于模型建立后3 d达低值,不同时间点与对照组差异有统计学意义(P<0.05),皮层下白质区R2*值于模型建立后24 h达低值(P<0.05)。Magnitude值于模型建立后明显升高(P<0.05)。模型组动物脑部MR的DWI成像可见双侧额部皮层下白质及双侧新纹状体略高信号, T2FLAIR信号变化不显著,T2WI未见明显异常。SWI可见粗大髓静脉及微出血。HIE早期病理变化以水肿及静脉淤血为主,偶见局灶性坏死及含铁血黄素沉积。结论 ESWAN序列可以评价HIE是否有出血及脑组织水肿。T2*值、R2*值、幅度值可用于观察缺氧缺血性脑损伤的发生发展变化。
作者:许俊;刚蔷蔷;郝鹏;张嘉宁 刊期: 2016年第05期
目的:探讨miR-135b在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖的作用的机制。方法运用RT-PCR的方法检测22对子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的miR-135b和FOXO1的表达;运用RT-PCR的方法检测JEC、Ishikawa、HEC-1-B、RL-952这4种子宫内膜癌细胞株中miR-135b和FOXO1的表达。分别转染miR-135b的模拟物抑制物于子宫内膜癌细胞株,通过RT-PCR检测转染的效果,通过MTT增殖试验检测对子宫内膜癌细胞增殖的影响。通过RT-PCR的方法检测FOXO1 mRNA的变化,Western blotting检测在FOXO1蛋白的变化。结果 miR-135b在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达增高(P<0.05), FOXO1在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达降低(P<0.05)。荧光定量PCR显示子宫内膜癌细胞中miR-135b与FOXO1表达趋势成负相关。miR-135b能促进子宫内膜癌细胞增殖(P<0.05)。上调miR-135b能够降低FOXO1 mRNA和蛋白的表达(P<0.05),下调miR-135b能够提高FOXO1 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 miR-135b在子宫内膜癌的发生发展中发挥重要的作用,其部分分子机制可能是通过调控靶基因FOXO1而发挥作用。
作者:乐珍;沈君菁;黄启涛;秦逸飞;李学农;刘国炳 刊期: 2016年第05期
目的:探讨连续长时间快速动眼睡眠剥夺(5 d)对C57BL/6J小鼠抑郁样行为和杏仁核单胺氧化酶A水平的影响。方法成年雄性C57BL/6J小鼠随机分成空白组、对照组和快速动眼睡眠剥夺组,通过多小平台水环境法建立快速动眼睡眠剥夺模型。睡眠剥夺结束后,于不同时间点采用旷场实验检测各组运动能力,强迫游泳实验和糖水偏好实验检测各组抑郁样行为。之后,取脑分离杏仁核,利用Western Blot和Real-time PCR检测各组单胺氧化酶A的表达水平。结果快速动眼睡眠剥夺后的1~3 d内,睡眠剥夺小鼠运动能力明显下降,第4天可恢复到正常水平;第7~14天强迫游泳实验显示小鼠不动时间延长;糖水偏好率也明显降低。Western blot和Real-time PCR检测发现杏仁核中单胺氧化酶A表达水平明显升高。结论连续长时间快速动眼睡眠剥夺导致小鼠迟发性抑郁样行为,该现象很可能与杏仁核单胺氧化酶水平变化有关。
作者:陈璐;王震;王雪敏 刊期: 2016年第05期
