学术投稿

白纹伊蚊及致倦库蚊对蝙蝠乙型脑炎病毒分离株的易感性分析

刘姗;张琼花;周军华;俞守义;郑学礼;陈清

关键词:白纹伊蚊, 致倦库蚊, 蝙蝠, 乙型脑炎病毒, 感染
摘要:目的 了解蝙蝠乙脑病毒分离株GD1和HN2株对白纹伊蚊和致倦库蚊的易感性.方法 通过病毒液饲喂法使白纹伊蚊和致倦库蚊经口感染蝙蝠乙脑病毒GD1株和HN2株,采用TaqMan real-time RT-PCR方法,检测GD1株和HN2株感染白纹伊蚊及致倦库蚊后第4、6、8、10、12、14、16、18、20天病毒存在情况与病毒载量的动态变化.结果两株蝙蝠乙脑病毒在感染白纹伊蚊、致倦库蚊后4~20 d内均能被检测到.Ct值的动态变化规律显示白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染乙脑病毒GD1株和HN2株,但致倦库蚊的易感性高于白纹伊蚊;两株毒株的毒力可能不同,HN2株毒力大于GD1株.结论 白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染蝙蝠乙脑病毒分离株.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 2型糖尿病患者与健康个体间肠道双歧杆菌的差异

    目的 研究2型精尿病患者与健康个体之间肠道双歧杆菌是否存在差异.方法 收集50例2型糖尿病患者和30例健康志愿者的粪便样品,提取样品中细菌总DNA,根据细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌总菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的属种特异性引物,并应用实时荧光定量PCR技术对两组人群粪便样品中的以上细菌进行定量检测和分析.结果 2型糖尿病患者组肠道双歧杆菌总菌和青春双歧杆菌的数量较健康对照组均显著减少(P<0.05).结论 2型糖尿病患者肠道双歧杆菌数量减少.

    作者:许小津;惠宏襄;蔡德鸿 刊期: 2012年第04期

  • 组织工程化皮瓣的构建

    目的 应用脂肪组织来源干细胞(ASCs)在体外构建组织工程脂肪并与已构建的复合皮组装培育,试构建出含脂肪层的组织工程化皮瓣.方法 (1)构建组织工程脂肪从脂肪组织中分离培养ASCs并进行三系分化诱导鉴定.ASCs与胶原凝胶混合并进行体外成脂诱导,诱导15d后分别进行倒置显微镜、油红O染色及HE染色观察.(2)构建复合皮从包皮组织中分离培养表皮细胞(Kc)和成纤维细胞(Fb).Fb与胶原凝胶混合后培养5d,将Kc接种到含有Fb的凝胶表面,在液面下培养4d后移至气-液界面继续培养10d形成复合皮.(3)构建含皮下脂肪组织的3层结构的皮肤复合组织将培养的复合皮与脂肪组织按正常皮肤结构顺序组装后继续培养3d并行HE染色观察.结果 (1)ASCs具有成脂、成软骨和成骨分化能力.ASCs凝胶复合物体外成脂诱导15d后,可见细胞内充满圆形脂滴,呈单房或多房形,油红O染色及HE染色均显示为成熟脂滴.(2)经过气-液界面培养后,Kc成层分化,形成基底上层.(3)组装培育后的皮肤复合组织分3层,表层Kc成层分化并形成基底上层;中层和底层连接处细胞聚集;成脂分化的ASCs位于底层.结论 分别应用Kc、Fb和ASCs三种细胞,在体外构建出组织工程化脂肪和复合皮,且按序组装培育,可构建出组织工程化皮瓣.

    作者:陈伟;姜平;陈晓炜;廖云君;高建华 刊期: 2012年第04期

  • 杏仁中央核μ阿片受体参与蔗糖溶液摄入的调节

    目的 探讨杏仁中央核内μ阿片受体是否参与大鼠蔗糖溶液摄入的调节及其可能的机制.方法 杏仁中央核内注入μ阿片受体激动剂DAMGO或生理盐水,测量大鼠在双瓶选择试验中对蔗糖溶液及蒸馏水的摄入量;利用荧光免疫组织化学方法,在大鼠摄入蔗糖溶液或蒸馏水后,观察杏仁中央核内μ阿片受体/Fos免疫阳性双标记神经元的数量.结果 与生理盐水注射组相比,杏仁中央核内注入DAMGO增加了大鼠3h内的蔗糖溶液摄入量;与蒸馏水摄入组相比,大鼠摄入蔗糖溶液后,杏仁中央核内c-Fos阳性神经元及μ阿片受体/Fos共表达神经元均显著增加(P<0.05).结论 杏仁中央核参与大鼠蔗糖溶液摄入的调节,该调节作用可能部分是由μ阿片受体介导的.

