刘姗；张琼花；周军华；俞守义；郑学礼；陈清
目的 研究2型精尿病患者与健康个体之间肠道双歧杆菌是否存在差异.方法 收集50例2型糖尿病患者和30例健康志愿者的粪便样品,提取样品中细菌总DNA,根据细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌总菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的属种特异性引物,并应用实时荧光定量PCR技术对两组人群粪便样品中的以上细菌进行定量检测和分析.结果 2型糖尿病患者组肠道双歧杆菌总菌和青春双歧杆菌的数量较健康对照组均显著减少(P＜0.05).结论 2型糖尿病患者肠道双歧杆菌数量减少.
作者：许小津；惠宏襄；蔡德鸿 刊期： 2012年第04期
目的 观察铜绿假单胞菌(PA-MSHA)注射液对人鼻咽癌细胞株5-8F及6-10B的生长抑制作用,初步探讨其作用机制.方法 MTT法检测鼻咽癌细胞体外增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Westem blotting检测细胞周期及凋亡相关蛋白.结果 MTT结果表明,与未加药组相比,加药组5-8F及6-10B细胞的增殖能力明显降低(P＜0.05),呈剂量和时间依赖性.细胞周期检测发现药物处理后的肿瘤细胞发生G1/S期阻滞(P＜0.05).Westerm blotting检测发现药物处理后的两组细胞周期相关蛋白cyclinD1、CDK4、CDK6及凋亡促进蛋白Bax表达上调,凋亡抑制蛋白Bc1-2表达下调.结论 PA-MSHA能够抑制鼻咽癌5-8F及6-10B细胞株增殖,其机制可能是通过影响细胞周期调节并促进细胞凋亡.
作者：王剑；吴德华；陈龙华 刊期： 2012年第04期
目的 探讨1,3-二环己基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(ZL-5010)体内、体外的抗炎镇痛活性.方法 醋酸所致小鼠扭体反应模型评价镇痛作用；二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型评价抗炎作用.细菌脂多糖(LPS,10μg/mL)刺激小鼠腹腔渗出细胞活化作为体外炎症模型.ELISA法检测白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果 ZL-5010经灌胃给药,1次/d,连续3d,在0.25和0.50mmol/kg的剂量下能减少醋酸所致小鼠的扭体次数,抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,抑制角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀,均具有统计学意义(P＜0.05);ZL-5010体外能抑制LPS诱导的小鼠腹腔渗出细胞产生促炎细胞因子IL-1β和TNF-α,具有统计学意义的低有效浓度分别为10和20 μmol/L(P＜0.05).结论 首次发现ZL-5010经动物体内灌胃给药具有抗炎镇痛作用,体外可抑制小鼠腹腔渗出细胞产生促炎细胞因子IL-1β和TNF-α.
作者：张群；周桂保；雷林生；余传林；陈娜娜 刊期： 2012年第04期
目的 探讨输尿管移行细胞癌术后膀胱复发的危险因素.方法 同顾分析两附属医院2000～2010年原发性输尿管癌病例,统计其临床及病理资料,通过多因素回归分析与膀胱复发相关的危险因素,用Kaplan-Meier法计算膀胱无复发生存率.结果 随访104例输尿管移行细胞癌患者,中位随访时间46个月(13～89个月),39例患者出现膀胱复发.尿脱落细胞学(P=0.000)、肿瘤数量(P=0.006)、肿瘤分级(P=0.039)及合并膀胱肿瘤(P=0.014)是输尿管移行细胞癌术后膀胱复发的独立危险因素.危险因素越多的患者,膀胱无复发生存率越差.结论 尿脱落细胞学、肿瘤数量、肿瘤分级及合并膀胱肿瘤与输尿管移行细胞癌术后膀胱复发密切相关.含有危险因素的病例可能需密切随访和积极治疗.
作者：叶云林；秦自科；卞军；陈明坤；黄燕平；袁小旭；孙祥宙；戴宇平 刊期： 2012年第04期
目的 提高临床医生对肺部脂质肉芽肿的认识.方法 报道l例误诊为肺癌的肺部脂质肉芽肿患者,结合文献复习,阐述该病的临床表现、诊断及治疗.结果 该患者肺部CT提示右下肺肿块,考虑右肺癌,行手术治疗,术后病理提示肺部脂质肉芽肿.结论 肺部脂质肉芽肿十分罕见,其临床表现、影像学与肺癌和其他肺部良性肿瘤难以区分,确诊需依赖病理学.