目的:探讨挛缩抑制剂2,3-丁二酮单肟(2,3-butanedione monoxime, BDM)改善大鼠离体心脏钙反常损伤的作用及其机制。方法32只SD雄性大鼠随机分为4组:正常对照组、BDM对照组、钙反常组和BDM干预组。大鼠离体心脏行Langendorff灌流,记录左室内压(left ventricular pressure, LVP)、左室舒张末压(left ventricular end-diastolic pressure, LVEDP),并计算左室发展压(left ventricular developed pressure, LVDP)评价心功能;测定复灌期冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量反映心肌损伤;2、3、5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评价心肌梗死面积的变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数;Western blot法检测cleaved caspase-3和细胞色素c(cytochrome c)蛋白的表达。结果与正常对照组相比,BDM(20 mmol/L)对照组大鼠心脏左室功能、心肌梗死面积和凋亡指数及cleaved caspase-3和细胞色素c蛋白的表达,无显著性变化(P>0.05);钙反常组LVEDP显著抬升,LVDP为0,冠脉流出液中LDH含量明显增多(P<0.01),cleaved caspase-3和细胞色素c蛋白的表达以及凋亡指数明显增加(P<0.01),心脏组织几乎全部死亡(P<0.01);BDM(20 mmol/L)干预钙反常组大鼠心脏心梗面积显著减小(P<0.01),LVEDP降低、LVDP部分恢复(P<0.01),LDH释放减少(P<0.01),cleaved caspase-3和细胞色素c蛋白表达量以及凋亡指数明显降低(P<0.01)。结论 BDM明显抑制急性钙超载引起的挛缩和细胞凋亡,改善心功能,减轻大鼠离体心脏钙超载损伤,是一种潜在的缺血再灌注心肌保护药物。
作者:孔令恒;顾晓明;苏兴利;孙娜;魏明;朱娟霞;常盼;周京军 刊期: 2016年第05期
目的:分析老年冠心病合并糖尿病患者的静息心率(RHR)控制水平与血糖水平的相关性,为老年冠心病患者二级预防的有效实施提供参考。方法入选在2011年4~7月全国21个省市165家医院门诊就诊的老年冠心病合并糖尿病患者(≥60岁)1336例,收集入选患者的一般临床资料及实验室检查指标,按照患者RHR控制水平将患者分为3组:Ⅰ组(RHR<70次/min,n=372)、Ⅱ组(RHR:70~79次/min,n=533)、Ⅲ组(RHR≥80次/min,n=431);记录各组相关临床资料及血糖控制情况,比较各组血糖控制目标或达标情况的差异,分析RHR与血糖指标的相关性,并利用二分类非条件Logistic回归方程探讨不同RHR控制水平与血糖控制或达标情况的关系。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组患者在总体人群、男性、女性患者中HbA1c水平均存在统计学差异(F=15.436,24.270,12.340,P<0.05),从Ⅰ组到Ⅲ组HbA1c水平依次增升高;3组患者亦在总体人群、男性、女性患者中的血糖达标率存在统计学差异(χ2=13.471,6.752,6.522,P<0.05),Ⅲ组的血糖达标率均低于Ⅰ组;Pearson相关分析分析显示, RHR分别与空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1C)呈正相关(r=0.058,0.085,0.084,P<0.05),多元线性回归分析提示RHR分别与FPG、2 hPG、HbA1C呈独立正相关(β=0.075,0.018,0.099,P<0.05);多因素Logistic回归方程显示,与RHR<70次/min比较,RHR≥80次/min在总体人群、男性、女性患者中血糖未达标的风险值(OR)分别为1.99(95%CI∶1.23~2.37,P<0.05)、1.81((95%CI∶1.17~2.77,P<0.05)、2.18(95%CI∶1.12~3.74,P<0.05)。结论 RHR增高可能与老年冠心病合并糖尿病患者血糖增高呈正相关,可能增加了患者血糖不达标的发生风险,临床应当积极控制此类高危患者的RHR水平,以利于患者血糖控制及促进冠心病二级预防的有效实施。