    作者:孙波;闫剑群;王倩;赵小林;李金容;闫薇;陈坷;杨雪娟;赵师儒;闫君宝 刊期: 2012年第04期

  • 上下文加工的任务概率效应:事件相关电位时空模式分析

    目的 利用AX型连续操作测试(AX-CPT)和事件相关电位(ERP)时空模式探讨上下文加工的任务概率效应及其脑机制.方法 在AX-CPT任务中,18名大学生仅要求针对反应线索A后的反应探针X按键,而对抑制线索B后的各类探针X或Y均不反应.设立3组互补的AX型/AY型任务概率:0.55/0.15,0.35/0.35,0.15/0.55;保持BX型和BY型任务概率恒定,均为0.15.行为绩效和ERP数据分别采用单因素重复测量方差分析.结果 反应线索A概率愈高,AX型反应愈快且BX型虚警愈多.ERP的F值统计参数映像显示概率效应显著脑区和时段分别是:线索A:顶中央区(300~350 ms)与左枕区(450~500ms);线索B:右前额(350~500ms)和左前额(750~950 ms).AX型探针:右额顶(200~250ms)、左额极、右背前额及双顶区(300~400 ms)和双顶枕区(400~650 ms);AY型探针:额中央区(350~500 ms )-P3效应;BX型探针:右颞区及左枕区(300~350ms);BY型探针:左颞区(150~250 ms).结论 任务概率不仅影响反应型线索编码和抑制型线索期待,而且分别调节了四种类型探针加工相关的神经集群.

    作者:黄金君;周曙;赵艳杰;赵云肖 刊期: 2012年第04期

  • 乌龙丹对慢性脑缺血大鼠松果体钟基因表达的影响

    目的 初步探讨慢性脑缺血对大鼠睡眠钟基因表达的影响及乌龙丹对其的调控作用.方法 24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、乌龙丹给药组.采用改良式双侧颈总动脉永久性结扎法建立大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后,灌胃给药3周,并持续监测各组大鼠体重,应用实时荧光定量PCR检测大鼠松果体钟基因Clock、Bmal1、Per1表达的变化.结果 模型组较假手术组Clock mRNA、PerlmRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),Bmal1基因表达无显著差异(P>0.05);乌龙丹给药组的Clock基因水平高于模型组(P.<0.01),Bmall基因表达较假手术组降低(P.<0.05),Per1无显著变化(P>0.05).结论 慢性脑缺血可能成为睡眠障碍的潜在病因,乌龙丹对慢性脑缺血引起的睡眠障碍有一定的治疗作用.

    作者:富祯祯;夏旸;彭康 刊期: 2012年第04期

  • 恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者血清中HBV DNA载量与TGF-β1的影响

    目的 观察慢性乙型肝炎患者恩替卡韦治疗前后血清中乙型肝炎病毒(HBV DNA)载量与TGF-β1变化,分析其疗效,为临床合理应用恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎提供参考.方法 选取63例慢性乙型肝炎患者,将其按随机原则分为恩替卡韦试验组及对照组.试验组33例,其中轻度9例、中度17例、重度7例,分别口服恩替卡韦0.5 mg,1次/d,同时加用一般护肝药;对照组30例,其中轻度13例、中度12例、重度5例,单用一般护肝药.分别于治疗前、治疗3个月、治疗6个月,检测血清中HBV DNA、TGF-β1的含量.采用SPSS13.0系统软件进行统计分析.结果 恩替卡韦试验组轻度、中度和重度患者血清中HBV DNA载量治疗后呈下降趋势,治疗3个月、6个月与治疗前比较有统计学差异(P<0.05).试验组中度和重度患者血清TGF-β1水平治疗后呈下降趋势,重度患者治疗6个月与治疗前比较有统计学差异(P<0.05).结论 恩替卡韦试验组慢性乙型肝炎(轻度、中度、重度)治疗后患者血清中的HBV DNA载量明显下降,同时慢性乙型肝炎(中度、重度)患者血清中的TGF-β1均有下降趋势,其中慢性乙型肝炎重度TGF-β1水平明显下降.