作者：姚一楠；杨光叠；周建英 刊期： 2012年第04期
目的 RT-PCR扩增小鼠前列腺干细胞抗原(mPSCA)基因,构建原核表达质粒pET-42a-mPSCA,诱导mPSCA蛋白表达并纯化,并检测mPSCA蛋白的抗原活性.方法 利用RT-PCR的方法从小鼠前列腺癌细胞系RM-1细胞中扩增mPSCA基因,测序正确后PCR的方法去掉mPSCA的信号肽序列将其克隆至原核表达载体pET-42a中构建重组载体pET-42a-mPSCA.将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,随后将表达的融合蛋白进行纯化.经SDS-PAGE分析后,Western blot检测纯化的蛋白,将纯化蛋白进一步包板后用ELISA法对其抗原活性进行评价.结果 测序结果证实成功扩增出全长mPSCA基因；酶切和测序结果证实pET-42a-mPSCA原核表达载体构建成功；转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白；Western blot检测证实纯化的蛋白能与特异性的抗体发生反应；ELISA检测显示纯化后的mPSCA抗原具有免疫原性.结论 成功扩增出小鼠全长PSCA基因,成功构建了mPSCA基因的原核表达载体,获得了纯化的mPSCA蛋白,该蛋白具有良好的抗原活性,为进一步研究以PSCA为靶点的前列腺癌的免疫治疗奠定了基础.
作者：董金凯；罗津；阎瑾琦；张亮；高江平；于继云 刊期： 2012年第04期
目的 对比分析广州管圆线虫幼虫排泄分泌抗原(LESA)与成虫抗原(AWA),探讨其诊断价值.方法 广州管圆线虫三期幼虫感染小鼠,21 d后取小鼠脑内幼虫进行体外培养,收集幼虫排泄分泌蛋白,并与广州管圆线虫成虫匀浆蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析,分别用两种抗原建立LESA-ELISA和AWA-ELISA以检测小鼠血清和不同人群血清.结果 SDS-PAGE和Western blot显示幼虫排泄分泌蛋白条带和抗原反应带较成虫少；LESA与小鼠感染血清和广州管圆线虫病患者血清在M,40000和Mr26000处均出现强反应带；感染小鼠血清中抗LESA和AWA的IgG和IgM抗体自感染后开始上升,5d后达到高峰,第10天后开始下降；LESA-ELISA用于检测广州管圆线虫病疑似病人血清阳性率低于AWA-ELISA；检测血吸虫和华支睾吸虫感染病人血清的交叉阳性率明显低于AWA-ELISA；检测献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较AWA-ELISA少.结论 LESA的抗原反应带较AWA少,尽管对广州管圆线虫病疑似病例血清抗体阳性率略低于AWA,但其特异性高；具有潜在的广州管圆线虫病早期诊断和现症感染诊断价值.
作者：张鑫；刘敏；吴雅欣；莫泽珣；沈浩贤；陈代雄；李华 刊期： 2012年第04期
目的 应用脂肪组织来源干细胞(ASCs)在体外构建组织工程脂肪并与已构建的复合皮组装培育,试构建出含脂肪层的组织工程化皮瓣.方法 (1)构建组织工程脂肪从脂肪组织中分离培养ASCs并进行三系分化诱导鉴定.ASCs与胶原凝胶混合并进行体外成脂诱导,诱导15d后分别进行倒置显微镜、油红O染色及HE染色观察.(2)构建复合皮从包皮组织中分离培养表皮细胞(Kc)和成纤维细胞(Fb).Fb与胶原凝胶混合后培养5d,将Kc接种到含有Fb的凝胶表面,在液面下培养4d后移至气-液界面继续培养10d形成复合皮.(3)构建含皮下脂肪组织的3层结构的皮肤复合组织将培养的复合皮与脂肪组织按正常皮肤结构顺序组装后继续培养3d并行HE染色观察.结果 (1)ASCs具有成脂、成软骨和成骨分化能力.ASCs凝胶复合物体外成脂诱导15d后,可见细胞内充满圆形脂滴,呈单房或多房形,油红O染色及HE染色均显示为成熟脂滴.(2)经过气-液界面培养后,Kc成层分化,形成基底上层.(3)组装培育后的皮肤复合组织分3层,表层Kc成层分化并形成基底上层；中层和底层连接处细胞聚集；成脂分化的ASCs位于底层.结论 分别应用Kc、Fb和ASCs三种细胞,在体外构建出组织工程化脂肪和复合皮,且按序组装培育,可构建出组织工程化皮瓣.