作者:梁东亮;李小鹰;王林;徐浩;拓西平;蹇在金;王晓娜;恽吉利;张旭;王斯悦 刊期: 2016年第05期
目的:探讨龙葵素对前列腺癌细胞Du145裸鼠移植瘤生长的影响及分子机制。方法采用高度恶性的转移前列腺癌细胞株Du145作为动物体内实验的模型,裸鼠皮下接种Du145细胞建立裸鼠皮下瘤模型。1周后将接种的裸鼠随机分为2组:龙葵素实验组和生理盐水空白对照组,每3 d分别向实体瘤中间部位注射0.2 mL龙葵素(50μg/mL)和生理盐水,观察裸鼠体内肿瘤生长,3周后颈椎脱臼处死裸鼠,剥离肿瘤组织,测量肿瘤的重量并根据肿瘤重量计算抑瘤率。实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测各组裸鼠瘤体细胞周期相关基因mRNA和蛋白表达。Tunel原位检测各组裸鼠瘤体组织凋亡情况。结果龙葵素治疗组裸鼠肿瘤成瘤率明显下降,裸鼠瘤体生长速度明显低于对照组(P<0.01)。龙葵素能抑制瘤体细胞CyclinD1、CyclinE1、CDK2、CDK4和CDK6基因mRNA和蛋白的表达,显著升高p21基因mRNA和蛋白的表达,龙葵素干预后裸鼠瘤体组织凋亡显著增加(P<0.01)。结论龙葵素可通过调控细胞周期G1/S关卡促进组织细胞凋亡抑制前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长。
作者:钟伟枫;刘思平;潘斌;唐兆烽;钟锦光;周芳坚 刊期: 2016年第05期
目的:观察棕榈酸(PA)对肝细胞氧化应激反应及炎症小体产生的影响。方法(1)将正常小鼠肝细胞AML12分别用不同浓度的棕榈酸(0、0.15、0.25、0.4 mmol/L)处理;(2)将AML12细胞分为空白对照组(control组)、棕榈酸组(PA组)及棕榈酸+N-乙酰半胱氨酸组(PA+NAC组)并予以相应药物处理。24 h后检测细胞中脂肪沉积情况、细胞总ROS、线粒体来源ROS、NOX4蛋白表达、NOX4的定位以及炎症小体和IL-1β的表达。结果与control组相比,PA组细胞质中脂滴增加,细胞总ROS(12463.09±2.72 vs 6691.23±2.45,P=0.00)及线粒体来源ROS含量(64.98±0.94 vs 45.04±0.92,P=0.00)上升,NOX4、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达增加,IL-1β表达增加(1603.52±1.32 vs 2629.33±2.57,P=0.00),且发现线粒体和NOX4在细胞质中存在共定位,而抗氧化剂NAC除了能使PA诱导的ROS产生减少(7782.15±2.87 vs 5445.6±1.17,P=0.00),还可使NLRP3、ASC及caspase-1蛋白表达下降。结论棕榈酸刺激肝细胞后,可以导致脂滴在肝细胞质中大量沉积,亦可以通过线粒体和NOX4途径导致肝细胞氧化应激反应,并因此促进细胞炎症小体的激活和IL-1β的分泌。
作者:许雯;郭予斌;李旭;何美蓉;刘思德 刊期: 2016年第05期