    作者:肖寒;马陈斌;张利霞;罗永燕;刘尹正泽;邵婕 刊期: 2012年第04期

  • Catwalk系统评估脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤后运动功能的恢复情况

    目的 应用Catwalk步态分析系统评价脐带间充质干细胞(UC-MSCs)治疗脑损伤后的功能恢复情况.方法 采用重物坠落模型制作脑损伤模型.成年Wistar大鼠分成3组:移植治疗组,脑损伤后第7天移植DiO标记的UC-MSCs;损伤对照组,损伤后第7天注射等量生理盐水;正常对照组不接收任何手术和治疗.按照分组,分别在大鼠损伤前、损伤后3d以及UC-MSCs移植治疗后7d,以改良神经损伤程度评分(mNSS)为经典评估参照指标,同步对实验鼠进行Catwalk步态分析检测,并于移植后14d进行脑片免疫组化染色观察,评价以Catwalk步态分析系统检测UC-MSCs治疗脑损伤后功能恢复情况的灵敏度.结果 细胞移植后7d,损伤组和移植组的mNSS评分有统计学差异(P<0.05);而Catwalk则从大鼠每一只爪子的压力、长度、宽度、面积、步幅等不同量化的角度,呈示了损伤组各参数与正常组之间的差异(P<0.05),以及移植组和损伤组之间的部分差异;移植治疗组的损伤灶区显示,DiO标记的UC-MSCs呈GFAP和β-Tubulin Ⅲ阳性表达.结论 以Catwalk步态分析系统评估损伤大鼠治疗前后的运动功能情况更为敏感客观,可准确评价UC-MSCs移植治疗TBI并促进脑功能恢复的情况.

    作者:张润;秦琨;法志强;刘翼;李鹏;蔡颖谦;姜晓丹 刊期: 2012年第04期

  • 42岁男性主动脉弓离断1例报告

    主动脉弓离断是一种罕见的、婴幼儿期死亡率高的严重复杂畸形,能长大成人更为罕见.一位42岁男性高血压患者,经主动脉CT血管造影检查证实,降主动脉起始部血管与主动脉弓中断,邻近脊柱旁、肋间及胸背部皮下软组织内见多个扭曲紊乱血管团,并于降主动脉起始水平见数支血管汇人降主动脉CT血管造影.经降压治疗后,症状好转出院.本研究报道给我们的启示:对年轻高血压患者要仔细听诊,一旦前胸背部听到杂音,及时行CTA检查,避免漏诊和误诊.

    作者:包宁;张煜;张志国;曹慧茹;张文辉 刊期: 2012年第04期

  • Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎轴索损害的病理学分析

    目的 在建立Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型基础上探讨多发性硬化的病理变化,尤其针对轴索损害的特点进行深入探讨.方法 对EAE大鼠的脑和脊髓进行HE染色、LFB髓鞘染色和Bielschowsky染色,分别以间接免疫荧光方法双染标记非磷酸化神经丝蛋白(SMI-32)和髓鞘碱性蛋白(MBP)MBP,以及轴索淀粉样前体蛋白(APP)和MBP.结果 脑和脊髓组织内可见大量炎细胞浸润形成典型的袖套改变,伴有大片状脱髓鞘,轴索结构排列紊乱,呈空泡样缺失.SMI-32染色证明发病14d脊髓白质内出现大量非磷酸化的神经丝蛋白,可见APP堆积形成轴突卵形体.表明发病早期即出现了明显的轴索损害,且髓鞘脱失和轴索损害的发生不同步.结论 EAE大鼠不同发病阶段出现不同程度的炎症反应,发病高峰期的炎症浸润明显.EAE的轴索损害开始于疾病的早期阶段,并不断进展.