作者：陈伟；姜平；陈晓炜；廖云君；高建华 刊期： 2012年第04期
目的 在建立Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型基础上探讨多发性硬化的病理变化,尤其针对轴索损害的特点进行深入探讨.方法 对EAE大鼠的脑和脊髓进行HE染色、LFB髓鞘染色和Bielschowsky染色,分别以间接免疫荧光方法双染标记非磷酸化神经丝蛋白(SMI-32)和髓鞘碱性蛋白(MBP)MBP,以及轴索淀粉样前体蛋白(APP)和MBP.结果 脑和脊髓组织内可见大量炎细胞浸润形成典型的袖套改变,伴有大片状脱髓鞘,轴索结构排列紊乱,呈空泡样缺失.SMI-32染色证明发病14d脊髓白质内出现大量非磷酸化的神经丝蛋白,可见APP堆积形成轴突卵形体.表明发病早期即出现了明显的轴索损害,且髓鞘脱失和轴索损害的发生不同步.结论 EAE大鼠不同发病阶段出现不同程度的炎症反应,发病高峰期的炎症浸润明显.EAE的轴索损害开始于疾病的早期阶段,并不断进展.
作者：王圆圆；吕田明；刘晓加；方敏；梁彦珊 刊期： 2012年第04期
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在人肺癌A549细胞放射治疗中的增敏作用.方法 单独γ射线辐照细胞或联合应用TNF-α处理细胞,通过MTT法检测人肺癌A549细胞存活生长曲线,采用流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期的变化,并利用Western blot法分析细胞中Caspase-3蛋白表达的变化.结果 与单独γ射线作用相比,TNF-α和γ射线联合应用能明显抑制人肺癌A549细胞的生长,同时诱导和促进A549细胞的凋亡发生,调整细胞周期的变化,这一过程与细胞中Caspase-3蛋白表达的增加相关.结论 TNF-α可以增加入肺癌A549细胞的放疗敏感性,提高γ射线对人肺癌A549细胞的放射治疗效果.
作者：夏晖；于长海；张宜明；俞建琦；李捷；张文；李英杰 刊期： 2012年第04期
目的 明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析.方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组.对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP 与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素释放前18h加入PMA( 10 nmol/L)；应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量.实时定量PCR检测对照组、HCNP组HCNP前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,CHAT)、3型毒蕈碱样受体(3-typemuscarinic receptor,M3R)基因水平表达情况.结果 浓度为3.3 mmol/L葡萄糖,三组间胰岛素含量无明显差异.浓度为5.6mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义.HCNP组INS-1细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义.结论 HCNP通过提高ChAT活性,推测影响乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用.
作者：高飞；陈宏；张桦；郭南京；徐艳花；蔡德鸿 刊期： 2012年第04期
目的 初步探讨慢性脑缺血对大鼠睡眠钟基因表达的影响及乌龙丹对其的调控作用.方法 24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、乌龙丹给药组.采用改良式双侧颈总动脉永久性结扎法建立大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后,灌胃给药3周,并持续监测各组大鼠体重,应用实时荧光定量PCR检测大鼠松果体钟基因Clock、Bmal1、Per1表达的变化.结果 模型组较假手术组Clock mRNA、PerlmRNA表达显著降低(P＜0.01,P＜0.05),Bmal1基因表达无显著差异(P＞0.05)；乌龙丹给药组的Clock基因水平高于模型组(P.＜0.01),Bmall基因表达较假手术组降低(P.＜0.05),Per1无显著变化(P＞0.05).结论 慢性脑缺血可能成为睡眠障碍的潜在病因,乌龙丹对慢性脑缺血引起的睡眠障碍有一定的治疗作用.
作者：富祯祯；夏旸；彭康 刊期： 2012年第04期
目的 了解不同细胞来源的肠道原发性非霍奇金淋巴瘤(PINHL)在临床特征、内镜表现、诊断及治疗、预后方面的差异.方法 回顾性分析我院2003年1月～2010年12月间明确诊断的PINHL病例,分别统计B细胞来源与T细胞来源的PINHL在临床表现、内镜表现、诊断治疗,并随访预后.结果 共纳入PINHL 85例,中位年龄52岁,男女比例为3.05:1,B细胞来源58例(68.2％),T细胞来源27例(31.8％).T细胞淋巴瘤较B细胞淋巴瘤具有发病年龄小(32岁vs56岁,P＜0.01)；发热、便血、腹泻、盗汗多(P＜0.05)；病变以多部位弥漫性分布和肠镜下以溃疡及溃疡浸润性表现为主；确诊时间长(4月vs2月,P＜0.01)；误诊率高(16/27vs12/58,P＜0.01);预后差等特点；且T细胞淋巴瘤以结外NK/T淋巴瘤为主.结论 我院PINHL中,T细胞来源淋巴瘤比例高,发病年龄更早,诊断困难,容易误诊,总体预后差,病理分型以结外NK/T淋巴瘤为主.