目的:研究羟基磷灰石的粒径、形貌对HA及其牙膏吸附水溶液中Zn2+的影响。方法取不同粒径、形貌的四种HA及其牙膏和空白对照牙膏分别配成9组系列浓度的悬液,分别加入初始浓度为10 mg/L的锌离子溶液,静置反应24 h后取上清液用电感耦合等离子发射光谱仪测定残余锌离子浓度,计算吸附率和吸附能力。结果 HA及掺HA牙膏对锌离子有一定的吸附能力,掺HA牙膏较纯HA的吸附率提高了3%~10%。12μm球形HA对锌离子的吸附能力强,其次为30 nm短棒状的HA。掺HA牙膏对锌离子的吸附符合Langmuir和Freundlish等温模型,纯HA的吸附仅符合Langmuir等温模型。结论在牙膏中加入HA可获得良好的锌离子吸附效果。HA的粒径、形貌对其吸附Zn2+的能力均有一定的影响,其中以12μm球形HA对锌离子的吸附效果优。
作者:杨剑珍;申晓青;刘成霞;徐平平 刊期: 2016年第05期
患者,26岁,未婚未育。主诉月经不调4年,阴道流血10 d,发现宫腔占位5 d。病理检查:中-低分化子宫内膜样腺癌。行腹腔镜下筋膜外全子宫及双附件切除术,术后诊断:子宫内膜样中低分化腺癌并透明细胞癌Ⅱ期,辅予以化疗,患者恢复可。年轻多囊卵巢综合症患者是发生子宫内膜癌的高危人群,而合并透明细胞癌者罕见,术前多科室综合评估、治疗方式的选择及预后分析是十分必要的,这也为今后的临床工作提供了经验。
作者:牛静;刘楠;刘国炳 刊期: 2016年第05期
目的:探讨人SPLUNC1基因在人体组织中的表达分布特征。方法采用原位杂交方法检测人体37种组织中SPLUNC1基因的细胞学定位。结果原位杂交结果显示:SPLUNC1在上腭、表皮、食管及食管-贲门部的鳞状上皮,鼻咽部、气管、宫颈部化生的鳞状上皮及食管和肺的鳞状细胞癌中均不表达;在胃粘膜、胆囊、空肠、结肠、子宫内膜及腺体和宫颈部的单层柱状上皮细胞中也不表达;主要表达在鼻咽、气管和支气管的假复层纤毛柱状上皮中,且沿呼吸道从上至下,该基因表达逐渐减弱,在肺组织中检测不到其表达。在腮腺、下颌下腺的导管和浆液腺细胞、鼻咽和肺等部位的粘膜下浆液腺细胞、胃粘膜固有层壁细胞及乳腺小叶和导管上皮中表达SPLUNC1,但粘液性腺上皮细胞中不表达。此外,在肺、胃、结肠、乳腺、子宫内膜和宫颈等部位的腺癌组织中, SPLUNC1基因均呈强阳性表达。结论 SPLUNC1基因的表达具有明显的细胞特异性,其表达分布特征可能与细胞功能有关。
作者:王爽;李文路;吕丽春;姚开泰 刊期: 2016年第05期
目的:探讨长脉宽1064 nm Nd:YAG激光治疗趾甲真菌病的疗效及安全性。方法对确诊的104例(461个趾甲)趾甲真菌病患者,根据年龄段分为Ⅰ组(≥60岁)和Ⅱ组(<60岁),按照SCIO评分及病甲位置的差异分为不同亚组;所有患者病甲均使用长脉宽1064 nm Nd:YAG激光进行每周1次、共10~12次的治疗,随访至初次治疗后的48周,观察疗效及不良反应。结果所有病人随访至48周,总体临床有效率为72.5%。Ⅱ组的临床有效率和真菌学治愈率均高于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同SCIO亚组之间的临床有效率无统计学差异(P>0.05)。第2~4趾甲亚组的临床有效率优于第1、第5趾甲亚组,差异有统计学意义(P<0.05);所有患者无明显不良反应。结论长脉宽1064 nm Nd:YAG激光是一种安全微创有效的治疗甲真菌病的方法,可在临床推广使用。
作者:杨烨玫;周思彤;胡永轩;毛祖豪;吴中;韩雪;刘康兴;黄诗韵;胡燕卿;卢艳;周冼苡 刊期: 2016年第05期
目的:了解鼠形动物粪便标本中携带肺炎克雷伯菌与铜绿假单胞菌的耐药情况。方法2015年3月~10月,利用笼捕法于广州市某医院及其周边居民区捕获鼠形动物,分离其粪便中肺炎克雷伯菌与铜绿假单胞菌菌株,按照2014年CLSI标准进行药敏试验,利用SPSS 20.0软件分析数据。结果共捕获鼠形动物329只(包括205只臭鼩鼱、111只褐家鼠、5只黄胸鼠和8只小家鼠)。肺炎克雷伯菌与铜绿假单胞菌在鼠形动物体内检出率分别为78.4%和34.7%。