    作者:王圆圆;吕田明;刘晓加;方敏;梁彦珊 刊期: 2012年第04期

  • 精索静脉曲张所致的睾丸及精液指标的异常

    目的 分析精索静脉曲张患者睾丸及精液指标的变化,探讨其对于男性生殖功能的影响.方法 回顾分析2003年以来在我院诊治的172例精索静脉曲张患者的资料,阴囊超声检测患者双侧睾丸的体积.收集167例患者的精液标本进行分析,同时收集163例青年健康志愿者的精液分析资料作为对照组.结果 所有患者均存在左侧精索静脉曲张,其中63例为双侧精索静脉曲张,但大多数左侧精索静脉曲张的临床分级均高于右侧.患者左侧睾丸体积平均为(10.99±3.71)ml,右侧睾丸体积平均为(11.86±4.05) ml,左侧睾丸体积明显小于右侧(P<0.01).与对照组比较,患者精液的理化指标(包括精子密度)无显著差异(P>0.05),但大多数患者的精子活力和活率均显著低于对照组(P<0.05).单、双侧精索静脉曲张患者的精子密度、活力和活率无统计学差异(P>0.05).结论 精索静脉曲张可导致睾丸体积缩小.单侧精索静脉曲张可同时对双侧睾丸产生影响,并导致睾丸功能受损.精索静脉曲张导致男性睾丸功能受损,主要表现为患者精子活力和活率的下降.

    作者:薛娟;阳建福;严谨;蒋先镇;何乐业;伍拓;郭军华 刊期: 2012年第04期

  • 肠道原发性非霍奇金淋巴瘤85例分析

    目的 了解不同细胞来源的肠道原发性非霍奇金淋巴瘤(PINHL)在临床特征、内镜表现、诊断及治疗、预后方面的差异.方法 回顾性分析我院2003年1月~2010年12月间明确诊断的PINHL病例,分别统计B细胞来源与T细胞来源的PINHL在临床表现、内镜表现、诊断治疗,并随访预后.结果 共纳入PINHL 85例,中位年龄52岁,男女比例为3.05:1,B细胞来源58例(68.2%),T细胞来源27例(31.8%).T细胞淋巴瘤较B细胞淋巴瘤具有发病年龄小(32岁vs56岁,P<0.01);发热、便血、腹泻、盗汗多(P<0.05);病变以多部位弥漫性分布和肠镜下以溃疡及溃疡浸润性表现为主;确诊时间长(4月vs2月,P<0.01);误诊率高(16/27vs12/58,P<0.01);预后差等特点;且T细胞淋巴瘤以结外NK/T淋巴瘤为主.结论 我院PINHL中,T细胞来源淋巴瘤比例高,发病年龄更早,诊断困难,容易误诊,总体预后差,病理分型以结外NK/T淋巴瘤为主.

    作者:冉文斌;欧阳钦 刊期: 2012年第04期

  • 白纹伊蚊及致倦库蚊对蝙蝠乙型脑炎病毒分离株的易感性分析

    目的 了解蝙蝠乙脑病毒分离株GD1和HN2株对白纹伊蚊和致倦库蚊的易感性.方法 通过病毒液饲喂法使白纹伊蚊和致倦库蚊经口感染蝙蝠乙脑病毒GD1株和HN2株,采用TaqMan real-time RT-PCR方法,检测GD1株和HN2株感染白纹伊蚊及致倦库蚊后第4、6、8、10、12、14、16、18、20天病毒存在情况与病毒载量的动态变化.结果两株蝙蝠乙脑病毒在感染白纹伊蚊、致倦库蚊后4~20 d内均能被检测到.Ct值的动态变化规律显示白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染乙脑病毒GD1株和HN2株,但致倦库蚊的易感性高于白纹伊蚊;两株毒株的毒力可能不同,HN2株毒力大于GD1株.结论 白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染蝙蝠乙脑病毒分离株.

    作者:刘姗;张琼花;周军华;俞守义;郑学礼;陈清 刊期: 2012年第04期

  • 海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1细胞胰岛素释放

    目的 明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析.方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组.对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP 与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素释放前18h加入PMA( 10 nmol/L);应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量.实时定量PCR检测对照组、HCNP组HCNP前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,CHAT)、3型毒蕈碱样受体(3-typemuscarinic receptor,M3R)基因水平表达情况.结果 浓度为3.3 mmol/L葡萄糖,三组间胰岛素含量无明显差异.浓度为5.6mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义.HCNP组INS-1细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义.结论 HCNP通过提高ChAT活性,推测影响乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用.