作者：冉文斌；欧阳钦 刊期： 2012年第04期
目的 研究奥美拉唑对体外培养人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)基因表达谱的影响,探讨奥美拉唑对内皮细胞作用的分子机制.方法 10-5mol/L奥美拉唑与人脐静脉内皮细胞株共培养48h,运用Affymetrix U133 plus 2.0全基因组表达芯片,检测奥美拉唑对人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响,分子注释系统MAS3.0软件进行聚类分析.RT-PCR验证基因表达谱结果,Western blotting验证相关蛋白水平的变化.结果 奥美拉唑作用内皮细胞48h后,基因芯片分析筛选出差异表达大于1.5倍的基因282个,其中上调基因236个,下调基因46个,包括转录调节、炎症反应、免疫反应、细胞粘附、抗凋亡、信号转导等相关基因,RT-PCR和Western blotting结果与基因芯片结果一致.结论 奥美拉唑在基因水平通过多条通路调节内皮功能.
作者：刘先锋；卢学春；范利；高燕；马聪；罗芸 刊期： 2012年第04期
目的 研究芥菜籽对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用,探讨其可能的作用机制.方法 将18只BALB/c小鼠随机分为模型组、芥菜籽组、正常组,模型组和正常组喂养普通饲料,芥菜籽组喂养含5％芥菜籽饲料.3周后,以2.4-二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠ACD模型,耳部激发24 h后,观察芥菜籽对小鼠耳肿胀度,组织病理改变,皮损处朗格汉斯细胞(LC)浸润、局部促炎细胞因子及血清IFN-γ等因子的水平.结果 芥菜籽能抑制ACD小鼠的耳肿胀度、降低皮损处LC浸润、降低IL-1β、TNF-α、IL-6等炎症因子的表达(P＜0.05),但对血清IFN-γ、IL-4、IL-17水平没有影响(P＞0.05).结论 芥菜籽对小鼠ACD有抑制作用,可能与其抑制LC的迁移及降低炎症因子有关.
作者：汶春苗；杨闰平；胡坚；焦泽龙；杨宇光；杨剑凌；李恒进；赵华 刊期： 2012年第04期
目的 探讨人类胚胎期大脑额叶、脑室区(VZ)和脑室下区(SVZ)内代谢型谷氨酸受体5(mGluRS)的表达规律及细胞分布.方法 将收集的引产胎儿按胎龄分为4组:9～11周,14～16周,22～24周和32～36周.切取额叶及含VZ、SVZ的脑组织固定后切片,免疫组织化学染色后观察额叶、VZ和SVZ内mGuR5的表达及其细胞定位.结果 9～36周的胚胎额叶及VZ、SVZ都有mGluR5表达,边缘带和皮质板内的免疫反应程度强于VZ和SVZ,阳性产物主要位于细胞膜.表达mGluR5的细胞主要为VZ和SVZ内的神经干/祖细胞、边缘带和VZ内的成熟前神经元及皮质板内的大量成熟神经元.结论 人类胚胎额叶、VZ和SVZ内均有mGluR5表达,提示mGluR5可能参与了人类大脑皮质发生的调节过程.