臭鼩鼱携带的肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢唑林、呋喃妥因、哌拉西林和头孢噻肟耐药性高(耐药率分别为100%、51.2%、44.2%、37.2%和23.3%);家鼠携带肺炎克雷伯菌耐药情况与鼩鼱相似。肺炎克雷伯菌的多重耐药率为40.9%,产ESBLs菌株检出率为10.7%。鼩鼱与家鼠携带的铜绿假单胞菌均对氨曲南耐药情况严重(耐药率为12.4%和16.0%),其次为广谱青霉素类和喹诺酮类抗生素,对头孢菌素、氨基糖苷类和碳青霉烯类抗生素耐药率低(耐药率均<5%)。结论鼠形动物携带的肺炎克雷伯菌与铜绿假单胞菌的耐药谱与目前临床分离株的耐药谱相似,提示这两种细菌可能在鼠形动物与人之间有传播作用,值得进一步研究。
作者:钟雪珊;葛婧;陈少威;熊益权;郑雪燕;邱旻;霍舒婷;陈清 刊期: 2016年第05期
目的:制备可检测全长SUN5的特异性抗体,并用该抗体检测SUN5蛋白在人类生殖细胞中的表达。方法通过生物信息学比较SUN5与新剪切体SUN5β之间的差异,在差异区域设计合成短肽,制备SUN5多克隆抗体并纯化。用新制备的SUN5抗体对Ntera-2细胞中的SUN5蛋白进行Western blotting和免疫荧光检测,验证抗体的特异性;后,用该抗体对人睾丸细胞涂片进行检测,观察SUN5蛋白在人生殖细胞中的表达。结果成功合成了SUN5短肽,而且用该短肽制备了SUN5多克隆抗体。Western blot结果显示,新制备的SUN5特异性抗体可检测到全长SUN5蛋白。免疫荧光实验结果表明,在Ntera-2细胞中SUN5蛋白定位在核膜和胞浆。通过对人睾丸细胞涂片的检测发现,SUN5在睾丸精母细胞、圆形精子细胞及精子中均有表达。结论成功制备了SUN5特异性抗体,该特异性抗体的制备对于深入研究SUN5的功能具有重要的意义。此外,发现SUN5蛋白在精母细胞、圆形精子细胞及精子中均有表达,提示SUN5蛋白可能在精子发生中发挥着重要的生理功能。
作者:王静芳;黄利华;伍勇;杨林飞;任瑶;邢晓为 刊期: 2016年第05期
目的:评估微波消融治疗小肾癌的长期临床疗效。方法回顾性分析了从2006年4月~2015年10月,我科收治的140例小肾癌患者151个病灶(平均直径2.8±0.8 cm)经超声引导经皮水冷微波消融治疗。小于2 cm的肿瘤使用一根微波消融针,大于或等于2 cm的肿瘤使用2根微波消融针。术后1,3,6月及之后每6个月行超声造影和CT/MRI检查进行随访。并通过时序检验统计分析评估短期及长期效果(总生存率、无病生存率和局部进展率)。结果技术有效率(微波消融后1月增强影像显示完全消融)达到100%(151/151)。1、3、5年局部进展率分别为0.9%、2.0%、7.1%,1、3、5年远处转移率分别为1.6%、2.5%、7.9%。1、3、5年总生存率分别为98.4%、94.8%、89.5%,1、3、5年无病生存率分别为98.4%、93.0%,83.1%。多因素分析结果提示肿瘤数量(P=0.015)和肿瘤生长模式(P=0.049)是影响患者术后长期疗效的独立的危险因素。结论该大样本长期随访临床研究结果表明,微波消融治疗肾细胞癌是一种微创、安全、有效的治疗方法。
作者:穆梦娟;于杰;梁萍;于晓玲;韩治宇;程志刚;刘方义;翟红燕;李鑫 刊期: 2016年第05期
目的:探讨茶多酚对缺血/再灌注心脏损伤的保护作用,并研究心脏能量代谢和心肌细胞钙内流是否参与了心脏缺血/再灌注损伤的保护作用。方法在大鼠Langendorff离体心脏上实施缺血/再灌注各30 min,用一导管经压力换能器连接放大器记录心功能指标;用31P NMR技术测定心脏的能量代谢,全细胞膜片钳技术记录心肌细胞钙内流。结果与对照组比较,茶多酚(2.5 mg/L)能使缺血/再灌注心脏的心室发展压、左心室压大收缩速率(+dp/dtmax)、左心室压大舒张速率(-dp/dtmax)和冠脉流量显著增加(P<0.05),并显著改善缺血/再灌注心脏的能量代谢,增加心肌ATP和PCr含量(P<0.05)。浓度为2.5和5.0 mg/L的茶多酚均能显著抑制培养心肌细胞的钙内流(P<0.01)。结论茶多酚对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用可能与其改善心肌能量代谢、抑制心肌细胞钙内流的作用有关。