    作者:高飞;陈宏;张桦;郭南京;徐艳花;蔡德鸿 刊期: 2012年第04期

  • 1,3-二环己基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯的抗炎镇痛作用

    目的 探讨1,3-二环己基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(ZL-5010)体内、体外的抗炎镇痛活性.方法 醋酸所致小鼠扭体反应模型评价镇痛作用;二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型评价抗炎作用.细菌脂多糖(LPS,10μg/mL)刺激小鼠腹腔渗出细胞活化作为体外炎症模型.ELISA法检测白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果 ZL-5010经灌胃给药,1次/d,连续3d,在0.25和0.50mmol/kg的剂量下能减少醋酸所致小鼠的扭体次数,抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,抑制角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀,均具有统计学意义(P<0.05);ZL-5010体外能抑制LPS诱导的小鼠腹腔渗出细胞产生促炎细胞因子IL-1β和TNF-α,具有统计学意义的低有效浓度分别为10和20 μmol/L(P<0.05).结论 首次发现ZL-5010经动物体内灌胃给药具有抗炎镇痛作用,体外可抑制小鼠腹腔渗出细胞产生促炎细胞因子IL-1β和TNF-α.

    作者:张群;周桂保;雷林生;余传林;陈娜娜 刊期: 2012年第04期

  • 20例中国Peutz-Jeghers综合征患者STK11基因编码区突变分析

    目的 检测Peutz-Jeghers综合征患者STK11基因编码区序列,进一步明确STK11基因可能存在新的突变位点.方法 收集空军总医院2009年1月~2010年10月期间收治的20例Peutz-Jeghcrs综合征患者的血液样本,采用PCR扩增技术及DNA测序方法检测STK11基因编码区序列,与STK11基因的正常序列比对分析.结果 20例Peutz-Jeghers综合征患者中有14例患者检测到STK11基因的编码区发生突变,1例患者携带2个突变位点,13例患者携带单一突变位点.测序发现1例患者在3号外显子第460位发现—错义突变(460C→G),在第154密码子处形成另一种新的氨基酸,为一新的突变位点.2个家系中4例患者在同一位点发生突变;同一家系患者的突变位点一致.其余6例患者STK11基因编码区未见突变位点.结论 STK11基因突变是Peutz-Jeghers综合征发生的主要病因,3号外显子第460位错义突变,即460C→G,是导致Peutz-Jeghers综合征发生新的突变位点.

    作者:赵晓;李玉霞;凌焱;陈惠鹏;张宝库;夏延毅;周平 刊期: 2012年第04期

  • 肺部脂质肉芽肿1例报道

    目的 提高临床医生对肺部脂质肉芽肿的认识.方法 报道l例误诊为肺癌的肺部脂质肉芽肿患者,结合文献复习,阐述该病的临床表现、诊断及治疗.结果 该患者肺部CT提示右下肺肿块,考虑右肺癌,行手术治疗,术后病理提示肺部脂质肉芽肿.结论 肺部脂质肉芽肿十分罕见,其临床表现、影像学与肺癌和其他肺部良性肿瘤难以区分,确诊需依赖病理学.

    作者:姚一楠;杨光叠;周建英 刊期: 2012年第04期

  • 铜绿假单胞菌制剂抑制鼻咽癌细胞体外增殖

    目的 观察铜绿假单胞菌(PA-MSHA)注射液对人鼻咽癌细胞株5-8F及6-10B的生长抑制作用,初步探讨其作用机制.方法 MTT法检测鼻咽癌细胞体外增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Westem blotting检测细胞周期及凋亡相关蛋白.结果 MTT结果表明,与未加药组相比,加药组5-8F及6-10B细胞的增殖能力明显降低(P<0.05),呈剂量和时间依赖性.细胞周期检测发现药物处理后的肿瘤细胞发生G1/S期阻滞(P<0.05).Westerm blotting检测发现药物处理后的两组细胞周期相关蛋白cyclinD1、CDK4、CDK6及凋亡促进蛋白Bax表达上调,凋亡抑制蛋白Bc1-2表达下调.结论 PA-MSHA能够抑制鼻咽癌5-8F及6-10B细胞株增殖,其机制可能是通过影响细胞周期调节并促进细胞凋亡.