作者：解武玲；杨蓬勃；张军峰；肖新莉；靳辉；石秦东；徐曦；刘勇 刊期： 2012年第04期
目的 比较老年冠心病患者单用氯吡格雷与氯吡格雷联用钙拮抗剂(CCB)的疗效.方法 选自2000年1月～2011年2月有完整住院资料及门诊随访记录,服用氯吡格雷的老年冠心病患者1021名,其中单用氯吡格雷402例,氯吡格雷联用CCB 619例,其中二氢吡啶类钙拮抗剂547例,非二氢吡啶类钙拮抗剂72例；P糖蛋白(Pgp)抑制剂的钙拮抗剂患者357例,非PgP抑制剂的CCB患者262例.研究主要终点为随访期内全因死亡,次要终点为心绞痛再入院,心梗再入院,血管再通术(PCI或CABG),脑卒中,TIA.结果 氯吡格雷组和联用CCB组发病密度(全因死亡)分别是50.55/1000、42.02/1000,粗RR 0.83 (95％ CI:0.55～1.26),调整RR 0.47 (95％CI:0.14～1.6),两组全因死亡率无显著差异(P＞0.05)；终点事件发生率比较也无显著差异(P＞0.05).对所有混杂因素进行倾向评分加权后,非二氢吡啶类CCB比二氢吡啶类CCB增加缺血性心脑血管事件风险,SMRW调整OR=1.97( 95％:1.2～3.23),P=0.007；氯吡格雷联用CCB组与单用氯吡格雷组加权前后全因死亡率及终点事件比较,差异无统计学意义.不同代谢途径CCB加权前后全因死亡率比较无显著差异(P＞0.05).结论 老年冠心病患者联用氯吡格雷及CCB治疗不增加全因死亡及缺血性心脑血管事件的发生,不同代谢途径CCB之间死亡率无明显差异,非二氢吡啶类CCB与氯吡格雷联用时比二氢吡啶类CCB致缺血性心脑血管终点事件的风险更高.
作者：高燕；卢学春；曹剑；刘先锋；马聪；范利 刊期： 2012年第04期
目的 探讨杏仁中央核内μ阿片受体是否参与大鼠蔗糖溶液摄入的调节及其可能的机制.方法 杏仁中央核内注入μ阿片受体激动剂DAMGO或生理盐水,测量大鼠在双瓶选择试验中对蔗糖溶液及蒸馏水的摄入量；利用荧光免疫组织化学方法,在大鼠摄入蔗糖溶液或蒸馏水后,观察杏仁中央核内μ阿片受体/Fos免疫阳性双标记神经元的数量.结果 与生理盐水注射组相比,杏仁中央核内注入DAMGO增加了大鼠3h内的蔗糖溶液摄入量；与蒸馏水摄入组相比,大鼠摄入蔗糖溶液后,杏仁中央核内c-Fos阳性神经元及μ阿片受体/Fos共表达神经元均显著增加(P＜0.05).结论 杏仁中央核参与大鼠蔗糖溶液摄入的调节,该调节作用可能部分是由μ阿片受体介导的.
作者：孙波；闫剑群；王倩；赵小林；李金容；闫薇；陈坷；杨雪娟；赵师儒；闫君宝 刊期： 2012年第04期
目的 了解蝙蝠乙脑病毒分离株GD1和HN2株对白纹伊蚊和致倦库蚊的易感性.方法 通过病毒液饲喂法使白纹伊蚊和致倦库蚊经口感染蝙蝠乙脑病毒GD1株和HN2株,采用TaqMan real-time RT-PCR方法,检测GD1株和HN2株感染白纹伊蚊及致倦库蚊后第4、6、8、10、12、14、16、18、20天病毒存在情况与病毒载量的动态变化.结果两株蝙蝠乙脑病毒在感染白纹伊蚊、致倦库蚊后4～20 d内均能被检测到.Ct值的动态变化规律显示白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染乙脑病毒GD1株和HN2株,但致倦库蚊的易感性高于白纹伊蚊；两株毒株的毒力可能不同,HN2株毒力大于GD1株.结论 白纹伊蚊和致倦库蚊均能感染蝙蝠乙脑病毒分离株.
作者：刘姗；张琼花；周军华；俞守义；郑学礼；陈清 刊期： 2012年第04期
目的 探讨在靶向纳米微泡条件下,用高强度聚焦超声(HIFU)辐照后,声像图相关函数与HIFU辐照发生凝固性坏死的关系,以提高监控超声的判断灵敏度.方法 60只双侧第二乳腺建模成功的VX2移植性肿瘤兔随机分为90 W,120W,150W组,每组20只,采用HIFU定点辐照,辐照时间统一为3s,辐照左侧肿瘤时注射微泡造影剂,右侧作对照,观测靶区辐照前后声像图变化和灰度值变化,并对靶区声像图进行相关函数运算,比较灰度判别方式与相关函数判别方式的准确性与灵敏性.结果 对120个样本进行辐照前后声像图相关函数分析,总判对率为83.3％,高于灰度判对率68.3％,其差异有明显统计学意义(P＜0.05)；同一辐照条件下,微泡组坏死样本声像图相关函数平均值低于对照组,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论运用相关函数分析辐照前后靶区声像图,较灰度评价,其准确性、灵敏性更高,能有效提高HIFU疗效.
作者：郭宇；邹建中；闵加艳；王冬；郭海英 刊期： 2012年第04期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