作者:董华进;李捷;詹皓;李泱;苏瑞斌 刊期: 2016年第05期
目的:研究Nanog促进乳腺癌细胞侵袭与ezrinT567磷酸化的关系及Nanog调节ezrinT567磷酸化的可能机制。方法转染靶向Nanog的siRNA敲低乳腺癌细胞Nanog;用transwell法检测乳腺癌细胞侵袭;用免疫印迹检测乳腺癌细胞Nanog、PKCε表达水平和ezrinT567磷酸化水平;用免疫共沉淀和免疫印迹检测PKCε和ezrin蛋白的相互作用。结果敲低乳腺癌细胞的Nanog,PKC?蛋白表达下降、ezrinT567磷酸化水平下降、乳腺癌细胞的侵袭能力下降;敲低PKCε降低ezrinT567磷酸化水平;PKC?与ezrin可免疫共沉淀。结论 Nanog可上调PKC?的表达,后者可使ezrinT567磷酸化,这可能是Nanog促进肿瘤转移的一个新机制。
作者:邵文凤;李福喜;唐芮;于晓然;温桥生;余焱林;熊静波 刊期: 2016年第05期
目的:检测生物节律基因NPAS2在结直肠癌组织及相应癌旁组织中的表达情况;明确NPAS2的表达与患者临床病理学参数之间的相关性,分析NPAS2表达与结直肠癌患者5年生存率之间的相关性,明确其在判断结直肠癌患者预后中的作用。方法采用RT-qPCR检测NPAS2 mRNA在40例结直肠癌及癌旁新鲜组织中的表达;采用免疫组织化学SABC法检测NPAS2蛋白在120例肿瘤及癌旁石蜡标本中的表达;利用其中78例随访患者资料,K-M生存法分析NPAS2蛋白表达水平与患者生存率之间的相关性。结果 RT-qPCR结果提示,结直肠癌中NPAS2 mRNA表达显著低于相对应的癌旁组织(P<0.01);免疫组织化学结果提示,NPAS2蛋白表达在结直肠癌组织中的阳性率为19.2%,显著低于癌旁中的62.5%(P<0.05)。NPAS2的低表达与结直肠癌的肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、分化、浸润深度及远处转移无显著相关性(P>0.05)。K-M生存分析结果表明,NPAS2高表达组患者5年生存率显著高于低表达组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论NPAS2在结直肠癌组织中低表达,且与肿瘤部分恶性生物学行为及患者5年生存率密切相关,提示检测NPAS2的表达对预测结直肠癌患者预后具有重要意义。
作者:杨少芬;许鸣;杨海云;李佩琴;池秀芳 刊期: 2016年第05期
目的:筛选小鼠黑色素瘤细胞中蛋白4.1家族的表达,探讨蛋白4.1对小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响。方法以MEF、B16、B16-F10细胞基因组RNA和总蛋白为模板,经PCR法和Western blot筛选蛋白4.1在小鼠黑色素瘤细胞中的表达;通过分子克隆构建真核表达载体pEGFP-N1-EPB41L3并转染黑色素瘤细胞;检测表达蛋白4.1B后B16、B16-F10细胞增殖的变化。结果蛋白4.1B在黑色素瘤细胞中表达缺失;通过转染成功构建的真核表达载体pEGFP-N1-EPB41L3发现,表达蛋白4.1B的黑色素瘤细胞的增殖作用被显著性抑制。结论通过真核表达载体pEGFP-N1-EPB41L3转染表达蛋白4.1B可显著抑制B16和B16-F10黑色素瘤细胞的增殖。
作者:门颖丽;康巧珍;丁聪;刘诗梦;江慧;王晓东;汲振余;刘鑫;王婷 刊期: 2016年第05期