    作者:王剑;吴德华;陈龙华 刊期: 2012年第04期

  • PDGF-A/PDGFR-α对系统性硬化症患者皮损成纤维细胞增殖和转分化的作用

    目的 探讨血小板衍生生长因子A(PDGF-AA)/PDGF受体α(PDGFR-α)信号通路对系统性硬化症(SSc)患者皮损成纤维细胞(FB)增殖和转分化为MFB的作用.方法SSc患者皮损和正常皮肤原代FB体外培养、鉴定,用免疫细胞化学法检测其中的α-SMA;分别予两组FB不同浓度的PDGF-AA刺激,用MTT法检测其对FB增殖的作用;对两组FB分别予TGF-β1、PDGF-AA及两者联合刺激,用RT-PCR法检测其PDGFR-αmRNA、α-SMA mRNA的表达水平.结果 两组FB形态虽相似,但SSc FB中α-SMA呈阳性,正常皮肤则为阴性;SSc FB增殖的饱和浓度高于对照组,在一定浓度与饱和浓度间两组FB都呈剂量依赖方式增殖(P<0.05);不论有无PDGF-AA刺激及刺激浓度大小,SSc FB增殖程度均高于对照组(P<0.05);除单用TGF-β1对正常皮肤FB表达PDGFR-α mRNA无影响外,TGF-β1、PDGF-AA或两者联合刺激均可上调两组FB中PDGFR-α mRNA、α-SMA mRNA的表达水平,以两者联合刺激作用强;不论有无刺激或何种刺激,SSc FB中PDGFR-α mRNA、α-SMA mRNA表达水平均高于正常皮肤FB (P<0.05);PDGFR-α mRNA和α-SMA mRNA的表达水平依照未处理、PDGF-AA、TGF-β1及TGF-β1+PDGF-AA的顺序渐次增加,两者呈高度正相关(r=0.925,P<0.05).结论 SSc患者皮损来源的FB存在着向MFB转分化的显著特性,SSc FB胞膜表面过表达的PDGFR-α可结合较多的PDGF-AA配体,从而介导更强的促进FB增殖和转分化为MFB作用,TGF-β1则可增强此作用.

    作者:刘彤;张静 刊期: 2012年第04期

  • 日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应

    目的 研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平.方法 以双链RNA(dsRNA)实现RNA干扰.体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转染到日本血吸虫成虫中,体外培养7d后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40基因及SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达,Western blot检测Sjp40蛋白表达产物.提取各期虫体总RNA,qPCR检测Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达.结果 转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照GFP dsRNA转染组下降了80%左右;蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化.此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高.结论 dsSjp40 RNAi可特异性抑制Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响.

    作者:陈敏芳;麦荣嘉;莫倩珍;周晓红 刊期: 2012年第04期

  • 小鼠前列腺干细胞抗原的原核表达、纯化及抗原活性检测

    目的 RT-PCR扩增小鼠前列腺干细胞抗原(mPSCA)基因,构建原核表达质粒pET-42a-mPSCA,诱导mPSCA蛋白表达并纯化,并检测mPSCA蛋白的抗原活性.方法 利用RT-PCR的方法从小鼠前列腺癌细胞系RM-1细胞中扩增mPSCA基因,测序正确后PCR的方法去掉mPSCA的信号肽序列将其克隆至原核表达载体pET-42a中构建重组载体pET-42a-mPSCA.将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,随后将表达的融合蛋白进行纯化.经SDS-PAGE分析后,Western blot检测纯化的蛋白,将纯化蛋白进一步包板后用ELISA法对其抗原活性进行评价.结果 测序结果证实成功扩增出全长mPSCA基因;酶切和测序结果证实pET-42a-mPSCA原核表达载体构建成功;转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;Western blot检测证实纯化的蛋白能与特异性的抗体发生反应;ELISA检测显示纯化后的mPSCA抗原具有免疫原性.结论 成功扩增出小鼠全长PSCA基因,成功构建了mPSCA基因的原核表达载体,获得了纯化的mPSCA蛋白,该蛋白具有良好的抗原活性,为进一步研究以PSCA为靶点的前列腺癌的免疫治疗奠定了基础.

    作者:董金凯;罗津;阎瑾琦;张亮;高江平;于继云 刊期: 2012年第04期

南方医科大学学报杂志

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